EphA2在胃癌中的表达及临床病理学意义

目的探讨肝细胞受体A2(EphA2)在胃癌组织中的表达及其表达与临床病理学指标之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例胃癌组织及癌旁胃组织中EphA2的表达。结果 EphA2在胃癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。EphA2的阳性表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05)。而与患者年龄、性别、肿瘤的直径及是否有血道转移无关(P>0.05)。结论 EphA2的阳性表达与胃癌的发生、发展及转移密切相关,有望作为胃癌治疗的一个新靶点。     

Livin、Smac/DIABLO和PTEN在胃癌组织中的表达及其与胃癌的相关性

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和PTEN在胃癌发生发展分子机制中的调控作用及意义.方法:实时荧光定量PCR检测75例手术切除胃癌患者组织, 20例癌旁组织及20例正常胃组织中Livin mRNA和Smac/DIABLO mRNA的表达, Western blot结合免疫组织化学法检测两者与PTEN蛋白的表达及组织学定位.结果:正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达, 胃癌组织中Livin mRNA相对表达量显著上调(6.374±4.759), 其表达在低分化胃癌组及淋巴结转移组具有显著差异(χ2 = 9.60, 5.51, P<0.01或0.05), 与肿瘤大小, 浸润程度及TNM分期等病理表现无关;Smac/DIABLO mRNA胃癌组织中的表达水平低于正常胃组织及癌旁组织, 但差异无显著性(0.731±0.420 vs 1.104±0.276, 1.061±0.737, 均P>0.05), Smac/DIABLO mRNA的表达水平与胃癌各临床病理因素无关; 其蛋白表达量与Smac/DIABLO mRNA的表达水平存在差异. Smac/DIABLO在肠型胃癌与弥漫型胃癌中的表达有显著差异(χ2 = 5.06,P<0.05). 正常胃黏膜及胃癌组织中未检出PTEN蛋白表达.结论:Li v i n、Sma c/DIABLO及PTEN的表达水平在不同阶段及病理类型的胃癌中存在差异. 实时荧光定量PCR检测Li v i n及Smac/DIABLO的表达量, 有可能为判断胃癌的发生, 分化程度及预测化疗敏感性提供新的指标.     

CD40和MMP2及iNOS在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨CD40、MMP2及iNOS在胃癌组织中的表达及与胃癌侵袭转移的关系及其临床意义。方法:用RT-PCR法检测45例胃癌组织及15例癌旁正常胃黏膜组织中CD40、MMP2及iNOS的mR-NA表达情况。结果:CD40、MMP2及iNOS在胃癌组织中的阳性表达率与癌旁正常胃黏膜组织比较具有统计学意义(P<0.01),CD40、MMP2及iNOS表达与胃癌TNM分期和淋巴结转移(P<0.05)有关,与肿瘤的大小及分化程度无关(P>0.05),三种基因之间存在着正相关(P<0.05)。结论:CD40、MMP2及iN-OS参与胃癌的肿瘤生物学行为和疾病进展,有可能成为胃癌进展和预后不良的生物学标志。     

胃癌组织中5-脂氧合酶的表达及其与磷酸化Akt相的关性

目的:检测5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在胃癌组织中的表达,并探讨5-LOX对磷酸化Akt(phosphorylatedAkt,p-Akt)表达的影响.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中5-LOXmRNA表达水平;免疫印迹法(Westernblot)检测5-LOX和p-Akt蛋白的表达水平.结果:5-LOX在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(76.7%vs40%,P<0.05,mRNA水平;56.7%vs30%,P<0.05,蛋白水平).p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达也显著高于癌旁正常组织(56.7%vs26.7%,P<0.05).相关性分析表明,胃癌组织中5-LOX蛋白表达和p-Akt水平间无明显相关性(r=0.186,P>0.05).结论:5-LOX蛋白对胃癌的发生、发展有一定促进作用,但与PI3-K/Akt信号通路无关.     

