MDR1在急性髓系白血病中的表达及其与预后的关系

目的检测初诊未治急性髓系白血病（AML）患者化疗前后骨髓单个核细胞多药耐药基因1（MDR1）的表达水平,探讨MDR1的表达对AML预后的评价作用。方法采用直接免疫荧光标记单抗流式细胞仪检测40例AML患者化疗前后血清及对照组血清MDR1的表达。结果实验组通透性糖蛋白（P．gP）阳性者的完全缓解（CR）率及CR持续时间均低于P—gp阴性者（P均〈0．01）;与对照组比较,实验组治疗前及治疗后未缓解患者P-gP均升高,治疗后未缓解者高于治疗前（P均〈0．01）;在各型白血病中,M3的P—gP表达最低,与其他亚型比较有统计学差异（P〈0．05）。性别、年龄、骨髓中白血病细胞比例对P-gP水平没有明显影响。结论P-gP可作为AML的独立预后因素。     

白血病患者造血细胞磷酸酶与半胱氨酸蛋白酶基因表达及其临床意义

目的探讨造血细胞磷酸酶（SHP-1）基因和天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶（Caspase-1、3）基因表达与白血病患者的化疗效果的关系。方法用RT-PCR方法检测白血病患者骨髓单个核细胞中SHP-1和Caspase-1、3的mRNA表达。结果急性白血病（AL）患者SHP-1和Caspase-1、3表达率分别为33．3％、80．0％、100．0％;慢性髓细胞白血病（CML）患者SHP-1表达率在急变期、慢性期分别为0．0％、37．5％。SHP-1和Caspase-1、3基因阳性患者的首次完全缓解（CR）率分别为85．0％、64．3％、55．8％,明显高于阴性患者（分别为15．6％、20．0％）,差异均有统计学意义（P〈0．05）;Caspase-1、3与SHP-1表达呈正相关。结论SHP-1可能是一个潜在的抑癌基因,它可能是通过激活下游的凋亡基因Caspase-1、3发挥作用;Caspase-1、3与SHP-1基因表达呈正相关且与病人的CR率有关,表明它们均参与了白血病的转归,可同时作为判断白血病患者的疗效和预后指标。     

急性髓细胞白血病表达CD7抗原的临床意义以及与细胞遗传学的相关性

目的：了解急性髓细胞白血病（AML）表达CD7抗原的临床意义以及与细胞遗传学的相关性。方法：对我院诊治的52例AML患者的免疫表型、细胞遗传学以及临床特点进行分析。结果：15例（28．8％）患者的骨髓白血病细胞表达CD7抗原。根据FAB分型,M2（18．5％）和M。型（20％）的CD7^＋率较低。CD7^＋组早期细胞抗原CD34、HLA—DR、CD117的表达率以及老年患者（大于60岁）比例高于CD7^-组,白细胞计数、染色体异常率、肝脾肿大及髓外白血病发生率均低于CD7^-组。CD7^＋组完全缓解（CR）率高于CD7^-组,无病生存期（DFS）短于CD7组,但差异均无统计学意义（P〉0．05）。70％以上的CD7^＋ AML患者分布在中等预后核型组。随着预后好、预后中等、预后差核型组的变化,AML所有病例、CD7^-组、CD7^＋组的CR率均呈逐渐下降趋势。结论：与CD7^- AML相比,CD7^＋ AML更容易获得CR,可能与低的白细胞计数、低的染色体异常率以及低的肝脾肿大与髓外白血病发生率有关;CD7^＋ AML患者年龄较大或同时表达早期细胞抗原,可能影响DFS。AML无论是否表达CD7抗原,染色体核型是判断预后最重要的因素。     

