当归对宫内缺氧幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响及机制

目的 探讨宫内缺氧对幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响,以及NMDAR1 mRNA在其新生期的表达与当归的调控作用.方法 健康SD孕鼠30只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各10只,于孕14 d开始将缺氧组与当归组孕鼠用三气培养箱制作胎鼠宫内缺氧模型,当归组用250 g/L当归静脉注射干预.3组孕鼠分娩当日每窝随机选取新生鼠2只,取脑、常规石蜡切片;余新生鼠随机选取2只喂养至30 d进行Morris水迷宫测试,测试结束当日,多聚甲醛灌注固定取脑、常规石蜡切片.幼鼠脑组织作NSE mRNA原位杂交、新生鼠脑组织作NMDAR1 mRNA原位杂交.结果 Morris水迷宫实验和NSE mRNA原位杂显示:与对照组(n=20)相比,缺氧组幼鼠(n=20)空间探查测试和对位探查测试时间较缩短、海马CA3区阳性细胞数减少(P＜0.05),当归组(n=20)探查测试时间较缺氧组延长(P＜0.05)、海马CA3区阳性细胞数增多(P＜0.05);NMDAR1 mRNA原位杂交显示:与对照组相比,缺氧组海马CA3区阳性细胞积分光密度值增大,当归组较缺氧组减小(P＜0.05).结论 宫内缺氧可致新生大鼠海马CA3区NMDAR1 mRNA表达增高,从而使幼年大鼠该区神经元减少,学习记忆能力降低,而当归注射液可改善宫内缺氧状态,增加幼年大鼠海马CA3区神经元数量,提高其学习记忆能力.     

宫内缺氧对新生大鼠神经元的影响及当归的保护作用

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠海马神经元的影响及当归注射液的保护作用.方法 孕期14 d的SD大鼠21只,随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg,1次/d,连续7 d,后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h,连续3 d(孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠脑组织,常规石蜡切片,经神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)免疫组织化学染色后行图像分析.结果 缺氧组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的积分光密度(Integrated Optical Density,IOD)值较对照组减少[IOD缺氧组:(4.9±1.1);IOD对照组:(6.2±1.6),P＜0.05];当归组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组增加[IOD治疗组:(6.9±2.6), P＜0.05].结论 一定程度的缺氧可刺激海马CA3区神经元变性;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元可能具有保护作用.     

当归对宫内缺氧后新生大鼠肾脏内血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究当归对宫内缺氧后新生大鼠肾脏内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14 天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg(连续7d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3 d:孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.3组孕鼠分娩当日取肾组织、多聚甲醛固定,石蜡包埋切片、VEGF免疫组化、400倍拍照、IPP6.0软件图像分析.结果 缺氧组新生鼠VEGF 阳性细胞的数量和积分光密度值均较对照组增大 (P＜0.05),当归组VEGF 阳性细胞数量和积分光密度值均较缺氧组减小(P＜0.05).结论 一定时间、一定氧浓度的宫内缺氧可刺激新生大鼠肾脏VEGF的表达增加 ;而当归注射液可使VEGF的表达下降.     

当归对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞增殖的影响

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用.方法 将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg(连续7d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3d孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织,常规石蜡切片,经巢蛋白(nestin)免疫组织化学染色后行图像分析.结果 缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度(IOD)值较对照组增加[IOD缺氧组(14 806±4 636.8);IOD对照组(7 387±3191.7),P＜0.05];当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱[IOD治疗组(9 859±2 386.4),P＜0.05].结论 一定程度的缺氧可刺激神经干细胞增殖;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞可能具有保护作用.     

