地塞米松和IL-10对hPBMC促炎细胞因子产生和核转录因子活化的影响

目的:观察地塞米松 (Dex)和白细胞介素 (IL)-10对培养的经脂多糖 (LPS)刺激的人外周血单个核细胞 (hPBMC)释放促炎细胞因子肿瘤坏死因子 (TNF)-α、IL-6及对转录因子核因子-κB(NF-κB)、活化蛋白-1(AP-1)、cAMP反应元件结合蛋白 (CREB)活化的影响。方法:用LPS刺激分离培养的hPBMC,分为正常对照组、LPS刺激组、IL-10和Dex干预组。ELISA法检测培养上清中TNF-α、IL-6含量。凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测核提取物中NF-κB、AP-1、CREB活性。结果:LPS刺激1h后TNF-α含量显著增加,Dex和IL-10干预后TNF-α含量增加被显著抑制;IL-6含量在LPS刺激后12h显著增加,Dex和IL-10显著抑制IL-6的产生;LPS刺激12h后IL-10含量显著增加,Dex对IL-10产生没有明显影响。LPS刺激1h后NF-κB、AP-1、CREB的DNA结合活性显著增加,Dex和IL-10显著抑制以上三种核因子的活性,但Dex对AP-1、CREB活性的抑制作用强于IL-10。结论:LPS诱导hPBMC释放多种促炎和抗炎细胞因子的产生,并诱导多种转录因子的活化;Dex、IL-10能抑制上述促炎细胞因子的产生和转录因子的活化。Dex对AP-1、CREB活性的抑制作用强于IL-10。     

慢性乙肝患者树突状细胞抗原递呈功能状态的初步研究

目的:研究慢性乙肝患者树突状细胞(DC)抗原递呈功能的改变。方法:从慢乙肝患者和健康人外周血分离单个核细胞,诱导培养出DC,显微镜下观察DC形态并计数,流式细胞仪检测DC表面协同刺激分子(CD80,CD86),MTT法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,ELISA法测定培养上清液中IL-12、r-IFN水平。结果:慢乙肝患者外周血单个核细胞诱导培养所获得的DC数量及表面协同刺激分子(CD80,CD86)表达水平、刺激同种异体淋巴细胞增殖能力和细胞因子产生水平均明显低于健康者(P<0.05)。结论:慢乙肝患者DC的数量及抗原递呈、免疫刺激功能状态均处于低下水平。     

尿酸诱导树突状细胞成熟的信号转导机制研究

目的: 观察树突状细胞(DCs)成熟过程中MAPKs和NF-κB信号分子表达情况,探讨尿酸刺激DCs成熟的分子机制。方法: 用尿酸体外刺激大鼠未成熟 DCs,在不同时点(0~45 min),免疫印迹方法检测p- p38、p-ERK1/2、p-JNK和NF-κB p65表达情况;以MAPKs和NF-κB信号分子抑制剂分别联合尿酸刺激DCs 48 h后,用流式细胞术检测表面分子CD83、CD86、IA/IE的表达;ELISA法测定IL-12 p70的水平。结果: (1)尿酸刺激后15 min,DCs p- p38、p-ERK1/2、p-JNK和NF-κB p65表达量明显增加,30 min时达到最大值;使用相应信号分子抑制剂后,相关蛋白表达均不能测出。(2)经p38、JNK、NF-κB p65等信号通路抑制剂预处理后,与单独尿酸刺激相比,DCs CD83、CD86、IA/IE等表面分子表达及IL-12 p70分泌水平均出现下降(P＜0.05或P<0.01),ERK1/2抑制剂预处理者,则出现表达上升(P＜0.05)。结论: 尿酸可以调节DCs p38、ERK1/2、JNK、 NF-κB等信号分子的活化,从而促进DCs表面分子表达及IL-12 p70分泌。这可能为尿酸能诱导DCs成熟及提高免疫功能的分子机制之一。     