Claudin-4 mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究chudin-4mRNA在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌生物学行为的关系.方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测10例正常胃黏膜组织和31例胃癌组织的claudin-4 mRNA的转录水平.结果 正常胃黏膜组织claudin-4 mRNA相对表达量低于胃癌组织(P<0.05),高中分化胃癌组织低于低分化组织(P<0.05),有淋巴结转移的胃癌组织高于无淋巴结转移组织(P<0.05),浸润深度达黏膜下层组织高于浸润深度未达到者(P<0.05).claudin-4 mRNA相对表达量与患者性别及肿瘤大小无显著相关性(P>0.05).结论 Claudin-4 mRNA在胃癌中表达上调可能在胃癌的发生发展中起着重要的作用,其表达上调可能促进胃癌的侵润和转移.     

MTA1基因表达与人胃癌的浸润和转移

目的:探讨MTA1基因在胃癌及癌周组织中的表达及其表达水平与胃癌浸润和转移潜能的相关性.方法:采用荧光定量PCR及Western印迹技术,分别在mRNA和蛋白水平检测42例手术切除的人胃癌组织及癌旁组织中MTA1的表达,结合胃癌的临床生物学特征分析MTA1表达与胃癌病理类型、淋巴结转移的关系.结果:胃癌组织中MTA1mRNA相对量的表达显著高于癌旁胃黏膜组织(0.6711vs0.3940,P<0.01),蛋白水平表达与mRNA一致.低分化胃腺癌组织中的MTA1mRNA的相对量表达显著高于中高分化胃腺癌组织(0.7475vs0.3460,P<0.01),而伴有淋巴结转移的胃癌组织中MTA1mRNA的相对量表达明显高于不伴有淋巴结转移的胃癌组织(0.8128vs0.4933,P<0.01).结论:MTA1的表达与促进胃癌的转移相关,检测MTA1表达可作为预测胃癌生物学行为、判断胃癌患者预后的一个参考指标.     

胰腺癌组织Survivin的表达与细胞凋亡、增殖的关系

目的:观察胰腺癌组织Survivin的表达与细胞凋亡、增殖的关系.方法:采用TUNEL法和免疫组化法检测64例胰腺癌及癌旁组织的细胞凋亡指数(AI)与增殖指数(PI)及Survivin表达,分析AI、PI与Survivin表达和临床病理因素的相关性.结果:Survivin蛋白在癌旁组织无表达,在胰腺癌组织阳性率为87.9%,两者比较差异显著(P<0.001).AI与年龄、性别及肿瘤部位无关,随胰腺癌组织分化程度的增加而增加,癌旁组织显著高于胰腺癌组织(30.47% vs 1.64%,P<0.001):PI与年龄、性别、肿瘤部位及淋巴结转移无关,而与癌组织的分化程度相关,随着胰腺癌分化程度的降低而增加.从分化程度观察,胰腺癌组织AI与Survivin表达水平呈负相关(r=-0.85),PI与Survivin表达水平呈正相关(r=0.87);从有无转移来看,胰腺癌AI与Survivin表达水平呈负相关(r=-0.81).结论:Survivin凋亡抑制基因在胰腺癌发生和发展中起重要作用.     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8在肺癌组织中的表达及对肺癌细胞增殖、迁移能力的影响

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α诱导蛋白(TNFAIP)8在非小细胞肺癌组织中的表达情况及其对肺癌A549细胞增殖和迁移能力的影响。方法用RT-PCR和Western印迹检测非小细胞肺癌组织与癌旁组织中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达的差异。合成TNFAIP8特异性siRNA,转染肺癌A549细胞,RT-PCR和Western印迹检测TNFAIP8-siRNA对细胞中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达的影响,MTT检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达情况。结果非小细胞肺癌组织中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。与空白对照组相比,转染TNFAIP8-siRNA的肺癌A549细胞TNFAIP8 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01),细胞增殖和迁移能力显著降低(P<0.01),细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。阴性对照组与空白对照组之间各项检测指标无显著差异(P>0.05)。结论 TNFAIP8高表达与非小细胞肺癌的发生密切相关,沉默TNFAIP8的表达能够抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移能力。     