当归注射液对宫内缺氧胎鼠大脑皮质神经元的保护作用

目的探讨当归注射液对宫内缺氧胚胎大鼠大脑皮质神经元是否有保护作用。方法将孕15 d的孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组,缺氧组和当归组孕鼠采用低张性缺氧模型致鼠胚宫内缺氧,各组鼠胚大脑组织经c-Fos和一氧化氮合酶(n itric oxide synthase,NOS)免疫组织化学双标染色后,进行观察分析。结果缺氧组大脑皮质NOS阳性细胞和c-Fos/NOS双染阳性细胞均比对照组明显增多(P<0.05);与缺氧组相比,当归组NOS阳性细胞和c-Fos/NOS双染阳性细胞均减少(P<0.05)。结论当归注射液可能对缺氧鼠胚大脑神经元有保护作用。     

当归对宫内缺氧后幼年大鼠齿状回胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨宫内缺氧对40 d龄幼年大鼠齿状回胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响及当归的干预作用.方法 配种得孕SD大鼠(39只),至孕14 d,随机分为对照组12只、缺氧组12只、当归组15只.将缺氧组大鼠置于三气培养箱内缺氧,制作宫内缺氧模型,缺氧前1 h经尾静脉注射NS(8 ml/kg),当归组经尾静脉注射当归注射液(8 ml/kg),其余同缺氧组;对照组经尾静脉注射NS,不缺氧;自然生产,产后第40天随机取幼年大鼠脑组织,常规石蜡切片,免疫组织化学染色.结果 缺氧组GFAP阳性染色面积(Area)均数比对照组大,差异有统计学意义(P＜0.05);当归组Area均数比缺氧组小,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 130 ml/L氧浓度的缺氧环境促进了幼年大鼠齿状回GFAP的表达,当归注射液能够减少宫内缺氧后幼年大鼠神经胶质细胞GFAP的表达,对神经系统发挥保护作用.     

宫内缺氧对幼年大鼠大脑齿状回颗粒细胞及其记忆功能的影响及当归的干预作用

目的 探讨宫内缺氧对生后幼年大鼠齿状回颗粒细胞及其学习能力的影响和当归的干预.方法 将孕14 d大鼠置于三气培养箱内缺氧,当归组在缺氧前注射当归注射液;缺氧组注射生理盐水;对照组注射生理盐水,但不缺氧;待自然生产,产后30 d各组随机取幼鼠行Morris水迷宫实验,实验后取脑组织,行神经元特异烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色.结果 水迷宫实验各组大鼠在目标象限的搜索时间比较:缺氧组<对照组(P<0.05);缺氧组<当归组(P<0.05);积分光密度(IOD)均数比较:缺氧组<对照组(P<0.05);缺氧组<当归组(P<0.05).结论 宫内缺氧能损伤齿状回颗粒细胞并降低大鼠的记忆能力;当归注射液能减轻宫内缺氧对齿状回颗粒细胞的损伤,增强缺氧大鼠的记忆能力.     

不同宫内缺氧时程对胎鼠神经干细胞增殖的影响及当归保护作用

目的 探讨不同宫内缺氧时程对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用. 方法将孕15 d的SD大鼠随机分为9组:对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组、缺氧9 h组、缺氧12 h组、当归3 h组、当归6 h组、当归9 h组和当归12 h组,每组5只.所有当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液,然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧;所有缺氧组用生理盐水代替当归注射液,其余同当归组;对照组只注盐水,不缺氧.取胎鼠大脑组织,作Nestin免疫组织化学染色、图像分析.结果 缺氧3 h组、缺氧6 h组和缺氧9 h组阳性细胞较对照组染色增强,数量增多,缺氧12 h组阳性细胞较对照组减少,各缺氧组间比较有统计学差异;除当归12 h组外,其余各当归组阳性细胞较相应缺氧组染色减弱,数量减少;当归12 h组与缺氧12 h组间比较无统计学差异(P＞0.05).结论 一定时程、一定浓度的缺氧可以刺激神经干细胞进入增殖状态,其增殖的强弱与缺氧时程有关,缺氧6 h时达到增殖高峰,缺氧9 h开始降低;长时程缺氧(12 h)会导致神经干细胞减少;当归对一定时程缺氧的胚胎大鼠神经干细胞有一定保护作用,而在缺氧12 h时失去保护作用.     