TGF-β1对单核细胞来源的树突状细胞表型和功能的影响

目的:研究 TGF-β1对树突状细胞(DC)的分化、成熟及功能影响.方法:应用100万U/L粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)7 d诱导单核细胞分化为不成熟DC,加入终浓度20万U/L的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)48 h后获得成熟DC的体外模型,将TGF-β1加入该模型中,用流式细胞术分别检测DC分化,成熟阶段细胞表型的变化,应用ELISA检测DC IL-12的分泌水平,应用MTT法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果:TGF-β1对不成熟DC的特征性分子 CD1a的表达无明显影响,但在诱导DC的成熟阶段,TGF-β1明显抑制CD40、CD86及CD83上调.此外,TGF-β1显著减少DC IL-12的分泌,显著抑制DC刺激同种异体T 细胞增殖的能力.结论:DC是TGF-β1免疫抑制活性的靶细胞.TGF-β1不影响DC的分化,但抑制DC的成熟和细胞因子的分泌,降低DC刺激同种异体反应T细胞增殖的能力.     

姜黄素诱导的免疫耐受性人树突状细胞的研究

目的:探讨姜黄素(Curcumin)诱导免疫耐受性人树突状细胞(Dendritic cell,DC)的效果。方法:聚蔗糖-泛影葡胺(ficoll-hypaque,F-H)密度梯度离心法获得健康人外周血单个核细胞(PBMC),在含有重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白介素4(rhIL-4)的培养基中培养6天。实验共分四组:①未成熟DC组(imDC组)、②姜黄素组(Curcumin,Cur组)、③姜黄素+脂多糖组(Cur+LPS组)、④脂多糖组(LPS组)。流式细胞术检测DC表型CD80、CD86、CD83及HLA-DR的表达情况和DC吞噬葡聚糖的能力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测DC分泌白介素-12(IL-12)的能力,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力。结果:Cur能够显著抑制DC共刺激分子CD80、CD86、CD83及HLA-DR的表达,并呈剂量依赖性,与imDC组比较差异无统计学意义;与LPS组比较,Cur+LPS组DC吞噬葡聚糖的阳性细胞百分率显著提高(P<0.05),而刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力则显著下降(P<0.05),IL-12的分泌量也显著下降(P<0.05)。结论:姜黄素能够抑制人树突状细胞的成熟,从而获得免疫耐受性的人树突状细胞。     

树突状细胞体外诱导方案的对比

目的探讨并比较不同细胞因子组合、诱导时间对树突状细胞(DC)体外诱导、成熟,分泌细胞因子水平和刺激淋巴细胞增殖能力的影响,为建立DC体外高效、规模化培育体系提供依据。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),贴壁法获得DC前体细胞,用白细胞介素4(IL-4)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导2 d,将其分为6组。A组加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1α和前列腺素E2(PGE2);B组加入α干扰素(IFN-α);C组加入脂多糖(LPS);3组细胞继续培育2 d。D~F组细胞先进行1/3体积换液,24 h后,分别再加入上述A~C组的成熟因子,再继续诱导2 d。分别收获各组上清和细胞,进行细胞计数,采用流式细胞术进行表型分析;采用ELISA检测各组DC分泌IL-12p70的水平、采用细胞增殖检测试剂盒刺激淋巴细胞增殖的能力。结果 6组体外诱导体系均能培育出形态学类似DC的细胞,DC数量与纯度(均达到96%以上),各组间无显著性差异。A组与D组比较:CD40、CD80、CD83、CD86共刺激分子表达水平相近,但D组DC分泌IL-12p70水平高于A组;B组与E组比较:E组DC的CD86表达水平显著高于B组,CD80表达量略高于B组,2组DC分泌IL-12p70的水平相近;C组与F组比较:CD40、CD80、CD83、CD86共刺激分子表达水平和分泌IL-12p70的水平均相近。6组DC刺激淋巴细胞增殖水平均相近。三种不同成熟因子(组合)比较:B组DC共刺激分子CD80水平明显低于C组和A组,且IL-12p70分泌水平最低,而C组和A组共刺激分子表达水平与IL-12p70分泌水平相近。结论 TNF-α、IL-1α和PGE-2三种细胞因子联合以及LPS可有效地诱导DC表达高水平免疫共刺激分子、分泌高水平IL-12p70。     

