金茵利胆胶囊对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用

目的 探讨金茵利胆胶囊对四氯化碳(CCl₄)诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、水飞蓟素(阳性药)组、金茵利胆胶囊低剂量组和高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用CCl₄腹腔注射,每周2次,连续6周诱导大鼠肝纤维化模型,造模期间连续灌胃给药6周。实验结束后计算肝脏、脾脏脏器指数;观察肝脏组织的病理变化和纤维化程度;检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)等生化指标含量;SOD试剂盒检测大鼠血清抗氧化能力;采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF-α炎症指标水平;免疫组化法检测大鼠肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;实时荧光定量PCR法检测Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、NF-κB、MMP2、TIMP1和TGF-β1等基因的相对表达量。结果 与模型组比较,金茵利胆胶囊能显著降低肝脏指数(P < 0.01);降低血清中ALT、AST和TBA水平(P < 0.05);改善肝组织纤维化程度;增加了SOD的含量(P < 0.01);降低IL-6、IL-1β和TNF-α炎症指标水平(P < 0.05);降低α-SMA的表达水平;降低肝脏Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、NF-κB、MMP2、TIMP1和TGF-β1等基因的相对表达量(P < 0.05)。结论 金茵利胆胶囊对CCl₄诱导的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能与抑制肝细胞外基质沉积和肝星状细胞活化有关。     

金茵颗粒剂抗炎及镇痛作用的实验研究

目的观察金茵颗粒剂对急性炎症反应的抑制作用及镇痛作用。方法二甲苯涂布法及热板法分别观察金茵颗粒剂对急性炎症所致肿胀、疼痛反应的抑制作用。结果金茵颗粒剂低、中、高剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有明显抑制作用,与生理盐水组比较差异显著(低剂量组P<0.05,中、高剂量组P<0.01);金茵颗粒剂高剂量组于给药后30分钟及60分钟对热板刺激所致小鼠疼痛反应有抑制作用,与生理盐水组比较差异显著(P<0.01、P<0.05)。结论金茵颗粒剂具有抗炎、镇痛作用。     

筋骨草抗炎有效部位及其量效关系研究

目的 研究筋骨草抗炎有效部位及其量效关系.方法 选用水煎法将获得的筋骨草水煎液经大孔树脂吸附后依次用蒸馏水和乙醇分别洗脱,观察水煎液和醇洗液浓缩后的筋骨草提取物时二甲苯致小鼠耳廓肿胀和琼脂皮下注射形成肉芽肿2种致炎模型的影响,初步明确筋骨草抗炎有效部位,并对该有效部分进行量效关系的评定.结果 筋骨草水煎液和筋骨草醇洗液均有抗炎作用,其中醇洗液更佳,有明显量效关系.结论 筋骨草醇洗液为筋骨草抗炎的主要活性部位,剂量在3～12 g·kg-1之间有明显的量效关系.     

凤仙透骨草HPLC指纹图谱及其与抗炎活性的谱效关系

目的：建立凤仙透骨草药材高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,并探究特征图谱与抗炎活性间的谱效关系。方法：采用HPLC建立凤仙透骨草药材的指纹图谱;利用聚类分析及主成分分析对共有峰进行评价;建立角叉菜胶致小鼠急性炎症模型,考察不同来源凤仙透骨草药材抗炎活性,利用灰色关联度分析和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）探究谱效关系。结果：建立了凤仙透骨草药材的指纹图谱,确定15个共有峰,相似度均在0.90以上,并确认了阿魏酸、芦丁（峰3）、2-甲氧基-1,4-萘醌（峰7）、槲皮素（峰8）、山柰酚（峰14）5个峰。聚类分析与主成分分析结果基本一致,将10批药材聚为4类,PLS-DA表明,峰2、峰4、峰6、峰7、峰14是造成不同来源凤仙透骨草药材组间差异的标志性化合物;不同来源凤仙透骨草药材抗炎活性程度不同,变量重要性投影值表明峰2、峰4、峰6、峰7、峰8、峰14与抗炎活性具有较大的关联度。结论：建立了凤仙透骨草药材的指纹图谱,并确定了与抗炎活性密切相关的成分,可为凤仙透骨草药材质量评价提供参考依据。     