针刺对宫内窘迫缺血缺氧脑损伤新生大鼠行为学及海马神经元自噬的影响

目的:观察针刺对宫内窘迫缺血缺氧脑损伤(HIBD)新生大鼠的行为学、海马神经元自噬水平及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3表达的影响,探讨针刺调控海马神经元自噬改善新生儿HIBD的机制。方法:SD孕鼠6只,2只孕鼠以宫内窘迫延迟剖宫产法行HIBD造模,2只孕鼠作为HIBD模型新生大鼠代乳鼠,2只孕鼠自然分娩正常新生大鼠。自然分娩的9只新生大鼠为正常组,HIBD新生大鼠按体质量、性别因素分层随机分为模型组和针刺组,每组9只。针刺组大鼠于出生后第14天予"靳三针"针刺,每穴快速捻转10次,每日1次,持续14 d。旷场实验、Morris水迷宫实验观察各组自主活动能力、空间学习记忆能力;透射电镜法观察大鼠海马神经元超微结构、自噬小体形态和数量;流式细胞术检测海马组织自噬相关蛋白Beclin-1的阳性细胞百分比;Western blot法检测海马组织LC3的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠走出中央区域时间、逃避潜伏期、第1次穿越原平台时间均明显延长(P<0.01,P<0.05,P<0.001),中央区域路程和总路程、活动次数、目标象限停留时间、穿越原平台次数均明显减少(P...     

自由基清除剂对大鼠脊髓损伤后NMDAR1表达的影响

目的:观察自由基清除剂对大鼠急性脊髓损伤后NMDAR1表达的影响,探讨自由基清除剂对大鼠脊髓损伤的保护及促神经功能恢复的作用.方法:采用改良Allen法制作SD大鼠脊髓中度损伤模型,将模型鼠随机分为实验组和对照组各24只.实验组按3mg/kg的剂量将自由基清除剂依达拉奉用0.9%氯化钠溶液稀释后,每隔12h腹腔注射1次,给药时间为30min,共14d.对照组采用同样方式给予0.9%氯化钠溶液.观察脊髓组织的病理改变及用免疫组化方法测定1天、3天、7天和14天不同时间点大鼠脊髓内离子型受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-Methyl-D-aspartate receptors,NMDAR)表达的变化.结果:与外伤对照组比较,依达拉奉治疗组MMDAR1免疫阳性细胞数在1d时较低(P＜0.05),3d、7d、14d     

茵陈与熊去氧胆酸联用对妊娠肝内胆汁淤积症大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2平衡状态及妊娠结局的影响

目的:探讨茵陈与熊去氧胆酸(UDCA)片联用对妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2及妊娠结局的影响.方法:50只孕大鼠中任选40只诱发建立ICP模型,且随机分成4组.茵陈组10只孕鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL·d-1,连服10天;UDCA组10只孕大鼠于妊娠第15天起喂UDCA片,15mg·kg-1·d-1,连服10天;联合组10只孕大鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL·d-1,同时加用UDCA片灌胃,15mg·kg-1·d-1,连服10天;诱发后未治疗10只孕大鼠作为对照组.其余10只孕大鼠为正常组.应用酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定50只孕鼠妊娠第15天(治疗前)和第21天血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平.记录各组孕大鼠妊娠天数及仔鼠存活率.结果:(1)ICP孕鼠(对照组)IL-2、IFN-γ水平高于正常组(P＜0.05),IL-4水平低于正常组(P＜0.05).(2)茵陈组治疗后IL-2水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);IFN-γ水平的变化无统计学意义(P＞0.05).UDCA组IL-2水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);IFN-γ水平较治疗前下降(P＜0.05),与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).(3)联合组治疗后IL-2、IFN-γ水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);且联合组IFN-γ水平较茵陈组、UDCA组低(P＜0.05),各药物组的IL-2、IL-4水平比较无统计学意义(P＞0.05).(4)对照组孕鼠妊娠天数、仔鼠存活率与正常组比较(P＜0.05).治疗后各药物组妊娠天数与对照组比较明显延长(P＜0.05),与正常组比较无差异(P＞0.05);仔鼠存活率较对照组均明显提高(P＜0.01),但茵陈组与UDCA组仍较联合组和正常组低(P＜0.05),而联合组仔鼠存活率与正常组比较无差异(P＞0.05).结论:ICP孕鼠T辅助细胞功能发生了变化,Th1细胞因子过度表达导致Th1/Th2失衡.茵陈与UDCA联用对ICP孕鼠Th1/Th2平衡状态向Th2细胞因子转化及仔鼠存活率提高作用较单一使用茵陈、UDCA更明显.     

