反相-高效液相色谱法检测人血浆盐酸二甲双胍浓度

目的:建立测定盐酸二甲双胍血药浓度的反相高效液相色谱法(RP-HPLC).方法:血浆经乙腈、高氯酸联合沉淀,以ZORBAX Eclipse XDB-C8(4.6 nm×150mm,5 μm)为色谱柱;以乙腈:水:3 mmol/L十二烷基硫酸钠(33:17:50,V/V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长为234nm.结果:血浆盐酸二甲双胍浓度在0.05～5.0 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999);最低检测限为0.05mg/L:平均相对回收率为(99.67±2.85)%(n=20),日内、日间RSD分别为(2.90±1.17)%和(2.64±1.15)%.结论:该方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆盐酸二甲双胍浓度的测定和药代动力学研究.     

高效液相色谱法测定白消安血药浓度

目的 建立测定人血浆中白消安浓度的柱前衍生高效液相色谱法.方法 以1,5-戊二醇二甲磺酸酯为内标,血浆样品经二乙基二硫代氨基甲酸钠衍生化处理后,以乙腈-0.7%冰醋酸水溶液(69:31)为流动相,流速1.0 ml·min-1,采用XterraRP18色谱柱分离,在280 nm波长下进行检测.结果 白消安线性范围为0.20～4.00 mg·L-1,以加权最小二乘法计算得到回归方程为y=2.56x+16.7(r=0.999 3,n=7),提取回收率81.01%～82.72%,方法回收率96.50%～97.90%,日内、日间精密度(RSD)均小于10%.最低血浆检测质量浓度为0.080 mg·L-1.结论 该方法准确、灵敏,适用于白消安血浆浓度测定及其药代动力学研究.     

兔血浆中氟虫腈及其砜化物的高效液相色谱分析法

目的:建立兔血浆中氟虫腈(Fipronil)及其代谢物砜化物(Fipronil sulfone)的高效液相色谱检测法.方法:高效液相色谱仪为Agilent 1100系列;血浆经乙醚萃取浓缩,以Hypersil ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5 μ m)为色谱分析柱;以乙腈-甲醇-水(26∶24∶50,V/V/V)为流动相,流速为1.0ml·min-1;检测波长为276 nm;内标为地西泮.对兔血浆中的氟虫腈及其砜化物进行检测.结果:氟虫腈及其砜化物浓度在0.05～5.00 mg·L-1范围内均具有良好的线性关系(r=0.999);最低检测限均为为0.05mg·L-1;相对回收率分别为(101.08±6.13)%和(100.68±4.78)%,绝对回收率分别为(80.24%±2.58)%和(81.77±2.64)%;日内精密度变异系数分别为(5.55±1.24)%和(5.59±1.25)%;日间精密度变异系数分别为(5.91±1.44)%和(7.27±1.20)%.结论:本研究采用的反相-高效液相色谱法快速、简便、灵敏、准确,可用于兔血浆氟虫腈及其砜化物的检测和毒物代谢动力学研究.     

人体血浆中奥硝唑的HPLC测定

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人体血浆中奥硝唑浓度方法.方法以C18柱(4.6 mm×250 mm)为色谱柱,甲醇-水(30∶70)为流动相,血浆样品用乙腈沉淀蛋白.结果人体血浆中的内源物质不干扰奥硝唑的测定,奥硝唑在2.0～25 μg/ml浓度范围内峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999 8),最低检测限为0.5 μg/ml.平均回收率为(99.87±0.46)%,高、中、低3种浓度的日内差(RSD)≤2.43%,日间差(RSD)≤3.18%.结论本方法简便、快速、准确,重现性好,可应用于奥硝唑人体药动学研究.     

RP-HPLC荧光法测定兔血浆中BWYJ的浓度及药代动力学参数测定

目的建立了RP-HPLC-荧光法检测兔血浆中BWYJ浓度。方法以C18色谱柱(150mm×416mm,5μm)分离;以盐酸普萘洛尔为内标,流动相为以甲醇-乙腈-磷酸缓冲液(28.5:28.5:43);流速:1ml.min-1,柱温:37℃;荧光检测器,激发波长229nm,发射波长335nm。结果日间RSD≤3.26%,日内RSD≤2.14%,平均相对回收率为101.50%±5.72%;BWYJ的保留时间为10.65±0.50min,内标的保留时间为3.87±0.31min。血药浓度在0.05～20μg.ml-1范围内关系良好(r=0.99),最低检测限为5ng。兔单次静脉注射BWYJ5mg.kg-1后,T1/2α、T1/2β分别为1.24±0.21min,42.70±9.43min。结论该法快速、灵敏、准确,可用于BWYJ的体内分析。     

