多药耐药基因在人原发性肝细胞癌中的表达

建立一种敏感性高、特异性强的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,定量检测了30例原发性肝细胞癌(PHC)患者癌组织及癌周组织中多药耐药基因(mdrl)表达水平,其中5例患者术前经肝动脉插管化疗。结果显示:PHC癌组织中mdrl基因表达较癌周组织高;术前行化疗者癌组织中mdrl基因过度表达,同时其癌周组织中mdrl的表达较未化疗的癌周组织高。我们认为mdrl基因的过度表达在PHC内在性或获得性药物耐受的产生中起着一定的作用。     

人原发性肝癌病人多药耐药基因表达及意义

目的 探讨原发性肝癌（ＰＨＣ）癌组织及癌周组织ｍｄｒｌ表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高,特异性强的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,定量检测４８例ＰＨＣ病人癌组织及癌周组织中ｍｄｒｌ表达水平。其中１８例病人要前行肝动脉化疗栓塞（ＴＡＣＥ）治疗。结果 ＰＨＣ癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为６３．３％,远高于癌周组织的２６．７％（Ｐ〈０．０１）;术前行ＴＡＣＥ组癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为８８．９％,远比未化疗组６３．３％高。结论 ＰＨＣ存在内源性ＭＤＲ和获得性ＭＤＲ,ｍｄｒｌ高表达是ＰＨＣ病人ＭＤＲ产生的重要机制之一。     

多药耐药相关蛋白基因在原发性肝细胞癌组织中的表达及意义

目的　研究原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的表达及意义。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5例新鲜原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中MRPmRNA的表达 ,用免疫组织化学技术LSAB法检测 60例肝细胞癌组织中MRP蛋白的表达 ,并结合流式细胞仪对体外化疗药物敏感性的检测结果进行统计学分析。结果　原发性肝细胞癌组织中MRPmRNA与MRP蛋白表达阳性率分别为 44 .0 0 % (11/2 5 )和 45 .0 0 % (2 7/60 ) ,均以中、低表达为主 ,明显高于癌周肝组织中MRPmRNA和MRP蛋白的表达阳性率〔2 8.0 0 % (7/2 5 )、2 6.67% (16/60 )〕 ,P<0 .0 5 ;5例复发性肝癌的MRP蛋白表达阳性率和表达强度呈增高的趋势。在RT PCR检测的 2 5例患者中 ,该两项指标具有良好的一致性 (P<0 .0 5 )。肝细胞癌在体外对化疗药物 5 FU、DDP、ADM、MMC及CTX的敏感性分别为 (15 .80± 7.63 ) %、(18.45± 9.5 9) %、(17.95± 7.99) %、(16.60± 8.69) %和 (17.40± 10 .14 ) %。MRP蛋白表达阳性者对 5 FU、ADM的敏感性低于阴性者 (P<0 .0 5 )。结论　MRP基因在原发性肝细胞癌组织中的表达可能在肝癌内在性和获得性耐药中起重要作用 ,检测MRP基因表达有助于预测化疗反应和选择合理的化疗方案。     

原发性肝癌多药耐药基因的表达及其意义

目的 探讨５种多药耐药（ＭＤＲ）基因肝癌组织中的表达,建立ＭＤＲ的基因诊断标准。方法 用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,流式细胞术检测肝癌组织中５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ和蛋白质的表达,用四氮唑蓝快速比色（ＭＴＴ）法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的ＩＣ５０值。结果 肝癌耐药涉及ｍｄｒ１,ＭＲＰ,ＬＲＰ,ＧＳＴｐ１和ＴｏｐｏⅡα基因,ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ≥０．５、ＭＲＰｍＲＮＡ≥０．６、ＬＲＰ ｍｒｎＡ     