补体调节蛋白Crry对树突状细胞的调控及诱导同种移植免疫低反应

目的:探讨补体调节蛋白Crry对树突状细胞(DC)的调节作用及诱导同种移植免疫低反应性的机制。方法:分离BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞,试验分为2组:①脂多糖(LPS)刺激组,即培养结束前加入外源性脂多糖(1 mg/L)刺激24小时;②Crry处理组,加入抗小鼠Crry抗体5μg/ml,结束前加入外源性脂多糖(1 mg/L)刺激24小时,流式细胞仪检测树突状细胞表面分子CD86、CD40、MHCⅡ的表达,ELISA法检测其细胞上清液中IFN-γ、IL-10和IL-12的水平,ELISA法检测细胞上清液中C3、C5、C3a和C5a的含量,并以BALB/c小鼠的DC作为刺激细胞,以C57BL/6小鼠的淋巴细胞作为反应细胞进行同种混合淋巴细胞培养,MTT法检测淋巴细胞增殖活性。结果:经LPS刺激后,培养的DC表面共刺激分子CD40、CD86和MHCⅡ分子的表达显著增加(P<0.05);Crry处理组DC表面共刺激分子CD86和MHCⅡ分子的表达较LPS刺激组显著降低(P<0.05),而CD40的表达无显著性差异;Crry处理组培养上清液中C3和C5的含量无明显变化,但C3a、C5a的含量较LPS刺激组显著减少(P<0.05);培养DC上清液中IFN-γ和IL-12的含量较LPS刺激组显著降低(P<0.05),IL-10的含量较LPS刺激组显著增加(P<0.05);培养的DC加入Crry抗体后,其淋巴细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。结论:补体调节蛋白Crry可以对DC具有重要的调控作用,可以影响其共刺激分子的表达、补体的生成以及细胞因子的合成等,从而诱导同种移植免疫低反应性,丰富先天免疫对获得性免疫的调节作用。     

HBeAg对小鼠骨髓源性树突状细胞成熟的影响

目的 探讨HBe Ag对LPS诱导小鼠骨髓源性树突状细胞(DC)成熟的影响。方法 体外诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞分化成未成熟树突状细胞,经CD11c磁珠分选纯化后将DCs随机分为空白对照组、LPS刺激组、HBe Ag+LPS刺激组。流式检测DC表型变化,混合淋巴反应(MLR)检测DC促T淋巴细胞增殖能力,酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液中IL-12的分泌水平,Western blot检测p38磷酸化水平,并设置SB203580组为阳性对照探讨细胞IL-12分泌的可能调节机制。结果 LPS刺激未成熟DC引起细胞表面MHC-Ⅱ、CD86表达升高,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强,IL-12分泌量增高。HBe Ag可抑制LPS促进DC表面MHC-Ⅱ、CD86表达升高和促淋巴细胞增殖能力增强的作用。LPS刺激DC可引起p38磷酸化水平升高,并呈时间依赖性;HBe Ag或SB203580预处理细胞再予LPS刺激,磷酸化p38表达和IL-12分泌较单纯LPS刺激组明显下降。结论 HBe Ag对LPS引起的树突状细胞的成熟有一定的抑制作用,且HBe Ag可能通过抑制p38MAPK信号通路下调LPS诱导的树突状细胞IL-12的产生。     

NF-κB活化在IL-1β诱导的小鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用

目的:研究NF-κB在rhIL-1β刺激引起的体外培养的鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用。方法:NF-κΒ活性检测采用电泳迁移率改变法(EMSA),IL-6mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PR)检测,培养上清IL-6蛋白含量采用ELISA检测。结果:rhIL-1β刺激肾小球系膜细胞时,在上调IL-6蛋白和基因表达的同时亦激活NF-κB,而且这种上调作用可被NF-κB特异性抑制剂PDTC所阻抑。结论:IL-1β诱导鼠肾小球系膜细胞表达IL-6是通过NF-κB调控,NF-κB可能参与肾小球肾炎的免疫炎症反应。     

