新型阿片受体配基的生物鉴定

目的研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用.方法采用生物鉴定的方法,检测新型阿片受体配基、DAMGO和吗啡对豚鼠回肠(GPI)纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型,评价效价强度,测定IC50值.结果新型阿片受体配基、DAMGO和吗啡都可抑制GPI的电刺激收缩,在GPI上显示纯激动剂作用.新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合.新型阿片受体配基1#、2#、3#、6#、8#、9#和12#以及典型的阿片受体激动剂DAMGO和吗啡的IC50值分别为(11.57±0.71)、(1255.00±407.00)、(9.40±1.41)、(240.60±146.40)、(453.00±7.07)、(130.60±10.61)、(7.68±0.71)、(12.04±0.61)和(72.15±22.63)nmol/L.竞争性拮抗剂纳洛酮可拮抗配基的激动作用,使新型阿片受体配基、DAMGO和吗啡的量效曲线平行右移.结论新型阿片受体配基可激动μ阿片受体,是典型的μ受体激动剂.     

新合成的阿片受体配基对稳定转染μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性

目的：研究新合成的阿片受体配基对稳定表达于CHO细胞的μ阿片受体的结合特性。方法：采用细胞生物学和放射性配基结合的方法,以能稳定表达μ阿片受体的CHO细胞为模型,检测阿片受体配基[^3H]diprenorphine(^3H-dip)与μ阿片受体的饱和性结合特征及一系列新合成阿片配基的竞争性结合特征。结果：(^3H-dip)结合μ阿片受体的平衡解离常数Kd值为1.06nmol/L;受体最大容量Bmax为930fmol/mg蛋白。竞争性结合实验表明3^#和12^#配基对μ阿片受体的亲和力高于BAMGO和吗啡。2^#、6^#、8^#和9^#配基对μ受体的亲和力低于BAMGO和吗啡。结论：新配基3^#和12^#对μ亚型的阿片受体有良好的亲和力。2^#、6^#、8^#和9^#配基对μ受体的亲和力较低。     

组织片放射配基受体结合微量分析法

现代技术的发展与应用,使受体研究成为现代生物医学科学中最活跃的领域之一。其中,放射配基受体结合分析法(RBA)又是当前受体研究的主要手段,为了简化检测流程、保持样品内受体活性和提高灵敏度,利用完整细胞进行受体的研究,我们在改制“简易恒冷切片箱”和采用国产~(125)碘标记配基的基础上,研究建立了组织切片放射配基受体结合微量分析法,为受体研究提供一项适合临床应用的微量分析技术。     

受体的动力学测定方法

普遍采用的测定受体亲和力和最大结合容量的方法,在放射性配基和受体结合达到平衡后进行,结合复合物和游离配基浓度处于动态平衡,其宏观值不变。但受体测定也可在配基受体结合达到平衡和复合物解离的动态过程中进行,这就是受体的动力学测定法。本文介绍此动力学方程和计算公式(后者以Clark模型假设为基础)并给出一个测定实例。     

袖珍计算机拟配SCATCHARD曲线及其应用

在某种配基与其特异结合分子互相作用时(如:激素—受体分子结合实验)可以得到多种数据。其中以配基结合量与游离量之比B/F(Y轴)对配基结合浓度B(X轴)作图,称为SCATCHARD图。SCATCHARD分析法是生物化学及免     

人、兔、大鼠血淋巴细胞β-受体若干性质的比较

以[_3H]DHA为放射配基,比较了人、家兔和大鼠血淋巴细胞β-受体与配基结合的若干参数。结果表明,不同种属间淋巴细胞β-受体密度存在差异,依次为家兔(n=9)104.5±19.8 fmol/10~6细胞>大鼠(n=5)68.8±12.3 fmol/10~6细胞>人(n=13)56±8.65 fmol/10~6细胞,(X±SD)。但是三者平衡解离常数Kd值相近,分别为8.39±2.76nM,6.34±2.99nM,6.96±1.62nM(X±SD)。Hill系数均极接近于1。提示,家兔、大鼠和人血淋巴细胞与β受体配基的结合过程属同一类型。兔和大鼠疾病模型中淋巴细胞β受体变化的资料对人类疾病时β受体作用的研究有一定的参考价值。     