原发性肝癌多药耐药基因的表达及意义

目的 探讨５种多药耐药（ＭＤＲ）基因在肝癌组织中的表达,建立ＭＤＲ的基因诊断标准。方法 用逆转录ＰＣＲ、流式细胞术检测肝癌组织中５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ和蛋白质的表达,用ＭＴＴ法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的ＩＣ５０值。结果 肝癌耐药涉及ｍｄｒ１、ＭＲＰ、ＬＲＰ、ＧＳＴＰ１和ＴｏｐｏⅡα基因。ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ≥０．５、ＭＲＰ ｍＲＮＡ≥０．６、ＬＲＰ ｍＲＮＡ≥０．８、ＧＳＴＰ１ ｍＲＮＡ≥０．７Ｔ ＴｏｐｏⅡαｍＲＮＡ≤０．４为耐药联合诊断标准,符合率为９８．００％。结论 多重ＭＤＲ是肝癌耐药的主要形式。用逆转录ＰＣＲ方法联合检测５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ表达在肝癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性。     

多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达的检测在原发性肝细胞癌中的临床意义

化疗在原发性肝癌以手术为主的综合治疗中发挥着重要作用 ,而多药耐药的产生可能是其临床化疗失败的原因之一。近来研究提示MRP基因过表达参与了癌细胞多药耐药的发生〔1〕,检测其表达可能具有重要的临床意义。本研究运用RT PCR和免疫组织化学技术 ,检测原发性肝细胞癌组织中MRP的表达 ,结合临床病理资料 ,探讨MRP基因表达在原发性肝细胞癌中的临床意义。1.材料与方法 :(1)标本 :RT PCR检测新鲜标本 2 5例 ,随机选自我院 1999年 9月～ 2 0 0 0年 3月间行手术切除、经病理证实的原发性肝细胞癌 ,并同时取得癌周 2cm处肝组织。免疫组…     

多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的　研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法　采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果　MRP和LRP在 3种组织中均有表达,HCC组织中其基因表达显著高于其他组织 (P< 0. 0 5 )。HCC中两种基因表达呈正相关 (r= 0. 3 1 2, P <0. 0 5; r= 0. 3 2 8, P< 0. 0 5 );其表达与HCC的分化程度有关 (P< 0. 0 5 )。并且其表达阳性组患者化疗后AFP有效率和平均生存期分别高于和长于阴性组 (P< 0. 0 5 ),但LRP与平均生存期无关 (P> 0. 0 5 )。结论　HCC多药耐药 (MDR)与两种基因表达有关,起源于内源性耐药;检测其表达对预测化疗耐药具有指导意义;MRP可能与预后有关。     

多药耐药基因mdr1在肝细胞性肝癌中的表达及其意义

目的　探讨肝细胞性肝癌 (HCC)中多药耐药基因mdr1的表达及其与肝癌临床病理特征、肿瘤多药耐药和患者预后的关系。方法　用免疫组化染色方法检测 5 6例HCC细胞中mdr1基因的表达 ,并结合临床病理指标进行统计分析。结果　 5 6例HCC病例中mdr1基因的表达 :癌旁组织中 19例阳性 (3 3 .9% ) ,癌组织中 3 0例阳性 (5 3 .6% ) ,两者比较差异有显著性 (χ2 =4.3 9,P<0 .0 5 )。 48例初治患者中 2 2例阳性 (4 5 .8% ) ,8例复发者均为阳性 (10 0 % )。按肿瘤大小、数目、包膜有无、癌栓有无、分化程度、HBsAg等分组 ,其间mdr1表达差异无统计学意义。mdr1表达阳性组与阴性组 1、2、3年生存率比较 ,其差异无统计学意义。结论　mdr1在HCC中表达阳性率为 5 3 .6% ,其表达与肿瘤大小、数目、包膜有无、癌栓有无、分化程度、HBsAg和肝硬变情况无关 ;HCC具有原发性耐药。     

多药耐药基因MDR1在原发性肝癌组织中表达的意义

肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性的原因有几种，其中最主要的是多药耐药基因MDR1。应用免疫组化方法测定30例原发性肝癌（PHC）癌组织和癌周组织中MDR1的表达产物Pgp（P-gly-coprotein，PgP），结果显示，PHC癌组织中MDR1基因表达阳性率（60．0％）远较癌周组织高（23．3％）。化疗后肿瘤组织MDR1阳性率（88．9％）较未化疗瘤的癌组织（47．6％）高。结合临床资料分析，MDR1基因的过度表达在我国PHC的内在性和获得性药物耐受产生中起着一定的作用。关键词:##4多药耐药基因;;原发性肝癌     

