玉溪地区8例β－地中海贫血的临床及基因诊断

本文报道１９９２年～１９９４年间对玉溪地区８例β－地中海贫血进行临床、血红蛋白电泳等检查，并应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术进行分子生物学检查的结果。首次证实玉溪地区β－地中海贫血的基因突变类型存在有Ｃｏｄｏｎ１７，Ａ→Ｔ；Ｃｏｄｏｎｓ４１－４２，－ＴＴＣＴ；Ｃｏｄｏｎｓ７１－７２，＋Ａ三种类型。本组病例中３例傣族均为Ｃｏｄｏｎｓ４１－４２；－ＴＴＣＴ；Ｃｏｄｏｎｓ７１－７２，＋Ａ双重突变，玉溪地区傣族中是否还存在其它基因突变类型，有待进一步研究。     

景洪地区6例β－地中海贫血的临床和基因分析

应用ＤＮＡ探针和聚合酶链反应技术对景洪地区６例经临床血液学、血红蛋白电泳和血红蛋白区带定量诊断的β－地中海贫血患者（主要为傣族）进行基因突变类型研究，结果显示：基因突变类型为Ｃｏｄｏｎ４１－４２（－ＴＴＣＴ）３例；Ｃｏｄｏｎ７１－７２（＋Ａ）１例；Ｃｏｄｏｎ１７（Ａ－Ｔ）１例；－２８（Ａ－Ｇ）１例四类。为即将开始的基因治疗提供了科学依据；对开展基因分析、遗传咨询、产前诊断和婚姻指导亦有重要意义。     

成都地区β地中海贫血基因突变型及产前基因诊断初步分析

我们通过ＤＮＡ扩增和等位特异寡核苷酸探针杂交，检测了成都地区可疑β地中海贫血（简称地贫）患者３３个家系，９５人。共检出５８例、７３条染色体的β珠蛋白基因突变。其中，Ｃｏｄｏｎ１７（Ａ→Ｔ）突变２８例（３８．４％）ｌｃＯｄｏｎ４１－４２（－ＴＴＣＴ）突变２１例（２８．８％）；ＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）突变１４例（１９．０％）；ｎｔ－２８（Ａ→Ｇ）和ｎｔ－２９（Ａ→Ｇ）突变分别是６例（８．２％）和４例（５．５％）。在测知双亲β地贫突变类型的基础上，对两例β地贫风险胎儿采羊水细胞分离ＤＮＡ，用相同方法进行了产前基因诊断，获满意结果。     

β地中海贫血的基因型与临床表现的关系探讨

目的：进一步弄清β地中海贫血的基因型与临床表现的关系。方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术结合特异性寡核苷酸探针斑点杂交方法,检测了四例β地中海贫血患者的基因突变类型,并观察了他们的临床表现,进行文献复习。结果：基因突变型－２８（Ａ→Ｔ）／４１－４２（－ＴＴＣＴ）、－２８纯合子、β地中海贫血同时复合α地中海贫血基因突变等的患者临床症状及贫血程度较轻。     

一个携带罕见β—地中海贫血突变家系的分子诊断

用反向点杂交法对临床诊断的１例重症β－地中海贫血患及其家庭成员进行了基因分析。在该家庭中检出两种中国人罕见的β－地贫突变，基因型分别为：先证者，ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）／ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）；父，ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）／Ｎ；母，ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）／Ｎ；胞组，Ｎ／Ｎ（正常）。这两种突变经ＰＣＲ－限制酶谱分析法进一步证实；ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）突变为国内首次报道。     

一个携带罕见β－地中海贫血突变家系的分子诊断

用反向点杂交法（ＲＤＢ）对临床诊断的１例重症β－地中海贫血患儿及其家庭成员进行了基因分析。在该家庭中检出两种中国人罕见的β－地贫突变，基因型分别为：先证者，ＣＤ２７－２８（＋ｃ）／ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）；父，ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）／Ｎ；母，ＣＤ２７－２８（＋ｃ）／Ｎ；胞姐，Ｎ／Ｎ（正常）。这两种突变经ＰＣＲ－限制酶谱分析法进一步证实；ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）突变为国内首次报道。     

