丁酸钠对重度烫伤大鼠心脏保护作用的研究

目的:探讨丁酸钠对重度烫伤大鼠心脏的保护作用.方法:雄性SD大鼠48只,随机分为假烫组、烫伤组和丁酸钠组(n=16).烫伤组和丁酸钠组采用沸水水浴法制作50％TBSA Ⅲ度烫伤动物模型,并于制模完成后即刻皮下分别注射丁酸钠400 mg/kg(丁酸钠组)或等体积生理盐水(烫伤组).假烫组以37℃水代替沸水.各组动物于烫伤后2.5 h和5.5 h从尾静脉注射异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖蓝2.5 mg.伤后3h和6h,每组各取8只动物经腹主动脉穿刺取血,测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;同时取心肌组织标本,测定葡聚糖蓝含量,以反映心脏微血管通透性的变化,干/湿重法测定心肌组织含水率.结果:与假烫组相比,烫伤组大鼠伤后3h和6h,血浆CK-MB水平明显升高(P＜0.05);心脏微血管通透性和心肌组织含水率明显增加(P均＜0.05).丁酸钠组大鼠在烫伤后3h和6h,血浆CK-MB水平、心脏微血管通透性和心肌组织含水率虽然高于假烫组,但较烫伤组均明显降低(P均＜ 0.05).结论:丁酸钠能够降低大鼠心肌微血管通透性和组织含水率,对于严重烫伤引起的心肌损害有显著保护作用.     

卡巴胆碱改善重度烫伤大鼠胃血流量和胃排空功能的初步研究

目的:探讨不同剂量卡巴胆碱对烫伤大鼠胃血流量和胃排空功能的影响.方法:40只Wistar雄性大鼠,随机分为假烫组(n=5)、单烫组(n=5)和口服卡巴胆碱组(n=30),后者又根据卡巴胆碱剂量不同分为20、40、60、80、100、120 μg/kg组(每组5只).假烫组大鼠均给予0.1%酚红溶液1.5 ml灌胃.单烫组和口服卡巴胆碱组大鼠均经30%TBSAⅢ度烫伤后立即给予0.1%酚红溶液1.5 ml灌胃,口服卡巴胆碱组于伤后0.5 h给予相应剂量卡巴胆碱 1 ml生理盐水灌胃.大鼠均于伤后2 h处死,观察不同剂量卡巴胆碱对大鼠胃血流量及胃排空率的影响.结果:烫伤后大鼠胃排空率为(29.50±13.42)%,明显低于假烫组(92.19±5.24)%,P＜0.01.伤后2 h胃血流量从伤前的(476.00±71.24)U降低到(103.60±51.28)U,P＜0.01.烫伤后给予不同剂量卡巴胆碱均能增加胃排空率和胃血流量,但以60 μg/kg最为显著(P＜0.01).结论:卡巴胆碱对烧伤休克大鼠胃血流量和胃排空有显著促进作用,最佳剂量为60μg/kg.     

伏立诺他对50% TBSA Ⅲ度烫伤大鼠脏器功能及血流量的影响

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(SAHA)对50%TBSAⅢ度烫伤大鼠器官功能及脏器血流量的影响。方法:雄性SD大鼠48只,体重240~260g,随机分为3组:1单烫组,于100℃水浴中背部浸泡15s、腹部浸泡8s,烫伤后,立即腹腔内注射0.25ml生理盐水;2SAHA组,烫伤后立即腹腔内注射0.25ml SAHA注射液(7.5mg/kg,溶于4ml生理盐水中);3假烫组,37℃水浴浸泡后腹腔内注射0.25ml生理盐水。于伤后3h和6h采用多普勒血流仪测定肝、肾及小肠黏膜血流量,取腹主动脉血检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)含量、肌酐(Cr)含量、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、神经特异性烯醇化酶(NSE)含量和二胺氧化酶(DAO)活性。结果:伤后3h,SAHA组肝、肾和小肠黏膜血流量显著高于单烫组(P均<0.05);SAHA组6h小肠黏膜血流量也显著高于单烫组(P<0.05)。SAHA组伤后3hCr、NSE含量和DAO活性显著低于单烫组(P均<0.05),伤后6hCK-MB、NSE含量和DAO活性均显著低于单烫组(P均<0.05)。结论:SAHA能改善50%TBSAⅢ度烫伤大鼠器官功能指标以及腹腔脏器血流量,保护重要脏器功能。     

