p16基因启动子甲基化与乳腺癌临床病理特征的关系

目的探讨p16基因在乳腺癌组织中的表达及其启动子区域甲基化情况,并分析p16基因启动子甲基化与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP方法和甲基化PCR(MSP)方法检测47例乳腺癌和20例乳腺增生组织p16蛋白表达及其启动子甲基化情况。结果乳腺癌组织p16蛋白阳性表达率低于乳腺增生组织(48.9%vs.70.0%),启动子甲基化率高于乳腺增生组织(38.3%vs.20.0%),但差异均无统计学意义(P>0.05);p16基因表达下降与其高甲基化呈负相关(r=-0.33,P=0.02);p16基因启动子甲基化与年龄、肿瘤直径、临床分期、雌激素受体(ER)以及孕激素受体(PR)无关(P>0.05),而与组织分级、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论p16基因启动子甲基化诱导p16蛋白低表达在乳腺癌早期发生过程中作用有限,但在乳腺癌发展过程中发挥作用。     

乳腺癌雌激素受体α基因启动子甲基化与其蛋白表达的关系

目的：检测乳腺癌雌激素受体α（estrogen receptor α,ERα）基因启动子区CpG岛甲基化状态,探讨乳腺癌ERα启动子甲基化与其蛋白表达及临床病理的关系。方法：采用免疫组化EnVisionTM二步法检测20例正常乳腺组织、44例乳腺癌组织ERα基因的表达,同时运用甲基化特异性PCR（Methylation-Specific PCR,MSP）及测序法分别检测ERα基因启动子A区和B区CpG岛的甲基化状态。结果：32例ERα阳性乳腺癌组织中,ERα启动子A区、B区甲基化率分别为28.2%和18.8%。12例ERα阴性乳腺癌组织中,ERα启动子A区、B区甲基化率分别为66.7%和58.3%。ERα阳性乳腺癌组、ERα阴性乳腺癌组、乳腺癌组的ERα启动子A、B区甲基化率均较正常组显著增高（P〈0.05）;ERα阴性乳腺癌组的ERα启动子A、B区甲基化率较ERα阳性乳腺癌组均显著增高（P〈0.05）。乳腺癌组织ERα表达与启动子区甲基化之间呈显著负相关。结论：乳腺癌组织ERα基因表达沉默与其启动子A区、B区CpG岛甲基化相关,后者有可能成为乳腺癌预后不良的分子检测指标。     

RUNX3基因启动子甲基化与乳腺癌临床病理特征及预后因素的关系

目的 探讨乳腺癌中抑癌基因RUNX3启动子甲基化状态与散发性乳腺浸润性导管癌临床病理特征及预后因素的关系.方法 运用甲基化特异性PCR(MSP)检测40例乳腺浸润性导管癌和15例乳腺增生病标本中RUNX3基因启动子甲基化状态,同时采用免疫组化SP法检测40例乳腺浸润性导管癌标本中ER、PR、C-erbB-2的表达水平.结果 乳腺浸润性导管癌组织中RUNX3基因启动子甲基化频率为47.5%,乳腺增生病组织中均未发生甲基化;RUNX3基因启动子甲基化与患者的年龄、淋巴结转移、PR、C-erbB-2阳性表达无相关性,与患者的病理组织学分级、临床分期、ER的阳性表达有相关性,差异有统计学意义.结论 RUNX3基因甲基化在散发性乳腺浸润性导管癌恶性进展中有一定作用,有可能成为乳腺癌预后不良的分子检测指标.     

乳腺癌中RUNX3基因启动子区甲基化及基因表达研究

目的 通过检测乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响,探讨RUNX3在乳腺癌发生、发展中的意义.方法 运用甲基化特异性PCR(MSP)检测40例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变标本中RUNX3基因启动子甲基化状态,同时采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测该基因的表达情况.结果 乳腺癌组织中RUNX3基因的甲基化率为47.5%,明显高于乳腺良性病变组织的甲基化率,其差异具有显著性(P<0.05);同时乳腺癌组织中RUNX3基因表达缺失率为40%,明显高于乳腺良性病变,其差异也具有显著性(P<0.05).乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化水平与患者的病理组织学分级有相关性,差异有统计学意义(P<0.05),与患者的年龄、淋巴结转移无相关性.RUNX3基因表达与患者的临床病理特征均无相关性.结论 RUNX3基因启动子的高甲基化可能是乳腺癌中一类重要的分子改变,也是导致RUNX3基因表达下降的原因之一,并参与了肿瘤的演进.     

