白果内酯对脓毒症急性肺损伤大鼠TLR4/NFκB信号通路及Th1/Th2细胞的影响

【摘要】目的 探讨白果内酯（BB）对脓毒症致急性肺损伤（ALI）大鼠Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及辅助性T细胞1/2（Th1/Th2）的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组(ALI组)、BB低（2.5 mg/kg）剂量组、BB高（10 mg/kg）剂量组、地塞米松阳性对照组（0.45 mg/kg）,每组各10只,除Sham组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症ALI模型,术后6 h各药物组经尾静脉注射相应剂量药物,Sham组、ALI组经尾静脉注射生理盐水,均3次/d,共3 d。末次给药1 h后处死大鼠,取肺组织,以苏木精-伊红染色（HE）检测各组大鼠肺组织病理变化;以酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测大鼠肺组织氧化物酶(MPO)活性、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;凝胶电泳迁移率转变分析（EMSA）法检测肺组织 NF-κB 活性;以蛋白免疫印迹法检测肺组织中TLR4通路蛋白表达;采用流式细胞仪(FACS）检测肺脏细胞中辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)比值。结果 与Sham组相比,ALI组大鼠肺组织可见水肿、炎性细胞浸润等病理损伤,肺组织MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显升高（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显降低（P＜0.05）。与ALI组相比,BB低、高剂量组及地塞米松阳性组肺组织水肿、炎性细胞浸润等病理损伤减轻,肺组织MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显降低（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显升高（P＜0.05）。与BB低剂量组相比,BB高剂量组及地塞米松阳性组肺组织水肿、炎性细胞浸润等病理损伤减轻,MPO、IL-6、TNF-α含量、TLR4蛋白表达、NF-κB活性均明显降低（P＜0.05）,Th1/Th2、TNF-α/IL-6均明显升高（P＜0.05）。结论 BB可抑制TLR4/NF-κB信号通路活化,调节Th1/Th2平衡,减轻炎性介质释放,改善脓毒症ALI大鼠肺组织损伤。     

卡托普利对急性肺损伤大鼠血清TNF—α和IL-8浓度的影响

目的：探讨烟雾吸入导致大鼠急性肺损伤（ALI）时血清TNF—α、IL-8含量变化及卡托普利对ALI和TNF-α、IL-8的影响。方法：36只健康成年Wistar大鼠随机平均分成正常对照组、烟雾致伤组（ALI组）和卡托普利干预组（CAP组）。CAP组腹腔注射卡托普利（5mg／kg），对照组和ALI组则腹腔注射等量生理盐水。15min后复制大鼠重度烟雾吸入性肺损伤模型。致伤后5min、5h分别采动脉血进行血气分析，检测烟雾致伤后5h血清TNF—α、IL-8含量，光镜观察肺病理形态学变化。结果：ALI组致伤后5h血清TNF-α、IL-8含量明显高于正常对照组（P〈0．01），肺组织病理学改变明显；CAP组致伤后5h血清IL-8含量显著低于ALI组（P〈0．05），肺损伤相对较轻。结论：TNF-α、IL-8可能在烟雾吸入性ALI中起重要作用，卡托普利能降低大鼠ALI时血清IL-8浓度，减轻烟雾吸入致ALI时的肺组织损伤。     