狼疮性肾炎肾组织CD134共刺激信号对核因子-κB表达的影响

目的:探讨CD134(OX40)对核因子-κB(NF-κB)表达的影响及CD134和NF-κB在狼疮性肾炎(LN)发病机制中的可能作用。方法:对40例LN患者肾组织, 用免疫组织化学方法检测CD134的表达, 用碱性磷酸酶-小鼠抗碱性磷酸酶免疫复合物法(APAAP)测定NF-κB表达, 分析CD134与NF-κB的相关性。结果:LN患者肾组织中, CD134表达显著上调, NF-κB在肾小球及肾小管也呈高水平表达, 尤其以Ⅳ型LN更为明显。除系膜细胞、内皮细胞和远曲小管CD134表达明显增强外, 肾间质毛细血管和大血管内皮细胞亦有CD134表达阳性的浸润细胞。LN患者肾小球和肾小管中CD134与NF-κB的表达呈正相关(r分别为0.5542, 0.6279;P＜0.05, P＜0.05)。结论:LN患者存在CD134共刺激分子的异常表达;通过CD134分子的异常信号通路的活化, NF-κB在LN肾组织局部的表达明显增高, 这在LN的发生和发展中可能起着重要的作用。     

A role for anti-CD45RB monoclonal antibody treatment upon dendritic cells

Selective interference with CD45RB isoform by monoclonal antibody (anti-CD45RBmAb) reliably induces donor-specific tolerance. Dendritic cells (DCs) are the most potent antigen-presenting cells that are capable of activating na?ve T cells. The purposes of the present study were to investigate the roles of anti-CD45RBmAb on the phenotypes and functioning of DCs and to further illustrate the mechanism of anti-CD45RBmAb-inducing immunologic tolerance. DCs from C57BL/6 mice were cultured and treated with various doses of anti-CD45RB monoclonal antibody. Cell phenotype, cycle and phagocytic ability were detected by flow cytometry. The production of IL-10 and IL-12 in the supernatants of mature DCs was measured with ELISA. Exosomes (Dex) were recovered from the supernatant of DCs cultured for 6 days in depleted medium, and effects of DCs and Dex on the ability of T-cell proliferation were detected by mixed lymphocyte culture. Anti-CD45RBmAb could inhibit DCs maturation in a dose-dependent manner, and the effects of exosomes (Dex) on DCs enhance or inhibition proliferation of T cells were also in a dose-dependent manner. Anti-CD45RBmAb could profoundly inhibit the maturation and functioning of DCs and generate tolerogenic dendritic cells (tDCs) as well as Dex, suggesting mechanistic contributions to tolerance development from the DCs through interactions with T cells.     

Dendritic cell activating peptides induce distinct cytokine profiles

High-mobility group box 1 protein (HMGB1), a DNA-binding nuclear and cytosolic protein, is a pro-inflammatory cytokine released by monocytes and macrophages. HMGB1 as well as its B box domain induce maturation of human dendritic cells (DCs). This report demonstrates that the B box domain induces phenotypic maturation of murine bone marrow-derived dendritic cells (BM-DCs) as evidenced by increased CD86, CD40 and MHC-II expression. The B box domain enhanced secretion of pro-inflammatory cytokines and chemokines: IL-1beta, IL-2, IL-5, IL-8, IL-12 and tumor necrosis factor (TNF)-alpha, but not IL-6 and IL-10. Furthermore, four peptides whose sequences correspond to different regions of HMGB1 induced production of IL-1beta, IL-2 and IL-12 (p70), but not IL-10 and IL-6 in mouse BM-DCs. Interestingly, these peptides differed in their capacity to induce TNF-alpha, IL-5, IL-18 and IL-8. B box domain as well as peptide-activated DCs acted as potent stimulators of allogeneic T cells in a mixed leukocyte reaction. DCs exposed to HMGB1 peptides induced proliferation of ovalbumin-specific syngeneic T cells. These DC-activating peptides could serve as an adjuvant in immunotherapeutic or vaccine context and the selective activity of these different peptides suggests a means to customize the functional properties of DCs.     