卡巴胆碱对烫伤休克大鼠肺血管通透性影响的初步研究

目的:研究烫伤休克大鼠液体复苏时给予卡巴胆碱对肺血管通透性和含水量的影响.方法:78只Wistar大鼠随机分为3组:烫伤组(n=36),卡巴胆碱治疗组(n=36)和正常组(n=6).采用30%TBSA Ⅲ度烫伤模型,应用改良伊文思蓝渗出法测定伤前及伤后4、8和12 h(n=6)肺组织血管通透性及肺含水量的变化.结果:伤后4 h卡巴胆碱治疗组伊文思蓝含量为(45.11±4.19)μg/g,较烫伤组(75.18±3.80)μg/g明显降低(P＜0.01),而与正常组(42.51±5.07)μg/g比较无统计学差异;伤后4 h、8 h卡巴胆碱治疗组的肺含水量显著低于烫伤组[(76.03±1.70)%比(78.46±1.42)%,(76.57±1.27)%比(80.15±1.84)%,P＜0.05和P＜0.01];伤后12 h肺组织血管通透性及含水量与烫伤组比较均无统计学差异.结论:卡巴胆碱能降低烧伤早期肺血管通透性及含水量增加,有助于烧伤休克早期的治疗.     

依那普利拉减轻大鼠烧伤早期脏器损害的研究

目的 探讨依那普利拉对烧伤早期内脏损害保护作用的量效关系.方法 随机将54只SD大鼠分为烫伤组(B组)和烫伤后小剂量、中剂量和大剂量依那普利拉治疗组(E1、E2、E3组),每组12只大鼠,另取6只大鼠不致伤作为正常对照组.检测烫伤前及伤后6 h和12 h动脉血压、血管紧张素Ⅱ、尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)和肌酸激酶(CK)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),以及主要脏器组织病理变化.结果 B组血管紧张素Ⅱ明显升高,治疗组均明显低于B组(P均＜0.05),E2和E3组明显低于E1组;B组大鼠CK、Bun、Cr、ALT、AST均显著高于正常参考值(P均＜0.05),治疗组较B组不同程度降低,E1组下降明显(P＜0.05),各时相点基本与正常值接近;E2和E3组下降不明显,明显高于E1组;烫伤后各组动脉收缩压和舒张压均有不同程度下降,其中E2、E3组较E1组更明显,E1组较B组明显升高.结论 小剂量依那普利拉能够显著减轻严重烧伤后脏器损害的程度,但对动脉收缩压和舒张压无显著影响.     

乌司他丁对烫伤大鼠全身炎症、脏器微血管通透性和组织含水率的影响

目的：研究乌司他丁对50％总体表面积烫伤大鼠全身炎症、脏器微血管通透性和组织含水率的影响。方法：32只雄性SD大鼠随机分为烫伤组和乌司他丁组（n=16）,两组动物均造成50％总体表面积Ⅲ度烫伤。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水或乌司他丁40000U／kg。于烫伤后4h取血浆测定肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白和髓过氧化物酶,然后处死动物,采用伊文斯蓝法测定心、肝、肺、肾和小肠微血管通透性,干／湿重法测定组织含水率。结果：烫伤后4h乌司他丁组血浆C反应蛋白含量和髓过氧化物酶活性显著低于烫伤组（P均〈0．01）。乌司他丁组肺、肾和小肠组织伊文斯蓝含量和含水率均显著低于烫伤组（P〈O．05或P〈0．01）。结论：乌司他丁能抑制致死性烫伤休克大鼠血浆促炎症因子水平,减轻组织炎症反应,降低脏器微血管通透性和组织水肿,减少血管内液体丢失,可用于烧伤休克的早期药物治疗。     