紫堇灵的分离制备及抗炎活性

旨在从苦地丁药材中分离出紫堇灵,从TLRs/NF-κB信号传导通路角度探讨其抗炎作用机制。以80%乙醇提取、硅胶柱色谱等方法制备紫堇灵,UPLC、MS、¹H NMR、¹³C NMR等方法进行纯度及结构鉴定;利用MTT实验评价紫堇灵的细胞毒性;采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型,用紫堇灵进行干预,以Western blot技术检测RAW264.7巨噬细胞中TLR4、TLR2、IκBα、p-IκBα、p65和p-p65蛋白的表达水平;进而通过实时荧光定量PCR、Western blot技术分别检测p65 mRNA及细胞核p65表达情况。实验发现,在LPS诱导的RAW264.7炎症细胞模型中,5~40 μmol/L紫堇灵呈正相关下调RAW264.7细胞中TLR4、TLR2蛋白的表达水平,抑制IκBα磷酸化并从基因水平和蛋白水平抑制p65转位入核。结果表明,紫堇灵可能是通过TLRs/NF-κB信号通路发挥对LPS致RAW264.7细胞炎症的抑制作用。     

抗炎舒胶囊的抗炎镇痛作用的实验研究

目的研究抗炎舒胶囊的抗炎、镇痛作用。方法采用二甲苯所致小鼠耳肿胀，醋酸致小鼠腹膜毛细血管通透性增高，棉球植入致大鼠足肉芽肿，热板法试验、冰醋酸致小鼠扭体等方法观察抗炎舒胶囊镇痛及抗炎作用。结果抗炎舒胶囊对二甲苯所致小鼠耳肿胀和大鼠棉球肉芽肿有一定的抑制作用，可明显拮抗醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高，亦能明显提高小鼠热板法痛阈，抑制醋酸所致小鼠扭体反应次数。结论抗炎舒胶囊具有明显抗炎、镇痛作用。     

黄芪抗胃溃疡作用的谱效关系研究

目的 研究黄芪95%乙醇提取物的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱与抗胃溃疡药效的相关性,初步揭示黄芪药效物质基础。方法 ig给予胃溃疡模型小鼠黄芪乙醇提取物,用灰色关联法和偏最小二乘法将HPLC指纹图谱各共有峰的峰面积与抗胃溃疡药效数据相关联,研究谱效相关性,确定黄芪抗胃溃疡作用的物质基础。结果 黄芪95%乙醇回流提取物（总提取物）对无水乙醇所致小鼠胃溃疡有一定的抑制作用,这与黄芪的敛疮生肌之功效相一致。用灰色关联的分析方法,根据关联度大小确定黄芪乙醇提取物中各成分对抗胃溃疡作用的贡献度,并应用偏最小二乘法拟合了药效和化合物峰面积的数理方程,筛选出贡献值较大的化合物。两种统计学方法综合分析表明,在HPLC-DAD指纹图谱中,成分P9和P12（毛蕊异黄酮）贡献较大;在HPLC-ELSD指纹图谱中,成分P8和P9作用较强。结论 黄芪95%乙醇提取物较其不同极性提取部位具有较强的抗胃溃疡作用,通过HPLC指纹图谱与药效相关性分析可知黄芪抗胃溃疡作用与其所含的多种成分有关。     

胆乐汤抗炎利胆作用的实验研究

目的:研究胆乐汤的抗炎利胆作用.方法:用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察胆乐汤的抗炎作用;以胆汁分泌量为指标,测量大鼠在给药后的胆汁流量变化.结果:胆乐汤的高中剂量组对二甲笨所致小鼠具有明显的消炎作用(P＜0.01),低剂量组有一定的抗炎作用;胆乐汤高剂量组能显著增加大鼠胆汁分泌量(P＜0.01),且高低中高剂量组随着给药剂量增加胆汁分泌量有增加的趋势,呈一定的量效关系.结论:胆乐汤具有一定的抗炎利胆作用.     

