青藤碱对UUO小鼠肾组织间质纤维化与炎症因子表达的干预作用

目的：通过抗风湿药青藤碱对UUO小鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、炎症介质细胞间黏附分子（intercellular adhesion molecule1,ICAM-1）、单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein1,MCP-1）表达的影响,探讨其防治肾间质纤维化作用及其机制。方法：实验采用小鼠单侧输尿管结扎（UUO）模型,用不同剂量青藤碱进行干预,用血管紧张素受体抑制剂蒙诺作为对照。肾脏病理用HE和Masson染色;肾组织α-SMA表达采用免疫组化;ICAM-1蛋白质表达采用Western-blotting方法检测;MCP-1基因表达采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法。结果：UUO模型组小鼠肾间质纤维化程度以及肾组织α-SMA的表达较假手术组显著增高,肾小管间质中炎细胞浸润亦较假手术组显著增强;青藤碱各治疗组肾间质纤维化程度、α-SMA和ICAM-1蛋白、MCP-1基因表达均显著低于模型组;蒙诺治疗亦可显著降低肾间质纤维化程度和肾组织α-SMA的表达,但对于炎细胞浸润和炎症因子抑制作用显著较青藤碱弱。而且未见其具有抑制ICAM-1表达的作用。结论：抗风湿药青藤碱可显著抑制肾间质纤维化和肌成纤维细胞的积聚,可能与其显著抑制肾组织炎症因子的表达及炎细胞浸润有关。     

HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...     

缺氧-复氧诱导HK2细胞HMGB1/TLR-4信号通路活化调控TNF-α、IL-1β表达的意义

目的:观察缺氧-复氧诱导后HK2细胞的凋亡率、高迁移率蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平的改变,探讨缺氧-复氧模拟肾缺血-再灌注诱导HGMB1/TLR-4信号通路活化在调控晚期炎症反应和细胞凋亡的意义。方法:用抗霉素A处理HK2细胞(0.1μmol/L)耗竭ATP的方法建立缺氧-复氧HK2细胞模型以模拟缺血-再灌注损伤。将HK2细胞随机分成3组:normal组、I/R组和重组人HGMB1组(r HGMB1组),在复氧后12 h、24 h、48 h 3个时间点,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,ELISA法检测细胞上清液HMGB1、TNF-α、IL-1β的水平,免疫激光共聚焦和western blot检测HK2细胞TLR-4蛋白的表达。结果:缺氧-复氧可诱导HK2细胞凋亡比率、细胞上清液重组人HMGB1、TNF-α、IL-1β水平及HK2细胞TLR-4蛋白12 h即明显增多,24 h达高峰,与normal组相同时间点相比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。经重组人HGMB1处理后,细胞的凋亡率、上清液HMGB1、TNF-α、IL-1β水平及HK2细胞TLR-4蛋白均明显降低,与I/R组相同时间点相比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:缺氧-复氧模拟肾缺血-再灌注可诱导HK2细胞HGMB1/TLR-4信号通路活化,参与调控TNF-α、IL-1β炎症介质的表达及HK2细胞的凋亡,通过晚期炎症和凋亡机制介导AKI的发生和发展。     

缺氧诱导因子1α调控内皮素1表达在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

糖尿病肾病(DN)是终末期肾脏病(ESRD)的主要原因,也是一类以进行性肾间质纤维化(RIF)为特征的疾病.研究表明在DN状态下,肾脏固有细胞如系膜细胞、肾小管上皮细胞均能发生表型转换而表现间充质细胞特性参与RIF[1].缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和其下游基因内皮素1 (ET-1)均能导致上皮细胞转分化(EMT)[2-3].但二者是否参与DN肾小管上皮细胞转分化(TEMT)及其相互作用并不清楚.本研究观察高糖环境下HIF-1α、ET-1、α-SMA和E-cadherin的表达情况,以及HIF-1α siRNA转染和ET-1特异性A受体拮抗剂BQ123对其的影响,旨在探讨HIF-1α和ET-1在高糖诱导TEMT中的作用.     

