球形芽孢杆菌2362株灭蚊幼效果观察

1988年在我市城区坑塘使用球形芽孢杆菌灭蚊幼,面积为12100m~2。设观察点2处,面积174m~2,水平均深度13cm,pH值7.1-7.3,水温24—28℃,对照区2处其条件与实验区基本相同。药源系山东省平阴县生物实验厂产品,生物效价LC50为0.5ppm。菌液稀释10倍,以5ml/m~2均匀喷洒水面,定期定点观察。实验区施药2次,分别在6月中旬,7月上旬。幼虫平均密度(只/勺)实验区为58.6,对照区298.3,对比下降80.4％。施药后24h,d2、5、     

乙酰唑胺促卵巢癌细胞的凋亡作用

目的 探讨乙酰唑胺是否可以抑制体外培养的卵巢癌细胞的生长.方法卵巢癌细胞体外培养,调整细胞浓度为1 x 105/ml,分成实验组3瓶和对照组1瓶,实验组3瓶更换成乙酰唑胺浓度分别为1×10-8mol/L、5×10 -8moL/L、10×10-8mol/L的培养液,对照组培养液不变,分别收集24、48、72 h的细胞,用预冷的70％乙醇固定,调整细胞浓度1×106/ml,PI染色,进行流式细胞仪检测.每组重复3次.结果①与对照组比较,不同浓度实验组细胞凋亡率均增加,且随着药物浓度增加,细胞凋亡率也在增加,差异有显著性(P＜0.05).②各实验组间比较,差异均有显著性(P＜0.05).③随着时间增加,对照组和实验组所有的细胞凋亡率增加,24h与48 h之间,24h与72 h之间,48h与72 h之间,差异均有显著性(P＜0.05).结论乙酰唑胺对体外培养的卵巢癌细胞有明显的抑制作用,且与药物浓度和培养时间有关.     

脂多糖对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞生长的影响——对建立支架内再狭窄炎症细胞模型的探索

目的探讨不同浓度脂多糖(LPS)作用不同时间对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)生长的影响,分析其应用于HCASMC的无毒性反应浓度范围,为开展介入术后再狭窄相关研究建立HCASMC炎症活化模型提供实验数据支持。方法体外培养的HCASMC 3~5代,加入96孔细胞培养板,用噻唑蓝比色实验(MTT法)检测不同浓度(0μg/ml,0.01μg/ml,0.1μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,100μg/ml)LPS在不同作用时间(24 h,46 h,72 h)下对HCASMC活力影响,酶标仪492 nm处测定各组A值,细胞活力=(实验组A值-调零孔A值)/对照组A值。结果 LPS在低于100μg/ml浓度范围内,干预HCASMC时间短于48 h未出现细胞毒性,多表现为促细胞增殖效应,而干预时间大于48 h则显现出较为明显的细胞毒性,且细胞活力随LPS浓度的增大而减低;干预72 h后LPS浓度在0~0.01μg/ml范围内有促增殖作用,0.1~0.5μg/ml浓度则产生轻微的细胞抑制作用,但细胞毒性不明显,在1~100μg/ml浓度下HCASMC毒性反应逐渐出现,且HCASMC活力随LPS浓度的升高而减低。同一浓度水平的LPS随着作用时间延长,HCASMC的细胞活力逐步下降,且作用时间越长下降越明显。结论LPS在浓度0.1μg/ml以下未出现明显的细胞毒性,其中LPS浓度0.01μg/ml干预24 h,人冠状动脉平滑肌细胞增殖最显著,可作为建立炎症诱导人冠状动脉平滑肌细胞活化模型的最佳条件。     

球形芽孢杆菌BS-10简介

球形芽孢杆菌BS-10是江苏省里下河农业科学研究所戴承镛研究员等于1982年从扬州市郊分离而得。1985～1987年在南京、扬州、苏州等地300万m~2以上的水体面积中进行灭蚊幼试验的结果表明:BS-10对杀灭蚊类幼虫,尤以对污水型蚊种二龄以上的蚊幼特别敏感,投BS-10混悬剂后24h,     