黄连抑菌活性的谱效关系研究

目的 以黄连为对象探讨中药谱效关系研究新方法。方法 建立优化基于ATP生物发光的微量抑菌检测方法,与微量稀释法抑菌结果进行相关性考察。以所建立的抑菌检测方法检测黄连抑菌活性,整合黄连的化学与抑菌活性图谱,探讨黄连化学组分与活性之间的关系。结果 所建立的基于ATP生物发光抑菌检测法与微量稀释法相关性良好,分别检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌所得相关系数r值分别为0.998和0.957。黄连谱效相关研究结果显示,黄连中除主要有效成分黄连素外,还可能含有微量高效抑菌成分。结论 基于ATP生物发光的抑菌活性检测方法适用于中药抑菌活性的谱效关系研究,为中药质量控制和药效评价提供新的技术手段。     

利胆止痛胶囊对小鼠抗抑菌炎、镇痛和利胆作用研究

目的观察云南永孜堂制药有限公司生产的利胆止痛胶囊的利胆、抑菌和抗炎镇痛作用.方法采用摘除小鼠胆囊直接称重的方法观测利胆止痛胶囊对正常小鼠胆汁量的影响.采用试管两倍稀释法观测利胆止痛胶囊在体外对甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及痢疾杆菌、大肠杆菌和沙门菌生长的影响.采用小鼠耳廓肿胀、大鼠足跖肿胀模型,观测利胆止痛胶囊抗炎消肿作用.运用小鼠热板法及醋酸扭体方法评价利胆止痛胶囊的镇痛作用.结果 0.72、1.44 g/kg的利胆止痛胶囊明显减轻正常小鼠的胆囊重量,低剂量的利胆止痛胶囊对小鼠胆囊重量无明显影响.利胆止痛胶囊对金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、痢疾杆菌和大肠杆菌的MIC分别为25、50、50、25和12.5 mg/mL,对沙门菌无明显抑菌作用.0.72、1.44 g/kg利胆止痛胶囊明显减轻小鼠耳廓肿胀度.对大鼠足跖肿胀模型,高剂量（0.72 g/kg）的利胆止痛胶囊于给药后1 h起效,作用至少可持续4 h;中、低剂量无明显影响.0.72和1.44 g/kg的利胆止痛胶囊明显减少小鼠扭体次数,热板法结果表明于给药后60～120 min均显著延长小鼠置入圆筒至开始舔后足时间.结论利胆止痛胶囊具有抑菌、抗炎、消肿、镇痛和利胆作用.     

名老中医经验方芙蓉膏体外抗炎作用实验研究

目的 观察芙蓉膏对炎症模型动物的抗炎作用,为临床应用提供实验依据.方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀度实验、大鼠角叉菜胶致足趾肿胀度实验、小鼠棉球肉芽肿增生实验观察芙蓉膏的抗炎作用.结果 芙蓉膏能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,明显减轻角叉菜胶性致大鼠足跖肿胀度,并具有显著抑制棉球诱发所致小鼠炎症的肉芽增生作用,与模型组比较差...     

补骨脂素抑制破骨细胞形成及其机制的实验研究

目的 探讨补骨脂素对破骨细胞分化的影响,以及对破骨细胞ERα、IL-17R基因表达的调节作用,初步阐明补骨脂素抗骨质疏松作用.方法 采用核因子κB受体活化因子配体体外诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7分化为破骨细胞,以雌二醇作为阳性对照药,补骨脂素分为高剂量(10 μmol/L)、中剂量(5 μmol/L)、低剂量(2.5 μmol/L).通过TRAP染色细胞数和骨吸收陷窝数评价药物抑制破骨细胞分化作用,同时采用RT-PCR和ELISA检测破骨细胞MMP-9、Cathepsin K、TRAP基因表达和蛋白水平,反映破骨细胞活性,RT-PCR和ELISA检测IL-17R、ER-α的基因表达和蛋白水平,初步探讨补骨脂素作用机制.结果 与对照组比较,补骨脂素高、中、低3个浓度均显著抑制破骨细胞形成数和骨陷窝形成数,同时对Cathepsin K、TRAP、IL-17R的基因表达均有显著的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01),并且显著增强ER-α基因表达(P＜0.01).高、中、低剂量的补骨脂素对MMP-9的基因表达有显著的抑制作用(P＜0.05).与对照组比较,高、中剂量的补骨脂素对Cathepsin K的蛋白含量有非常显著的抑制作用(P＜0.01);高、中、低剂量的补骨脂素对TRAP、MMP-9、IL-17R的蛋白含量有显著的抑制作用(P＜0.05,P＜0.01);高、中、低剂量的补骨脂素均显著促进ER-α的蛋白表达(P＜0.01).结论 补骨脂素对破骨细胞的形成和溶骨活性均有显著的抑制作用,该作用可能通过提高破骨细胞雌激素受体的表达和抑制IL-17R的表达实现.     