热休克蛋白70减轻大鼠急性坏死性胰腺炎机制的实验研究

目的 探讨热休克蛋白70减轻大鼠急性坏死性胰腺炎的机制.方法 80只SD大鼠随机分为4组,急性坏死性胰腺炎模型组（A）、假手术组（B）、温生理盐水腹腔灌洗预处理后急性坏死性胰腺炎（ANP）组（C）和温生理盐水腹腔灌洗和丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）抑制剂（SB202190）预处理后ANP组（D）,ANP模型由5%牛黄胆酸钠大鼠胰胆管逆行注射诱发而成.C组使用温生理盐水持续腹腔灌洗30 min,10 h后造ANP模型;D组在使用温生理盐水腹腔冲洗后,立刻行SB202190（10 mg/kg）腹腔注射,10 h后制造ANP模型.ANP术后6 h处死大鼠,检查各组大鼠血清细胞因子IL-6、TNF-α和IL-8;血清淀粉酶;取胰腺组织行病理检查,并使用PCR方法检测胰腺中热休克蛋白70（HSP70）/p38-MAPK的表达.结果 SB202190预处理组大鼠血清淀粉酶[（1779.77±84.90）U/L]和温生理盐水腹腔灌洗预处理组[（2845.70＆#177;204.78）U/L]明显低于ANP组[（4064.93±188.97）U/L,P＜0.05],但高于假手术组[（1221.47±54.58）U/L,P＜0.05];SB202190预处理组低于温生理盐水腹腔灌洗预处理组（t＝3.329,P＜0.05）.SB202190预处理组和温生理盐水腹腔灌洗预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8明显低于ANP组（P＜0.05）,但高于假手术组（P＜0.05）;SB202190预处理组低于温生理盐水腹腔灌洗预处理组（P＜0.05）.SB202190预处理组和温生理盐水腹腔灌洗预处理组胰腺组织p38MAPK mRNA含量明显低于ANP组（P＜0.05）,温生理盐水腹腔灌洗预处理组高于假手术组（P＜0.05）;SB202190预处理组低于温生理盐水腹腔灌洗预处理组（P＜0.05）.结论 HSP70可以通过调控p38MAPK从而下调细胞因子的表达,进而改善大鼠ANP病理生理.     

芪益强肾饮治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

①目的 探讨自拟方芪益强肾饮（原名益肾蠲湿饮,下同）治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）的作用机制.②方法 采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠MsPGN模型,于造模第4周起,模型组给予芪益强肾饮,对照组给予等量生理盐水,11周末处死,从旋主动脉取血;测定大鼠24小时尿蛋白、血尿素氮（BUN）、肌酐（Cre）及血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素一6（IL一6）的变化.③结果 与模型组相比,芪益强肾组能降低大鼠24小时尿蛋白、BUN、Cre、TNF-α、IL-6（P＜0.05）.④结论 芪益强肾饮能明显降低大鼠24小时尿蛋白及血清TNF-α、IL-6,改善肾功能.其机制可能与抑制TNF-α、IL-6等有关.     

丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响

目的观察丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响。方法采用大鼠尾静脉注射脂多糖复制脓毒症模型。按完全随机化原则分为5组：正常对照组（N）、脂多糖组（L）、脂多糖＋地塞米松组（LD）、LPS＋异丙酚组（LP组）、LPS＋异丙酚＋地塞米松组（LPD组）。各组大鼠于造模后麻醉处死,取腹主动脉血,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-10（IL-10）。结果 L组TNF-α、IL-1β和IL-6较对照组明显升高,IL-10则明显降低（P均〈0.05）;LD组、LP组、LDP组同L组比较,其结果显示TNF-α、IL-1β和IL-6均明显降低,IL-10明显升高（P〈0.05;P〈0.05;P〈0.05）;LDP组同LP组、LD组比较,LDP组TNF-α、IL-1β和IL-6表达量明显下降,IL-10明显升高（P〈0.05）。结论 LPS可迅速引起TNF-α、IL-1β和IL-6的释放,抑制IL-10的表达;地塞米松、丙泊酚干预后,TNF-α、IL-1β和IL-6的量明显减少,IL-10明显升高,且两药联用干预效果更明显,对早期脓毒症大鼠有明显保护作用。     