复发/难治AML患者sorcin基因表达及意义

目的研究复发／难治急性髓细胞白血病（AML）患者骨髓可溶性耐药相关钙结合蛋白（sorcin）基因表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测65例AML患者（观察组）,27例非白血病患者和健康人（对照组）sorcin基因表达水平。结果观察组sorcin基因表达水平高于对照组（P〈0．001）,其中复发／难治者高于初诊者和完全缓解（CR）者;AML各亚型sorcin基因过度表达存在差异,以M,阳性表达率最高;观察组临床耐药者sorcin基因表达显著高于非临床耐药者（P〈0．001）,且CR率显著低于非临床耐药者（P〈0．001）。结论sorcin基因过度表达与AML患者临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素;sorcin可作为检测AML临床耐药和判断预后的指标之一。     

nm23-H1在慢性粒细胞白血病患者血浆中的表达及临床意义

采用酶联免疫法测定分化抑制因子mn23-H1蛋白在80例慢性粒细胞白血病（CML）患者（观察组）和30例健康志愿者（对照组）血浆中的含量。结果观察组慢性期（CML—CP）mn23-H1蛋白血浆水平与对照组无显著差异,加速期（CML-AP）、急变期（CML-BP）明显高于对照组（P〈0．001）,CML—BP明显高于CML-AP。认为nm23-H1蛋白在CML血浆中的表达水平与疾病进展有关,nm23-H-蛋白表达水平可为CML早期诊断、临床分期及预后判断提供新的评价手段及实验室依据。     

髓系白血病中EVI1基因的表达及其临床意义

目的研究EVI1基因在成人急性髓系白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)中的表达及其临床意义。方法采用多重逆转录-聚合酶链反应(多重RT-PCR)技术分析2002年9月至2005年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的45例AML和43例CML骨髓单个核细胞中EVI1基因mRNA的表达,分析EVI1mRNA阳性白血病患者的临床特征及疗效。结果45例AML患者中有8例(17.8%)EVI1阳性,其中M11例、M23例、M54例。43例CML患者中有8例(18.6%)EVI1阳性,其中慢性期2例,占5.7%(2/35),加速期与急变期各3例,均占75.0%(3/4),加速期与急变期组的EVI1基因表达率高于慢性期组(P<0.01)。EVI1阳性的AML患者早期病死率高;EVI1基因阳性表达与CML白血病临床分期及预后相关。结论EVI1基因的高表达在髓系白血病的发生中,特别是在慢性粒细胞白血病慢性期向急性期转化中起重要作用。     

急性髓细胞白血病患者NPM1与FLT3基因突变的研究

目的 探讨急性髓细胞白血病（AML）患者中NPM1基因与FLT3基因内部串联重复（ITD）突变的发生率,并了解其临床特征及预后。方法 收集86例成人AML患者初诊时骨髓单个核细胞,采用基因组DNA-PCR方法分别扩增其NPM1和FLT3基因,毛细管电泳方法分析NPM1第12外显子突变,琼脂糖电泳分析FLT3-ITD突变,随访判断其预后。结果 86例AML患者中共检出NPM1基因突变29例（33．7％）,FLT3-ITD突变15例（17,4％）。两种突变在50例染色体正常核型AML中的发生率分别为46．0％和24．0％,明显高于异常核型AML患者。7例中6例NPM1^＋／FLT3-ITD^＋双阳性AML患者表现为正常核型,外周血白细胞均〉50×10^9几。单纯NPM1^＋或FLT3-ITD^＋AML患者初诊时也表现为高白细胞（P〈0.05）,NPM1^＋AML患者CD34表达率较低（P〈0．001）、临床完全缓解（CR）率略高（66.7％、53.3％,P〉0.05）、总生存率（OS）高（P〉0.05）;而FLT3-ITD^＋AML患者CR率略低（50．0％、58．8％,P〉0.05）、OS低（P〉0.05）。NPM1^＋／FLT3-ITD^-、NPM^-／FLT3-ITD^-、NPM^＋／FLT3-ITD^＋、NPM1-／FLT3-ITD^＋四组患者的CR率分别为66．7％、62．5％、50．0％、42．9％（P〉0．05）,各组间OS差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 NPM1和FLT3-ITD突变是AML（尤其正常核型AML）患者常见的分子学异常,且与其临床特点、疗效及预后有一定相关性。     