急性淋巴细胞白血病免疫分型研究

使用一组单克隆抗体及抗ＩｇＭ多抗对２４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞表面抗原标志进行分析。结果表明：急性非Ｔ细胞白血病（Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ）为６２．５０％，急性Ｔ细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）为２９．１７％，急性未分化型白血病（ＡＵＬ）为４．１７％，急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ－Ⅱ）为４．１７％。Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ型以ＨＬＡ－ＤＰ＋，Ⅱ型以ＣＤ１９＋，Ⅲ型以ＣＤ１０＋，Ⅳ型以ＣＤ２０＋，Ⅵ型以ＳＩｇＭ＋为诊断条件。Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ期以ＣＤ７＋、Ⅲ期以ＣＤ３＋、ＣＤ４＋或ＣＤ８＋为诊断条件，其它表面抗原变化不定。Ｔ－ＡＬＬ中ＨＬＡ－ＤＰ表达率达４２．８６％。２４例ＡＬＬ中３例为Ｂ－Ｔ杂合型白血病，占１２．５０％，均分布在Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ之中。ＦＡＢ形态学分型符合率为９５．６５％。非诊断性表面抗原标志的变化是进一步分亚型的依据，也可能与药物敏感性等治疗和预后相关，值得进一步探讨     

应用聚合酶链反应和非同位素标记寡核苷酸探针进行β－地中海贫血的基因诊断

为确定云南β－地中海贫血的基因类型，从云南省德宏州、西双版纳州等地采集临床诊断为β－地中海贫血的病例２４例，经提取ＤＮＡ，聚合酶链反应和非同位素（加强化学发光，ＥＣＬ）标记寡核苷酸探针点杂交进行基因诊断．结果：在已完成杂交的９例中有４例为最常见的突变Ｃｏｄｏｎｓ４１～４２，即编码子４１～４２发生框架位移，减少ＴＴＣＴ四个硷基，这与国内广东、四川的研究相似．     

PCR和SSO探针分析HLA—DQ位点的基因型探讨

用ＰＣＲ－ＳＳＯ方法对４２名汉族常人ＨＬＡ－ＤＱＡ、ＤＱＢ位点多态性等位基因进行了基因型分析。结果发现，ＤＱＡ位点有２０种基因型，ＤＱＡ０１０１／０１０３占２１％，ＤＱＡ０１０１／０５０１占１１．９％。ＤＱＡ０１０１／０１０３、０１０１／０５０１和０１０１／０６０１三种杂合子基因型占研究人数的４２．８％。     

反义RNA对培养的红系细胞βIVS—2—654C→T基因剪接缺陷的纠正

目的观察反义ＲＮＡＡ２对培养的红系细胞中βＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变基因剪接异常的纠正作用。方法将构建的反义核酸真核表达载体通过脂质体介导转染培养的成人红系细胞（ｈＡＥ），应用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）定量测定β珠蛋白ｍＲＮＡ及微量珠蛋白生物合成技术分析转染前后ｈＡＥ细胞内珠蛋白基因表达的变化。结果β６５４／β４１－４２基因型ｈＡＥ细胞内，正常剪接的βｍＲＮＡ占总βｍＲＮＡ的比例从转染前的０．０２４上升到第８天的０．３８０；β６５４／βＡ基因型ｈＡＥ细胞从０．３９６上升到０．８８３；与此相应，新合成的β珠蛋白链也出现升高：β６５４／β４１－４２基因型ｈＡＥ细胞β／α比值从０．０５２升至０．３５９，β６５４／βＡ基因型ｈＡＥ细胞从０．６２４升至０．８２０；正常人ｈＡＥ细胞珠蛋白基因表达不受反义ＲＮＡ的影响。结论反义ＲＮＡＡ２能有效地纠正ｈＡＥ细胞内β６５４ｍＲＮＡ前体异常剪接，进而明显地升高β珠蛋白链的合成，为β６５４地中海贫血的反义ＲＮＡ治疗提供了科学依据。     