不同因素致急性肺损伤大鼠TNF-α、IL-6的释放水平及地塞米松的影响

目的 探讨TNF-α和IL-6在急性肺损伤中（ALI）的作用和地塞米松的治疗意义。方法 本实验通过静脉注射内毒素（LPS）和盲肠结扎穿孔（CLP）复制大鼠ALI模型,观察在这两种ALI模型早期,动脉血氧分压(PaO2)和肺湿干重比率（W/D）、血浆促炎症细胞因子TNF-α、IL-6的变化,以及地塞米松干预的影响。结果 （1）在LPS刺激12h和CLP24h大鼠PaO2均显著降低。W/D显著增加,在同一时相LPS组损伤较CLP组重;地塞米松能减轻两组ALI模型大鼠PaO2的降低和W/D的增加。（2）两种模型大鼠血浆中TNF-α的含量先迅速增加,后逐渐降低,IL-6的浓度逐渐增加;LPS组TNF-α的峰值浓度出现较CLP组早,IL-6的浓度高于CIP组;地塞米松能显著降低两组模型中TNF-α的峰值浓度和IL-6浓度的增加。结论 血浆TNF-α峰值浓度出现的早晚和IL-6浓度的水平可能反映损伤的严重程度。糖皮质激素对LPS刺激和CLP大鼠ALI有保护作用,可能在ALI早期有治疗应用价值。     

甲泼尼龙对内毒素性急性肺损伤大鼠炎症介质的影响

目的探讨应用甲泼尼龙对内毒素所致急性肺损伤大鼠的防治作用及可能机制。方法静注脂多糖（6 mg/kg）制成ALI模型,54只大鼠随机分为生理盐水对照组、内毒素损伤组、甲泼尼龙组（内毒素＋甲泼尼龙）。采用放射免疫（ELISA）方法检测大鼠血清TNF-α、IL-8和IL-10水平,并进行肺湿/干重比（W/D）测定。结果与对照组比较,ALI组各时相点大鼠肺组织中3种炎症因子水平及W/D值均明显上升,差异有统计学意义（P〈0.05）,表达峰值时间：TNF-α为4 h,IL-8为2 h,而IL-10为8 h。结论甲泼尼龙可降低内毒素致大鼠ALI血清TNF-α、IL-8和IL-10水平,对大鼠ALI有防治作用。     

血必净对兔急性肺损伤的早期保护作用及其机制研究

目的探讨血必净对爆炸致兔急性肺损伤（ALI）的早期保护作用及其机制。方法将40只家兔随机分为血必净低剂量（L）组、高剂量（H）组、地塞米松（D）组、氯化钠溶液对照（N）组及ALI模型（A）组,每组8只。除了N组外其他组均建立ALI模型。L、H组分别给予血必净10、20ml/kg;D组给予0.5ml/kg地塞米松;N、A组给予10ml/kg氯化钠注射液;各组于给药后24h采集血液及肺组织标本。采用ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的含量,采用Westernblot法和RT-PCR法测定肺组织核转录因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的蛋白及mRNA表达水平,测定肺湿干重比（W/D）,并在光镜下观察肺组织病理变化。结果A组MMP-9、NF-κB的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量以及W/D均比N组高（均P＜0.05）;经血必净治疗后,L、H组MMP-9、NF-κB的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6含量以及W/D均比A组低（均P＜0.05）,IL-10表达量比A组高（P＜0.05）,其中均以H组改变最显著（均P＜0.05）;肺病理切片显示血必净治疗后肺组织损伤明显减轻。结论血必净可抑制爆炸致ALI早期炎性介质的生成和释放,减轻组织病理损害,从而起到保护作用。     