性激素受体基础与临床研究

性激素的生理作用主要为促进性器官的生长发育,促进蛋白质的合成等;性激素的这些作用均是通过性激素受体来介导的。性激素(雄激素、雌激素及孕激素)受体均为核受体超家族成员,1962年Toft首次证实了子宫组织中存在与雌二醇高亲和力特异结合的蛋白质分子,即雌激素受体(ER);至20世纪80年代末,所有甾体激素受体cDNA均被成功克隆,有关性激素受体的研究有了长足的进步。我们以外周血白细胞为研究样本,对健康人及自身免疫性疾病患者性激素受体进行了较广泛的探讨。     

前列腺增生症患者血清性激素结合球蛋白结合容量的改变

作者应用放射配基结合分析法测定了良性前列腺增生症(BPH)患者及不同年龄健康男性血清性激素结合球蛋白(SHBG)结合容量。结果发现 BPH 组短程乙烯雌酚(DES)治疗前后自身配对 SHBG 结合容量差值     

男性假两性畸形临床与实验研究（对雄激素不敏感综合征三例）

报告３例雄激素水平不敏感综合征患者，染色体核型虽为４６，ＸＹ，但均为女性表现型（或女性化不完全），血清垂体促性腺激素升高，性激素（Ｔ，ＤＨＴ等）水平正常，以２３例年龄分别与患者相配伍的正常男性为对照，分析活检患者会阴部皮肤组织中的５α－还原酶Ｉ型和ＩＩ型同工酶的活性，靶组织中雄激素（Ｔ，ＤＨＴ）的水平，雄激素受体的配基给活性，结果表明，患者的５α－还原酶活性正常，但雄激素受体的配基结合能力缺陷，核     

补体3a受体第2胞外上174位硫化酪氨酸形成其配基结合位点

目的探讨酪氨酸硫化对补体第3成分片断a受体(C3aR)配基结合的意义.方法体外构建全长人野生型C3aR及其突变型的表达质粒,并测定开放读框序列.证实序列正确后,转染人肾胚胎上皮细胞(HEK)293T 24 h后用35S-蛋氨酸/半胱氨酸或35S-硫标记转染的HEK 293T细胞,48 h后再进行免疫沉降实验.转染的HEK 293T细胞在24h后分成两部分,一部分细胞转染后48 h用流式细胞仪检测受体的表达水平,另一部分用于碘-125标记配基结合实验.测定转染了C3aR及其突变体的犬胸腺上皮细胞(Cf2Th)在48 h后钙离子细胞内流.结果突变型C3aR的表达较野生型降低;C3aR第2胞外环的5个酪氨酸翻译后被硫化修饰;将184、188、317和318位酪氨酸突变为苯丙氨酸即可阻断酪氨酸硫化,且不影响配基结合和钙离子细胞内流;但将174位酪氨酸突变为苯丙氨酸后,则配基和受体的结合完全被阻断,并可有效抑制钙离子内流.结论证实了C3aR与配基的双位点结合模型,174位硫化的酪氨酸是其配基重要的结合位点.七次跨膜片断(7TMS)的G蛋白耦联受体(GPCR)胞外环区域的硫化酪氨酸对配基结合功能可能具有决定意义.     

特发性男性乳房增生症患者性激素及其受体改变及意义

目的:观察特发性男性乳房增生症患者血清性激素水平及外周血白细胞性激素受体的改变。方法:选取特发性男性乳房增生症患者156例,年龄(58±4)岁;对照组40例,年龄(54±3)岁;血清性激素水平用放射免疫法测定,外周血白细胞雌激素受体     

补肾方对老年原发性高血压肾气亏虚证患者性激素受体表达强度的影响

目的:观察补肾方对老年原发性高血压肾气亏虚证患者性激素受体表达强度的影响。方法:老年原发性高血压肾气亏虚证患者60例,男女各半,给予补肾方药治疗4周,采用流式细胞检测法检测雌激素受体(ER-β)和雄激素受体(AR)的荧光强度。结果:经补肾方干预后肾气亏虚证老年原发性高血压患者的外周血ER-β和AR的表达强度较治疗前均有所回升(男性P0.01,女性P0.05)。结论:补肾方可以显著提高性激素受体表达强度,从而有效介导性激素生理效应的正常发挥,以达到有效降压的目的。     

大鼠肺组织中α1和β受体的检定

本实验用放射性配基结合分析法,测定大鼠肺组织细胞膜中α_1和β肾上腺素能受体(简称α_1和β受体)。 1 材料与方法 1.1 试剂 ~3H-哌唑嗪(~3H-PZ,比放射性0.7TBq/mmol)     

直肠癌与性激素受体关系的探讨

对20例直肠癌病例的性激素受体进行了检测,证实性激素受体(包括 ER,PR,AR)除存在于其靶器官组织细胞内以外,同样存在于非靶器官的癌组织中,并对它们之间的关系加以探讨,提出对直肠癌性激素受体阳性病例仍可辅以内分泌治疗的观点.     