橄榄苦苷对破骨细胞的分化以及骨吸收功能的影响

目的 探讨橄榄苦苷(oleuropein)对破骨细胞分化成熟以及骨吸收功能的影响及其可能机制.方法 把不同浓度的橄榄苦苷(12.5、25、50 μmol/L)分别加入由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的体外破骨细胞培养体系中,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resist ant acid phosphatase,TRAP)染色方法观察呈TRAP阳性的多核细胞;RAW264.7细胞也用RANKL诱导,用流式细胞仪分析橄榄苦苷对破骨细胞凋亡的影响;在扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)下观察骨吸收陷窝,并用图像分析软件统计其面积.采用Western blot法检测橄榄苦苷对破骨细胞特异性蛋白组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、激活T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATC1)及相关信号通路蛋白表达的影响.结果 TRAP染色结果显示,橄榄苦苷能显著抑制RANKL诱导的破骨细胞的形成,且呈浓度依赖性(P＜0.05);橄榄苦苷能下调破骨细胞特异性蛋白CTSK的蛋白表达水平(P＜0.05);橄榄苦苷对破骨细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);橄榄苦苷能显著减少骨吸收陷窝的面积(P＜0.05);橄榄苦苷能够下调NFATC1及磷酸化p38(p-p38)的表达(P＜0.05).结论 橄榄苦苷可以抑制由RANKL诱导的破骨细胞分化以及破骨细胞的骨吸收功能,可能和橄榄苦苷能够下调p38/MAPK信号通路有关.     

青黛对实验性结肠炎抗炎作用的体内外研究

目的 研究青黛对溃疡性结肠炎(UC)体内、体外炎症模型的抗炎作用.方法 大鼠随机分为正常组、模型组、青黛高剂量组、青黛低剂量组,以低浓度TNBS/乙醇溶液灌肠诱导大鼠实验性结肠炎体内炎症模型,连续以青黛高、低剂量混悬液灌胃治疗10 d,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-l(IL-1)、IL-6、IL-8浓度.以脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞24h诱导体外炎症模型,以MTT法检测青黛对细胞生存率的影响,以ELISA法研究青黛在直接干预、预防干预2种模式下对细胞培养液IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.结果 动物实验:模型组大鼠血清中IL-1、IL-6、IL-8浓度均明显高于空白组(P＜0.05),青黛高剂量组血清中IL-1、IL-6、IL-8含量均明显低于模型组(P＜0.05),青黛低剂量组血清IL-6、IL-8浓度明显低于模型组(P＜0.05).细胞实验:模型组中IL-6、TNF-α水平较正常组均有明显升高(P＜0.05);青黛直接干预时,10 μmol/L青黛组细胞培养液IL-6、TNF-α均较模型组有明显下降(P＜0.05);青黛预防性干预时,10 μmol/L青黛组IL-6明显下降(P＜0.05).结论 青黛对溃疡性结肠炎有一定的体内、体外抗炎作用,抗炎机制可能为下调炎症因子的表达.     

通脉络胶囊抗心肌缺血和耐常压缺氧作用的研究

目的：研究通脉络胶囊对实验动物的抗心肌缺血和耐常压缺氧作用,为临床用药提供依据。方法：给兔耳静脉注射脑垂体后叶素,造成急性心肌缺血状态,以心电图ＳＴ段及Ｔ波产生的变化为指标,来研究通脉络胶囊对抗垂体后叶素引起的兔心肌缺血作用;将小鼠放在密闭的容器中造成缺氧环境,以小鼠在常压缺氧条件下呼吸停止的时间为指标,来研究小鼠的耐常压缺氧作用。各实验均设四组动物：通脉络胶囊高、低剂量组、复方丹参片组、水对照组。结果：通脉络胶囊高剂量组与对照组比较有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）;低剂量组有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。与复方丹参片组比较,抗心肌缺血作用无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;耐常压缺氧作用的高剂量组有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：通脉络胶囊有显著的抗心肌缺血作用和耐常压缺氧作用,它的疗效与剂量有依赖关系;抗心肌缺血作用与复方丹参片近似,耐常压缺氧作用远较复方丹参片强。     