小窝蛋白-1在白藜芦醇治疗小鼠急性肺损伤中的作用研究*

目的 研究小窝蛋白-1（Cav-1）在急性肺损伤（ALI）中的作用以及白藜芦醇抗炎的可能分子机制。方法 将50只BALB/c小鼠随机分为正常组、ALI组、ALI+白藜芦醇干预组、Cav-1过表达的ALI组、Cav-1过表达的ALI+白藜芦醇干预组,每组10只。采用脂多糖（LPS）气管滴注复制小鼠ALI模型,尾静脉注射GV287-Cav-1过表达载体复制Cav-1过表达小鼠,白藜芦醇腹腔给药干预小鼠ALI模型。模型复制成功后取肺组织观察病理组织学变化,采用免疫组织化学和Western blotting检测Cav-1在肺组织中的表达,提取小鼠血清检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）。结果 过表达Cav-1能促进ALI小鼠释放更多的TNF-α、IL-6（P?<0.05）,白藜芦醇能降低Cav-1蛋白的表达水平,改善ALI,抑制TNF-α、IL-6的释放（P?<0.05）,减轻肺组织炎症损伤。结论 白藜芦醇可能通过抑制Cav-1的表达起到对小鼠ALI的治疗作用。     

NF-κB、IL-6和TNF-α在抗IL-6受体单抗干预早期急性肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的 观察NF-kB、IL-6、TNF-α在抗IL-6R单抗干预急性肺损伤(ALI)早期大鼠肺组织中的表达,探讨抗IL-6受体单抗(抗IL-6R单抗)保护肺组织的作用机制.方法 40只大鼠随机分成5组:ALI组,抗IL-6R单抗干预组,兔IgG干预组,地塞米松干预组,生理盐水对照组,每组8只.先给予脂多糖(LPS)总剂量(8mg/kg)的1/10腹腔注射,12h后再给予余量,制备大鼠ALI模型.抗IL-6R单抗、兔IgG、地塞米松的剂量分别为200μg/kg、200μg/kg和2mg/kg.采用免疫组化技术观察各组动物肺组织中NF-kB、IL-6和TNF-α在干预因素作用下的早期ALI大鼠肺组织中的表达.结果 与对照组比较,抗IL-6R单抗均能抑制AU肺组织中NF-kB、IL-6的表达,而TNF-α的表达未见下调.结论 抗IL-6R单抗使ALI大鼠肺组织中NF-kB的表达下降,可能为抗IL-6R单抗对ALI有保护作用的机制之一.     

乌司他丁对大鼠多脏器功能障碍综合征炎性因子的影响及意义

目的 通过乌司他丁（UTI）干预多脏器功能障碍综合征（MODS）大鼠,检测外周血炎性因子表达,研究UTI对MODS的可能保护作用及机制.方法 将90只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组与UTI组,模型组与UTI组大鼠分别通过尾静脉以15 g/kg注射内毒素（LPS）,UTI组建模前24 h和建模后连续3d,每日2次以1＆#215;105 U/kg腹腔注射UTI进行干预和治疗,观察各时间点各组的体征表现并收集血清用ELISA方法检测TNF-α、IL-1α、IL-4和IL-10的表达水平.结果 ①对照组、模型组和UTI组的死亡率分别为：0％、33％和16％.②TNF-α、IL-1α的表达水平UTI组均低于相对应的模型组.③模型组IL-4的表达水平在6h与24 h与对照组相比明显的升高（P＜0.05）,UTI组与对照组相比在0h、12 h（P＜0.05）,24 h（P＜0.01）显著升高;模型组IL-10的表达水平在12h与对照组相比明显升高（P＜0.05）,UTI组在6 h～12 h时IL-10的表达水平与对照组相比明显升高（P＜0.05）.结论 UTI能降低LPS介导的大鼠MODS的死亡率,可抑制TNF-α、IL-1α释放和促进IL-4、IL-10释放,有效改善MODS的发生发展.     

