新型HF-LPME-HPLC对蒙药荜茇生物碱含量测定研究

研究建立一种新型中空纤维膜液相微萃取联合高效液相色谱(HF-LPME-HPLC)测定蒙药荜茇中生物碱含量,对影响HF-LPME萃取效率的各项参数进行优化分析。中空纤维膜材料为偏氟乙烯纤维膜(空隙率>50%),正辛醇为萃取剂,萃取温度为室温,振荡速度为200 r/min,萃取时间为128 min。建立了新型HF-LPME的萃取方法,对蒙药荜茇中胡椒碱的R>5,与传统萃取方法相比,富集倍数为40倍。线性范围分别为0.006～0.01 mg/mL,相关系数(r)为0.999 9。相比于传统的萃取方法,该方法使用极少量的有机溶剂,可高效萃取并测定蒙药荜茇中生物碱的含量,打破了仅能在环境和食品中应用的限制,可以在各类化学基础实验中推广应用。     

HPLC测定荜茇三味散中胡椒碱的含量

目的:建立荜茇(荜茇、诃子、山楂)三味散中胡椒碱的含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Kromasil(C18,5um,250mm×4.6mm)色谱柱,流动相为甲醇-水(77:23),检测波长为343nm。结果:胡椒碱在进样量6.96ug~1.99ug范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为102.9%,RSD为1.4%。结论:HPLC法简单准确,精密度高,分离度良好,可用于荜茇三味散的质量控制。     

荜茇提取物对地鼠脂质代谢紊乱的影响

目的 研究荜茇提取物对高血脂症地鼠血脂的影响。方法 给予高脂饲料建立金黄地鼠高血脂模型,将动物随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组、荜茇提取物组、去胡椒碱荜茇提取物组,除正常对照组外其余各组均给予高脂饲料喂养2或4周,每周测量体质量,分别在第2周末和第4周末用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肝脏指数、肝脂质TC和TG。结果 与正常对照组比较,模型组TC,TG 和LDL显著增加(P<0.01),HDL显著降低;与模型组比较,荜茇提取物组在第2周和第4周均能显著降低TC,TG 和LDL,显著升高HDL(P<0.05或P<0.01);去胡椒碱荜茇提取物组在第2周能显著降低LDL,升高HDL,在第4周有降低TC,TG,LDL的趋势,但差异无统计学意义,能显著升高HDL(P<0.05);各受试物组动物在前两周体质量显著低于模型组,而后2周差异无统计学意义;4周时荜茇提取物组能显著降低肝脂质TC,TG;各受试物组均能显著降低肝指数。结论 荜茇提取物可显著改善高血脂症地鼠血脂水平,其中胡椒碱为其主要有效成分,且与其他各成分有协同降血脂作用。     

高效液相色谱法测定六味木香散中荜茇的含量

六味木香散系蒙古族验方 ,由木香、荜茇、栀子等六味药组成。荜茇具有温中散寒、下气止痛功效 ,为六味木香散主药。胡椒碱是荜茇药材所含主要有效活性成分 ,含量较高 ,为控制六味木香散质量 ,将胡椒碱作为其内控指标。薄层扫描法测定六味木香散中荜茇的含量[1] ,操作方法比较繁琐、费时 ,且误差较大。本文采用高效液相色谱法测定[2 ] ,操作简单、省时 ,结果准确、可信 ,精密度、重现性较好。1　仪器与试药ＦＲＡＮＫ - 2 0 0 0Ｐ型高效液相色谱仪 (配有色谱工作站 ) ;ＴＰ - 30 0超声波振荡器 ;甲醇为色谱纯 ;其他试药均为优级纯 ;胡椒碱对…     

HPLC法测定荜茇根中胡椒碱的含量

目的:建立测定荜茇根中胡椒碱含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(77∶23,V/V),检测波长为343 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。结果:胡椒碱的质量浓度在0.000 8⁰.024 0 mg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率为100.85%,RSD=0.82%(n=6)。结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于荜茇药材的质量控制。     

渗透促进剂对荜茇提取物中胡椒碱体外经皮吸收的影响

目的研究荜茇提取物中的主要成分胡椒碱的透皮吸收特性,确定最佳促进剂及质量浓度。方法采用卧式双室扩散池,以离体大鼠皮肤作为渗透屏障,用HPLC法测定样品中胡椒碱的质量浓度。以稳态流量(Js)、增渗比(ER)及滞后时间(tlag)为指标考察渗透促进剂对荜茇提取物中胡椒碱体外经皮吸收的影响。结果当用质量分数为10%的N-甲基-2-吡咯烷酮时,胡椒碱的稳态渗透速率最高。结论N-甲基-2-吡咯烷酮为荜茇提取物中胡椒碱经皮给药有效的渗透促进剂。     