短发夹RNA/MDR1逆转肝细胞癌多药耐药

目的 探讨短发夹RNA/MDR1(shRNA/MDR1)干扰技术能否体内逆转肝细胞癌多药耐药.方法 建立肝细胞癌耐药细胞株HepG2/MDR1和敏感细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型,分腹腔注射组和瘤体内注射组,以表达载体pSUPER-shRNA/MDR1转染,阴性对照组以阴性载体pSUPER转染,72 h后行腹腔内阿霉素化疗试验,每周2次,共2周,然后处死动物,测量化疗前后肿瘤体积差,瘤体制成细胞悬液和组织切片,分别以流式细胞术和免疫组织化学检测细胞膜P-gp表达.结果 成瘤率100%,HepG2/MDR1组和HepG2组成瘤时间和化疗前肿瘤体积差异无统计学意义,HepG2/MDR1组化疗前后肿瘤体积差(mm3)与阴性对照组比较差异有统计学意义(700.14±25.61比1659.70±152.54,P＜0.01);腹腔注射组和瘤内注射组差异无统计学意义.流式细胞术检测发现治疗组细胞膜蛋白P-gp表达率(%)较阴性对照组明显下调(65.1%比94.1%,P＜0.05),腹腔注射组和瘤内注射组差异无统计学意义(94.1%比92.8%,P＞0.05).瘤体组织病理切片和免疫组织化学分析也有同样的结果.结论 表达载体pSUPER-shRNA/MDR1体内转染可以逆转肝细胞癌多药耐药.     

多药耐药相关蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 研究人肝细胞癌组织中多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）的表达情况并探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测了１１０例随访资料完整的肝细胞癌石蜡切片组织中ＭＲＰ表达情况，并与临床病理指标联系，进行统计学分析。结果 本组肝细胞癌１１０例，表达阳性５７例，其阳性率为５２％。术前行经肝动脉栓塞化疗（ＴＡＣＥ）及未行ＴＡＣＥ治疗者的ＭＲＰ阳性率分别为５１％（１９／３７）和５２％（３８／７３）。ＭＲＰ与癌     

原发性肝细胞癌肺耐药蛋白基因Irp表达及其意义

目的 :研究肺耐药蛋白基因Irp在原发性肝细胞癌 (PHC)化疗中产生的多药耐药机制及其与PHC的临床病理关系 ,对甲胎蛋白 (AFP)的影响和术后预后的意义。方法 :采用S P免疫组织化学法和原位PCR技术对 5 4例未化疗的PHC、2 4例PHC癌旁和 12例肝炎后肝硬化存档石蜡包埋组织中Irp基因编码的LRP和mRNAIrp的表达进行检测 ,对术后 2 4例AFP阳性的PHC病人进行术后化疗 ,分析Irp基因表达与AFP变化关系。 结果 :LRP和mRNAIrp在 3种组织中的阳性表达率分别为6 1.1%,33.3%,16 .7%和 75 .9%,37.5 %,33.3%,PHC组织中Irp基因表达显著高于其他组织 (P <0 .0 5 )。Irp基因表达与PHC的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,与PHC病人的年龄、性别、肿瘤大小等临床病理资料无关 (P >0 .0 5 )。Irp基因表达阳性组病人术后化疗AFP有效率显著低于Irp基因表达阴性组病人 (P <0 .0 5 )。术后随访Irp基因表达阴性组病人平均生存时间长于阳性组病人 ,但无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论 :PHC多药耐药 (MDR)与Irp基因表达有关 ,Irp基因可作为临床化疗耐药指标 ,检测Irp基因表达有助于PHC个体化疗方案制订 ,并为MDR逆转提供依据。Irp基因表达与PHC的分化程度有关 ,可能与病人的预后无关。     