MCF-7 乳腺癌细胞培养上清对树突状细胞抑制作用的研究

目的:应用MCF-7乳腺癌细胞分泌的上清液培养正常外周血树突状细胞,探讨MCF-7乳腺癌细胞分泌因子对正常树突状细胞分化、成熟及功能的影响.方法:应用MCF-7 乳腺癌细胞的培养上清和GM-CSF、IL-4及TNF-α培养正常外周血单个核细胞,检测所诱导的树突状细胞(DC)及其致敏的CTL活性.结果:MCF-7 乳腺癌细胞培养上清能够明显抑制正常树突状细胞的分化成熟及抗原提呈能力,CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达明显降低,与正常对照差异显著(P＜0.01);CTL对MCF-7细胞杀伤活性为17.35%与对照组56.14%比较差异显著(P＜0.01);IL-12分泌和共刺激T淋巴细胞所分泌的IFN-γ明显降低(P＜0.01).结论:MCF-7 乳腺癌细胞上清明显抑制所共培养的树突状细胞的分化、成熟及抗原提呈能力.     

Essential roles of SHPS-1 in induction of contact hypersensitivity of skin

SHPS-1 is a transmembrane protein that binds the protein tyrosine phosphatases SHP-1 and SHP-2 and is abundant on the surface of CD11c(+) dendritic cells (DCs). We recently showed that SHPS-1 is essential for priming by DCs of CD4(+) T cells and for development of Th17 cell-mediated experimental autoimmunity. We have now further evaluated the importance of SHPS-1 and that of its ligand CD47 in contact hypersensitivity (CHS) to 2,4-dinitro-1-fluorobenzene (DNFB). Whereas the DNFB-induced CHS response was impaired in mice that express a mutant form of SHPS-1 lacking most of the cytoplasmic region, it was unaffected in CD47-deficient mice. Moreover, treatment of wild-type mice with mAbs to SHPS-1 that either block or do not block the binding of SHPS-1 to CD47 inhibited the CHS response. A mAb to CD47 had no such effect. The 2,4-dinitro-benzenesulfonic acid-induced proliferation of, and production of IFN-gamma or IL-17 by, T cells from DNFB-sensitized wild-type mice were inhibited by either mAb to SHPS-1 but not by that to CD47. In contrast, the blocking mAbs to SHPS-1, but not that to CD47, inhibited an allogeneic mixed leukocyte reaction. Both mAbs to SHPS-1, but not that to CD47, also inhibited the lipopolysaccharide- or polyinosinic-polycytidylic acid-induced production of TNF-alpha by DCs. These results suggest that SHPS-1 is essential for development of CHS, likely as a result of its positive regulation of the priming by DCs of CD4(+) T cells. However, such regulation by SHPS-1 does not appear to require its interaction with CD47.     

香加皮羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对树突状细胞分化成熟的影响

目的：探讨香加皮羽扇豆烷乙酸酯（CPLA）对人外周血单个核细胞（PBMC）来源的树突状细胞（DC）在体外分化成熟及免疫活性的影响。方法：从人外周血分离单个核细胞，与细胞因子GM—CSF、IL-4共培养，于第5天加入DC的促成熟刺激剂TNF-α（阳性对照组）或CPLA。倒置显微镜和透射电镜下观察DC的形态；应用流式细胞术检测成熟DC的表面标志CD1a、CD83、CD80和CD86的表达情况；用ELISA检测DC培养上清中IL-12和IFN-γ的含量；用MTT法测定DC刺激T细胞增殖的能力。结果：培养10d后，经CPLA刺激的PBMC呈现出典型DC的形态学特征；成熟DC的特征性表面分子CD1a、CD83、CD80和CD86表达水平均明显上调（P〈0．05）；细胞培养上清中IL-12和IFN-γ含量明显增高（P〈0．05）；刺激T细胞增殖的能力明显增强（P〈0．05）。结论：CPLA可诱导PBMC来源的DC分化成熟，并可促进其细胞因子的分泌，增强DC的免疫调节活性。     