细胞因子信号转导抑制因子3抑制血小板衍生生长因子-BB诱导的血管平滑肌细胞炎症反应的作用及其机制

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3( SOCS3)抑制血管平滑肌细胞炎症反应的作用及机制.方法 用携带大鼠SOCS3基因的腺病毒(pYrAd-rSOCS3)转染血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激的大鼠动脉血管平滑肌细胞.实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)检测SOCS3、白细胞介素(IL) -1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达.Western blot检测SOCS3、信号转导及转录激活因子3(STAT3)、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1的的蛋白表达.结果 PDGF-BB刺激血管平滑肌细胞24h后,SOCS3、STAT3、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1表达均上调;pYrAd-rSOCS3转染血管平滑肌细胞后再用PDGF-BB刺激,其SOCS3表达进一步上调,但STAT3、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1表达明显下调.结论 上调血管平滑肌细胞SOCS3表达通过负反馈调节酪氨酸蛋白激酶(JAK) -STAT3信号通路,抑制STAT3的激活及磷酸化而下调炎性细胞因子表达.     

霉酚酸酯对糖尿病肾组织炎性因子表达的抑制作用

目的探讨霉酚酸酯（MMF）在糖尿病肾组织中发挥抗炎作用及其机制。方法MMF治疗2型糖尿病大鼠，观察肾组织单核／巨噬细胞浸润，及转录因子（NF）-KBp65、神经生长因子表达的变化；不同浓度的霉酚酸干预高糖环境下培养的肾小球系膜细胞，测定细胞间粘附分子（ICAM）-1、单核细胞趋化蛋白（MCP）-1及神经生长因子（NGF）表达的变化。结果MMF治疗能显著改善糖尿病大鼠肾功能，伴肾小球NF-KBp65活性明显下降，NGF表达水平明显降低，单核／巨噬细胞浸润显著减轻。霉酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞ICAM-1、MCP-1和NGF高表达有显著的抑制作用。结论MMF很可能通过降低NF-KB活性，间接抑制炎性因子表达、炎症细胞浸润。霉酚酸对高糖环境下肾小球系膜细胞ICAM-1、MCP-1和NGF的高表达有显著抑制作用。     

缺氧诱导因子-1α表达水平与分泌性中耳炎患者炎症水平的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平与分泌性中耳炎患者炎症水平的关系及其临床意义。方法选取2017年6月到2022年6月新乡市中心医院收治的44例急性中耳炎患者和同期44例健康体检者作为研究对象, 收集中耳积液和外周血, 采用蛋白质印迹法(Western blot)和酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组研究者和不同性质中耳炎患者中耳积液和血清中HIF-1α和炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平;采用Pearson法分析HIF-1α、TNF-α、IL-1β与分泌性中耳炎患者病程的相关性。组间数据比较采用t检验。结果对照组血清HIF-1α表达水平(1.02±0.15)明显低于观察组耳积液和血清HIF-1α表达水平(1.79±0.15、2.26±0.15), 差异有统计学意义(t=28.730、17.460, P<0.05)。对照组血清TNF-α和IL-6表达水平[(9.94±1.49)、(10.99±2.81) ng/ml]明显低于观察组耳积液和血清TNF-α和IL-6表达水平[(86.02±8.59)、(47.25±8.65)...     