胞壁酰二肽诱导烫伤大鼠脓毒症模型的建立

目的 建立胞壁酰二肽(MDP)诱发烫伤大鼠脓毒症模型.方法 选择SPF级健康雄性SD大鼠50只,体重200～250 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将其分为3组:对照组(C组,n=10)、烫伤组(S组,n=10),制备20%总体表面积Ⅲ度烫伤模型;MDP组(n=30),于烫伤后24h时经股静脉注射MDP 5 mg/kg.MDP组于注射MDP后1、6、24h时,S组于烫伤后24h时,C组于20℃水中假烫伤后24h时取腹主动脉血样,分别行血气分析、计数WBC和Plt、检测肝肾功能、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、血浆TNF-α、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-6、IL-10、高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)水平;取血样后处死大鼠,取心、肝、肺和肾组织行病理学检查,另取肺组织测定髓过氧化物酶(MPO)活性.另取雄性SD大鼠90只,按照上述方法分组处理后,记录72 h生存情况.结果 与C组比较,S组血浆IL-6、IL-10、IFN-γ和HMGB1水平、WBC计数、血清ALT、AST和BUN水平、肺组织MPO活性升高,生存率降低,MDP组血浆TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ和HMGB-1水平、血清ALT、AST、总胆红素、BUN、Cr和CK-MB水平、肺组织MPO活性、PaCO2升高,BE负值增加,WBC和Plt计数、pH值、PaO2和生存率降低(P＜0.05).与S组比较,MDP组血浆TNF-α、IL-6、IFN-γ和HMGB-1水平,血清ALT、AST、总胆红素、BUN、Cr、CK-MB水平、肺组织MPO活性和PaC02升高,BE负值增加,WBC和Plt计数、pH值、PaO2和生存率降低(P＜0.05).S组和MDP组心、肝、肺和肾组织病理学损伤明显,MDP组病理学损伤程度较重.结论 Ⅲ度烫伤后经MDP诱导可致大鼠广泛炎性反应并伴多器官功能损伤,成功建立烫伤后脓毒症模型.     

乌司他丁对烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1表达及CD4＋CD25＋调节性T细胞的影响

目的：研究乌司他丁对烫伤大鼠脾脏高迁移率族蛋白B1（HMGBl）的表达以及淋巴细胞免疫功能的影响。方法：96只Wistar大鼠随机分为假烫组、烫伤组和烫伤＋乌司他丁治疗组（n=32）。后两组大鼠制作30％TBSAⅢ度烫伤模型,伤后即刻腹腔注射林格液或乌司他丁＋林格液抗休克,创面涂碘伏抗炎。假烫组于37℃水浴中12S行假烫。各组分别于伤后1、3、5、7d腹主动脉无菌采血,并分离获取大鼠脾脏组织。Westernblot检测大鼠脾组织HMGBl的表达,流式细胞术检测血液中CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）的变化。结果：与假烫组比较,烫伤组大鼠脾组织HMGBl水平在伤后1～7d显著升高（P〈O．01）,伤后3d时表达量最高,分别为0．66±0．10、0．22±0．05（t=10．91,P〈0．01）;乌司他丁治疗后1～7dHMGB1水平有不同程度的降低,其中伤后5d表达量最低,分别为0．32±0．07、0．63±0．07（t=9．61,P〈0．01）。与假烫组比较,烫伤组CD4＋CD25＋Treg表达在伤后逐渐上升,伤后3d时达到峰值（5．42±0．56）％;乌司他丁治疗后,CD4＋CD25＋Treg于伤后3、5、7d显著低于烫伤组（P〈O．01）,伤后5d时最低（2．23±0．21）％。结论：严重烫伤后大鼠脾脏HMGB1水平的持续升高对其调节性T细胞的异常具有显著的影响;乌司他丁作为一种抗炎药物能够降低伤后HMGB1的表达,改善烫伤大鼠的免疫功能。     