交叉表达淋系和髓系相关抗原的急性白血病的生物学及临床特征研究

目的：探讨交叉表达淋系和髓系相关抗原的急性白血病患者的生物学与临床特征及预后。方法：用流式细胞术检测白血病细胞的免疫表型，根据FAB亚型和免疫标记将病例分为6组；CD7表达阳性的急性髓细胞性白血病（CD7^ AML）、CD7表达阴性的伴淋系相关抗原的急性髓细胞性白血病（CD7^-Ly^ AML）、不伴淋系相关抗原的急性髓细胞性白血病（Ly^-AML）、伴髓系相关抗原的急性淋巴细胞性白血病（My^ ALL）、不伴髓系相关抗原的急性淋巴细胞性白血病（My^-ALL）和急性杂翕生白血病（HAL）。结果：CD7^ AML组的白细胞数高于Ly^-AML组及CD7^-Ly^ AML组，诱导缓解率（16.7％）低于Ly^-AML组（71.4％），有显著差异；CD7^-Ly^ AML组与Ly^-AML组分别比较，发病年龄较高，白细胞数较高，贫血较明显，平均缓解期及平均生存期较短。结论：CD7^ AML及CD7^-Ly^ AML具有不同的临床特征，预后较差，可以看作一个独特的临床亚型。HAL与My^ ALL相比较，具有不同的临床特征，应该区别对待。     

CD7+CD56+双阳性急性髓系白血病临床生物学特征

目的：探讨CD7^＋CD56^＋急性髓系白血病（AML）的临床生物学意义。方法：对25例初治CD7^＋CD56^＋AML患者进行细胞学形态、免疫表型、多药耐药P糖蛋白（PgP）检测，临床观察、并常规采用HAE方案诱导治疗，判定疗效，并随机选择66例CD7^-CD56^-AML患者进行对照。结果：CD7^＋CD56^＋AML阳性率4．08％（25／612）。CD7^＋CD56^＋AML在FAB分型中以M0、M1、M5、M7多见。与CD7^-CD56^-AML组比较CD7^＋CD56^＋AML具有高血红蛋白含量（89．29：75．62g／L，P〈0．05），高表达PgP（78．26％：34．85％，P〈0．01）和CD34表达（72．00％：45．45％，P〈0．05）等特征；此外，CD7^＋CD56^＋AML患者中枢神经系统浸润现象明显（36．00％：3．27％，P〈0．01），CD7CD56共表达与年龄、性别、白细胞计数、血小板计数、及外周血幼稚细胞数无关，也不影响完全缓解率和无病生存时间（均P〉0．05）。结论：CD7^＋CD56^＋AML具有独特的临床生物学特征，较少贫血，高表达PgP和CD34，常伴有中枢神经系统浸润。     

c-kit受体及其在白血病中临床意义

c-kit的配体为干细胞生长因子。c-kit受体正常表达于造血干／祖细胞，在急性淋巴细胞白血病中极少或不表达，而在急性髓性白血病（AML）中则表达较高，但在AML的各亚型表达不尽一致，因而c-kit受体检测有助于急性白血病（AL）的分类诊断和分型诊断。s-kit在原发性AML患者的表达高于MDS转变的AML，因此，s-kit检测有助于两种不同AML的鉴别诊断。SCF／c-kit诱导的细胞凋亡耐受与AML患者化疗疗效差有关，抗c-kit单抗可逆转AL细胞对化疗的凋亡耐受，这为难治性AML的治疗提供了新的思路。     