金线莲提取物对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的观察金线莲提取物对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）模型小鼠的疗效并探讨其作用机制。方法60只健康ICR小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组和金线莲低、中、高剂量组。地塞米松组给予5.0mg/kg地塞米松溶液腹腔注射,金线莲低、中、高剂量组分别给予1.3、2.6、5.2g/kg的金线莲提取物灌胃,对照组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,连续给药2d。第3天对照组给予0.9%氯化钠溶液气管滴注,其余各组均给予5.0mg/kgLPS构建ALI模型。造模后各组再给药1次。12h后颈椎脱臼处死小鼠,获取肺组织及肺泡灌洗液。HE染色观察肺组织病理学变化,测定肺湿干比,ELISA法测定肺泡灌洗液中IL-6、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10的水平,免疫组化法检测肺组织中髓过氧化物酶（MPO）、磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）、人核因子κB抑制蛋白α（IκBα）和磷酸化人核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）的蛋白表达水平,Westernblot法检测肺组织中细胞外信号调节激酶（ERK）、p-ERK、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、p38、磷酸化p38（p-p38）、腺苷酸-活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化腺苷酸-活化蛋白激酶α（p-AMPKα）、MPO蛋白相对表达量。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织出现炎性病理变化,肺泡灌洗液中IL-6、MCP-1、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平均显著升高（均P＜0.01）。与模型组相比,金线莲高剂量组肺组织湿干比明显降低（P＜0.01）,肺泡灌洗液中IL-6、MCP-1、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平均显著降低（均P＜0.05）,肺组织MPO、p-ERK、p-IκBα蛋白表达水平均显著降低（均P＜0.05）,p-ERK、p-JNK、p-p38、p-AMPKα、MPO蛋白相对表达量均显著降低（均P＜0.05）。结论一定剂量金线莲提取物可有效保护LPS所致ALI,其作用机制可能与调节丝裂原活化蛋白激酶信号通路、减轻炎症反应有关。     

氧化苦参碱对急性坏死性胰腺炎大鼠血清和胰腺组织中炎性介质的影响

目的：探讨氧化苦参碱（OMT）对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠血清和胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和 IL-10含量的影响及其意义.方法：选择标准Wistar大鼠120只,随机分为3组：假手术组（SO组）、ANP组和ANP＋OMT组, 以牛磺胆酸钠复制急性坏死性胰腺炎大鼠模型.OMT用药方法为胰管内给予牛磺胆酸钠后15 min腹腔内注射给药50mg·kg^-1·h^-1,共3次.动态观察同组不同时间（4、8、12、16 h）及不同组同时间的血清和胰腺组织中内毒素（ET）、TNF-α、IL-1β、IL-6和 IL-10含量变化,同时观察各组大鼠胰腺组织的病理变化、大鼠24 h病死率及平均生存时间.结果： ANP组和ANP＋OMT组在4、8、12和16 h的血清和胰腺组织中ET、TNF-α、IL-1β、IL-6和 IL-10 （ANP组IL-10除16 h外）均显著高于SO组（P＜0.01～0.05）, 且ANP组和ANP＋OMT组ET、TNF-α、IL-1β和IL-6随病程进展而升高（P＜0.05）;ANP组 IL-10水平随病程进展降低（P＜0.05）,ANP＋OMT组IL-10水平随病程进展增高（P＜0.05）.在相同时段除ET在ANP组和ANP＋OMT组差异无统计学意义外（P＞0.05）,ANP组TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著高于ANP＋OMT组（P＜0.01）,而ANP＋OMP组IL-10水平（除4 h组外）显著高于ANP组（P＜0.01～0.05）.ANP组和ANP＋OMT组大鼠胰腺组织的病理变化无明显差异,但ANP＋OMT组大鼠24 h病死率显著低于ANP组（P＜0.05）,平均生存时间较ANP组显著延长（P＜0.05）.结论： OMT可减少促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6 的产生,上调抗炎细胞因子IL-10的负调控作用,有助于减轻ANP时炎性细胞因子瀑布样级联反应,降低大鼠24 h病死率,延长平均生存时间.     