高原严重烫伤大鼠延迟复苏肾组织细胞凋亡与c-fos蛋白表达的变化

目的：探讨高原不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肾脏组织c-fos蛋白的表达规律及其与肾组织细胞凋亡的关系.方法：雄性Wistar大鼠240只,分别在1517 m和3 848 m两个海拔高度进行实验,每个海拔高度的大鼠（n=120）均随机分为3组：①即时复苏组（IFR组,n=60）：伤后即刻腹腔注射等渗盐水4 ml/kg;②延迟复苏组（DFR组,n=50）：伤后6 h开始按4 ml/kg补液;③假伤组（n=10）：大鼠背部置于37 ℃水浴中20 s模拟烫伤,不补液.IFR组和DFR组大鼠将背部浸于90 ℃热水中20s建立30% TBSA Ⅲ度高原烫伤模型,分别于伤后1、6、12、24、72和168 h取肾组织,假伤组大鼠于模拟烫伤后1 h取肾组织,采用原位末端标记法（TUNEL）检测肾组织细胞的凋亡,计算凋亡指数;免疫组织化学染色与图像分析技术检测肾组织c-fos蛋白的表达.结果：肾组织细胞凋亡指数和c-fos蛋白表达水平在相同海拔高度DFR组和IFR组均高于假伤组,且DFR组均高于IFR组,高海拔地区高于低海拔地区（P〈0.001）;细胞凋亡指数与c-fos蛋白表达水平呈明显的正相关（r=0.968,P〈0.001）.结论：高原严重烫伤可导致 c-fos蛋白的表达增强,同时伴肾组织细胞凋亡加剧,延迟复苏较即时复苏加重细胞凋亡;c-fos蛋白的表达与高原严重烫伤大鼠肾组织细胞凋亡相关.     

电针足三里穴对大鼠烫伤早期胃和小肠黏膜血流量的影响

目的:研究电针刺激足三里穴对大鼠烫伤休克早期胃和小肠黏膜血流量的影响。方法:35只健康雄性Wistar大鼠随机分为7组:假烫组(C)、烫伤2 h组(S_2)、烫伤6h组(S_6)、烫伤 电针足三里穴2 h组(SE_2)、烫伤 电针足三里穴6h组(SE_6)、烫伤 电针非经非穴2h组(SSE_2)、烫伤 电针非经非穴6 h组(SSE_6),每组5只。烫伤组大鼠均造成背部35%TBSAⅢ度烫伤(100℃沸水,15s)。烫伤 电针组大鼠于烫伤后30 min开始电针刺激足三里穴或非经非穴(频率2～100 Hz,强度2～3 mA,时间1h)。假烫组于术后2 h、烫伤组于烫伤后2 h和6 h用激光多普勒血流仪测定胃和小肠黏膜血流量。结果:烫伤后大鼠胃和小肠黏膜血流量均较假烫组显著降低(P<0.01),电针刺激足三里穴各组大鼠胃和小肠黏膜血流量均显著回升,显著高于烫伤组和烫伤 电针非经非穴组(P<0.05)。结论:电针足三里穴能显著改善大鼠烫伤休克早期胃和小肠黏膜血流量。     