慢性粒细胞白血病患者sorcin基因表达及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白（sorcin）基因表达与临床耐药和疗效的关系。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测31例慢性粒细胞白血病（CML）患者（CML组）和27例健康人（对照组）sorcin基因表达。结果CML组sorcin基因阳性表达率明显高于对照组（P〈0．01），其急变期患者阳性率高于慢性期和加速期患者（P分别为0．03和0．18）；CML临床耐药者sorcin基因表达显著高于非临床耐药者，疗效显著低于非临床耐药者。结论CML患者sorcin基因呈高表达，与临床耐药和预后密切相关；sorcin表达可作为检测临床耐药和判断CML患者预后的指标之一。     

c-IAP1与Smac基因在白血病中的表达及临床意义

目的:探讨c-IAP1及其拮抗素Smac基因在白血病中的表达及对成人急性白血病(AL)患者预后的意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测103例AL患者c-IAP1、Smac的mRNA表达水平,20例健康人为正常对照,K562、Kg-1α细胞株为阳性对照。结果:初治AL患者中c-IAP1、Smac的表达较正常对照者明显升高,2者的表达为高度正相关,治疗缓解后c-IAP1、Smac的表达明显下降,复发后c-IAP1、Smac:基因的表达又复升高。c-IAP1 mRNA和Smac mRNA在慢性粒细胞性白血病慢性期组的表达率和表达水平均高于正常对照组,但差异无统计学意义。初治AL患者中,c-IAP1、Smac表达阳性的患者缓解率均低于表达阴性的患者。结论:AL的发病可能与c-IAP1和Smac的高表达有关,而且是AL复发的高危因素;c-IAP1和Smac高表达的患者完全缓解率低,预后不良。     

PTTG蛋白在急性白血病患者中表达的研究

目的:研究垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene, PTTG)蛋白在急性白血病(acuteleukemia,AL)患者中的表达,探讨其与白血病发生的关系。方法:采用SABC免疫组织化学方法测定47 例初诊患者及10例骨髓象正常患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中PTTG蛋白的表达。结果:AL初诊患者BMMNC中PTTG蛋白表达水平显著高于正常对照(P<0.05);异常染色体核型组高于无异常染色体核型组(P<0.05);治疗后达完全缓解(CR)组其PTTG蛋白表达低于未完全缓解(NR)组。结论:AL患者中PTTG蛋白的异常表达和AL的发生相关,其表达水平可反映患者的预后。     

Increased expression of protease-activated receptor 1 (PAR-1) in human leukemias

Protease-activated receptor 1 (PAR-1) is a G-protein-coupled receptor that is overexpressed in solid tumors, being associated with several pro-tumoral responses including primary growth, invasion, metastasis and angiogenesis. Expression of PAR-1 in human leukemic cell lines is reported but the status of its expression in human leukemic patients is currently unknown. In this study we evaluated the expression pattern of PAR-1 in patients with the four main types of leukemia - chronic lymphocytic leukemia subtype B (B-CLL), acute lymphoblastic leukemia subtype B (B-ALL), acute myeloid leukemia (AML) and chronic myeloid leukemia (CML). Flow cytometry analyses show that lymphocytes from B-CLL patients express this receptor at similar levels to healthy individuals. On the other hand, it was observed a significant increase in PAR-1 expression in B-ALL lymphocytes as compared to B-CLL and healthy donors. Flow cytometric and real-time PCR demonstrated a significant increase in PAR-1 expression in granulocytes from CML patients in blast phase (CML-BP) but not in chronic phase (CML-CP) as compared to healthy donors. Finally, a significant increase in PAR-1 expression has been also observed in blasts from AML (subtypes M4 and M5) patients, as compared to monocytes or granulocytes from healthy donors. We conclude that PAR-1 might play an important biological role in aggressive leukemias and might offer additional strategies for the development of new therapies.     

慢性粒细胞白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓细胞中Wilms瘤抑癌基因（WT1）的表达水平及其临床意义。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用Light Cycler PCR仪检测了46例（109份骨髓细胞cDNA标本）CML患者和23例非白血病患者骨髓细胞中WT1及内参β胆色原脱氢酶（GAPDH）的表达水平,以WT1N=（WT1拷贝数／GAPDH拷贝数）×10^4计算WT1表达水平。结果23份CML加速期与22份CML急变期患者骨髓细胞中WT1N的中位表达水平分别为103．71和129．44,明显高于64份CML慢性期和对照组（分别为3．44和1．47,P〈0．01）,对照组与CML慢性期之间WT1基因表达差异无统计学意义;CML加速期与急变期之间WT1基因表达差异也无统计学意义（P〈0．05）。WT1基因表达水平与BCR／ABL融合基因表达水平具有一定的相关性。对其中7例CML患者行异基因骨髓移植前后动态检测WT1上升可提示白血病复发。结论CML患者加速急变期骨髓细胞中WT1基因表达升高,具有参考意义。     