冠心病42例血浆载脂蛋白E基因型及脂类、内皮素、一氧化氮水平检测

目的：为了观察血浆载脂蛋白Ｅ（ＡＯＰＥ）基因多态性与冠心病（ＣＨＤ）患者血浆脂类水平及动脉粥样硬化病变进程的关系。方法：测定４２例ＣＨＤ患者的血浆ＡｐｏＥ基因型,分别测定,１：Ｅ２／２＋Ｅ２／３＋Ｅ３／３和１：Ｅ２／４＋Ｅ３／４＋Ｅ４／４两组患者血浆甘油三酯（ＴＧ）,胆固醇（ＴＣ）,高密度脂蛋白－胆固高脂蛋白－胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）,低密度脂蛋白－胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）,ＡｐｏＥ,载脂蛋白Ａ１（Ａｐｏ     

大鼠β—防御素rBD—2的分子克隆及其在皮肤组织的诱导表达

从大鼠皮肤提取总ＲＮＡ,以Ｐ１５′→３′ＴＴＣＡＧＴＣＡＴＧＡＧＧＡＴＣＣＡＴＴＡＣ和Ｐ２５′→３′ＧＧＴＴＣＴＴＧＧＴＣＴＴＴＴＴＡＴＣＴＡＣ引物,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增得到一ｃＤＮＡ片段,经核苷酸序列测定,并根据其推导的氨基酸序列与人β－防御素－２和大鼠β－防御素－１进行同源性比较,结果显示,该ｃＤＮＡ片段编码的氨基酸序列具高度同源性（其成熟肽与ｈＢＤ－２的同一性为５０％,相似性为３２％）,均含６个典型的半胱氨酸,这表明所克隆的ｃＤＮＡ为大鼠β－防御素－２亚类,因此命名为ｒＢＤ－２。大鼠β－防御素－２基因在大肠杆菌感染性损伤皮肤组织中的表达明显增强,与人ｈＢＤ－２的表达相似,能够被诱导表达。以上结果提示,β－防御素－２可能是皮肤组织对感染性损伤的防御反应所产生的重要免疫介质。     

Ｈ 型高血压合并冠心病 ＭＴＨＦＲ 基因 Ｃ６７７Ｔ 多态性 与冠状动脉病变的分析

目的：探讨 Ｈ 型高血压合并冠心病病人亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）Ｃ６７７Ｔ 基因多态性、血清 同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）与冠状动脉病变的关系。方法：选取 ２０１７－１０ ～ ２０１８－１１ 期间我院心内科诊断为 Ｈ 型高血 压合并冠心病病人 １２０ 例作为试验组,其中合并稳定型心绞痛（ＳＡＰ）４０ 例为 Ａ 组,合并不稳定型心绞痛（ＵＡＰ） ４２ 例为 Ｂ 组,合并急性心肌梗死（ＡＭＩ）３８ 例为 Ｃ 组,Ｈ 型高血压病人 ４０ 例作为对照 Ｄ 组,检测 ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７ Ｔ 基因、血清同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）,根据冠状动脉造影结果采用 Ｇｅｎｓｉｎｉ 评分法评估冠状动脉病变程度。结果：Ｈ 型高血压合并冠心病组 Ｈｃｙ ２５．３４±９．２５μｍｏｌ ／ Ｌ 较 Ｈ 型高血压组１６．４６±８．１２μｍｏｌ ／ Ｌ 明显增高。ＴＴ 型 Ｈｃｙ ３２．１４± １２．４４μｍｏｌ ／ Ｌ 较 ＣＴ 型２３．２６±１０．２７μｍｏｌ ／ Ｌ、ＣＣ 型１４．５２±８．２３μｍｏｌ ／ Ｌ 明显增高。Ｈ 型高血压合并冠心病组 ＴＴ 型 （３３％）、Ｔ 等位基因频率（５４％）较 Ｈ 型高血压组 ＴＴ 型（１８％）、Ｔ 等位基因频率（４０％）明显增高。ＴＴ 型 Ｇｅｎｓｉｎｉ 评分４１．５６± ４．４８明显高于 ＣＣ 型２８．４２ ± ３．２３,有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。Ｂ 组 ＴＴ 型（３６％）、Ｔ 等位基因频率 （５６％）、Ｃ 组 ＴＴ 型（３７％）、Ｔ 等位基因频率（５８％）较 Ａ 组 ＴＴ 型（２８％）、Ｔ 等位基因频率（４９％）增高,有统计学 意义（Ｐ＜０．０５）。Ｂ 组、Ｃ 组 ＴＴ 型、Ｔ 等位基因频率无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：Ｈ 型高血压合并冠心病组 Ｈｃｙ 水平、ＴＴ 型、Ｔ 等位基因频率较 Ｈ 型高血压组明显增高。ＴＴ 型 Ｈｃｙ、Ｇｅｎｓｉｎｉ 评分明显增高。Ｂ 组、Ｃ 组 ＴＴ 型、Ｔ 等位基因频率较 Ａ 组增高,Ｂ、Ｃ 组 ＴＴ 型、Ｔ 等位基因频率无统计学意义。     