PNU282987对烧伤休克犬复苏时脂质过氧化损伤和组织含水率的影响

目的：研究α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）激动剂PNU282987对致死性烧伤休克犬脂质过氧化损伤和组织含水率的影响.方法：成年雄性Beagle犬12只,按完全随机数字表法分为烧伤补液组和烧伤PNU282987组,每组6只.采用凝固汽油燃烧法造成50%总体表面积Ⅲ度烧伤.于伤后0.5 h分别通过颈静脉补液,烧伤补液组给予林格液,烧伤PNU282987组给予等量含有PNU282987 （0.38 mg/kg）的林格液.补液量和速率均根据Parkland公式确定.于伤前和伤后2、4、8、12和24 h颈静脉取血,测定丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,并于伤后24 h处死动物,留取心、肝、脾、肺、肾和回肠组织,测定组织含水率.结果：两组犬伤后SOD水平显著降低;伤后4 h起烧伤PNU282987组SOD水平显著高于烧伤补液组（P＜0.05）,而单纯烧伤组SOD水平持续降低.两组犬伤后MDA水平均上升,伤后4h起烧伤PNU282987组血浆MDA水平均显著低于烧伤补液组（P＜0.05）.烧伤PNU282987组脏器含水率显著低于烧伤补液组[心：（68.6±1.1）% vs.（78.3±1.8）%;肝：（70.0±1.4）% vs.（ 79.8±0.7）%;脾：（67.2±1.2）% vs.（78.8±0.8）%;肺：（74.3±0.5）% vs.（ 80.2±1.6）%;肾：（71.2±0.8）% vs.（ 80.1±0.9）%;回肠：（68.9±1.1）% vs.（ 78.7±0.8）%],差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：PNU282987能抑制烧伤休克犬复苏时引起的脏器氧自由基生成,减轻组织水肿,具有潜在临床应用价值.     

延迟复苏对烫伤大鼠肠道淋巴细胞凋亡率的影响

目的：探讨延迟复苏对烫伤大鼠小肠Peyer氏结淋巴细胞（PPL）、固有层淋巴细胞（LPL）和上皮内淋巴细胞（IEL）凋亡率的影响。方法：Wistar大鼠30只,分为假伤对照组、立即复苏组（ER）和延迟复苏组（DR）。建立30%体表面积Ⅲ度烫伤合并延迟复苏模型。按Davies法分离、收集上述3种淋巴细胞,采用DNA片段百分率（ap%）反映其伤后细胞凋亡百分率变化。采用DNA凝胶电泳、TUNEL法和电镜观察3种淋巴细胞凋亡特征性改变。结果：两组PPL、LPL、IEL伤后ap%均显著高于伤前（P〈0.01）;伤后6h、12h,DR组PPLap%显著高于ER组（P〈0.05或P〈0.01）,其中LPL伤后12hap%高达56.26%。伤后12hDR组LPL、IELap%显著高于ER组（P〈0.01）。伤后6hLPL、IEL基因组DNA电泳均可见凋亡特征性梯形条带;伤后12hTUNEL法和电镜均观察到3种淋巴细胞典型的凋亡形态学改变。结论：烫伤延迟复苏后细胞凋亡是肠道淋巴细胞数量急剧减少的主要原因;可能是烫伤后肠道免疫功能抑制的重要机制之一。     

不同程度烫伤应激对大鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：探讨应激反应对大鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将大鼠乳腺癌细胞Walker-256癌细胞株注入Wistar幼鼠腹腔,5d后抽取腹水,浓缩,经Wistar大鼠腹股沟皮下接种,建立Wistar大鼠皮下移植瘤模型。选取24只荷瘤大鼠,随机分为实验对照组（未烫伤）、轻度烫伤组（10％TBSA,100℃水中烫伤5s）、重度烫伤组（15％TBSA,100℃水中烫伤10s）,每组8只。烫伤后12h尾静脉取血,ELISA法检测血自细胞介素-18（IL-113）水平,放射免疫法测定血清皮质醇水平;烫伤后1、7、13d测定皮下肿瘤体积,伤后13d进行肿瘤的病理学观察。结果：烫伤后大鼠血浆IL-1G水平较实验对照组[（5．01±2．51）pg／m1]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（155．78±18．30）pg／ml]较轻度烫伤组[（94．12±15．31）pg／m1]升高更加明显（P〈O．01）;烫伤后大鼠血清皮质醇水平也较实验对照组[（60．51±16．70）μg／L]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（115．78±17．42）μg／L]较轻度烫伤组[（87．19±13．28）μg／L]升高更加明显（P〈O．05）。烫伤后1d,各组间肿瘤体积差异无统计学意义（P〉0．05）;烫伤后7d和13d,对照组与轻度烫伤组肿瘤体积差异无显著性（P〉0．05）,重度烫伤组肿瘤体积明显大于实验对照组和轻度烫伤组（P〈0．05）。病理学观察显示,烫伤组肿瘤细胞密度均较实验对照组大;各组均有纤维组织增生和炎细胞浸润,尤以重度烫伤组为甚。结论：重度烫伤后应激反应促进肿瘤的生长。     