急性和慢性白血病survivin基因的表达及临床意义

目的探讨survivin基因在白血病中的表达及对成人急性白血病(AL)患者的预后意义。方法应用RT-PCR检测105例AL和21例慢性粒细胞白血病(CML)患者survivin mRNA的表达水平,15例健康人为正常对照,K562、NIM、Kg-1α、HL-60细胞株为阳性对照。流式细胞术检测AL患者细胞周期分布,分析survivin基因表达与细胞增殖的关系。结果survivin在初治AL中的表达(0.525±0.460)较正常对照组(0.101±0.187)明显升高,治疗缓解后survivin的表达(0.280±0.095)下降,复发时表达水平(0.935±0.343)又复升高;在CML慢性期患者,survivin mRNA表达水平(0.279±0.112)与正常对照无明显差异,而在急变期的患者表达水平(0.653±0.236)明显升高;AL患者中survivin基因高表达组的增殖指数(PI=9.682)较正常表达组的增殖指数(PI=6.899)高,且差异有统计学意义(P＜0.05);在初治AL患者中,survivin表达阳性的患者缓解率低于表达阴性的患者。结论survivin有促增殖、促分裂作用。survivin基因表达的紊乱可能在AL的发病中起着重要作用,并且与AL复发和预后因素密切相关。survivin表达水平的升高是CML患者急变的高危因素。     

Cyclosporine inhibition of P-glycoprotein in chronic myeloid leukemia blast phase

Chronic myeloid leukemia blast phase (CML-BP) cells commonly express the multidrug transporter, P-glycoprotein (Pgp). To determine whether Pgp inhibition improves treatment outcome in CML-BP, the Southwest Oncology Group performed a randomized, controlled trial testing the benefit of the Pgp modulator, cyclosporin A (CsA). Seventy-three eligible patients were assigned to treatment with cytarabine and infusional daunorubicin with or without intravenous CsA. Treatment with CsA yielded no improvement in treatment outcome as measured by the frequency of induction resistance (68% vs 53%), rate of complete remission or restored chronic phase (CR/CP, 8% vs 30%), and survival (3 vs 5 months). Blast expression of Pgp (63%) and LRP (71%) was common, whereas only Pgp adversely impacted the rate of CR/CP (P =.025). We conclude that Pgp has prognostic relevance in CML-BP but that the modulation of Pgp function with CsA as applied in this trial is ineffective.     

Treatment of chronic myeloid leukemia in the blastic phase with fludarabine, cytosine arabinoside and G-CSF (FLAG)

The present study was undertaken to evaluate the efficacy of the association of fludarabine plus Ara-C and G-CSF (FLAG) in the treatment of 15 patients with chronic myeloid leukemia in the blastic phase (CML-BP). Patients achieving a partial remission (PR) after the first course received a second FLAG. Complete remission (CR) was consolidated with another FLAG regimen. Patients were then submitted to an individualized program of treatment depending on age and suitable donors. Overall seven patients achieved CR (46.7%), three (20%) showed a primary resistant disease, while three (20%) died during remission induction therapy. Five of them received a consolidation therapy; in two cases further treatment was not performed because of severe toxicity. Median overall survival and disease-free survival were of 7.5 and 4.5 months, respectively. FLAG proved to be effective in achieving a high CR rate in patients with CML-BP. Median overall survival and disease-free survival were not significantly improved compared to previous studies. Nevertheless, the treatment was well tolerated even in a group of heavily pretreated patients, allowing further transplantation opportunities in younger patients.