MODS大鼠外周血中PPARγ与TNF-α和IL-10动态变化的研究

目的：探讨MODS大鼠外周血中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）与TNF-α,IL-10动态变化的关系,并观察PPARγ能否调控炎症反应,即能否保持IL-10/TNF-α比值的稳定.方法：健康雄性SD大鼠96只,随机分为4组：①正常对照组;②LPS刺激组;③罗格列酮（ROSI）预处理组;④选择性拮抗剂2-氯-5-硝基苯胺（GW9662）预处理组.每组又分为1,3,5,7h组.免疫细胞化学结合图像分析检测外周血单个核细胞内PPARγ的表达,利用酶联免疫吸附剂测定法检测外周血中TNF-α及IL-10的水平.结果：①ROSI预处理组TNF-α各时间点的值较LPS刺激组低（P〈0.05）.GW9662预处理组TNF-α各时间点的值较LPS刺激组高（P〈0.05）.ROSI预处理组比同时相LPS刺激组IL-10的水平高（P〈0.05）.GW9662预处理组与LPS刺激组IL-10的变化趋势基本相同,但5h及7h组IL-10的水平比同时相的LPS刺激组低（P〈0.05）.②相关分析表明,外周血单个核细胞内PPARγ和TNF-α在ROSI预处理组、GW9662预处理组呈显著负相关[ROSI预处理组（r=-0.635,P〈0.05）;GW9662预处理组（r=-0.725,P〈0.05）].外周血单个核细胞内PPARγ和IL-10在ROSI预处理组、GW9662预处理组呈显著正相关[ROSI预处理组（r=0.605,P〈0.05）;GW9662预处理组（r=0.645,P〈0.05）].③ROSI预处理组IL-10/TNF-α值与同时相正常对照组相比无显著差异.GW9662预处理组IL-10/TNF-α值明显降低,与同时相LPS刺激组相比有显著差异（P〈0.05）.结论：PPARγ可降低MODS大鼠外周血中TNF-α的水平,PPARγ升高MODS大鼠外周血中IL-10的水平,PPARγ对MODS大鼠有保护作用.     

地塞米松对急性坏死性胰腺炎大鼠模型血液TNF-α、IL-10和GR的影响

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型血液TNF-α、IL-10和糖皮质激素受体(GK)的变化规律及地塞米松(DEX)干预对上述指标的影响.方法 48只雄性SD大鼠随机分为ANP组(A组,n=16)、DEX治疗组(D组,n=16)和假手术组(S组,n=16).除S组大鼠外,各组均通过逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作.ANP模型;D组大鼠术后肌注地塞米松干预.制模后8、12 h分别处死各组一半大鼠,分别观察大鼠胰腺病理改变、血清淀粉酶、TNF-α、IL-10水平和全血有核细胞GR的mRNA表达等指标.结果 ①A组大鼠表现为典型ANP病理改变,包括间质水肿、炎细胞浸润、出血和胰腺坏死;D组大鼠胰腺的炎症反应相对较轻.②A组血清TNF-α、IL-10显著高于S组(P＜0.01),D组血清TNP低于A组而IL-10高于A组(P＜0.01).③在术后8 h和12h,D组血GRmRNA表达显著低于S组(分别P＜0.05,P＜0.01).结论 TNF-α、IL-10以及GR的改变与ANP的炎症反应存在相关性,外源性DEX可能通过影响这些因素达到缓解ANP的作用.     