低剂量顺铂联合化疗晚期乳腺癌临床疗效观察

采用低剂量顺铂（一次剂量〈５０ｍｇ／ｍ＾２）联合化疗方案治疗晚期乳腺癌４２例。顺铂给药方法为３０ｍｇ／ｄ１－５．３ｗ或４０ｍｇ／ｄ１－３．３Ｗ，给药期间给予水化、地塞 公及胃复安等一般对症治疗。其中用ＣＭＦＰ方案（环膦酰胺（ＣＴＸ）＋氨甲喋ＭＴＸ）＋氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）＋顺铂（ＤＤＰ））１４例；ＣＦＰ方案（ＣＴＸ＋５－Ｆｕ－ＤＤＰ）２０例；ＣＡＰ方案（ＣＴＸ＋阿霉素（ＡＤＭ）＋ＤＤＰ）８例，总结有     

Doppler超声时间指标评价高血压病、冠心病左室功能

采用Ｄｏｐｐｌｅｒ超声测量ＣＨＤ、ＨＤ、ＨＣＤ－ＣＨＤ及ｓ四组ＡＴ、ＥＴ、ＡＴ／ＥＴ、ＩＣＴ、ＰＥＰ／ＥＴ、ＰＥＰ、ＩＶＲＴ、ＡｃＴＥ、ＡｃＴＥ／ＭＶＯＴ，结果ＣＨＤ、ＨＤ、ＨＣＤ－ＣＨＤ三组ＩＶＲＴ明显升高（Ｐ＜０．０１），ＨＤ、ＣＨＤ与ＨＣＤＣＨＤ之ＩＶＲＴ差异有显著性（Ｐ＜０．０１），ＮＳ、ＣＨＤ、ＨＤ与ＨＣＤ－ＣＨＤ组ＰＥＰ／ＥＴ、ＩＣＴ、ＰＥＰ差异均有显著性（Ｐ＜０．０５），ＨＣＤ－ＣＨＤ组ＰＥＰ／ＥＴ、ＩＣＴ、ＰＥＰ值升高，ＮＳ、ＨＤ与ＣＨＤ、ＨＣＤ－ＣＨＤ、ＡＴ／ＥＴ差异有显著性（Ｐ＜０．０５），ＣＨＤ及ＨＣＤ－ＣＨＤ组ＡＴ／ＥＴ下降，ＨＲ、ＡＴ、ＥＴ、ＡＣＴＥ各组间差异均无显著性（Ｐ＞０．０５），Ｄｏｐｐｌｅｒ超声时间指标评价左室功能具有一定价值。     

PCR和SSO探针分析HLA－DQ位点的基因型探讨

用ＰＣＲ－ＳＳＯ方法对４２名汉族常人ＨＬＡ－ＤＱＡ、ＤＱＢ位点多态性等位基因进行了基因型分析。结果发现，ＤＱＡ位点有２０种基因型，ＤＱＡ０１０１／０１０３占２１％，ＤＱＡ０１０１／０５０１占１１．９％。ＤＱＡ０１０１／０１０３、０１０１／０５０１和０１０１／０６０１三种杂合子基因型占研究人数的４２．８％。ＤＱＢ位点２１种基因型，以ＤＱＢ０６０１／０６０４ｂ为最高，占１９％，ＤＱＢ０６０１／０４０２和ＤＱＢ０６０１／０３０１各占１１．９％。只一例ＤＱＢ０６０１／０６０１为纯合子基因型。     