乳腺癌p16基因甲基化及与蛋白表达的关系

目的:探讨散发性乳腺癌中p16基因异常甲基化状况及其与蛋白表达的关系,进而研究散发性乳腺癌中p16基因异常的表遗传学作用。方法:用甲基化特异PCR(MSP)和SP法研究68例乳腺癌组织及相应癌旁正常组织中p16基因启动子甲基化状况及蛋白表达情况。结果:p16基因在68例散发性乳腺癌组织中的甲基化率为29%,且其甲基化与肿瘤组织分型、患者居住地及淋巴结转移相关(P<0.05),而与肿瘤患者绝经与否及组织分级无关(P>0.05);P16蛋白在所有肿瘤标本中的表达下降率为51%,在相应癌旁组织中均呈阳性表达,二者有显著性差异(P<0.05),P16蛋白表达下降与肿瘤患者淋巴结转移及患者居住地明显相关(P<0.05),与患者绝经、组织分级和分型无关(P>0.05);在20例p16甲基化的癌组织标本中,P16蛋白表达下降率(95%),显著高于48例未发生甲基化的乳腺癌标本下降率(33%),两者有显著性差异(P<0.05),乳腺癌患者组织p16基因甲基化检出率与P16蛋白表达下降率具有良好的一致性(Kappa=0.506),而p16未发生甲基化的正常乳腺组织和乳腺良性病变组织其蛋白均呈阳性表达。结论:在散发性乳腺癌中p16启动子甲基化改变会明显降低P16蛋白表达,p16基因启动子甲基化是其蛋白表达下降的重要原因,这种机制更倾向于农村乳腺癌患者。     

XIAP基因在乳腺癌发生及发展过程中的表达及意义

目的：探讨XIAP基因在乳腺癌发生和发展中的作用。 方法：采用免疫组化S-P法检测正常乳腺组织(96例）、乳腺囊性增生组织(56例）、乳腺不典型增生组织(12例）及乳腺癌组织(119例）中XIAP蛋白的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果：XIAP蛋白在正常乳腺组织、乳腺囊性增生组织、乳腺不典型增生组织及癌组织中的阳性率分别为4.2%(4/96)、5.4%(3/56)、42.7%(5/12)和72.2%(86/11 9),后两者的阳性表达率明显高于前两者(P<0.005);浸润性非特殊型乳腺癌XIAP蛋白阳性率(82.0%,73/89)明显高于浸润性特殊型乳腺癌(45.4%,10/22）和早期浸润性乳腺癌(37.5%,3/8)(P<0.05);XIAP蛋白表达在有淋巴结转移的乳腺癌中有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。 结论：XIAP蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段呈不同程度的表达,过度表达提示预后不良。     

乳腺肿瘤与β-连环素及其复合体的相关性

目的探讨β连环素(β-cat)及其与E钙粘附素(E-cad)的复合体在乳腺肿瘤中的表达及意义。方法采用超敏感SP免疫组化方法,检测83例乳腺肿瘤中β-cat、E-cad的表达。结果同正常乳腺组织阳性表达率80%相比,乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌组中β-cat阳性表达率分别为26.3%、29.3%,且与正常乳腺组织差别均有统计学意义(P<0.01),但后两组之间相比差别不显著。E-cad在正常乳腺组织阳性表达率为90%,而在乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌组中分别为57.9%、20.7%,但仅乳腺癌组与正常乳腺组织差别有统计学意义(P<0.01)。同时发现,乳腺中重度不典型增生组与乳腺癌组中的Ecad阳性表达率差别亦有统计学意义(P<0.05),而Ecad的表达与乳腺癌淋巴结转移的关系不明显。结论β-cat可以作为乳腺疾病向恶性转变过程中的一个监测指标,E-cad在由乳腺不典型增生转变为乳腺癌的过程中起一定的作用。     