丹参素促大鼠心肌细胞及心脏干细胞增殖的作用

目的：大鼠原代心肌细胞及心脏干细胞（CSCs）培养条件的筛选及丹参素（DS-182）对两种细胞体外增殖的影响。方法：对比组织块培养法及差速培养法,选取适宜培养基、消化液浓度、消化时间、差速贴壁时间及心脏成纤维细胞（CFs）抑制剂等因素。分别用MTT比色法、ELISA法及流式细胞术（FCM）检测丹参素对大鼠心肌细胞及CSCs体外增殖的影响。结果：确定DMEM/F12 1∶1培养基、100 ml/L胎牛血清（FBS）、2.5 g/L胰蛋白酶、5 min/次×5次的消化时间及120 min的差速贴壁时间为最适分离纯化条件。MTT比色法检测显示,与空白对照组相比,经浓度为7.8×10-4~1×10-1 mol/L的DS-182处理12、24、48和72 h后,细胞的吸光度（A）值明显增加（P〈0.05）。ELISA法检测显示,与空白对照组相比,经浓度为3.9×10-4~1×10-1 mol/L的DS 182处理24 h后,细胞的A值明显增加（P〈0.05）。FCM检测显示,经浓度为0.1 mol/L的DS-182处理24 h后,c-kit＋的细胞数占细胞总数的比例增加了27.0%。结论：改良了一套较为完整的大鼠心肌细胞及CSCs的分离纯化方法。DS-182在一定浓度下（7.8×10-4~1×10-1 mol/L）对大鼠心肌细胞及CSCs的增殖具有明显的促进作用。     

TNFα诱导大肠癌细胞凋亡的实验研究

目的:探索肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导人大肠癌细胞凋亡的可能性及其发生规律。方法用细胞体外培养方法,以TNFα不同剂量、不同时间作用于人大肠癌Lovo细胞,经Hoechst33258荧光染色,光镜观察细胞的形态改变;DNA抽提、琼脂糖凝胶电泳,检测DNA断裂情况。结果:TNFα1×10~5μ/ml作用12—48h和1×10~4—1×10~5μ/ml作用48h,Lovo细胞出现逐渐明显的凋亡形态学改变;1×10~5μ/ml作用48h,DNA电泳出现显示凋亡特性的梯形条带。结论 TNFα能够诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡,并存在时间与剂量效应。     

植物耀素凝胶对阴道常见微生物生长的影响

目的研究植物耀素凝胶对阴道常见微生物生长增殖的影响,为阴道炎症的预防提供理论依据。方法将植物耀素凝胶加入培养基中,采用比浊法和菌落计数测定其对微生物生长的影响;采用3,5-二硝基水杨酸法测定不同微生物对培养基中的碳源消耗量;通过菌落计数测定植物耀素凝胶对混合培养的鼠李糖乳杆菌和致病菌生长的影响。结果单独培养条件下,植物耀素凝胶可促进鼠李糖乳杆菌生长,其活菌浓度由(1.79±0.42)×10~9 CFU/mL增加至(8.27±1.80)×10~9 CFU/ml(P0.01);抑制其他微生物生长,其中大肠埃希菌活菌浓度由(3.06±1.54)×10~9 CFU/ml降至(9.40±0.07)×10~3 CFU/ml(P0.01),阴道加德纳菌活菌浓度由(3.34±1.02)×10~7 CFU/ml降至(1.98±0.98)×10~5 CFU/ml(P0.01),白色假丝酵母菌生长活菌浓度由(3.00±1.17)×10~7 CFU/ml降至(75.00±0.11)CFU/ml(P0.001),干燥棒状杆菌无单菌落生长。鼠李糖乳杆菌对培养基中碳源相对消耗量为50.26%,呈中等消耗程度,其余菌对碳源消耗量为低或基本无消耗;混合培养条件下,植物耀素凝胶促进鼠李糖乳杆菌生长(P0.05),进而抑制其他微生物生长:金黄色葡萄球菌活菌浓度由(4.39±0.45)×10~(15) CFU/ml降至(2.05±0.22)×10~(12) CFU/ml(P0.01),大肠埃希菌活菌浓度由(1.27±0.70)×10~9 CFU/ml降至(6.95±2.75)×10~5 CFU/ml(P0.01),干燥棒状杆菌无单菌落生长,白色假丝酵母菌活菌浓度由(3.95±1.72)×10~7 CFU/ml降至(1.95±0.26)×10~5 CFU/ml(P0.01)。结论植物耀素凝胶能促进鼠李糖乳杆菌生长,从而抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、干燥棒状杆菌和白色假丝酵母菌的生长,有利于维持阴道微生态平衡,可应用于阴道炎症预防。     