血管紧张素原基因 M235T 分子变异与冠心病的关系

目的研究血管紧张素原（ＡＧＴ）基因Ｍ２３５Ｔ分子变异与中国人冠心病（ＣＨＤ）发生的关系。方法采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）、限制性片段长度多态性分析，对７６例ＣＨＤ患者和７６例无ＣＨＤ证据的对照组进行ＡＧＴ基因Ｍ２３５Ｔ等位基因检测。结果ＣＨＤ患者ＡＧＴ基因２３５ＴＴ型（０．７０）和Ｔ２３５等位基因（０．８２）的频率显著高于对照组（分别为０．４２和０．６３，Ｐ＝０．００２和Ｐ＜０．０１）。经校正ＣＨＤ的主要危险因素后，ＡＧＴ基因２３５ＴＴ型仍可显著增加ＣＨＤ发生的危险性（比数比为３．５６，Ｐ＝０．０１２）。结论中国人ＡＧＴ基因Ｍ２３５Ｔ分子变异与ＣＨＤ显著相关，ＡＧＴ基因２３５ＴＴ型可能是ＣＨＤ的重要危险因素之一。     

阿尔茨海默病患者脑脊液tau、Aβ1—40、Aβ1—42（43）蛋白的？…

目的 探讨检测脑脊液ｔａｕ、Ａβ１－４０、Ａβ１－４２（４３）（以下简称Ａβ１－４２）蛋白水平及其在阿尔茨海默病（ＡＤ）诊断方面的意义。方法 用双抗体夹心ＥＬＳＡ法，共检测了２２例ＡＤ、１５例脑血管性痴呆（ＶＤ）和３０例非痴呆对照（ＮＣ）脑脊液中的上述３种蛋白；用简单智能量表（ＭＭＳＥ）、哈金斯基缺血量表（ＨＩＳ）、日常生活能力量表（ＡＤＬ）、ＣＴ和美国神经病、语言障碍和卒中－阿尔茨海默病和相关疾     

遗传因素对高血压病人群靶器官损害发生的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ１型受体（ＡＴ１Ｒ）Ａ／Ｃ１１６６多态性、纤溶酶原激活物抑制剂－１（ＰＮ－１）４Ｇ／５Ｇ多态性与高血压病人群肾脏损害（ＲＤ）和脑梗死（ＣＩ）发生的关系。方法 以高血压病人群为随机研究对象,采用等位基因特异性寡核苷酸探针杂交分析ＡＴ１Ｒ基因型和ＰＡＩ－１基因型。结果 （１）ＡＴ１Ｒ基因型与肾脏功能显著相关,ＡＣ基因型肾脏功能显著差于ＡＡ基因型,ＰＡＩ－１基因型与肾脏功能无显著性     

磁性分离酶联免疫测定技术在糖尿病的临床应用

目的引进磁性分离酶联免疫测定（ＭＡＩＡ）新技术,应用于糖尿病的临床实践。方法初诊１型糖尿病（ＩＤＤＭ）１０例,轻症２型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）４１例,及健康正常对照１５例,作口服葡萄糖耐量试验（ＯＧＴＴ）,使用瑞士ＳｅｒｏｚｙｍｅⅠ系统和ＭＡＩＡ进口试剂测定胰岛素（Ｉｎｓ）和Ｃ肽（Ｃ－Ｐ）。结果ＭＡＩＡ批内变异系数（ＣＶ）为３．８３％,批间ＣＶ为７．３８％;灵敏度分别为０．５２ｍＩＵ／Ｌ和０．４２ｐｍｏｌ／Ｌ。ＭＡＩＡ结果与放射免疫法（ＲＩＡ）之间有显著直线相关（Ｐ＜０．０１）。健康人ＯＧＴＴ试验时,空腹Ｉｎｓ和Ｃ－Ｐ分别为（１６．１９±６．７６）ｍＩＵ／Ｌ和（５０４．２０±１７７．２４）ｐｍｏｌ／Ｌ,在３０～６０ｍｉｎ达到峰值,平均为（６３．５３±７．９８）ｍＩＵ／Ｌ和（２１８８．７５±２７９．０８）ｐｍｏｌ／Ｌ。ＩＤＤＭ患者Ｉｎｓ和Ｃ－Ｐ空腹水平低,ＯＧＴＴ试验无峰值出现;而ＮＩＤＤＭ患者峰值则延迟。结论ＭＡＩＡ稳定可靠,特异性高,无放射性污染,优于ＲＩＡ,在糖尿病临床实践中有较大应用价值。