薄荷醇衍生物对荜茇提取物贴剂中胡椒碱体外经皮通透性的影响

目的研究薄荷醇衍生物对荜茇提取物贴剂中胡椒碱体外经皮通透性的影响,探讨将荜茇提取物制成贴剂的可行性。方法采用卧式双室扩散池,以离体大鼠皮肤作为通透屏障进行体外透皮实验,用HPLC法测定接收池中胡椒碱的浓度。结果戊酸薄荷醇酯、己酸薄荷醇酯、丁酸薄荷醇酯和乳酸薄荷醇酯对胡椒碱经皮吸收有明显的促透效果,其中以戊酸薄荷醇酯的促透效果最好;庚酸薄荷醇酯、十四酸薄荷醇酯和油酸薄荷醇酯的促透作用不明显;薄荷醇对胡椒碱的经皮吸收有抑制作用。结论在含有化学促进剂的贴剂中,胡椒碱的累积透过量及稳态通透速率均显著增加,说明将荜茇提取物制成贴剂是可行的。     

高效液相色谱法测定蒙药荜茇三味散中胡椒碱的含量

目的：建立蒙药荜茇三味散中胡椒碱的含量测定方法.方法：采用高效液相色谱法,色谱柱：C18柱,流动相：甲醇-水（70：30）,检测波长：343nm.结果：胡椒碱在0.03808μg～0.4760μg范围内呈良好的线性关系,加样平均回收率为99.2%,RSD为1.40%.结论：本法可作为该药品的质量标准.     

荜茇宁衍生物对高脂血症大鼠调脂作用及其机制的研究

目的：探讨荜茇宁（GBN）的衍生物（GBNT）对高脂血症大鼠的调脂作用,并考察其作用机制。方法高脂饲料喂养Wister 大鼠,建立高脂血症模型,造模同时连续灌胃给药8周后,腹主动脉取血,检测各组大鼠血清中总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量;HE 染色检测肝脏病理学形态;Western blot 方法研究低密度脂蛋白受体（LDLR）,卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶（LCAT）,胆固醇7α-羟化酶（CYP7A）蛋白表达的变化。结果GBNT 低、高剂量组均能降低模型大鼠 TC、TG 和 LDL-C 的含量,升高 HDL-C 含量;上调 LDLR,LCAT,CYP7A1蛋白的表达;并减轻肝脏脂肪变性。结论GBNT 具有降低高脂血症模型大鼠血脂水平的作用,其机制可能与调节 LCAT,CYP7A1等脂质代谢酶表达有关。     

基于体外药效学结合分子对接技术研究穿山龙抗心肌缺血的作用机制

目的 通过液质联用技术、体外药效学及分子对接技术探究穿山龙抗心肌缺血的物质基础和作用机制。方法 利用UPLC-Q TOF-MS技术确定穿山龙醇提物中的主要成分,比较不同质量浓度（40、10、4、0.4、0.004 mg/mL）的穿山龙醇提物对H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤后细胞活力的影响。应用AutoDock软件对潜在药效物质和关键靶点进行分子对接,相关结果采用Cytoscape 3.6.1进行构图和网络拓扑结构分析。结果 从穿山龙的醇提物中鉴定出7个化学成分,并证明穿山龙醇提物对H/R损伤H9c2心肌细胞具有一定的保护作用。筛选出5种（薯蓣皂苷元、薯蓣皂苷、对羟基苄基酒石酸、原薯蓣皂苷、薯蓣次皂苷A）与抗心肌缺血相关的活性成分,5种活性成分的分子对接结果显示潜在的药效物质与关键靶点内皮一氧化氮合酶（NOS）2、NOS3、环氧化酶/细胞色素C氧化酶多肽Ⅱ(COX2)、热休克蛋白（HSP70）对接结果能量低于-8 kcal/mol。结论 穿山龙中的甾体皂苷类成分可能是其治疗心肌缺血的物质基础,穿山龙治疗心肌缺血是多成分与多靶点相互作用的结果。     

沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血的保护作用

目的 研究沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血损伤的保护作用及机制。方法 大鼠随机分成6组：对照组、模型组、野生沉香醇提物（2.84 g/kg）组和通体沉香醇提物低、中、高剂量（0.71、1.42、2.84 g/kg）组,每天1次,连续ig给药7 d,对照组和模型组ig等体积蒸馏水。除对照组外,采用sc异丙肾上腺素（ISO）联合冰水浸泡诱导大鼠气滞血瘀心肌缺血模型,检测生化指标全血黏度（WBV）、血浆比黏度（PSV）,血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）活性;观察心电图及心肌病理损伤情况;检测血浆中脂质过氧化物（LPO）、过氧化氢（H₂O₂）、总抗氧化能力（T-AOC）和过氧化氢酶（CAT）的水平;酶联免疫法（ELISA）检测血清中细胞因子5-羟色胺（5-HT）、内皮素（ET）、血栓烷素B2（TXB₂）及前列腺素E₂（PGE₂）的分泌水平。结果 与模型组比较,通体沉香醇提物各剂量组均能显著降低WBV和PSV,改善心电图的异常,显著降低心电图ST段的抬高（P<0.05、0.01）;中、高剂量组显著降低血清中心肌酶CK、LDH、ALT和AST活性（P<0.05、0.01、0.001）;各剂量组明显减轻心肌组织的病理损伤程度;高、中剂量组均显著降低LPO和H₂O₂水平,升高T-AOC和SOD水平（P<0.05、0.01、0.001）;高剂量组显著降低5-HT水平,各剂量组均显著降低ET、TXB₂和PEG₂水平（P<0.05、0.01、0.001）。同等剂量下通体沉香醇提物与野生沉香醇提物作用相当。结论 通体沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血有保护作用,其作用机制与抗氧化、改善血管微循环、调节内皮细胞生长及调节细胞因子的分泌有关。     

冬虫夏草对垂体后叶素所致大鼠缺血心肌的保护作用

目的　观察冬虫夏草对急性缺血心肌的保护作用。方法　采用垂体后叶素所致大鼠急性缺血模型观察药物的作用。结果　冬虫夏草和维拉帕米能明显缓解垂体后叶素所引起的心电图T波变化 (P <0 .0 1) ,垂体后叶素使 10 0 %的动物发生心律失常 ,而在冬虫夏草组及维拉帕米组 ,心律失常的发生律分别为 18% (P <0 .0 1)和 12 % (P <0 .0 1)。结论　冬虫夏草对垂体后叶素所致急性缺血心肌具有保护作用。     

丹皮酚银杏叶提取物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的评价丹皮酚与银杏叶提取物1∶1组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法尼莫地平(10.8 mg/kg)组、丹皮酚(37.5 mg/kg)组、银杏叶提取物(37.5 mg/kg)组以及丹皮酚银杏叶提取物1∶1组合物(75.0 mg/kg)组大鼠灌胃给予相应药物,给药容积10 m L/kg,ig给药6 d后大脑中动脉栓塞造模,脑缺血再灌注后4、24 h进行观察,计算行为学评分;动物取脑,测定脑梗死面积,计算脑梗死率;大鼠脑缺血再灌注后24 h后,测定血清中自由基超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)水平和脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、GABA、Glu含量。结果与模型组比较,脑缺血再灌注22 h后,各组大鼠行为学评分均有降低趋势,其中组合物组的降低作用的差异具有显著性(P0.05);与模型组比较,脑缺血再灌注24 h后,银杏叶提取物、丹皮酚、组合物组大鼠脑梗死率均明显降低,差异具有显著性(P0.01);与模型组比较,组合物组大鼠血清中SOD水平、丹皮酚和组合物组血清中GABA水平显著升高(P0.05),银杏叶提取物、丹皮酚、组合物组大鼠血清中MDA水平、组合物组血清中Glu水平显著降低(P0.01、0.05);丹皮酚和组合物组大鼠脑组织中MMP-9、Glu含量显著降低(P0.01、0.05),组合物组脑组织中GABA含量显著升高(P0.01)。结论丹皮酚银杏叶提取物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抗氧化损伤、平衡兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸浓度、调节MMP-9表达量有关。     

黄杞叶和片姜黄提取物及其组方对大鼠急性心肌缺血的保护和协同作用

目的研究黄杞叶和片姜黄的提取物联合应用防治大鼠急性心肌缺血的合理性。方法根据权重配方法设计6个不同配伍联合用药组,采用冠脉动脉结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型,以心肌梗塞范围和血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)为指标,评价大鼠急性心肌缺血的损伤程度。采用非线性混合效应分析研究联合用药的相互作用。结果黄杞叶和片姜黄的提取物均能够保护心肌细胞,显著降低冠脉结扎造成急性心肌缺血大鼠血清中CK和LDH,缩小心肌梗死体积。非线性混合效应分析显示黄杞叶和片姜黄其提取物联用时有明显的协同作用。结论黄杞叶和片姜黄的提取物对大鼠急性心肌缺血具有显著的保护作用,两者合用具有明显的协同作用。     