家蝇幼虫抗菌肽抗弓形虫效果观察

目的 研究家蝇幼虫抗菌肽对弓形虫的杀伤作用. 方法 通过研磨、高速离心和层析分离家蝇幼虫抗菌肽,暂命名为AMP-1.将AMP-1用PBS调整浓度为12.5、25.0和50.0 μg/ml,分别作用于体外游离的和Vero细胞内的弓形虫速殖子,采用MTT法和瑞姬氏染色法观察其24、48和72h的抑制率,并采用MTT法观察其对宿主细胞的毒性作用.将50 μg/ml的家蝇幼虫抗菌肽作用于体外游离的弓形虫速殖子24h后,采用透射电镜观察弓形虫速殖子超微结构的变化. 结果 研究发现,AMP-1的抗游离弓形虫作用随着浓度的增大和时间的延长而升高(F24h=23.482,F48h=20.519,F72h=9.469,P＜0.05).瑞姬氏染色结果显示,各浓度抗菌肽组弓形虫对Vero细胞的侵入率均随着AMP-1浓度的增大而减小(F24h=8.888,F48h=10.890,P＜0.05).12.5、25.0和50.0 μg/ml AMP-1作用于Vero细胞72 h后,细胞存活率分别为94.04％,90.70％和81.94％.透射电镜观察表明,AMP-1能引起弓形虫速殖子细胞膜、胞内细胞器以及细胞核受损. 结论 AMP-1能有效杀伤弓形虫速殖子,并且对正常细胞损伤很小,提示AMP-1可作为抗弓形虫的候选药物.     

TNFα诱导大肠癌细胞凋亡的实验研究

目的探索肿瘤坏死因子α(TNF_α)诱导人大肠癌细胞凋亡的可能性及其发生规律。方法用细胞体外培养方法,以TNF_α不同剂量、不同时间作用于人大肠癌Lovo细胞,经Hoechsl 33258荧光染色,光镜观察细胞的形态改变;DNA抽提、琼脂糖凝胶电泳,检则DNA断裂情况。结果TNFal×10~5μ/ml作用12-48h和J×10~4-1 x10~5μ/ml作用48h.Lovo细胞出现逐渐明显的凋亡形态学改变;1×10~5μ/ml作用48h.DNA电泳出现显示凋亡特性的梯形条带。结论TNF_α能够诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡,并存在时间与效果效应。     

