兔眼球石蜡切片制作技术探讨

目的简化改良兔全眼球石蜡切片的制作方法。方法选取动物实验中心双眼行小梁切除术制模后的家兔14只，摘除眼球，固定、脱水、加压包埋、切片，行HE、α-SMA免疫组化染色，光镜下观察。结果该法制作的眼球切片组织结构收缩变形较小，各层组织结构均保存完好，染色清晰，并且，同一眼球的双侧房角可互相对照。结论该法制作家兔眼球石蜡切片操作简便、耗费低廉、节约时间、制作理想，值得在相关研究中推广使用。     

不同固定剂对冰冻切片免疫组化结果的影响

目的分析不同固定剂对冰冻切片免疫组化的影响,寻找出最佳的冰冻切片免疫组化的固定剂。方法取常见的组织或肿瘤6种,冰冻切片后,置于6种不同冰冻固定液,95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮、EAF(配方为无水乙醇85mL、冰醋酸5mL、40%甲醛10mL)、AAF(配方为丙酮85mL、冰醋酸5mL、40%甲醛10mL),固定5min,根据组织含有的特定抗原进行相应抗体的免疫组化染色,结果采用中国病理学工作者委员会免疫组化质控中心推荐的免疫组化质控评分标准进行评分。结果不同的固定剂可直接影响到冰冻切片免疫组化染色的成败和质量的高低,甚至会造成假阴性;混合固定液EAF优于其它固定液,其它五种固定液的染色效果依次为AAF、95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮。结论用冰冻切片做免疫组化染色,对于大多数抗体而言,EAF固定液的效果优于其他5种固定液。     

免疫组化技术（二）

2 免疫组化理论 2.1 免疫组织化学免疫组织化学是一项用抗原-抗体相互作用鉴别细胞或组织成分(抗原)的技术,抗体连接的位点可通过抗体直接标记或使用二级标记法鉴别.     

优化甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取预处理对STR分型有效性的研究

目的通过对甲醛固定石蜡包埋组织（FFPET）DNA提取进行优化处理,确定满足FFPET样本进行短片段重复序列（STR）完整分型的条件。方法改变石蜡切片厚度、离心速率和时间、组织用量和消化液体积等参数提取FFPETDNA,并对提取的DNA样本进行常规STR扩增检验。结果优化方法处理后可以提取到较高质量DNA（1000bp）,经扩增均可以检出性别基因座（amelogenin）和15个以上STR基因座。结论 FFPET优化方法能够提高DNA提取的质量,适合STR分型研究。     

细针穿刺细胞块石蜡包埋切片技术联合CK19、CD56、Galectin-3、HBME-1检测在甲状腺结节诊断中的临床意义

目的 探讨细针穿刺细胞块石蜡包埋切片技术联合人骨髓内皮细胞标记物-1(H BME-1)、细胞角蛋白19(CK19)、半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、CD56检测在甲状腺结节诊断中的临床意义.方法 选取2018年7月至2020年5月于该院进行甲状腺结节细针穿刺病理检查的196例患者为研究对象,根据制片方法不同分...     

用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法

背景：甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物。目的：建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法。方法：将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异。结果与结论：柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液比单纯高温修复10～20min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度（10mg/L）能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本。进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团。提示柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液,选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量。     

改进病理包埋技术对误漏诊的预防

在临床实践中，我们发现在使用包埋机常规方法包埋微小组织时，常会出现多块小组织分散，甚至有时多块组织不在同一平面上。前者给连续切片和阅片者带来许多不变，而后一种情况则将导致切片时有的组织切没了，而有的组织还没有切到，即不能一次切出完整的切片。容易造成漏诊或误诊。针对这一情况笔者采用了两步包埋法包埋微小组织取得良好效果。现介绍如下。     

组织芯片技术在免疫组化及原位杂交阳性对照中的应用

组织芯片亦称组织微阵列(tissue microaryyay,TMA)是将数十个、数百个组织标本整齐地排列在同一张载玻片上的微缩组织切片。组织芯片具有高通量、节约组织原材料和检测试剂、实验条件一致性及实验结果可比性好、实验误差小等优点，在病理学研究中有广阔的应用前景…。我们利用组织芯片技术制作免疫组化及原位杂交的阳性对照组织芯片，将阳性对照的组织芯片与待检测的组织裱在同一张玻璃切片上，进行免疫组化及原位杂交染色，取得了比较理想的结果，现介绍如下。     