穗花杉双黄酮调控miR-140-5p介导脂多糖致急性肺损伤的机制研究

目的 探究穗花杉双黄酮对脂多糖（lipopolysaccharides ,LPS）致大鼠急性肺损伤（acute lung injury ,ALI）的保护作用及机制研究。方法 将60只大鼠随机分为4组：对照组、模型组、阳性对照组、实验组。模型组、阳性对照组和实验组大鼠均通过气道滴注3.00 mg/kg LPS 100μl,空白对照组气道滴注等体积的生理盐水,6 h后阳性对照组大鼠腹腔注射地塞米松（2.5 mg/kg）,实验组大鼠腹腔注射穗花杉双黄酮（2.5 mg/kg）,对照组和模型组注射等体积生理盐水。48 h后称重测定大鼠肺组织湿/干比;苏木精-伊红染色( hematoxylin-Eosin staining,HE )观察各组大鼠肺组织病理结构;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平;RT-PCR检测miR-140-5p在肺组织中的表达情况;蛋白印迹法（western Blot,WB）检测肺组织中Toll样受体4（Toll Like Receptor 4,TLR4）、核因子活化B细胞κ轻链增强子（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB）蛋白表达水平。RT-PCR检测肺组织中miR-140-5p的表达情况。利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入穗花杉双黄酮RT-PCR检测miR-140-5P的表达,利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入miR-140-5P抑制剂、mimic-NC干预,RT-PCR检测TLR4、NF-κB的表达。结果 实验组肺组织湿/干比明显低于模型组（P＜0.05）;HE染色结果显示实验组大鼠肺组织结构相比于ALI模型组大鼠炎症细胞明显减少,肺泡间隔明显减轻;ELISA结果显示实验组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显低于模型组（P＜0.05）;WB结果发现实验组大鼠肺组织中TLR4、NF-κB表达量明显低于模型组;RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织和细胞中miR-140-5P表达均明显高于模型组（P＜0.05）,而miR-140-5P mimic能明显抑制TLR4、NF-κB的表达（P＜0.05）。结论 穗花杉双黄酮能明显缓解LPS诱导的大鼠ALI,降低肺损伤病理进程中血清TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,对ALI起保护作用,其作用机制可能是通过促进了miR-140-5P的表达,从而减低ALI炎症过程中关键炎症信号TLR4、NF-κB的表达。     

降脂丸预防大鼠动脉粥样硬化的研究

目的 观察预防性给药降脂丸对动脉粥样硬化大鼠(atherosclerosis,AS)血脂及主动脉弓形态学变化的影响.方法 将72只SD大鼠随机分为①降脂丸高剂量组、②降脂丸中剂量组、③降脂丸低剂量组、④绞股蓝干预组、⑤空白组、⑥模型组.空白组正常饮食,模型组灌胃脂肪乳剂,其余各组在造模的同时给予相应药物治疗.分别在第15天、第25天、第34天后测定甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)及C反应蛋白(CRP),最后观察主动脉弓及肝脏病理学形态.结果 降脂丸高、中、低剂量组在给药后15天、25天、34天的TC、LDL-C含量显著低于模型组(P＜0.01),且效果优于绞股蓝;降脂丸高、中、低剂量组的CRP显著低于模型组(P＜0.01),高剂量组的效果优于绞股蓝,中、低剂量组作用与绞股蓝类似;灌胃脂肪乳剂的大鼠体质量明显较轻,降脂丸高、中剂量组肝指数与模型组比有显著差异(P＜0.01);肝脂肪化程度⑥＞④＞③=②＞①＞⑤;主动脉弓硬化情况⑥＞②=③＞④＞①＞⑤.结论 降脂丸具有一定的降血脂作用,可以有效的预防AS及脂肪肝的发生.     

二烯丙基三硫对急性肺损伤小鼠血清细胞因子IL-18,IL-10的影响

目的 探讨二烯丙基三硫(DATS)对急性肺损伤小鼠血清IL-18,IL-10的影响.方法 90只健康昆明小鼠,随机分为5组:①急性肺损伤组:腹腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS);②预防组:腹腔注射DATS 7 d后注射LPS;③治疗组:腹腔注射LPS后30 min注射DATS;④DATS组:腹腔注射DATS 7 d;⑤对照组:腹腔注射等量生理盐水.光镜观察12h点肺组织形态学改变.测定血清中IL-18及IL-10在2h和6h含量.结果 DATS预防组肺泡间渗出及炎性细胞浸润较ALI组明显减轻.其血清中IL-18含量均明显低于ALI组(P<0.01),IL-10含量均明显高于ALI组(P<0.01).结论 预防性应用DATS可减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织炎症反应.并能抑制LPS诱导的小鼠血清中炎性细胞因子IL-18的生成,而促进抗炎性细胞因子IL-10的生成.     