苏芸金杆菌微胶囊剂型与标准菌粉灭蚊幼效果比较

本文报道按美国哈佛大学专利技术制备的苏芸金杆菌微胶囊剂型(EBTI)与标准菌粉剂(SBTI)灭蚊幼效果比较。结果表明:1 在BTI为0.007～0.002ppm低浓度时,EBTI灭蚊幼持效显著高于SBTI(P<0.01),在施用后第4wk仍保持100％的蚊幼死亡率;而相同浓度的SBTI组在施用第2wk后,蚊幼死亡率逐周下降,显著低于EBTI组(P<0.01),至第4wk灭蚊幼效力消失。表明EBTI比相同浓度SBTI持效长、毒效高。2 趋势性假设检验结果示SBTI在BTI浓度≤0.025ppm时,蚊幼死亡率随用药时间延长而呈下降趋势(X~2=8.17～24.08,P<0.01);而EBTI组在BTI浓度为0.025～0.007ppm时,蚊幼死亡率保持100％,表明EBTI最适长效高效低剂量BTI血浓度为0.007ppm。     

隐匿型Ph易位三例报告

应用骨髓染色体G显带技术,在450例慢性髓性白血病(CML)检出3例隐匿型Ph易位,报道如下:1 细胞遗传学分析方法 均取患者的骨髓血,细胞数按终浓度(2～3)×10~9/ml加入含20%小牛血清或20%自体血浆的McCoy's培养液中,在37C温箱中进行24h培养,终止培养前2h按终浓度0.08～0.1μg/ml加入秋水仙素,常规低渗、固定后,进行制片、老化、G显带,方法详见报道。每例至少分析20个中期分裂相。异常核型按人类染色体国际命名体制ISCN标准定义。对每个异常克隆拍照、放大、剪排,制备3～5个核型图。2 病例及临床资料 3例皆为男性,按张之南主编的有关标准进行诊断、分期和疗效评定。 例1,42岁,1993年7月因左肋部疼痛、低热、乏力3周,在我院门诊查白细胞(WBC)80×10~9/L,肝     

氟伐他汀改善嘌呤霉素作用下足细胞β1整合素的表达

目的:探讨氟伐他汀(FLV)对嘌呤霉素(PAN)刺激下足细胞黏附分子β1整合素表达的影响及可能机制。方法:体外培养的永生化人足细胞分为以下四组:(1)正常对照组;(2)二甲基亚砜(DMSO,1mg/ml)对照组;(3)PAN(1.0μg/ml)组:PAN分别培养足细胞12h、24h、48h、72h;(4)PAN(1.0μg/ml)+FLV(1×10-8～1×10-5M)组,PAN分别与不同浓度FLV共同培养足细胞48h。用Western印迹和DCFHDA(2’,7’-二氯荧光素-3’,6’-二乙酸酯)分别检测以上四组足细胞β1整合素和活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的表达。噻唑蓝[3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,简称MTI]法检测足细胞活力。结果:与正常对照组相比,PAN分别作用24h、48h、72h后,β1整合素表达逐渐下降、ROS表达则明显升高(P<0.05)。FLV干预后,β1整合素表达水平升高、ROS表达水平下降,以FLV浓度为1×10-7M作用48h效果最明显(P<0.05)。相关性分析发现,PAN组以及PAN+FLV组足细胞β1整合素水平与细胞内ROS表达水平成负相关。MTT结果表明DMSO以及FLV浓度为1×10-8M和1×10-7M对足细胞的存活无明显影响(P>0.05),而FLV浓度为1×10-6M和1×10-5M、PAN组、PAN+FLV组,在24h均明显抑制足细胞的活力(P<0.05)。与PAN组相比,PAN与FLV1×10-7M共同作用48h足细胞活力有明显的改善(P<0.05)。结论:PAN可致体外培养足细胞的β1整合素表达下降,FLV上调β1整合素的表达,保护足细胞。此机制与FLV抑制足细胞内ROS的表达相关。     