HIF-2α在肾透明细胞癌血管生成中的作用

目的探讨体外水平HIF-2α在肾透明细胞癌血管生成中的作用。方法采用RNAi方法,体外化学合成HIF-2α序列特异的siRNAs,转染肾透明细胞癌786-0细胞抑制HIF-2α表达,Western blotting、ELISA方法检测VEGF表达变化,应用BrdU抗体ELISA比色法研究HIF-2α抑制后肿瘤细胞血管生成能力改变。结果肾透明细胞癌786-0细胞不表达HIF-1a,仅表达HIF-2α,缺氧诱导HIF-2α蛋白表达增加。HIF-2α序列特异的siRNAs特异抑制HIF-2α蛋白的表达,转染效率>80%,抑制率(72.0±8.0)%;HIF-2α抑制后,缺氧诱导的细胞结合型VEGF表达减少,分泌型VEGF在正常氧压情况下抑制率(21.7±3.8)%,缺氧情况下抑制率(37.8±4.7)%,肿瘤细胞在体外水平的血管生成能力降低(42.7±5.0)%。结论HIF-2α在肾透明细胞癌中具有促进肿瘤血管生成的作用,抑制HIF-2α下调细胞结合型与分泌型VEGF表达而降低肾透明细胞癌在体外水平的血管生成能力。     

COX-2与HIF-1α在肝癌中的表达与相关性

目的研究肝癌中环氧合酶-2(COX-2)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的相关性,探讨选择性COX-2抑制剂抑癌作用的可能机理。方法通过免疫组化染色检测53例肝癌标本中COX-2和HIF-1α的表达;利用不同浓度的选择性COX-2抑制剂美洛昔康对在正常和氯化钴模拟缺氧条件下培养的肝癌SMMC-7721细胞进行处理,Western blot法分别检测各组HIF-1α的表达情况。结果53例标本中COX-2表达强阳性率为41.5%(22/53),表达弱阳性率为20.8%(11/53),表达阴性率为37.7%(20/53);HIF-1α表达强阳性率为34.0%(18/53),表达弱阳性率为34.0%(18/53),表达阴性率为32.1%(17/53)。COX-2和HIF-1α的表达呈正相关(r=0.44,P<0.01)。常氧条件下HIF-1α表达相对值为0.185±0.057,经美洛昔康处理后HIF-1α不表达。缺氧刺激下HIF-1α表达相对值升高至1.011±0.131,而加入美洛昔康后明显降低(P<0.05),且随着美洛昔康浓度的增加,降低越明显(P<0.05)。结论美洛昔康不仅能够抑制常氧条件下HIF-1α的表达,而且呈浓度依赖性地抑制缺氧条件下HIF-1α表达的上调,选择性COX-2抑制剂的抑癌作用机理可能部分是由HIF-1α介导的。     

六味地黄丸对5/6肾切除大鼠肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1表达的影响

目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在肾间质纤维化中的表达及作用,观察六味地黄丸对其表达的影响.方法：用5/6肾切除大鼠制作肾间质纤维化模型,分假手术组,模型组和六味地黄丸组.术后8周,常规HE染色观察肾脏组织病理变化,用Masson染色法检测胶原在肾脏的沉积;免疫组化法检测HIF-1α、PAI-1和TIMP-1在肾组织中的表达;Western blot法检测HIF-1α蛋白的表达.结果：与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1蛋白水平均明显升高（P＜0.01）.与模型组比较,六味地黄丸组肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1蛋白水平均明显降低（P＜0.05或P＜0.01）.结论：HIF-1α通过调节PAI-1和TIMP-1的表达,抑制细胞外基质降解而导致肾间质纤维化,六味地黄丸可通过减少HIF-1α蛋白水平来减轻肾间质纤维化.     

血小板衍生生长因子-D和缺氧诱导因子-1α在肾间质纤维化小鼠肾组织的表达

目的:探讨血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)与缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化模型中肾组织的表达。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham-operated rats,SOR)和单侧输尿管梗阻(ulilateral ureteral obstruction,UUO)模型组。术后第3天、7天、14天各处死大鼠10只,肾组织行HE染色并观察病理变化。采用免疫组织化学和荧光定量逆转录一聚合酶链反应(Q-RT-PCR)法检测肾脏组织中PDGF-D、HIF-1α、TGF-β_1蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重;PDGF-D、HIF-1α、TGF-β_1蛋白表达随梗阻时间的延长逐渐增加;与假手术组相比,PDGF-D、HIF-1α、TGF-β_1mRNA表达明显增加(P0.05),相关分析显示,模型组第3天PDGF-D mRNA表达与HIF-1αmRNA,TGF-β_1mRNA表达分别呈正相关(r=0.748,0.659,P0.05)。结论:PDGF-D可能通过调节HIF-1α,TGF-β_1的表达参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