乳腺癌组织中神经营养因子Neuritin的表达及其临床意义

目的：观察神经营养因子Neuritin蛋白和mRNA在人乳腺癌组织中的表达及其
与临床病理特征的关系,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法： 收集74例乳腺癌组织
标本和12例正常乳腺组织标本,采用免疫组织化学和Western blotting法检测标本中Neuri
tin蛋白的阳性表达率和表达水平,利用RT-PCR法检测标本中Neuritin mRNA的表达水平。结
果：Neuritin蛋白在正常乳腺组织中阳性表达率为25%,在乳腺癌组织中阳性表达率为70.62%,
乳腺癌组织中Neuritin蛋白阳性表达率高于正常乳腺组织(P<0.05),且其在乳腺癌肿瘤细胞中定位于细胞核和细胞质。Neuritin蛋白的阳性表达率与乳腺癌淋巴
结转移、TNM分期和ER/PR/HER2高阳性率有关联(P<0.05)。与正常乳腺组织比较,Ⅰ-Ⅱ
期及Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01);与Ⅰ
-Ⅱ期乳腺癌组织比较,Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平亦升高(P<0.05)。结
论：Neuritin可能是促进乳腺癌发生发展的一个重要基因,也可能是治疗乳腺癌的关键靶向分子。
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肿瘤相关糖抗原sTn在乳腺肿瘤组织的表达

目的：研究乳腺肿瘤病理标本中肿瘤相关糖抗原sTn的表达及乳腺癌组织中sTn表达与肿瘤大小、患者年龄、绝经、腋窝淋巴结转移、临床分期、病理分级和雌激素受体的关系。方法：应用单克隆抗体TKH-2（McAb TKH-2）用免疫组化方法检测sTn在46例乳腺癌、4例乳腺腺瘤和2例男性乳腺增生中的表达。应用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色法（S-P法）检测46例乳腺癌雌激素受体（ER）水平。结果：乳腺腺瘤和男性乳腺增生患者sTn表达均呈阴性。46例乳腺癌患者中,28例sTn表达阳性（60.9%）。乳腺癌患者中sTn表达阳性频数有腋窝淋巴结转移者高于无腋窝淋巴结转移者（P<0.05 ）,临床分期较晚患者高于临床分期较早患者（P<0.05 ）,雌激素受体阳性者高于雌激素受体阴性者（P<0.05）。在病理分级、年龄、是否绝经、肿瘤直径大小患者中的sTn表达阳性频数分布差异无显著性（P>0.05 ）。46例乳腺癌患者中,25例雌激素受体阳性（54.3%）。结论：乳腺癌中sTn表达阳性患者易发生在腋窝淋巴结转移、临床分期较晚且雌激素受体阳性率升高患者,sTn可以作为判定乳腺癌预后的指标,sTn和雌激素受体联合检测对判断乳腺癌预后意义更大。     

The significance of mRNA expression and methylation of SFRP1 promoter in invasive breast cancer

目的 探讨浸润性乳腺癌及相应癌旁乳腺组织中分泌型卷曲相关蛋白1(the secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)基因的表达及其启动子CpG岛的异常甲基化状态,并分析其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR技术及甲基化聚合酶链反应(MSP)技术检测58例浸润性乳腺癌组织和相应癌旁乳腺组织中SFRP1基因的mRNA表达及其启动子CpG岛的异常甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的关系.结果 浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于癌旁乳腺组织组(P<0.05);腋窝淋巴结有转移的浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于腋窝淋巴结无转移组(P<0.05),而与其他临床病理参数无关.SFRP1在浸润性乳腺癌组的mRNA表达量与乳腺癌旁组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在23例SFRP1基因启动子CpG岛发生异常甲基化的浸润性乳腺癌组,均未检测到SFRP1的mRNA表达.结论 SFRP1基因异常甲基化可能影响其 mRNA的转录水平;SFRP1基因启动子的甲基化与浸润性乳腺癌的发生发展有关,对其进行检测有可能为浸润性乳腺癌的早期诊断和判断预后提供帮助.     