采用高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠含量

目的:建立高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠的含量。方法:采用Diamonsil-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.08mol·L-1醋酸铵溶液∶甲醇(80∶20)(混合后,冰醋酸调pH至6.0)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm,柱温30℃;以外标法进行含量计算。结果:头孢美唑钠在0.0105~0.8400mg·mL-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,方法平均回收率为99.89%,中间精密度RSD为1.41%(n=6)。结论:本法简便、专属、灵敏快速,可用于注射用头孢美唑钠含量的测定。     

HPLC法测定人血浆中的盐酸哌甲酯

目的:建立HPLC测定盐酸哌甲酯血药浓度的方法.方法:血浆样品经碱化后用乙醚提取,采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-RF)测定血浆中盐酸哌甲酯的浓度,采用ODS C18(4.6mm ×150mm,5μm)色潜柱,流动相为乙腈-0.03 m·L-1磷酸缓冲液(22:78);荧光检测激发波长为252nm,发射波长为295nm.结果:血浆哌甲酯浓度在(2～100)μg·mL-1范围与其蜂高比呈良好的线形关系,r=0.999;平均加样回收率为102.5%,RSD为6.0%.结论:本实验方法灵敏、准确、简便,适用于人血浆样品的哌甲酯浓度测定.     

HPLC法测定维生素E片含量

目的 建立测定维生素E(VitE)含量的高效液相色谱法.方法 采用Shimadzu C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5um),以甲醇为流动相;检测波长为284 nm,流速1.5 ml·min-1.结果 维生素E在0.125～5.0 mg·ml-1范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.999 9),高、中、低3种浓度的平均加样回收率为101.4%～102.7%,RSD为0.46%～O.71%,最低检测限为0.4ug·ml-1.结论 本法准确、简便、快速,适用于维生素E片的含量测定.     

高效液相色谱法测定鱼金口服液中绿原酸含量

目的 建立鱼金口服液中绿原酸的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,使用Agilent Extend-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.4%磷酸溶液(10:90)为流动相,检测波长为327nm,流速为1.0ml·min-1,柱温为30℃.结果 绿原酸在4.24～42.4mg·L-1浓度范围内线性关系良好,r=0.9993.平均加样回收率为99.50%,RSD为0.50%.结论 本法简便,快速,准确,可靠,可作为该制剂的定量分析方法.     

反相高效液相色谱法测定补骨脂酊中补骨脂素和异补骨脂素的含量

目的 建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定补骨脂酊中补骨脂素(psoralen)和异补骨脂素(isopsoralen)的含量.方法 以Waters Xterra RPl8(4.6mmx 250mm,5μm)为色谱柱,以乙腈一水(0.28:0.52)为流动相,检测波长247mm.结果 补骨脂素和异补骨脂素保留时间分别为14.326 min和15.259min;补骨脂素的线性范围为0.88-14.08mg·L-1(r=0.9998);异补骨脂素的线性范围为0.80～12.80mg·L-1(r=0.9999).补骨脂素的平均加样回收率为99.5%,RSD为1.10%;异补骨脂素的平均加样回收率为100.4%,RSD为0.59%.结论 本方法简便、快速、准确,可用于补骨脂酊制剂的质量控制.     

高效液相色谱法测定生物样本中头孢噻肟和舒巴坦的浓度

目的: 为静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠后在血浆和尿液中的药物浓度分析提供检测方法. 方法:采用HPLC测定头孢噻肟钠血浆和尿液中浓度. 在血样中加入甲醇沉淀蛋白后,尿样用超纯水稀释后取上清液进样,色谱分析条件: 以C18反相柱作分析柱;柱温:室温;流速: 1 Ml/min;头孢噻肟和舒巴坦的流动相分别为:1g/L的三乙胺水溶液(用磷酸调Ph值6.2)∶甲醇＝68∶32和84∶16;头孢噻肟和舒巴坦的紫外检测波长分别为254 nm和220 nm. 结果:头孢噻肟血样和尿样的线性范围分别为5.3～530.0 mg/L和5.45～545.00 mg/L,最低检测浓度分别为1.00 mg/L和0.25 mg/L;舒巴坦血样和尿样的线性范围为1.04～208.00 mg/L,最低检出浓度分别为0.5 mg/L和0.25 mg/L;方法平均提取回收率在 (89～110)%之间;日内、日间RSD均小于5%. 头孢噻肟和舒巴坦血浆和尿液样品置于-20℃冰箱3 d内稳定. 结论:本方法具有快速、简便、灵敏、准确等特点,适合于头孢噻肟和舒巴坦血浆和尿液浓度测定.     