茵陈与熊去氧胆酸联用对妊娠肝内胆汁淤积症大鼠T辅助细胞因子Thl／Th2平衡状态及妊娠结局的影响

目的探讨茵陈与熊去氧胆酸(UDCA)片联用对妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2及妊娠结局的影响.方法50只孕大鼠中任选40只诱发建立ICP模型,且随机分成4组.茵陈组10只孕鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL·d-1,连服10天;UDCA组10只孕大鼠于妊娠第15天起喂UDCA片,15mg·kg-1·d-1,连服10天;联合组10只孕大鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL·d-1,同时加用UDCA片灌胃,15mg·kg-1·d-1,连服10天;诱发后未治疗10只孕大鼠作为对照组.其余10只孕大鼠为正常组.应用酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定50只孕鼠妊娠第15天(治疗前)和第21天血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平.记录各组孕大鼠妊娠天数及仔鼠存活率.结果(1)ICP孕鼠(对照组)IL-2、IFN-γ水平高于正常组(P＜0.05),IL-4水平低于正常组(P＜0.05).(2)茵陈组治疗后IL-2水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);IFN-γ水平的变化无统计学意义(P＞0.05).UDCA组IL-2水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);IFN-γ水平较治疗前下降(P＜0.05),与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).(3)联合组治疗后IL-2、IFN-γ水平较治疗前、对照组下降(P＜0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P＜0.05);且联合组IFN-γ水平较茵陈组、UDCA组低(P＜0.05),各药物组的IL-2、IL-4水平比较无统计学意义(P＞0.05).(4)对照组孕鼠妊娠天数、仔鼠存活率与正常组比较(P＜0.05).治疗后各药物组妊娠天数与对照组比较明显延长(P＜0.05),与正常组比较无差异(P＞0.05);仔鼠存活率较对照组均明显提高(P＜0.01),但茵陈组与UDCA组仍较联合组和正常组低(P＜0.05),而联合组仔鼠存活率与正常组比较无差异(P＞0.05).结论ICP孕鼠T辅助细胞功能发生了变化,Th1细胞因子过度表达导致Th1/Th2失衡.茵陈与UDCA联用对ICP孕鼠Th1/Th2平衡状态向Th2细胞因子转化及仔鼠存活率提高作用较单一使用茵陈、UDCA更明显.     

丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响

目的 探讨丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响.方法 应用脑立体定位仪将肝素化Ⅶ型胶原酶注人大鼠尾壳核建立脑出血模型.大鼠随机分为正常对照组、出血对照组和治疗组.分别在不同时间段观察大鼠神经行为学、凋亡蛋白Caspase-3的表达及神经元的超微结构变化等指标.结果 治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减少(P＜0.05);治疗组Caspase-3阳性细胞数较出血对照组明显降低(P＜0.05);7 d治疗组Caspase-3阳性细胞数较3d治疗组降低(P＜0.05);电镜结果显示,治疗组与出血对照组比较,神经元细胞各结构形态相对完整.结论 丹参注射液对抑制大鼠脑出血灶周围神经元的凋亡具有较好的作用.     

松果菊苷对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织BDNF、TrkB表达影响

摘要：目的 通过建立血管性痴呆（VD）大鼠模型,观察松果菊苷（ECH）对VD大鼠学习记忆及海马组织脑源性神经营养因子（BDNF）、酪氨酸激酶B（TrkB）表达影响。方法 选择6月龄雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组、ECH组,每组30只。采用永久性结扎双侧颈总动脉建立大鼠VD模型,ECH组给予ECH 4周,采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,大鼠处死取脑,分离皮层与海马组织,HE染色观察脑组织神经元损伤。RT-PCR测定海马组织BDNF、TrkB mRNA表达,western blot检测BDNF、TrkB、AKT蛋白表达水平,免疫组化法测定NMDAR蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数降低（P＜0.05）,脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显,海马组织BDNF、TrkB mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达低于假手术组（P＜0.05）;与模型组比较,ECH组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加（P＜0.05）,脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显改善,海马组织BDNF、TrkB的mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达明显高于模型组（P＜0.05）。结论 松果菊苷可能通过上调血管性痴呆大鼠海马区BDNF、TrkB、AKT、NMDAR表达,减轻VD大鼠神经元缺血损伤,改善学习记忆能力。     