鼠吸入全氟异丁烯急性肺损伤红花苷干预研 究简

目的 探讨鼠吸入全氟异丁烯（PFIB）致急性肺损伤（ALI）模型应用红花苷干预的意义.方法 Wistar雄性大鼠130只随机分成实验组（30只,包括3个亚组）、染毒组（30只）和正常组（10只）,分为24h、72 h、7d三个时间观察点,每个时间点各10只.正常组不染毒、不干预处理;而染毒组仅染毒,无药物干预;3个实验组均在染毒后1h腹腔给药干预,实验组1单纯给红花,实验组2给红花联合地塞米松;实验组3给红花联合乌斯他丁;染毒组腹腔注射盐水;分别在不同时间点放血处死.观察肺含水量、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量、血清和肺组织中的肿瘤坏死因子-α （TNF-α）,用ELISA法测定白介素-1（IL-1）,IL-8,IL-18,IL-10和P-选择素（P-s）.结果 肺含水量以24h最高;染毒组[（81.95±177;2.05）％]、实验组（3组）[（81.57±177;2.31）％、（83.57±177;3.35）％、（80.41±177;1.51）％]与正常组[（78.18±177;1.34）％]比较差异有高度统计学意义（P＜0.01）;3个实验组中以实验组组3最低,与实验组2和染毒组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.BALF蛋白含量,正常组[（0.32±177;0.25）g/LJ]与染毒组[（6.16±177;2.14）g/L]和实验组（3组）[（5.64±177;1.97）、（6.01±177;3.55）、（5.23±177;2.79）g/L]比较,差异均有高度统计学意义（P＜0.01）;实验组3与染毒组、实验组1、2比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,但以实验组3最低.24 h实验组各组血清细胞因子TNF-α、IL-1、IL-8、IL-18低于染毒组,其中实验组1、实验组2 TNF-α[（14.06±177;6.08）、（6.92±177;14.10）μg/L]和IL-18[（64.94±177;11.84）、（66.93±177;11.69）μg/L]与染毒组TNF-α[（20.20±177;4.70） μg/L],IL-18[（87.34±177;20.98） μg/L]比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.肺组织中相同细胞因子明显高于血清,在时间点的变化趋势与血清基本一致.结论 红花苷可以降低PFIB吸入性ALI炎性细胞因子水平,联合乌斯他丁能更有效减轻肺水肿.     

“通利大肠”对COPD大鼠细胞因子含量的影响

目的 观察“通利大肠”对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠外周血及肺泡灌洗液中白介素-8(IL-8)、白介素-1β(IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10 (IL-10)含量变化,从炎症调控角度探讨COPD“从肠论治”的效应机制.方法 用气管注射脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型,随机分为正常组、模型组、治肠组、治肺组及肺肠同治组.正常组、模型组灌胃纯净水,各给药组灌胃相应中药,连续14 d.用酶联免疫法(ELISA)测定外周血和肺泡灌洗液中细胞因子IL-8、IL-1β、TNF-α和IL-10的含量.结果 ①与正常组比较,模型组大鼠外周血和肺泡灌洗液的IL-8、IL-1β、TNF-α和IL-10含量均升高(P＜0.01或P＜0.05).②与模型组比较,治肠组外周血和肺泡灌洗液的IL-8、IL-1β、TNF-α和IL-10含量均降低(P＜0.01或P＜0.05).③与治肺组比较,肺肠同治组外周血IL-1 β含量和肺泡灌洗液IL-8含量降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 通利大肠或在治肺的基础上增加通利大肠,能降低COPD模型大鼠的外周血和肺泡灌洗液中的细胞因子含量,从而减轻全身及局部的炎症反应,这可能是COPD“从肠论治”效应产生的作用环节之一.