简易测定人血浆中胺碘酮浓度的高效液相色谱法

[目的]建立一种简易的高效液相色谱法测定胺碘酮血药浓度.[方法]提取采用乙腈溶液直接沉淀血浆蛋白,溴己新为内标.色谱柱为Diamonsil C18(250 cm×4.6 mm,5μm);柱温:室温;流动相:乙腈:25mol/L KH2PO4缓冲液(pH4.2)=55:45(V/V);流速:1.3 mL·min-1;检测波长:242 m.[结果]胺碘酮血药浓度在0.1～5.0 μg·mL-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0.9997),最低检测浓度为0.05μg·mL-1.平均方法回收率为(100.1±5.7)%(n=15),日内RSD≤1.7%,日间RSD≤6.2%.[结论]本法简单、快速、准确,可用于临床血药浓度监测及人体药动学研究.     

茶苯海明口崩片的人体药代动力学及相对生物利用度研究

目的:比较茶苯海明口崩片和普通市售片的人体内药代动力学及相对生物利用度.方法:8名健康志愿者均分为2组,分别为口含单剂量茶苯海明口崩片(25 mg/片)和口服茶苯海明普通市售片(25 mg/片)后,分别服药前和服药后用高效液相色谱法测定血药浓度.色谱条件:色谱柱:Nova Pak C18(4μm,3.9 mm×150 mm),保护柱:Nova-Pak C18(4μm,3.9 mm×30 mm),流动相为甲醇:三乙胺缓冲液(磷酸4 ml,三乙胺7 ml,加50%甲醇稀释至1 000 ml,用磷酸调节pH 3.2),流速1.0 ml/min,检测波长225 nm,进样量20μl,室温.进行口崩片与普通市售片的药代动力学和生物利用度研究.结果:茶苯海明在人空白血浆中的标准曲线方程:C=0.004 4 A 4.745,R2=0.996,在5～500 ng/ml的浓度范围内线性良好.最低检测限2 ng/ml.平均回收率为(90.55±4.69)%,RSD=0.041%.低、中、高3种浓度的日内RSD分别为9.27%,4.93%,2.95%(n=5).目间RSD分别为9.97%,3.81%,3.06%(n=5).取血样3 ml处理后进样,两剂型血药浓度有显著差异,口崩片为:茶苯海明血药浓度-时间曲线下面积(AUC)=(602.04±113.82)ng·h·ml,峰浓度(Cmax)=(95.86±21.28)ng·ml,达峰时间(TPeak)=(1.8±0.32)h,市售片的药动学参数为:AUC=(342.73±84.96)ng·h·ml1,Cmax=(46.34±10.32)ng·ml-1,TPeak=(2.65±0.24)h,口崩片与普通片的生物利用度的差异有统计学意义(P＜0.01),相对生物利用度为175.66%.结论:所研制的口崩片能显著提高茶苯海明的生物利用度.     

固相提取法测定大鼠血浆中柚皮素浓度

[目的]建立测定柚皮素血浆浓度的高效液相色谱法.[方法]血浆柚皮素提取为Water OasisTM HLB固相提取.内标为槲皮素.分析柱为Hypersil BDS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈pH 2.5磷酸水溶液(33∶67),流速1.0 mL/min,检测波长为288 m,柱温为室温.[结果]柚皮素血浆浓度在0.05-10 μg/mL范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=.9998).平均方法回收率为(105.6±5.8)%,日内RSD≤3.8%,日间RSD≤4.5%.[结论]本方法简单、可靠、准确,可用于测定柚皮素血浆浓度.     

HPLC同时测定复方双氯芬酸钠注射液中两组分的含量

目的:建立HPLC测定复方双氯芬酸钠注射液中两组分含量的方法。方法:以Kromasil ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为ψ(甲醇:乙酸盐缓冲液,pH4.6)=70:30,流速为1.0 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为30℃,进样量为20 μL,外标法定量。结果:双氯芬酸钠和盐酸利多个因的线性范围分别为18.8～188.0μg/mL(r=0.9999)和5.3～53.0μg/mL(r=0.9999),平均回收率分别为100.3％(RSD=0.77％)和99.23％(RSD=0.59％)。结论:本方法结果准确,重现性好,简便快速,可作为该制剂的含量测定方法。     