缺氧预处理MSCs移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4表达的影响及清热化瘀方的干预作用

目的：观察缺氧预处理骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响及清热化瘀方的干预作用。方法：采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠（MCAO）模型，将216只SD大鼠随机分为6组：假手术组（SO）、模型组（MCAO）、MSCs移植对照组(N-MSCs)、经HP处理后的MSCs移植组(HP-MSCs)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs QRHY)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP QRHY)。每组大鼠36只，每组根据取材时间点7d、14d、28d又可分为每组3个亚组，每个亚组12只大鼠。采用qRT-PCR和Western blot观察3个时间点SDF-1/CXCR4 mRNA及其蛋白的表达变化，并以TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果：各组缺血半暗带SDF-1/CXCR4 mRNA及其蛋白的表达均于7d达到高峰，14d，28d表达逐渐下降。其中7d、14d同一时间点组间比较，HP-MSCs组、MSCs QRHY组及HP QRHY组二者的表达均明显优于N-MSCs组（P＜0.01或P＜0.05），而以HP QRHY组增高最为明显（P＜0.05或P＜0.01），28d后，各移植组的表达趋势趋同，但仍高于模型组（P＜0.05）。结论：缺氧预处理MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4的表达，清热化瘀方能够进一步上调SDF/1CXCR4的表达，减少细胞凋亡。     

针药结合对局灶性脑缺血大鼠海马CA1和CA3区神经干细胞增殖与分化相关蛋白表达的影响

目的:观察电针结合天麻素对局灶性脑缺血大鼠海马CA 1和CA 3区神经巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达的影响,探讨针药结合对脑缺血后内源性神经干细胞(eNSCs)增殖与分化的作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针组、天麻素组和电针+天麻素组,每组10只。采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型。电针组电针左侧"合谷"穴和"曲池"穴,刺激30min;天麻素组按10mg/kg剂量腹腔注射天麻素注射液;电针+天麻素组给予电针与天麻素治疗。各组均每天治疗1次,共治疗14d。免疫组织化学方法检测缺血侧海马CA 1和CA 3区Nestin、GFAP及NSE的阳性细胞数。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠海马CA 1和CA 3区Nestin阳性细胞数增加(P0.05);与模型组比较,电针组、天麻素组和电针+天麻素组Nestin阳性细胞数均明显增加(P0.05);电针+天麻素组Nestin阳性细胞数较电针组及天麻素组增加(P0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠海马CA 1和CA 3区GFAP阳性细胞数增加(P0.05);与模型组比较,电针组、天麻素组和电针+天麻素组GFAP阳性细胞数明显减少(P0.05);电针+天麻素组GFAP阳性细胞数较电针组及天麻素组减少(P0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠NSE阳性细胞数减少(P0.05);与模型组比较,电针组、天麻素组和电针+天麻素组NSE阳性细胞数均明显增加(P0.05);电针+天麻素组NSE阳性细胞数较电针组或天麻素组增加(P0.05)。结论:电针与天麻素均可显著促进缺血侧海马CA 1和CA 3区eNSCs的增殖,抑制脑缺血后GFAP的过度表达,可能促进增殖的eNSCs向神经细胞分化,电针与天麻素结合作用更显著,这可能是针药结合治疗脑缺血有效的神经再生机制之一。     

天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠学习记忆行为及海马NMDAR1表达的影响

目的:观察天冰调督胶囊对印防己毒化学点燃癫痫模型大鼠学习记忆行为学改变及海马组织NMDAR1表达的影响。方法:SD大鼠腹腔注射印防己毒素(1.5 mg/kg)连续30 d,制作反复发作癫痫模型,点燃模型大鼠随机分为模型组、天冰调督胶囊低(0.4 g/kg)、高(0.8 g/kg)剂量组、丙戊酸钠组及拉莫三嗪组,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆行为学,RT-PCR检测海马组织NMDAR1 mRNA,Western-blot和免疫组化法检测NMDAR1蛋白表达情况。结果:治疗60 d后,与模型组比较,天冰调督胶囊低、高剂量组大鼠水迷宫实验寻找平台时间显著缩短(P0.05或P0.01),通过平台次数显著增加(P0.01);NMDAR1 mRNA含量均增加(P0.05或P0.01);在CA3、DG区NMDAR1表达均增强(P0.05)。结论:天冰调督胶囊可能通过调节NMDAR1水平改善癫痫学习记忆等认知障碍。     