抗纤灵对HepG2细胞端粒酶抑制作用的影响

[目的]观察抗纤灵对人肝癌细胞株（HepG2）端粒酶活性和端粒酶RNA的影响,探讨中药抗纤灵防止肝细胞癌变的作用机制。[方法]将10×半抑制浓度（IC50）,1.0×IC50,0.1×IC50抗纤灵药液加入到细胞培养液中,以0.85%氯化钠和环磷酰胺分别作阴性和阳性对照,在12、24、48、72、96 h收集细胞,并检测端粒酶的活性和端粒酶RNA的表达。[结果]抗纤灵杀伤HepG2的IC50为1 mg/ml,10×IC50为10 mg/ml,0.1×IC50为0.1 mg/ml;10×IC50浓度作用后,靶细胞端粒酶活性显示阴性,10×IC50及环磷酰胺对HepG2细胞端粒酶RNA有明显抑制作用;1.0×IC50和0.1×IC50则没有抑制作用。[结论]通过抑制端粒酶活性,抗纤灵能明显抑制HepG2生长。     

空肠弯曲菌在双相培养基中生长特性的研究

本文观察了空肠弯曲菌在布氏肉汤中的生长速度,比较研究了它在铁盐双相琼脂和布氏血琼脂双相培养基上生长的特点。实验表明经43℃24小时培养后,铁盐双相琼脂上菌落生长数为1.64×10~8cfu/ml,而在布氏血双相琼脂上则为2.85×10~8cfa/ml。空肠弯曲菌在布氏血双相琼脂中进行培养,于42℃42小时菌液浓度即可达2.5×10~(10)cfu/ml,连续观察18.5天仍有活菌生长(7.0×10~5cfu/ml)。在pH值的测定中表明18～450小时的弯曲菌培养液,碱度逐步上升(pH7.2～8.6)。空肠弯曲菌在双相培养基中存活和繁殖比较适宜,但对此菌存活持续时间的长期观察仍需进一步研究。     

`粉尘螨对过敏性支气管哮喘患者气道CD~+_4CD~+_(25)T细胞的募集作用

目的 研究过敏原粉尘螨提取液能否募集CD~+_4CD~+_(25)T细胞浸润到过敏性支气管哮喘(以下简称哮喘)患者气道.方法 经纤维支气管镜将粉尘螨直接注入10例非急性发作期的轻度过敏性哮喘患者的右肺中叶或左肺舌叶的段支气管(粉尘螨侧),将生理盐水注入对侧肺段支气管作对照(对照侧).24 h后再经纤维支气管镜于相应的肺段支气管进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF中的细胞数并分类.以流式细胞仪测定BALF中的T细胞及其亚群.结果 粉尘螨侧BALF中嗜酸性粒细胞[(1.4±0.1)×10~6/ml]明显多于对照侧[(0.3±0.1)×10~6/ml,P<0.003],淋巴细胞[(2.2±0.3)×10~6/ml]明显多于对照侧[(0.3±0.1)×10~6/ml,P<0.05],CD~+_4CD~+_(25)T细胞[(784.0±281.3)个/μl]明显多于对照侧[(7.7±3.6)个/μl,P<0.001].结论 粉尘螨能募集CD~+_4 CD~+_(25)T细胞浸润到缓解期轻度过敏性哮喘患者气道局部.     

3种基因工程藻对中华按蚊幼虫杀灭作用的实验研究

本实验观察了３种基因工程杀蚊幼蓝藻对中华按蚊Ⅲ龄幼虫的杀灭作用。结果表明，当喷施工程藻浓度高于３．０×１０５ｃｅｌｓ／ｍｌ时，作用２４ｈ后，中华按蚊幼虫死亡数较低，而在４８ｈ、７２ｈ后蚊幼虫大部分（６７％以上）死亡；在喷施工程藻浓度低于３．０×１０４ｃｅｌｓ／ｍｌ时，２４ｈ、４８ｈ和７２ｈ的杀蚊幼效果均较差，此结果明显低于工程藻对淡色库蚊幼虫的作用效果。因此在应用基因工程藻进行现场控制蚊幼虫时，特别是在有较多按蚊幼虫的孳生地，应该考虑联合应用其它防治方法。     