益肾解毒汤对5/6肾切除大鼠肾组织中HIF-1α、CTGF和TGF-β_1表达的影响

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CTGF和TGF-β1在肾间质纤维化中的表达及作用,观察益肾解毒汤对其表达的影响。方法:用5/6肾切除大鼠制作肾间质纤维化模型,分假手术组,模型组,氯沙坦组和益肾解毒汤组。术后8周,常规HE染色观察肾脏组织病理变化,用Masson染色法检测胶原在肾脏的沉积;Western blot法检测HIF-1α、CTGF和TGF-β1在肾组织中的表达。结果:与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、CTGF和TGF-β1蛋白水平均明显升高(P0.01)。与模型组比较,益肾解毒汤组肾组织中HIF-1α、CTGF和TGF-β1蛋白水平均明显降低(P0.01)。结论:HIF-1α通过调节CTGF和TGF-β1的表达,抑制细胞外基质降解而导致肾间质的纤维化,益肾解毒汤可通过减少HIF-1α蛋白水平来减轻肾间质纤维化。     

缺氧条件下大鼠髓核细胞中缺氧诱导因子1α与自噬相关分子的表达及相关性分析

目的探讨缺氧条件下大鼠髓核细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)与自噬相关分子Beclin1、LC3B的表达及其相关性。方法取健康成年SD大鼠髓核组织,分离培养髓核细胞并传代。取第3代髓核细胞行HE染色和Ⅱ型胶原酶免疫荧光染色鉴定后,随机分为4组。A组细胞于常氧条件下(37℃、5%CO2、20%O2)培养,B组细胞于缺氧条件下(37℃、5%CO2、1%O2)培养,C组细胞转染HIF-1α-小干扰RNA后于缺氧条件下培养,D组细胞加入自噬抑制剂3-MA后于缺氧条件下培养。各组细胞培养8 h后,采用Western blot和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测HIF-1α与自噬相关分子Beclin1、LC3B的表达情况。结果经分离纯化的第3代大鼠髓核细胞HE染色后细胞质呈淡粉色,细胞核呈蓝黑色;Ⅱ型胶原酶免疫荧光染色为阳性。Western blot和qRT-PCR检测示,B组HIF-1α、Beclin1和LC3B蛋白及mRNA相对表达量均显著高于A组(P<0.05),C组均显著低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。D组HIF-1α蛋白和mRNA相对表达量与B组比较差异无统计学意义(P>0.05),Beclin1和LC3B蛋白和mRNA相对表达量均较B组显著降低(P<0.05)。结论缺氧条件能诱导大鼠髓核细胞中HIF-1α和自噬相关分子Beclin1、LC3B的表达,且HIF-1α与自噬相关分子的表达具有相关性,即HIF-1α下调能降低自噬相关分子的表达,而缺氧条件下自噬水平下调对HIF-1α的表达无明显影响。     

蒲公英提取物通过miR-31抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤和炎症反应的作用研究

目的:探讨蒲公英提取物对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤和炎症反应的保护作用。方法:肾小管上皮细胞HRPTEpiC分为正常对照(NC)组、高渗对照(OSM)组、高糖(HG)组、不同浓度蒲公英提取物组、高剂量组+anti-miR-NC组、高剂量组+anti-miR-31组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-6水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-31表达水平。结果:高糖诱导的肾小管上皮细胞活性降低,细胞凋亡率升高,TNF-α、IL-6水平升高,miR-31表达水平降低(P<0.05)。不同浓度蒲公英提取物处理后,肾小管上皮细胞活性升高,细胞凋亡率降低,TNF-α、IL-6水平降低,miR-31表达水平升高(P<0.05)。抑制miR-31表达逆转了蒲公英提取物对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用。结论:蒲公英提取物可通过调控miR-31抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤和炎症反应。     