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer氏结中Bax表达与T细胞凋亡和增殖的关系

目的：探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率和促凋亡基因Bax与T细胞增殖的变化及意义。方法：Wistar大鼠132只,分别在1517m和3848m两个海拔高度随机分为延迟复苏组（DFR,n=30）、即时复苏组（IFR,n=30）和假伤组（SG,n=6）,建立30%TBSAⅢ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72h在回盲部向近心端10cm处切取回肠组织后,于肠壁上切取所有Peyer氏结,采用TUNEL、免疫组织化学染色与图像分析技术,观察回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率的变化、Bax和CD^3＋的表达。结果：各海拔高度DFR组凋亡率均高于IFR组,各复苏组伤后12h凋亡率最高;Bax的阳性表达位于Peyer氏结中淋巴细胞胞浆内,其表达强度各复苏组高于假伤组,随海拔高度上升Bax表达增强,高海拔组的表达强度高于低海拔组,各海拔高度DFR高于IFR组（P〈0.05）;CD^3＋的阳性表达部位位于Peyer氏结中T淋巴细胞胞膜,其表达强度各复苏组低于假伤组,随海拔高度上升CD^3＋表达减弱,伤后12h表达降至最低（P〈0.05）。结论：高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡率增加和T淋巴细胞数降低的重要原因之一。     

电针足三里穴对致死性失血性休克延迟补液大鼠生存率和脏器功能指标的影响

目的:研究电针足三里穴对致死性失血性休克延迟补液大鼠生存率和脏器功能指标的影响,探讨其对液体复苏疗法的替代作用.方法:36只SD雄性大鼠,体重(270±20)g,按全血容量的45%放血制成致死性失血性休克模型.随机分为3组:即刻补液组、非经非穴+延迟补液组和足三里+延迟补液组,每组12只.即刻补液组于失血后10 min...     

卡巴胆碱对脓毒症大鼠促炎症细胞因子所致心肌损伤的保护作用

目的：研究卡巴胆碱对脓毒症大鼠促炎症因子所致心肌损伤的保护作用。方法：雄性SD大鼠32只,采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型,随机分为CLP组、卡巴胆碱干预组（CAR组）,每组16只。CLP术后立即静脉注射CAR10μg／kg（CAR组）或等量生理盐水（CLP组）。各组大鼠于CLP术后6h和12h取血检测血浆肌酸激酶同工酶（CK—MB）活性;然后处死动物,取心肌组织,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、一氧化氮（NO）含量、髓过氧化物酶（MPO）活性以及组织含水率。结果：CLP术后6h和12h,CAR组血浆CK—MB水平显著低于CLP组（P〈0．05）,CAR组心肌组织TNF-α水平、N0含量和MPO活性显著低于CLP组（P〈0．05）。CAR组心肌组织含水率均低于CLP组[6h：（69．5±2．3）％vs．（74．3±2．6）％,P〈0．05;12h：（71．4±2．4）％vs．（76．7±2．1）％,P〈0．05]。结论：卡巴胆碱能显著抑制脓毒症大鼠心肌促炎症因子水平,减轻心肌组织水肿和功能损害。卡巴胆碱的抗炎和心肌保护作用机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。     

树突状细胞体内回输对烫伤小鼠过度炎症反应的调控作用

目的:观察树突状细胞(DCs)与调节性树突状细胞(CD11clowCD45RBhigh DCs)体内回输对烫伤所致腹腔炎症反应的影响.方法:采用15%体表面积Ⅲ度烫伤[(99.0±0.5℃)沸水中8 s]小鼠模型.伤后即刻腹腔注射林格液(1 ml/只)抗休克治疗(烫伤组,n=21)或者腹腔注射加入自小鼠脾脏分离纯化而得...