血管紧张素Ⅱ对血管内皮细胞线粒体转录因子A表达的影响

目的探讨血管紧张素(Ang)Ⅱ对血管内皮细胞线粒体转录因子A(TFAM)表达及细胞功能的影响。方法将不同浓度的AngⅡ(1×10~(-7)~1×10~(-5)mol/L)与原代人脐静脉细胞(HUVECs)共孵育,在24 h用免疫印迹技术和RT-PCR分别检测TFAM的表达量;在12 h用流式细胞仪检测线粒体膜电位及细胞的凋亡率变化。结果 AngⅡ以浓度依赖的方式降低TFAM的表达量;随着AngⅡ浓度升高,线粒体膜电位降低水平、细胞凋亡率增加(P<0.01)。结论 AngⅡ降低HUVECs TFAM表达量及导致细胞损伤。     

125I-脱氧尿嘧啶核苷对重组质粒pcDNAEgr-IFNγ体外辐射诱导表达的作用

目的研究125I-脱氧尿嘧啶核苷对重组质粒pcDNAEgr-IFNγ在体外培养B16细胞中的辐射诱导表达作用。方法以脂质体介导法将pcDNAEgr-IFNγ重组质粒转染B16细胞,48h后,于培养液中加入125I-UdR,使其终放射性浓度分别为0(空白对照)、1、5、10、20、50kBq/ml,24h后,采用ELISA法定量检测细胞上清中IFNγ。结果转染组细胞IFNγ蛋白表达随着细胞培养液中125I-UdR浓度的增高而增高,放射性浓度为5、10、20、50kBq/ml组IFNγ的蛋白表达明显高于0kBq/ml组(P<0.05~0.001),其中50kBq/ml组表达量最高,为0kBq/ml组的3.66倍;加入50kBq/ml125I-UdR后6h上清中IFNγ表达量即明显升高(P<0.05~0.001),并随时间延长逐渐增加,照后48h达峰值,表达量为未加入125I-UdR时的6.51倍。结论pcDNAEgr-IFNγ重组质粒在125I-UdR诱导下可有效表达IFNγ,并且其辐射诱导IFNγ基因表达增强特性具有一定的量效和时程规律。     

自养黄色杆菌杀钉螺的实验研究

目的筛选出一种高效低毒廉价的微生物用以杀灭钉螺,并验证其效用。方法从钉螺孳生的土壤中分离得到自养黄色杆菌(Xanthobacterautotrophicus),分别采用浸泡法和接触法进行了杀螺实验。结果钉螺在1×106、2×106、3×106、4×106cfu/ml4个浓度的菌液浸泡24～72h,死亡率在1.3%～95.0%之间,48h的LD50是2.6×106cfu/ml,表明钉螺的死亡率与浸泡时间及菌液浓度具有明显的正相关关系。结论浓度为106cfu/ml以上的该菌液具有比较稳定的杀螺效果;浸泡法杀螺比接触法效果更好。     

Celecoxib对胃癌细胞凋亡的影响

目的:研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂Celecoxib对人胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响.方法:采用MTT法测定人胃癌细胞株SGC7901分别在1×10-5,1×10-6,1×10-7,1×10-8,1×10-9mol/L的Celecoxib作用48h后生长抑制情况;流式细胞术(FCM)观察Celecoxib对SGC7901细胞凋亡的影响;采用免疫细胞化学染色观察Survivin的表达.结果:Celecoxib浓度为1×10-5-1×10-9mol/L时,对SGC7901细胞的生长均有抑制作用,以1×10-5mol/L浓度的抑制作用最为显著,其抑制率为30.03%;1×10-5mol/LCelecoxib作用12,24,48h后,细胞凋亡比例较对照组均明显增加,48h凋亡率达17.83%;1×10-5mol/LCelecoxib作用后,Survivin的表达自用药3h起下降,24h最明显.结论:Celecoxib可诱导SGC7901细胞的凋亡,其可能的作用机制为抑制细胞Survivin基因的表达.