WWOX基因过表达对人胃癌细胞增殖、凋亡能力的影响及机制研究

目的探究含有WW结构域的氧化还原酶基因(WWOX)mRNA在胃癌中的表达量及过表达WWOX对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡能力的影响及作用机制。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测WWOX mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达量;利用脂质体LipofectamineTM2000将重组质粒pc DNA3.0-WWOX、空载体pc DNA3.0-NC转入人胃癌SGC7901细胞中,未转染细胞为空白组,蛋白质印迹法(Western blotting)检测WWOX蛋白表达量;绘制转染后人胃癌SGC7901细胞增殖状况;流式细胞术检测SGC7901细胞凋亡率;Western blotting检测转染后细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和生存素(Survivn)蛋白的表达量。结果 WWOX mRNA在胃癌组织中的表达量显著低于癌旁组织(P0.05);pc DNA3.0-WWOX组WWOX蛋白的表达量显著高于pc DNA3.0-NC组和空白组(P0.05);绘制细胞生长曲线发现,WWOX基因能抑制胃癌SGC7901细胞的增殖;流式细胞术检测结果显示,pc DNA3.0-WWOX组细胞的凋亡率显著高于pc DNA3.0-NC组和空白组(P0.05);pc DNA3.0-WWOX组细胞Cyclin D1蛋白的表达显著低于pc DNA3.0-NC组和空白组(P0.05),而Survivn蛋白显著高于pc DNA3.0-NC组和空白组(P0.05)。结论 WWOX mRNA在胃癌中的表达量低于癌旁组织;过表达WWOX可通过降低Cyclin D1蛋白、增加Survivn蛋白抑制胃癌SGC7901细胞的增殖,并促进其凋亡。     

SREBP-1在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1在结直肠癌中的表达特征及其与患者病情及预后的相关性。方法临床收集56例结直肠癌患者肿瘤组织及相应的癌旁组织,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及免疫组化(IHC)技术检测组织中SREBP-1的表达,分析结直肠癌组织SREBP-1 mRNA的表达水平与患者年龄、体重、性别、肿瘤大小、临床Dukes分期及病理学分级的相关性,比较SREBP-1阳性率与患者临床资料间的关系,Kaplan-Meier生存分析法分析患者结直肠癌组织SREBP-1 mRNA的表达与预后的关系。结果 RT-PCR结果显示结直肠癌组织SREBP-1mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),IHC的结果示结直肠癌组织中细胞SREBP-1阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。Spearman相关性分析显示患者结直肠癌组织SREBP-1的表达与患者年龄、性别、体重及肿瘤大小无显著相关性(P>0.05),与患者临床Dukes分期及病理学分级呈显著正相关(P<0.05)。kaplan-Meier生存分析示癌组织中高表达SREBP-1的患者预后不良。结论 SREBP-1高表达于结直肠癌组织,且与肿瘤恶性程度、进展及患者不良预后密切相关,是潜在的结直肠癌标志物。     