胸腔积液细胞块切片免疫组化染色技术对肺腺癌的诊断价值

目的 探讨胸腔积液细胞块切片免疫组化染色技术对肺腺癌的鉴别诊断价值。方法 选取巩义市人民医院2017年6月至2019年6月收治的73例胸腔积液患者,所有患者入组后均采集胸腔积液标本,均行常规细胞涂片检查、胸腔积液细胞块切片免疫组化染色检查,比较HE染色结果、两种诊断方法对恶性胸腔积液的诊断率,并分析细胞块免疫组化的免疫标记染色结果。结果 细胞块切片HE染色对胸腔积液的诊断结果与常规涂片HE染色比较,差异未见统计学意义(P 0. 05);细胞块切片免疫组化染色诊断恶性胸腔积液诊断率优于常规涂片免疫组化染色,差异有统计学意义(P 0. 05);本研究病理最终诊断有36例恶性,细胞块切片免疫组化染色诊断34例与病理诊断相符,符合率为94. 44%(34/36)。肺腺癌CD15、TTF-1、Be-rEP4、CK17阳性表达率较高,而间皮性肿瘤的WT-1、CK5/6、Desmin阳性表达率较高。结论 细胞块切片免疫组化染色技术可提高恶性胸腔积液诊断的符合率,可为临床诊断肺腺癌提供重要依据。     

使用生物组织快速脱水仪制备石蜡切片的体会

目前国内手术中快速病理诊断多用冷冻切片或传统加温快速石蜡切片技术，但冷冻切片中易出现细胞肿胀等人为假象，传统加温快速石蜡切片制备过程复杂，安全性差，且易造成组织收缩和硬变。为克服上述不足，我们应用生物组织快速脱水仪制备石蜡切片，方便快捷，效果良好。     

细胞块免疫组化技术在胸腔积液病理诊断中的应用

目的分析胸腔积液患者采用细胞块免疫组化技术检测的病理诊断价值。方法选取2017年3月～2018年3月本院收治的胸腔积液患者90例,所有患者先后行细胞块免疫组化技术检测、常规细胞学涂片检测,比较两种检测方法对胸腔积液的诊断情况。结果细胞块免疫组化技术检测对胸腔积液阳性检出率为100.00%,明显优于常规细胞学涂片检测检出率72.22%,差异有统计学意义(P0.05);抗体表达检测结果显示,CK5/6、Calretinin、WT-1、Desmin是间皮性肿瘤的特异性抗体,CEA、CD15、TTF-1、CK7、Ber EP4、MOC-31是肺腺癌的特异性抗体,各类抗体在间皮性肿瘤细胞、腺癌细胞上交叉表达。结论胞块切片免疫组化染色技术对胸腔积液检出率高,能准确鉴别积液的良恶性性质,为临床治疗提供准确的诊断依据,具有较高的诊断价值。     

FFPE组织HPV检测技术的研究进展

<正>宫颈癌是威胁女性生命健康最主要的恶性肿瘤,其主要致癌因素是持续性人乳头瘤病毒(HPV)感染^[1]。我国女性高危型HPV(HR-HPV)感染率为19%,与全球其他地区基本一致,感染率位于前5的HPV型别分别为16、52、58、53、18型^[2]。HPV检测是宫颈癌筛查的重要手段,国内已有一百余种HPV核酸检测试剂盒,其均主要适用于宫颈脱落细胞标本^[3]。然而,当新鲜标本无法检测或用于回顾性流行病学研究时,需使用活检组织标本替代。     

胸腔积液细胞块切片免疫组化染色技术对肺腺癌的鉴别诊断价值

研究分析胸腔积液细胞块切片免疫组化染色技术对肺腺癌的鉴别诊断价值,为临床诊断提供指导。选取2016年1月~2016年6月我院收治的76例胸腔积液患者为研究对象,采集患者胸腔积液,分别使用细胞块切片免疫组化染色技术和细胞涂片检查,比较两种检查方法诊断肺腺癌的准确性。细胞涂片HE染色和细胞块切片HE染色对胸腔积液的诊断结果无显著差异(P0.05);细胞块切片免疫组化染色技术对恶性胸腔积液的诊断率及诊断符合率均明显高于细胞涂片检查结果(P0.05);肺腺癌细胞中TTF1、CD15、CK17、Ber EP4阳性率分别为88%、92%、100%、100%均明显高于良性细胞及间皮性肿瘤细胞;良性细胞中WT-1、Desmin、CK5/6阳性率分别为98%、100%、100%明显高于其他细胞,肺腺癌细胞与间皮性肿瘤细胞中WT-1、Desmin、CK5/6、TTF1、CD15、CK17、Ber EP4阳性率存在明显差异。以上数据组间比较差异显著(P0.05)。细胞块切片免疫组化染色技术用于恶性胸腔积液诊断准确率高,可为临床诊断肺腺癌提供科学合理的参考依据,具有较高的诊断价值。     

免疫组化技术(三)

2.3标记物 2.3.1酶标记酶是在免疫组化中最广泛使用的标记。通过标准的免疫组化方法,酶能够与色原一起进行孵育,产生适用于光学显微镜的稳定有色的反应终产物。此外,多样的酶和色原的合用使得用户可选择反应终产物的颜色。辣根过氧化物酶是使用最广泛的酶,而且可与最受偏爱的色原联用如对二氨基联苯胺（DAB）它可产生干净利落的、不溶的、稳定的、暗棕色的反应终产物（Graham和Karnovsky,1966）。     

血浆凝固法胸腹水细胞块技术的临床应用

脱落细胞病检是目前各级医院病理科的1个工作重点与发展方向,其中胸腹水细胞学检查在制片与诊断技术上都存在很大困难.我院研制的血浆凝固法胸腹水细胞块技术在制片方面取得了较好的效果,也提高了诊断质量.现报告如下.     