何首乌醇提物对大鼠的肝毒性研究

目的 观察何首乌醇提物对大鼠肝脏的毒性作用,并探讨其可能的毒性机制。方法 SD大鼠连续6周ig给予生、制何首乌醇提物（10、20 g生药/kg）,观察动物一般状况、体质量变化;给药结束时检测血清生化指标,测定肝脏质量并计算肝脏系数,进行肝脏组织病理学检查;提取肝脏线粒体测定呼吸链复合物Ⅰ活性,透射电镜观察肝脏线粒体结构。结果 生、制何首乌醇提物连续ig给药6周可导致大鼠出现腹泻、体质量增长缓慢等表现;对丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）等生化指标和肝脏系数无明显影响;使大鼠肝脏出现轻度炎细胞浸润、肝细胞片状坏死、纤维增生、空泡等组织病理学变化;能降低大鼠肝脏线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性,透射电镜下可见个别线粒体嵴紊乱、断裂或消失,出现空泡。结论 生、制何首乌醇提物均可引起大鼠肝脏一定程度的损伤,其肝毒性机制可能与影响肝脏线粒体的结构和电子传递链功能有关。     

五味子提取物及其有效成分对心血管疾病的药理作用研究进展

五味子是常用中药材之一,在保肝、治疗心脑血管疾病等方面发挥重要作用,其主要活性成分包括木脂素类、多糖类、挥发油及有机酸等成分。对五味子提取物及其有效成分治疗心血管疾病的抗心肌炎症、抗氧化损伤、抑制心肌细胞凋亡、缓解心肌纤维化等药理作用及其机制进行综述,发现五味子总木脂素可以调节核因子-κB信号通路、激活氮合酶途径抑制炎症因子及心肌细胞的凋亡,五味子乙素调节酪氨酸激酶2蛋白/信号转导子与激活子3信号通路抑制氧化损伤,五味子提取物抑制Smad蛋白信号传导发挥舒张心血管作用。     

鸡肝散药效成分木犀草素在大鼠体内的药代动力学

建立RP-HPLC法测定大鼠灌胃鸡肝散提取物后血浆中木犀草素的含量，并研究木犀草素在大鼠体内的药代动力学行为。大鼠灌胃鸡肝散提取物后，血浆样品经三氯乙酸沉淀蛋白，用RP-HPLC法测定。血浆中木犀草素的线性范围为0.37～47.27 μg·mL^-1；定量限为0.37 μg·mL^-1；方法回收率93%～99%，提取回收率75%～85%，日内及日间精密度均小于5%。鸡肝散提取物在大鼠体内的药代动力学行为符合开放二室模型。经大鼠性别和测定时间两因素方差分析，提示不同性别的大鼠的血药浓度具有显著性差异。通过质谱法鉴定了血浆中代谢物为葡糖醛酸结合物。建立的大鼠血浆中木犀草素的含量测定方法具有灵敏、准确，专属性强等特点，可用于鸡肝散药效成分木犀草素的体内药代动力学研究。     

生川乌瓜蒌不同配伍中乌头类生物碱在大鼠体内的药动学研究

目的考察生川乌瓜蒌不同配伍比例醇提液中乌头类生物碱在大鼠体内的药动学研究,比较瓜蒌对其药动学行为的影响。方法建立灵敏、专属、快速的测定大鼠血浆中6种乌头类生物碱的液相色谱-串联质谱方法。大鼠随机分为3组,分别ig生川乌与瓜蒌1∶0、6∶1、1∶6配伍醇提液,在不同的时间点采血分析,经DAS 2.0软件计算主要药动学参数。结果乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的药动学参数tmax和t1/2发生了显著变化,且变化趋势基本一致,在生川乌与瓜蒌6∶1配伍组tmax显著减小(P0.05),生川乌与瓜蒌1∶6配伍组tmax显著增加(P0.01、0.001),且t_(1/2)显著降低(P0.05、0.01),提示生川乌与瓜蒌不同配伍比例影响了3种生物碱的吸收和消除过程。结论生川乌与瓜蒌配伍影响了乌头类生物碱的药动学过程,配伍比例是其配伍禁忌的重要条件。