甲状腺激素低下对小鼠脑β-肾上腺素能受体的影响

为证实甲状腺激素对中枢神经系统的影响与β受体活动的关系,本文采用内服甲基硫氧嘧啶制作小鼠低甲状腺激素的模型,再用放射配基结合分析法测定小鼠脑β受体最大结合容量(Bmax)和亲和力(KD)的变化。并以助阳药进行实验性治疗。结果表明:脑组织B受体Bmax较对照组显著减少(p<0.00     

胃癌患者性激素受体及性激素测定的临床意义

研究36例男性胃癌患者手术前血清睾酮(T)、雌二醇(E_2)和胃癌组织标本雌激素受体(EP)、孕激素受体(PR)含量.探讨胃癌的性激素水平改变及性激索与性激素受体的关系。结果表明:(1)血清睾酮、雌二醇下降是胃癌发生的危险因索,血清睾酮对胃癌患者术前评估切除可能性有参考价值.但对判断预后及复发的意义仍有待进一步研究。(2)胃癌组织中存在ER、PR受体.对ER( )PR( )胃癌可采用内分泌治疗。     

人类良性前列腺增生组织内性激素受体测定

应用放射配基结合分析法,测定了18例良性前列腺增生(BPH)开放手术(其中11例术前接受过己烯雌酚治疗)和5例正常前列腺标本内雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)的含量,以探讨受体测定的临床意义及雌雄激素协同诱导BPH的机理。结果BPH组织内AR浓度显著高于正常前列腺组织,     

雌孕激素受体与消化系肿瘤

检测性激素受体水平对肿瘤的监测、鉴别良恶性病变、判断预后有重要的临床应用推广价值 [1 ]。本文综合近年有关雌激素受体 (ER)、孕酮受体 (PR)在消化系肿瘤表达的有关文献 ,综述如下。1　食管癌和胆囊癌　　有研究表明 [2 ] ,食管癌、胃癌、大肠癌性激素受体阳性率比较均无显著性差异。阳性率与肿瘤病理类型、生长方式、分化程度、浸润度、局部淋巴结转移及临床分期均无统计学显著性 ,Jung[3 ]等亦有相似报道。李永国等研究表明 [4] ,性激素受体的表达可能是反映胆囊癌生物学行为 (分化程度、病理类型 )的重要标记物。2　胰腺癌　　胰腺…     

雌、孕激素受体及雄激素受体在膀胱癌中的检测及其意义

人体肿瘤的性激素受体研究已有 2 0多年历史 ,目前对乳腺等靶器官肿瘤的性激素受体研究已取得令人瞩目的成就。对非靶器官的研究也引起了重视 ,而对膀胱癌与性激素受体间的关系研究 ,国内外报道甚少 ,本文对 89例膀胱移行细胞癌进行ＥＲ、ＰＲ及ＡＲ半定量检测 ,以探讨膀胱癌与性激素的关系 ,是否具有内分泌治疗及判断预后的意义。1　材料和方法材料选自我院 1990～ 1996年膀胱移行细胞癌手术标本89例 ,癌按照ＶＩＣＣ标准分期 :ＰＴＡ(非浸润期 ) ,ＰＴ1(浸润固有膜 ) ,ＰＴ2 (浸润浅肌层 )、ＰＴ3(浸润深肌层 )。根据国际肿瘤组织学标准 ,…     

雌孕激素受体与消化系肿瘤

检测性激素受体水平对肿瘤的监测、鉴别良恶性病变、判断预后有重要的临床应用推广价值[1].本文综合近年有关雌激素受体(ER)、孕酮受体(PR)在消化系肿瘤表达的有关文献,综述如下. 1 食管癌和胆囊癌 有研究表明[2],食管癌、胃癌、大肠癌性激素受体阳性率比较均无显著性差异.阳性率与肿瘤病理类型、生长方式、分化程度、浸润度、局部淋巴结转移及临床分期均无统计学显著性,Jung[3]等亦有相似报道.李永国等研究表明[4],性激素受体的表达可能是反映胆囊癌生物学行为(分化程度、病理类型)的重要标记物.