石蜡包埋技术全程标准化探讨

病理切片质量好坏,直接影响到对疾病的判断和治疗.切片制作过程中每一环节都很重要,包括良好的组织固定、组织处理、染色和封片,但最容易毁坏组织切片的步骤是不合适的组织包埋[1].《临床技术操作规范病理学分册》[2]对组织块石蜡包埋技术有规范化要求,但具体操作标准细节并不完善,需病理技术人员去解读和细化实践.多年来,我国病理...     

利用组织芯片技术探讨免疫组化染色中二抗回收的可行性

目的应用组织芯片技术,在免疫组化超敏二步法中对二抗回收的可行性进行探讨。方法根据所测试抗体的不同,选取本院病理科48例中性甲醛固定、石蜡包埋的组织标本（包括正常及病变的组织）,用组织芯片制作仪构建1个组织芯片蜡块。用免疫组化超敏二步法试剂分别测试3种单克隆抗体（Vimentin、CK和Ki-67）。结果经平行的免疫组化染色后,在48例的试验中,未经使用的二抗与经一次使用后回收的二抗显色的结果相同或相似。结论在此次免疫组化染色测试中,组织芯片显示了其信息含量多、可比性强及省时、省力等优点,二抗显色的结果相同或相似（P〉0.05）,提示超敏二步法中二抗回收是可行的。     

FFPE组织HPV检测中PCR-反向点杂交技术的应用:两种核酸提取方法的比较

目的 比较两种不同核酸提取方法在人乳头瘤病毒(HPV)亚型检测中的应用,为实验室选择相应的核酸提取方法来获得有效的HPV结果提供依据。方法 收集25例浸润性宫颈癌福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织标本,采用粗提法和纯化法两种核酸提取方法提取DNA标本,并通过检测DNA浓度、纯度及内参β-Globin来评估DNA质量。将提取的DNA经PCR扩增后,应用PCR-反向点杂交法检测HPV亚型,分析两种提取方法HPV检测结果的有效性及一致性。结果 两种提取方法均能获得适量的DNA用于HPV检测,粗提法较纯化法可获得较高的DNA浓度(P<0.05),但存有一定有机物及蛋白质污染。纯化法较粗提法获得的DNA纯度更高(P<0.05)。将粗提法和纯化法提取的DNA用于检测HPV感染,总HPV阳性率分别为92%和96%。采用粗提法提取的DNA标本高危型HPV(HR-HPV)阳性率低于纯化法(92%vs. 96%),但单一型HPV16阳性率高于纯化法(44%vs. 36%);与纯化法相比,粗提法提取的DNA无法检测出更多型别的混合感染,而FFPE组织标本经纯化法分离后可检测出HPV33、HPV...     

二代测序技术在儿童T淋巴母细胞淋巴瘤全外显子测序中的应用

目的建立从石蜡包埋的儿童T淋巴母细胞淋巴瘤（T-LBL）病理组织中提取基因组DNA,采用二代测序技术行全外显子测序检测的方法并分析其可行性。方法从10例儿童T-LBL石蜡包埋组织中提取基因组DNA,PCR反应扩增后采用二代测序技术行全外显子测序检测并确定致病位点,所获得的致病突变采用Sanger测序法测序确认,比较两种方法的一致性。结果10例石蜡包埋T-LBL组织标本中均成功提取到基因组DNA,采用二代测序技术开展全外显子测序测序均检测到致病突变;二代测序检测结果经Sanger测序法验证,证实致病突变确实存在,且与Sanger测序结果一致。结论基于二代测序技术的全外显子测序测序可用于检测石蜡包埋的儿童T-LBL病理标本的致病突变。     

免疫组化技术在成人肾皮质肿瘤针吸活检诊断中的作用:离体实验研究(英)

Al-Ahmadie HA...//Role of immunohistochemistry in the evaluation of needle core biopsies in adult renal cortical tumors:an exvivo study.Am J Surg Pathol,2011,35(7):949-961.目前肾肿瘤有多种治疗方法可供选择,致使病理医师凭借有限的材料做出正确诊断的压力越来越来,因此不提倡仅凭