bcl-2基因表达在人膀胱癌多药耐药现象中的意义

目的探讨ｂｃｌ２基因在人膀胱癌多药耐药中的作用。方法应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法（ＴＵＮＥＬ）、免疫细胞化学及逆转录多聚酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）技术,分别对阿霉素诱导的人膀胱癌耐药细胞株（ＢＩＵ８７／ＡＤＭ）及敏感细胞株（ＢＩＵ８７）的细胞凋亡及其ｂｃｌ２基因表达进行研究。结果（１）在相同条件下,与敏感细胞株相比,耐药细胞株中细胞凋亡明显受到抑制;（２）耐药细胞株中ｂｃｌ２基因表达明显强于敏感细胞株。结论凋亡抑制基因ｂｃｌ２在人膀胱癌多药耐药细胞中的高表达,是导致其细胞凋亡受抑制的重要原因,对于人膀胱癌多药耐药的产生具有重要意义。     

肝细胞癌SMC7721体内外多药耐药模型的建立及其耐药机制

目的 建立肝细胞癌SMC7721体内外多药耐药细胞株并探讨其耐药机制.方法 通过阿霉素浓度递增筛选出SMC7721/ADM肝癌多药耐药细胞株并建立裸鼠移植瘤模型;噻唑蓝(MTr)检测各组移植瘤对化疗药物的耐药性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测MDR1和BCRP在各组移植瘤中的表达.结果 SMC7721/ADM对阿霉素,丝裂霉素,5-Fu的耐药性均较亲本细胞明显降低(P<0.01);其移植瘤对3种化疗药物的IC50.均明显低于亲本细胞(P<0.05);SMC7721/ADM细胞中MDR1 mRNA表达是亲本细胞的40.13倍(P<0.01);BCRP mRNA表达与亲本细胞差异无统计学意义(P>0.05).其移植瘤中BCRP mRNA表达是亲本细胞移植瘤的3.69倍(P<0.01);而MDR1 mRNA表达与亲本细胞差异无统计学意义(P>0.05);SMC7721/ADM细胞株中两种蛋白表达显著高于亲本细胞株(P<0.01);SMC7721/ADM移植瘤中BCRP蛋白表达显著高于亲本移植瘤(P<0.01),而两者中MDR1表达差异无统计学意义(JP>0.05).结论 MDR1和BCRP在SMC7721/ADM多药耐药的不同阶段起作用并介导肝细胞癌对不同药物的耐药性.     

微环境诱导肝细胞癌多药耐药的形成及机制

目的探讨微环境在肝癌多药耐药（MDR）表型形成中的作用，并初探其作用机制，为逆转肝癌耐药提供有效的新的分子靶点。方法模拟肝癌体内生长的局部微环境，使HepG2细胞分别在缺氧、低糖的微环境下生长或稳定整合HBX基因。应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术和Westernblot技术分别检测这些局部微环境因素作用下的HepG2细胞内多药耐药相关基因mdr1、肺耐药相关蛋白基因（LRP）、多药耐药相关蛋白基因（MRP1）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的mRNA和蛋白水平的表达。同时运用免疫细胞化学技术检测肝癌耐药细胞株中HIF-1α蛋白的表达。以及检测转染了HIF-1α质粒的HepG2细胞中上述相关多药耐药基因的表达。结果在缺氧、低糖环境下生长或稳定整合了HBX基因的HepG2细胞均不同程度地高表达多药耐药相关基因和HIF-1α；在肝癌耐药细胞株中HIF-1α蛋白高表达；稳定转染了HIF-1α质粒的HepG2细胞显著高表达多药耐药相关基因。结论肝癌生长的微环境可通过核转录因子HIF-1α调控多药耐药相关基因的表达。从而诱导肝癌多药耐药表型的形成；HIF-1α有望成为逆转肝癌耐药的新的分子靶点。     

多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因在食管、贲门癌中的表达

目的　探讨多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)在食管癌、贲门癌中表达的临床意义。　方法　采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR),对29例食管癌、贲门癌癌组织及癌旁组织中MDR1和MRP的表达进行检测。　结果　癌组织中MDR1阳性率为65.5%,高于癌旁组织中MDR1的阳性率,为37.9%(P<0.05),癌组织MDR1信使核糖核酸(mRNA)表达水平也显著高于癌旁组织(P<0.01);癌组织的MRP阳性率为48.3%,高于癌旁组织(27.6%),但无差异(P>0.05),而癌组织MRPmRNA表达水平与癌旁组织比较则有差异(P<0.05);中、低分化肿瘤的MDR1和MRP表达阳性率增高,两基因的mRNA表达水平显著高于高分化肿瘤(P<0.05)。　结论食管、贲门癌具有内源性多药耐药性;MDR1和MRP表达与食管、贲门癌的组织学类型及TNM分期无关,但可反映其肿瘤组织分化不良的生物学特征     