腹膜透析患者腹透液中HIF-1α与TGF-β1、IL-6、CRP及腹膜转运功能的相关性研究

目的:研究腹膜透析患者腹透液中低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平与TGF-β1、IL-6、CRP和腹膜转运功能的相关性,初步探讨HIF-1α对腹膜功能的影响以及可能的作用机制。方法:用ELISA法测定腹透患者腹透流出液中HIF-1α与TGF-β1、IL-6、CRP水平;并统计腹透患者的腹膜炎发生次数;行4h腹膜平衡试验,计算腹透液肌酐和血肌酐比值(D/Pcr)。结果:短期、中期和长期腹透组患者腹透液中HIF-1α的表达水平均明显高于初始腹透组(P均<0.05);长期腹透组HIF-1α的水平高于中期组(492.65±84.89vs.288.92±78.93,P<0.05);中期腹透组HIF-1α的水平高于短期组(288.92±78.93vs.241.05±72.41,P<0.05)。HIF-1α高水平组的IL-6、CRP、TGF-β1和D/Pcr均高于HIF-1α低水平组(P均<0.05)。相关性分析显示腹透液中HIF-1α的水平与IL-6、CRP、TGF-β1和D/Pcr正相关(r=0.512,P<0.001;r=0.506,P<0.001;r=0.722,P<0.001;r=0.354,P=0.001)。腹透液中HIF-1α和TGF-β1的表达水平与腹膜炎次数无关(P>0.05)。结论:腹透患者腹透液中HIF-1α的表达水平随着腹透龄的延长逐渐升高。HIF-1α可能通过影响腹膜慢性炎症状态和腹膜纤维化进展而影响腹膜功能。     

缺氧及沉默缺氧诱导因子-1α对BxPC-3细胞中RUNX3基因表达的影响

目的 观察缺氧及应用小干扰RNA (siRNA)沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对胰腺癌细胞株BxPC-3中RUNX3基因表达的影响.方法 构建人RUNX3基因真核表达载体质粒pEGFP-RUNX3,CoC12化学模拟肿瘤缺氧环境,检测缺氧以及siRNA沉默HIF-1α对BxPC-3细胞中RUNX3基因在mRNA和蛋白水平的影响.结果 缺氧能使BxPC-3细胞中RUNX3基因的表达较常氧时显著升高[表达为(9.13±1.55),P＜0.05],siRNA转染BxPC-3细胞后能显著下调HIF-1α蛋白表达(抑制率90％),并导致RUNX3基因的表达也受到明显抑制.结论 缺氧促使BxPC-3细胞中HIF-1α在蛋白水平表达升高,缺氧时HIF-1α能上调RUNX3基因的表达水平.     

促排卵对小鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α的影响

目的观察自然周期排卵与促排卵状态下小鼠卵巢缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平的变化。方法成年雌性小鼠随机分为2组,每组15只,分别为自然排卵组(对照组)、普丽康促排卵组(实验组),取两组小鼠排卵期卵巢组织,采用免疫组织化学方法检测HIF-1α的表达与定位,并分析表达丰度。结果两组小鼠卵母细胞与颗粒细胞中均检测到HIF-1α的表达,实验组HIF-1α蛋白的平均光密度值(0.149 5±0.034 7)高于对照组(0.192 4±0.026 8),差异有统计学意义(P0.05)。结论促排卵可增加小鼠卵巢组织中HIF-1α的表达。     