乳腺浸润性导管癌患者中Fhit基因的表达及其与雌、孕激素受体表达的相关性

目的:探讨乳腺浸润性导管癌组织中Fhit基因表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的关系。方法:采用免疫组化SP法检测128例乳腺浸润性导管癌及50例良性增生病变标本中Fhit基因及128例乳腺浸润性导管癌ER、PR的表达情况。结果:Fhit基因在乳腺浸润性导管癌病例中阳性表达率为27.34%(35/128),明显低于其在乳腺腺病中的阳性表达率70.00%(35/50)。差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌组织中,Fhit蛋白表达与组织学分级、腋窝淋巴结的转移的差异有统计学意义(P<0.05),与绝经情况、肿瘤长径、TNM分期差异无统计学意义(P>0.05)。通过相关性分析得出Fhit蛋白表达与ER及PR表达相关(P<0.05)。结论:联合检测乳腺癌组织ER、PR和Fhit蛋白的表达对于乳腺癌诊断、肿瘤恶性程度判定及预后有意义。     

结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化对其表达 水平的影响及其临床意义

目的:研究结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响,分析其与结直肠癌临床病理特性的关系及临床意义。方法:收集126例结直肠癌组织及其癌旁正常结直肠组织,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Kiss-1基因启动子区甲基化状态,采用实时荧光定量 PCR和Western blotting法检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中Kiss-1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果：结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率（83.33%）高于癌旁正常结直肠组织（30.16%）（P<0.05）。结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平均低于Kiss-1基因启动子甲基化阴性组（P<0.05）。结直肠癌组织中T3+T4组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于T1+T2组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平低于T1+T2组（P<0.05）;
中和低分化组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于高分化组（P<0.05）,Kiss-1基因mRNA表达水平低于高分化组（P<0.05）;淋巴结转移组甲基化阳性率高于无淋巴结转移组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无淋巴结转移组（P<0.05）;远处转移组Kiss-1基因启
动子甲基化阳性率显著高于无远处转移组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无转移组（P<0.05）。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小无明显关联（P>0.05）。结论：结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达
水平及结直肠癌的恶性转化特性（特别是转移）有关联,Kiss-1基因甲基化状态有望成为评估结直肠癌转移风险的重要指标。     

侵袭性乳腺癌ASPH基因表达与启动子甲基化的临床意义

目的 探讨侵袭性癌（IBC）癌组织中天冬氨酰-β-羟化酶基因(ASPH) mRNA的表达和基因启动子区域甲基化与临床病理参数的关系。方法 收集91例IBC患者癌组织与配对的癌旁正常组织（MNT）,使用逆转录实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测ASPH基因mRNA在组织中的表达,使用甲基化特异性PCR（ＭＳＰ）法检测ASPH基因启动子区CpG 岛甲基化状态,进一步分别分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。结果 在IBC中ASPH mRNA的表达量高于MNT（P<0.001）,ASPH mRNA的表达与乳腺癌中的标志物E-cadherin阳性表达有关（r=0.195,P=0.041）。ASPH基因在癌组织与MNT中的启动子甲基化阳性率分别为47.3%（43/91）和89.0%（81/91）,差异有统计学意义（P<0.05)。基因启动子甲基化率与E-cadherin和肿瘤大小相关（P<0.05）。结论 ASPH基因的表达及启动子甲基化率可能参与了乳腺癌的发生发展。     

分化型甲状腺癌组织中脆性组氨酸三联体基因启动子甲基化及与其蛋白表达的相关性

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因启动子甲基化状态及其与蛋白表达的关系.方法:采用PCR-based酶切甲基化及免疫组织化学SP技术,检测65例DTC及其相对应的甲状腺切缘非癌组织中FHIT基因启动子甲基化状态及其蛋白表达.结果:在非癌组织中,无一例出现FHIT基因启动子甲基化,而在DTC组织中有24.6%(16/65)出现甲基化,且甲基化状态与DTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05);非癌组织和DTC组织中FHIT蛋白阳性表达率分别为100%(65/65)和41.5%(27/65)(P<0.05).病理分级为Ⅰ和Ⅱ级的DTC组织中FHIT蛋白阳性表达率分别为53.5%和18.2%,淋巴结转移阳性和阴性组分别为15.4%和59.0%,以上2组比较差异均有统计学意义(P<0.05);FHIT基因启动子甲基化与蛋白表达有关(P<0.05).结论:FHIT基因启动子甲基化是其基因失活的重要机制之一,其在DTC的发生、发展中起重要作用.     