缺氧诱导因子-1α与EphA2在食管鳞状细胞癌中的表达及其相关性研究

目的 检测缺氧诱导因子-1α (HIF-1α) 蛋白与EphA2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达定位并探讨二者表达的相关性.方法 采用细胞免疫荧光法检测HIF-1α与EphA2在食管鳞状细胞癌细胞株Eca109中的表达与定位;采用免疫组化法检测HIF-1α与EphA2在41例食管鳞状细胞癌和25例正常食管组织中的表达;常氧和缺氧条件下,Western 印迹法检测食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE13经RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默HIF-1α后EphA2表达的变化.结果 ①细胞免疫荧光结果显示HIF-1α和EphA2均在Eca109细胞胞质表达.②免疫组化结果显示HIF-1α在食管鳞状细胞癌和正常食管组织中的阳性表达率分别为70.73%(29/41)和0%(0/25),两者比较差异有统计学意义(P<0.05).EphA2在食管鳞状细胞癌和正常食管组织中的阳性表达率分别为78.04%(32/41)和28%(7/25),两者比较差异有统计学意义(P<0.05).相关性检验提示HIF-1α和EphA2在食管鳞状细胞癌中表达呈正相关性(r=0.5654,χ~2=13.11,P<0.05).③ Western印迹结果显示在食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE13中,EphA2表达随HIF-1α的沉默而受抑制.结论 HIF-1α与EphA2在食管鳞状细胞癌组织中呈高表达,且二者表达呈正相关;EphA2表达受HIF-1α的调控,可能为HIF-1α的靶基因.     

膀胱内翻性乳头状瘤中EphA2蛋白、mRNA的表达及意义

目的观察膀胱内翻性乳头状瘤（IPB）组织中受体酪氨酸激酶（EphA2）蛋白、mRNA的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组化sP法检测26例IPB（IPB组）、15例低级别膀胱移行细胞癌（BTCC组）和10例正常膀胱组织中的EphA2蛋白。采用逆转录实时定量PCR技术检测各组EphA2 mRNA的表达。结果IPB组、BTCC组EphA2蛋白的表达量（IA值）分别为13826±3996和13112±3587,与对照组的8364±3915相比,P均〈0．05;IPB组与BTCC组相比P〉0．05。以对照组为1,IPB组与BTCC组EphA2 mRNA表达分别上调（2．12±0．95）和（2,01±0．86）倍;IPB与BTCC组比较,P〉0．05。结论IPB组织中EphA2过表达,其可能促进了膀胱内翻性乳头状瘤的癌性转化。     

EphA 2蛋白在大肠腺癌中的表达及与大肠腺癌发生发展的关系

目的探讨EphA2蛋白的表达与大肠腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测154例大肠腺癌和相应正常大肠黏膜组织中EphA2蛋白的表达。结果EphA2蛋白在癌组织中的表达明显高于相应正常大肠黏膜组织（P〈0．001）。EphA2阳性染色定位于相同区域的癌细胞和血管内皮细胞，且EphA2蛋白在癌细胞与血管内皮细胞中的表达呈正相关（r=60．272。P〈0．001）。EphA2蛋白高表达与癌分化程度、浸润深度和大体类型相关（P〈0．05）。而与患者的年龄、性别、肿瘤体积及淋巴结和血行、种植性转移无关（P〉0．05）。结论EphA2蛋白的高表达与大肠腺癌的发生和浸润转移有关。     

EphA2、hMSH2 mRNA在新疆维吾尔族和汉族食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨新疆维吾尔族和汉族食管鳞状细胞癌（鳞癌）基因EphA2和hMSH2 mRNA的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法采用RT-PCR技术检测EphA2和hMSH2 mRNA在30例新疆维吾尔族和30例汉族食管鳞癌组织及其对应的远隔无癌食管组织中的表达。结果 EphA2在食管癌组织和远隔无癌组织中的相对表达量分别为0.269±0.040和0.153±0.023,P=0.013;hMSH2分别为0.674±0.039和0.797±0.035,P=0.022。在汉族和维吾尔族食管鳞癌组织中EphA2的阳性表达率分别为50%和63.3%,P=0.297;hMSH2的阳性表达率分别为40%和50%,P=0.436。EphA2与hMSH2的表达之间呈负相关。结论 EphA2和hMSH2在两民族食管鳞癌中的表达无差异;EphA2高表达和hMSH2低表达可能共同促进食管鳞癌的发生发展。     