缺氧预适应抑制内皮细胞冷缺氧/温复氧损伤

目的 研究缺氧预适应对内皮细胞冷缺氧／温复氧损伤的作用及可能机制。方法 培养的内皮细胞ECV-304分成4组，A组，对照组；B组，冷缺氧／温复氧（A／R）组95％N2／5％a=）2缺氧装置中用4℃UW液保存24h；C组，缺氧预适应组（APC），内皮细胞在缺氧前遭受4个循环短时间缺氧／复氧；D组，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）抑制组：缺氧预适应前，细胞培养液中加入5μmol／L的HIF-1α抑制剂NS398，余同C组。缺氧结束后，各组37℃5％CO2 95％空气中复氧6h。分别以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法、Western blot法检测各组HIF-1α mRNA和蛋白表达，内皮细胞保护作用通过细胞存活率（台盼蓝拒染法）、LDH释出率及ICAM-1的表达判定。结果 缺氧预适应明显上调HIF-1α mRNA和蛋白表达，显著抑制冷保存内皮细胞缺氧／复氧损伤，表现为更高的细胞存活率，更少的LDH释出和ICAM-1的表达。而HIF-1α抑制剂可逆转这种保护作用。结论 缺氧预适应能有效地抑制冷保存内皮细胞缺氧／复氧损伤，这种细胞保护作用可能是通过HIF-1α介导的。     

反义缺氧诱导因子-1α对胰腺癌细胞BxPC-3化疗敏感性的影响

目的： 观察反义缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对胰腺癌细胞BxPC-3化疗敏感性的影响。方法：实验分组：（1）缺氧条件下(0.5% O2)体外培养4h，未转染反义HIF-1α质粒的BxPC-3细胞设为缺氧对照组；（2）常氧条件下体外培养，未转染反义HIF-1α质粒的BxPC-3 细胞设为常氧对照组；（3）缺氧条件下(0.5% O2)体外培养4h，稳定转染反义HIF-1α质粒的BxPC-3细胞设为实验组。采用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)检测各组的HIF-1α和survivin表达情况。 流式细胞术和MTT比色法检测不同剂量的化疗药物(5-氟尿嘧啶、阿霉素、吉西他宾)对各组的凋亡率和生长抑制率的影响。 结果：实验组HIF-1α和survivin的表达明显降低 (P<0.05)，与对照组相比，实验组的凋亡率、抑制率与剂量成正比，高剂量引起高抑制(P<0.05)。 结论：反义HIF-1α可能通过阻断survivin的表达而增强胰腺癌对化疗的敏感性。据此可望通过阻断HIF-1α的表达为胰腺癌基因治疗提供一种新途径。     

肝再生增强因子对缺血再灌注损伤肾脏局部炎性反应的影响

目的 探讨重组人肝再生增强因子( rhALR)对缺血再灌注(IR)肾损伤大鼠模型肾脏局部炎性细胞浸润及炎性因子表达的影响.方法 将SD大鼠按随机数字表法分成假手术组、IR组、rhALR低剂量(100 μg/kg)组及rhALR高剂量(200 μg/kg)组.采用双侧肾蒂夹闭60 min后再灌注建立IR肾损伤动物模型.常规生化法检测血肌酐、尿素氮的水平,HE染色观察肾脏组织学改变,比色法检测肾组织髓过氧化物酶( MPO)的活性,Western印迹法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的蛋白表达.结果 rhALR组的血肌酐和尿素氮显著低于IR组(均P＜ 0.05),肾组织病理损害减轻,rhALR高剂量组较rhALR低剂量组肾功能及肾脏病理改善更明显.IR组大鼠肾组织的MPO活性、TNF-α、ICAM-1、MCP-1的蛋白表达在术后12 h较假手术组显著上升,术后24h有所下降,但仍维持在较高水平(均P＜0.05);rhALR组肾组织MPO活性、肾组织TNF-α、ICAM-1、MCP-1的蛋白表达较IR组显著下降(均P＜0.05),且rhALR高剂量组4者较rhALR低剂量组下降更显著(均P＜0.05).结论 rhALR对IR肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其减少肾脏局部的炎性细胞浸润、抑制炎性因子MCP-1、ICAM-1、TNF-α的表达有关.