RASSFIA基因启动子甲基化与乳腺癌相关性研究

目的:研究抑癌基因RASSF1A在乳癌组织中的表达情况及与RASSF1A基因启动子甲基化的关系。方法:运用RT-PCR方法检测40例乳癌组织和6例乳腺良性肿瘤和5例正常乳腺组织中RASSF1A的表达,运用甲基化特异PCR方法检测这些组织中RASSF1A基因启动子的甲基化情况。结果:RASSF1A基因在40例乳腺癌组织中8例(20%)存在表达缺失,差异无统计学意义(P>0.05)。但其表达量明显低于正常乳腺组织(P<0.05)。乳腺癌组织的RASSF1A基因启动子甲基化频率(65%)明显高于正常乳腺组织(20%)和乳腺良性肿瘤(17%)(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中RASSF1A基因启动子的高甲基化是引起RASSF1A基因表达下调的重要原因,在肿瘤的发生和发展中起重要的调控作用。     

胃癌中E-cad的表达及启动子甲基化的临床意义

目的探讨E-cad（上皮型钙黏素）在胃癌和癌旁组织中的表达及其启动子甲基化状态与胃癌发生、发展、转移和预后等生物学特性的关系。方法应用免疫组织化学SP法和MSP（甲基化特异PCR法）,检测38例癌旁组织和72例胃癌组织中E-cad的表达情况及其启动子甲基化状态。结果癌旁组织均表达E-cad,而胃癌组织E-cad阴性表达率为63.89%（46/72）,其表达缺失与胃癌的分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度密切相关（P〈0.05）。在癌旁组织中无E-cad启动子甲基化,而胃癌组织E-cad启动子甲基化发生率为56.94%（41/72）。随着肿瘤的去分化,临床分期增高,肿瘤浸润深度增加和淋巴转移E-cad启动子甲基化率逐渐增加（P〈0.05）。结论E-cad表达缺失和启动子甲基化与胃癌的发生、发展及预后密切相关,启动子甲基化是E-cad表达缺失的重要原因。     

乳腺导管内增生性病变及乳腺浸润性导管癌中TRβ1基因甲基化的研究

目的：了解乳腺浸润性导管癌及乳腺导管增生性病变组织甲状腺素受体β1（thyroid hormone receptor β1,TRβ1）基因启动子区甲基化状态,探讨其与乳腺癌发生的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（methylation-specific polymerase chain reaction,MSP）技术,研究40例乳腺浸润性导管癌（infiltrating ductal carcinoma,IDC）、12例普通型导管增生（usual ductal hyperplasia,UDH）、8例乳腺不典型性导管增生（atpical ductal hyperplasia,ADH）,24例导管原位癌（duetal carcinoma in situ,DCIS）组织及10例健康成人女性乳腺组织中TRβ1基因启动子区甲基化状态。结果：正常乳腺组织、UDH、ADH、DCIS和IDC中,TRβ1基因甲基化率分别为0.0%（0/10）、16.7%（2/12）、37.5%（3/8）、62.5%（15/24）和80.0%（32/40）,正常组织TRβ1基因甲基化率与DCIS和IDC相比差异有统计学意义（P正常组对DCIS=0.001,P正常组对IDC=0.000）;UDH与DCIS相比,差异无统计学意义（P=0.009）;UDH与IDC相比差异有统计学意义（P=0.000）。结论：TRβ1基因启动子区CpG岛甲基化是乳腺癌发生过程中的早期事件,可能在乳腺癌发生和乳腺增生病癌变过程中起重要生物学作用。     