EphA7在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 检测EphA7蛋白在胰腺癌组织中的表达,探讨其与胰腺癌发生发展的关系.方法 应用免疫组化方法 检测10例正常胰腺组织、51例胰腺癌及其配对癌旁组织中EphA7蛋白的表达,并分析其与胰腺癌病理参数的关系.结果 正常胰腺组织、胰腺癌旁组织和胰腺癌组织中EphA7蛋白的阳性表达率分别为10%(1/10)、47.1%(24/51)和94.1%(48/51),差异有显著性统计学意义(P<0.05).EphA7蛋白高表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移或远距转移密切相关(P<0.05).结论 EphA7高表达可能与胰腺癌的发生、发展及转移有关.     

E-cad和EphA2在膀胱癌患者癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨E-cad和EphA2在膀胱癌中的表达及意义.方法 通过免疫组织化学法检测E-cad和EphA2在膀胱癌和正常膀胱组织中的表达.结果 E-cad在膀胱癌组织中的阳性表达率为32.39%,正常膀胱组织表达的阳性率为100%.EphA2在膀胱癌组织中表达的阳性率为77.46%,正常膀胱组织表达的异常率为20%.E-cad和EphA2在膀胱癌组织表达呈负相关r=-0.274 94.结论 E-cad和EphA2在膀胱癌组织的表达.可以作为膀胱癌的诊断、转移以及治疗的基础理论依据.     

p27和p-ERK1/2在胃癌中的表达和意义

目的 探讨p27和p-ERK1／2在胃癌中的表达，意义及二者可能的相互关系。方法 免疫组织化学（SP）法检测46例胃癌组织及10例正常胃黏膜中p27和p-ERK1／2的表达。结果 ①胃癌组织中p27阳性表达率28．3％（13／46）明显低于正常胃黏膜组织90％（9／10），其表达水平和组织分化程度、胃壁浸润深度、淋巴结转移等有关。②胃癌组织中p-ERK1／2的阳性表达率47．8％（22／46）明显高于正常胃黏膜组织10％（1／10），其表达水平和胃壁浸润深度、淋巴结转移、TNM分期等有关。③胃癌组织中p27和p-ERK1／2的表达呈明显负相关。结论 ERK1／2基因的活化可以调节p27的表达，二者与胃癌发生发展有关。     

血管内皮钙黏附素下调对食管鳞癌细胞血管生成拟态、增殖和凋亡的影响

背景：血管内皮钙黏附素（VE-cad）作为血管生成拟态的重要调控分子在多种高侵袭性肿瘤中均存在表达,参与肿瘤的发生、发展过程。前期研究发现食管鳞癌细胞中亦存在VE—cad表达。目的：探讨微小RNA（miRNA）干扰技术下调VE-cad对食管鳞癌细胞血管生成拟态形成、细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法：将已成功构建的VE—cadmiRNA干扰质粒稳定转染Eca109、TE13细胞,同时设置阴性对照组（转染空质粒）和空白对照组（未转染）。荧光显微镜观察单克隆转染效率,三维培养观察细胞管腔样结构形成的能力,RT—PCR和蛋白质印迹法分别检测VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA和蛋白表达,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡。结果：荧光显微镜显示Eca109、TE13细胞稳定转染效率均达90％以上。与阴性对照组和空白对照组相比,干扰组细胞管腔样结构数目明显减少（P〈0．01）,VE—cad、EphA2、LN5γ2mRNA和蛋白表达明显受抑（P〈0．01）,细胞增殖能力明显下降（P〈0．05）,凋亡率明显增高（P〈0．05）。结论：miRNA干扰技术能有效抑制食管鳞癌细胞Eca109、TE13的VE-cad表达。VE—cad通过下调EphA2和LN5γ2表达抑制血管生成拟态的体外形成,并影响细胞增殖和凋亡。VE—cad可能成为食管鳞癌分子靶向治疗的新靶点。