人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马神经元的保护作用及机制

目的:观察人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的影响,探讨其保护海马神经元的作用机制。方法:60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,人参-知母-赤芍提取物组(0. 20 g·kg-1)和美金刚组(2. 1 mg·kg-1),每组12只。采用双侧颈总动脉反复夹闭合并腹腔注射硝普钠的方法建立血管性痴呆大鼠模型,造模后,正常组,假手术组,模型组给予同等体积生理盐水,每日1次,连续14 d。采用Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色观察海马CA1区病理改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马神经元胞膜NMDAR1的蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测海马NMDAR1的表达情况;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测海马组织中NMDAR1 mRNA的表达水平。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数显著减少(P 0. 01),海马CA1区神经细胞层次减少,排列紊乱、出现核固缩、神经元丢失,NMDAR1蛋白及mRNA表达显著升高(P 0. 01);与模型组比较,人参-知母-赤芍提取物组,美金刚组逃避潜伏期明显缩短(P 0. 05,P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数明显增加(P 0. 05,P 0. 01),海马CA1区神经元数目与形态有明显改善,海马神经元NMDAR1蛋白及NMDAR1 mRNA表达明显降低(P 0. 05)。结论:人参-知母-赤芍提取物能够改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,减轻海马CA1区神经元的损伤,其机制可能与下调海马神经元NMDAR1的表达有关。     

不同宫内缺氧时程对胎鼠脑组织STAT3表达的影响

目的:研究不同宫内缺氧时间对胚胎大鼠脑组织信号转导子与转录激活子3蛋白表达的影响。方法:制备乏氧性缺氧动物模型,从胎龄15d到16d连续宫内缺氧2d,分别缺氧2、4、6、8、12h共5个不同时程,采用免疫组化检测胚胎大鼠脑组织STAT3蛋白表达情况。结果:与对照组比较,缺氧2h胎鼠脑组织STAT3蛋白表达升高(P<0.05),在缺氧6h达最高(P<0.05);缺氧8h较对照组染色增强,但较缺氧6h表达减弱(P<0.05);缺氧12h组与对照组相比STAT3表达降低(P<0.05)。结论:短时缺氧(缺氧2、4、6、8h)能增强胎鼠脑组织STAT3蛋白的表达,但缺氧时间较长(缺氧12h)会降低STAT3蛋白的表达,说明宫内缺氧对胚胎脑组织的影响可能通过STAT3通路进行调节。     

石菖蒲及其有效成分-细辛醚对癫痫幼鼠海马区神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响

目的探讨在戊四氮(PTZ)诱发的癫痫动物模型中,石菖蒲及其主要成分α-细辛醚对海马区神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1) mRNA表达水平的影响。方法3周龄Wistar幼鼠ipPTZ60mg/kg建立癫痫模型。动物模型随机分为模型对照组、石菖蒲组、α-细辛醚组,另设正常对照组。各组均ig给药。正常对照组给予生理盐水1.0mL/d,其余各组分别给予石菖蒲2350mg/(kg·d),α-细辛醚29mg/(kg·d),连续7d。次日ipPTZ60mg/kg,观察动物行为变化,1d后处死动物,取左侧大脑固定用于原位杂交;取右侧海马组织用于半定量RT-PCR,检测海马CA1、CA3区神经元NMDRA1 mRNA的表达情况。结果原位杂交结果显示,阳性染色颗粒定位于海马神经元胞质内。石菖蒲和α-细辛醚治疗组海马区神经元阳性细胞数和平均吸光度均明显少于模型对照组(P<0.05)。半定量RT-PCR结果显示,石菖蒲和α-细辛醚治疗组海马组织中NMDAR1 mRNA的相对表达量均较显著低于模型对照组(P<0.05)。结论石菖蒲和α-细辛醚可能通过抑制海马区神经元谷氨酸NMDAR1表达而发挥抑制PTZ诱发的幼鼠癫痫发作。