高效液相色谱质谱检测血浆秋水仙碱及其药动学研究

目的 建立人血浆秋水仙碱检测的高效液相色谱-质谱检测方法,研究秋水仙碱片的人体药动学.方法 血浆样品0.1 mL,经乙醚-二氯甲烷萃取,以ZORBAX Extend-C18为色谱柱;流动相为甲醇-10 mmol·L-1乙酸铵,流速为1.1 mL·min-1;采用质谱电喷雾离子化法,正离子多重反应检测(MRM).测定12名健康志愿者单剂量口服2 mg秋水仙碱片后的血药浓度经时过程.由DAS2.0程序计算药动学参数.结果 秋水仙碱浓度在0.05-10 μg·L-1范围内线性关系良好;平均回收率分别为(92.47±1.73)%;日内RSD≤2.99%,日间RSD≤2.22%.结论 本方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆秋水仙碱浓度的测定及其药代动力学研究.     

HPLC法测定双氯芬酸钠水凝胶中双氯芬酸的含量

目的:建立HPLC法,测定双氯芬酸钠水凝胶中双氯芬酸的含量,用于医院内制剂的质量标准研究。方法:采用高效液相色谱法,以Kromasil ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析色谱柱;流动相:甲醇-pH 2.5磷酸盐缓冲液(70∶30);流速:1 mL.min-1;检测波长:254 nm;柱温为室温。结果:双氯芬酸在0.05～0.80 mg.mL-1浓度范围内具有良好的线性关系。结论:该方法可准确、快速、简便地测定双氯芬酸钠水凝胶中双氯芬酸的含量。     

反相高效液相色谱法测定人血清中洛美沙星浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血清中洛美沙星浓度.方法:色谱条件:LichrosorbRP-18,4.0mm×250mm,10μm;以甲醇、pH2.3的磷酸盐缓冲液、0.05mol/L四丁基碘化铵溶液(31:58:11,V/V/V)为流动相;流速:1.0ml/min;柱温30℃;紫外检测波长287nm.结果:标准曲线的线性范围为0.2～8.0mg/L,平均方法回收率(98.63±0.04)%,日内RSD小于4.95%,日间RSD小于5.31%.结论:本法简便、快速、准确,可用于洛美沙星体内血药浓度测定.     

兔血浆利福平的反相高效液相色谱分析及药代动力学研究

目的建立兔血浆利福平（rifampicin,RFP）反相高效液相色谱分析方法（reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC）。研究其静脉给药后兔体内血浆药代动力学参数。方法以Agilent ZORBAX XDB-C18柱（5μm,4.6mm×150mm）为分析柱,流动相为0.02mol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液（PH7.0）∶甲醇=30∶70;流速1.0mL·min^-1;柱温：35℃,检测波长330nm。8只新西兰大白兔分别按RFP12mg·kg^-1静滴,RP-HPLC法检测血浆药物浓度。所得血药浓度数据经DAS软件拟合分析。结果 RFP在0.5～72μg·mL^-1血浆浓度范围内线性关系良好（r=0.99969）,平均提取回收率为99.72%,日内、日间变异系数（RSD=5）分别为2.6%～4.4%和2.2%～2.9%。静脉滴注RFP在兔体内药代动力学过程符合双隔室模型（权重系数为1/cc）,T1/2=（2.87±0.78）h,Cmax=（12.49±1.57）mg·L^-1,AUC（0-∞）=（50.05±14.50）mg·（h·L）^-1。结论本研究建立的兔血浆利福平RP-HPLC方法简便、准确、重现性好,可用于兔体内利福平血药浓度的测定,兔体内利福平药代动力学过程符合双隔室模型,体内药代谢动力学参数为利福平其它剂型的研究提供参考。     

高效液相色谱法测定维吾尔族与哈萨克族2型糖尿病患者尿液中马尿酸含量

目的建立快速测定维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病患者尿液中马尿酸含量的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用色谱柱Hypersil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),以甲醇/乙酸铵缓冲液(pH 6.8)为流动相,流速1.0mL/min,柱温25℃进行梯度洗脱,检测波长235nm。结果马尿酸的质量浓度为2～25mg/L内线性关系良好,平均回收率为90.77%～96.66%,RSD均<2%。维吾尔族糖尿病患者尿液中马尿酸含量为(253.72±31.37)mg/mL,哈萨克族糖尿病患者为(74.44±15.05)mg/mL。结论 HPLC法灵敏、准确,适用于临床尿液中马尿酸含量的检测。