BRCA1基因在散发性乳腺癌中的表达及异常甲基化

目的：通过检测乳腺癌易感基因1（BRCA1）基因在散发性乳腺癌中的表达情况及其启动子甲基化状态,探讨BRCA1基因与散发性乳腺癌的关系。方法应用实时荧光定量PCR的方法和免疫组织化学方法分别检测BRCA1 mRNA和蛋白在60例散发性乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织及30例乳腺良性病变组织中的表达情况;应用重亚硫酸盐测序PCR（BPS）联合TA克隆测序方法检测上述组织中BRCA1启动子CpG岛的甲基化状态,分析BRCA1基因表达和启动子甲基化相关性。结果BRCA1 mRNA和蛋白在散发性乳腺癌组织中的相对表达水平分别低于癌旁正常组织及乳腺良性病变组织,差异有统计学意义（P＜0．001）。乳腺癌组织中BRCA1蛋白的表达率为51．7％（31／60）,明显低于癌旁正常乳腺组织的71．7％（43／60）及乳腺良性病变组织的66．7％（20／30）,差异有统计学意义（P＜0．001）;散发性乳腺癌组织中BRCA1启动子甲基化率为31．7％（19／60）,癌旁正常乳腺组织及乳腺良性病变组织均未检测出甲基化,差异有统计学意义（P＝0．000）;BRCA1蛋白表达与其启动子甲基化呈负相关（r＝－0．345,P＝0．007）。结论乳腺癌易感基因BRCA1启动子区CpG岛甲基化导致BRCA1基因表达显著下调,可能参与散发性乳腺癌的发生、发展。     

脑胶质瘤MGMT基因启动子甲基化与蛋白表达的研究

目的 探讨脑胶质瘤中MGMT基因启动子甲基化与MGMT蛋白表达的相关性及MGMT基因变异与脑胶质瘤临床病理学特征的关系.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测49例脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子甲基化情况,免疫组织化学法检测脑胶质瘤MGMT蛋白表达情况. 结果 49例脑胶质瘤组织中,MGMT基因启动子甲基化阳性率为53.06%(26/49);脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子区甲基化阳性率在脑胶质瘤WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级中分别为45.45%、50.0%和72.72%,三者间比较差异无统计学意义(P=0.32);在不同性别、年龄之间MGMT基因启动子甲基化阳性率差异也无统计学意义(P>0.05).MGMT蛋白表达阳性率为55.10%(27/49),其中29.62%(8/27)MGMT基因启动子甲基化为阳性;而22例MGMT蛋白表达阴性的组织中,81.81%MGMT基因启动子甲基化阳性(18/22).MGMT蛋白表达与其基因启动子甲基化呈负相关(r=-0.520,P<0.05 ),不同性别、年龄及病理学分级之间MGMT蛋白表达率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MGMT基因启动子区甲基化可能是MGMT蛋白失活的重要原因之一,检测组织中MGMT 基因启动子的异常甲基化可以作为肿瘤早期诊断的一项指标;MSP是检测MGMT基因启动子区甲基化灵敏和可靠的方法.     

Cx43基因启动子甲基化下调乳腺癌Cx43的表达

目的：探讨乳腺癌细胞中Cx43蛋白的表达与基因启动子甲基化的关系。方法：免疫组化检测乳腺标本中Cx43蛋白的表达,甲基化PCR检测Cx43启动子甲基化的频度。5-氮杂脱氧胞苷培养乳腺癌MD-MBA-231细胞后,RT-PCR乳腺癌细胞中Cx43 mRNA,免疫组化、Western Blot检测Cx43蛋白表达,甲基化PCR检测启动子甲基化的变化。结果：与正常乳腺组织相比,乳腺癌中Cx43蛋白的表达下调,启动子甲基化频度高。在应用5-Aza-dC处理前,MD-MBA-231 Cx43基因呈甲基化状态,经4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48h后,乳腺癌细胞Cx43基因甲基化逆转,Cx43基因mRNA及蛋白表达增加。结论：Cx43在乳腺癌组织中表达下调可能与启动子甲基化有关。5-Aza-dC能逆转乳腺癌细胞MD-MBA-231的Cx43基因异常甲基化,促进Cx43基因的再表达。