多药耐药基因在原发性肝癌的表达及其临床意义

目的 探讨多药耐药基因（MDR）在原发性肝癌中的表达及其临床意义。方法 取肝细胞癌标本64例，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法半定量检测肝癌多种多药耐药基因的基因表达情况，分析其临床意义。结果 （1）各多药耐药基因的表达率高，各耐药基因的表达率差异无统计学意义。（2）各多药耐药基因的表达量差异无统计学意义。（3）MDRl、多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽S转移酶（GST）-π和肺耐药蛋白（LRP）的mRNA表达量有随分级而增高的趋势；DNA拓扑异构酶（TOPOⅡ）的mRNA表达量有随分级而下降的趋势。（4）肝癌MDR基因mRNA表达量与肿瘤大小、有无转移、有无包膜和结节数目有关，与AFP水平、肝硬化情况、肝功能状况无关。（5）在有效组中MDR1、MRP、GST-Ⅱ LRP mRNA的表达量低于无效组；TOPOⅡ mRNA的表达量有效组高于无效组，差异无统计学意义。结论 在肝癌多药耐药基因mRNA的表达率高；在肝癌多药耐药的基因mRNA的表达与肿瘤大小、有无转移、结节数目、有无包膜相关，与化疗的疗效相关。     

肺耐药蛋白基因(lrp)与原发性肝细胞癌化疗敏感性研究

我们采用SP免疫组织化学方法和原位PCR技术对 5 4例术前未化疗的术中未能切除的原发性肝细胞癌(PHC)病人进行lrp检测。观察肝癌lrp表达与术后病人化疗疗效及AFP变化的关系 ,现总结如下。1.材料和方法 :(1)标本和临床资料 :收集我院 1995～ 1997年 5 4例肝癌、2 4例其癌旁和 12例肝炎后肝硬化组织的存档石蜡包埋切片标本 ,所有标本均经HE染色和病理确诊。 5 4例肝癌病人男 4 6例 ,女 8例 ,年龄 18～ 72岁 ,平均年龄 4 6岁。所有病人均采用开腹经皮下肝动脉置泵化疗。其中 2 0例术中辅以冷冻治疗 ,38例术后 2周AFP持续阳性。 (2 )SP免…     

肝细胞癌P—gp的表达与临床病理的关系

恶性肿瘤化疗效果不佳，大多数是由于肿瘤产生了耐药性〔１〕。目前有关肿瘤多药耐药（ＭＤＲ１）基因的报道日趋增多，有人发现ＭＤＲ１基因及产物Ｐ糖蛋白（Ｐｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，Ｐｇｐ）在Ｆｉｓｃｈｅｒ大鼠肝细胞癌（ＨＣＣ）中过度表达，且与肿瘤的生物学行为有一定关系〔２〕。但人肝癌Ｐｇｐ的表达研究甚少。我们应用显微图像分析仪对肝癌Ｐｇｐ免疫组织化学结果进行定量分析，并探讨其含量与肿瘤临床病理特征的关系。材料与方法１９９６年６月至１９９７年７月手术切除且病理证实的ＨＣＣ标本４７例，男３９例，…     

肝细胞癌多药耐药机制及其逆转策略研究进展

近20年，肝细胞癌（HCC）的外科治疗取得了明显进步，但单纯通过外科手术提高HCC的治疗效果已无太大发展空间。HCC的低切除率、高复发率决定了化疗在综合治疗中应占有重要地位。但HCC化疗的现状令人失望。其主要原因之一是HCC的多药耐药（MDR）。现结合相关肿瘤MDR的研究成果。综述HCC的MDR研究进展。