防风汤抗炎作用的实验研究

目的:观察防风汤的抗炎作用。方法:用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加及小鼠棉球肉芽组织增生的方法,观察防风汤的抗炎作用。结果:防风汤大、中、小剂量组的鼠耳肿胀度、腹腔伊文思蓝的OD值均比蒸馏水组小,差异显著(P<0.01);防风汤大、中剂量组的肉芽肿的重量比蒸馏水组小,差异显著(P<0.01),小剂量组的肉芽肿的重量与蒸馏水组相比,差异不显著(P>0.05)。结论:防风汤具有抗炎作用。     

不同相对分子质量一年生膜荚黄芪多糖对RAW264.7细胞炎症相关因子表达的影响

目的：观察不同相对分子质量的一年生膜荚黄芪多糖（APSⅠ）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7炎症模型分泌促炎因子和抗炎因子的影响,探讨APSⅠ的抗炎作用。方法：体外培养RAW264.7细胞,APSⅠ作用于未经刺激的RAW264.7细胞及LPS（1 mg/L）刺激后RAW264.7细胞,将细胞分为空白对照组、LPS模型组、APSⅠ组及LPS+ APSⅠ不同相对分子质量组(APSⅠ-A,APSⅠ-B,APSⅠ-C),采用CCK-8法检测不同相对分子质量、不同浓度的APSⅠ组RAW264.7细胞增殖活力,硝酸还原酶法测定细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量,酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）的分泌量。结果：与空白对照组比较,APSⅠ单独处理组RAW264.7细胞增殖活性降低（P<0.05或P<0.01）,NO及IL-10表达水平明显增加（P<0.05）,TNF-α的分泌量降低（P<0.05）;与LPS模型组比较, LPS+APSⅠ组RAW264.7细胞增殖活力显著升高（P<0.05或P<0.01）,NO、TNF-α的表达明显降低（P<0.05或P<0.01）,IL-10的分泌增加（P<0.05或P<0.01）;3种不同相对分子质量APSⅠ之间比较,APSⅠ-C对NO、TNF-α的抑制更为明显,且APSⅠ-C促进IL-10分泌的作用强于APSⅠ-A及APSⅠ-B。结论：APSⅠ　可以拮抗LPS所致的RAW264.7细胞炎症反应;不同相对分子质量APSⅠ的抗炎作用有差异,APSⅠ的生物活性与其相对分子质量存在一定的关联性。     

In vitro evaluation of cytotoxicity and oxidative stress induced by multiwalled carbon nanotubes in murine RAW 264.7 macrophages and human A549 lung cells

Objective To investigate in vitro cytotoxicity and oxidative stress response induced by multiwalled carbon nanotubes (MWCNTs).Methods Cultured macrophages (murine RAW264.7 cells) and alveolar epithelium cells type II (human A549 lung cells) were exposed to the blank control,DNA salt control,and the MWCNTs suspensions at 2.5,10,25,and 100 μg/mL for 24 h.Each treatment was evaluated by cell viability,cytotoxicity and oxidative stress.Results Overall,both cell lines had similar patterns in response to the cyto...     

insig-1基因siRNA干扰质粒的构建及对炎症状态下细胞胆固醇代谢的影响

目的 构建针对insig-1 基因的siRNA 表达载体,观察其对炎症状态下RAW264.7小鼠巨噬细胞胆固醇代谢的影响.方法 根据insig-1核苷酸序列,设计并构建针对insig-1 基因mRNA的3个特异性siRNA表达载体(si-1、si-2、si-3)和1个无同源性的阴性对照载体(si-nc),经酶切和测序鉴...     

霍山石斛胶囊延缓果蝇衰老的观察

目的:探讨霍山石斛胶囊(dendrobium huoshenese capsule,DHC)对延缓果蝇衰老的影响作用及其机制。方法:收集羽化8h内的黑腹果蝇,在普通培养基上饲喂20天后随机分为4组,分别以添加0.000%、0.056%、0.167%、0.500% DHC的培养基饲喂,用生存实验检测果蝇寿命;分别测定给药10、20、30日龄果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:0.056%、0.167%、0.500% DHC能显著延长雌雄果蝇的半数死亡时间、寿命及最高寿命(P<0.01),给药10、20、30日龄时雌雄蝇体内随着霍山石斛浓度增高,SOD活性升高、MDA含量降低(P<0.05)。结论:DHC具有抗氧化、延缓果蝇衰老的作用。