孕酮对人树突状细胞成熟和免疫功能的影响

目的：研究孕酮（P₄）对人外周血来源树突状细胞（DCs）成熟和免疫学功能的影响。方法：在人外周血来源DCs体外培养时加入两种浓度的P₄ (10-7 mol/L和10-6 mol/L)处理，光镜和电镜下观察DCs的生成情况及形态变化，以流式细胞仪分析各组细胞的免疫表型，用ELISA方法测定其分泌的IL-10和IL-12水平，［3H］-TdR掺入法检测体外混合淋巴细胞反应中DCs刺激同种反应性T细胞的增殖能力。结果：加入P4培养后, DCs树突状和膜面状伪足减少，表达低水平MHC-II分子和共刺激分子CD40、CD80和CD86，其分泌的IL-10水平升高，IL-12水平明显下降，DCs刺激同种反应性T细胞的功能显著下降。结论：P₄抑制人外周血来源DCs的成熟，对其免疫学功能具有负性调节作用。     

激动型CD40单克隆抗体体外抑制结肠癌细胞增殖的实验研究

目的 探讨激动型CD40单克隆抗体在体外对结肠癌细胞增殖的抑制作用.方法 树突状细胞(DCs)经结肠癌冻融抗原致敏后予以不同条件激活,分为激动型CD40单克隆抗体组、阴性对照组及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)阳性对照组,诱导培养至第7天,用流式细胞仪检测各组DCs表面分化相关抗原CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达,酶联免疫吸附测定法检测DCs培养液上清中白细胞介素-12(IL-12)的质量浓度,噻唑蓝比色法检测DCs体外刺激T淋巴细胞增殖的能力,进而检测DCs所诱导的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对人结肠癌细胞HCT116的杀伤作用.结果 与阴性对照组相比,激动型CD40单克隆抗体组活化的DCs表面抗原CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达率均显著升高(均P＜0.05),DCs上清中IL-12的质量浓度亦显著升高((716.80±53.43) pg/ml比(405.51±12.17) pg/ml,P＜0.05),活化的DCs具有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力(刺激指数2.006 2±0.438 3比1.365 0±0.209 8,P＜0.05),活化的DCs所诱导的CTL对HCT116细胞具有更强的杀伤作用(抑制率(66.08±0.41)％比(46.60±1.10)％,P＜0.05);而与TNF-α阳性对照组相比,其差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 激动型CD40单克隆抗体在体外可促进DCs的活化与成熟,进而诱导肿瘤特异性CTL的产生,从而抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖.     

血管紧张素Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响*

 目的： 探讨血管紧张素II（Ang II）对人单核细胞源树突状细胞（DCs）免疫成熟进程及摄取氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）功能的影响。方法: 采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含100 μg/L重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和50 μg/L重组人IL-4（rhIL-4）的RPMI-1640培养液培养,诱导分化为未成熟DCs。经不同浓度的Ang II干预24 h,另用10 μmol/L血管紧张素II受体1拮抗剂洛沙坦预处理后再加入Ang II干预,采用流式细胞术检测细胞免疫表型（CD83和HLA-DR）,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清液中细胞因子（IL-12和IFN-γ）的浓度;通过加入10 mg/L的荧光DiI标记的Ox-LDL,用流式细胞仪检测DiI-Ox-LDL的摄取分数;采用real-time PCR法检测清道夫受体A（SR-A）、CD36和凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1） mRNA的表达。结果: (1) Ang II干预可上调DCs表面成熟标志物CD83和HLA-DR的表达,且分泌细胞因子IL-12和IFN-γ水平升高,10 μmol/L洛沙坦预处理可明显抑制Ang II诱导的DCs成熟。(2) Ang II干预可促进DCs对DiI-Ox-LDL的摄取,洛沙坦预处理可部分抑制DCs对DiI-Ox-LDL的摄取。(3)Ang II干预可上调LOX-1 mRNA的表达,但对SR-A和CD36的表达无明显影响,洛沙坦预处理可明显抑制LOX-1mRNA的表达,但SR-A和CD36的表达无明显变化。结论: Ang II可促进DCs的免疫成熟,并且可能通过上调LOX-1的表达,促进DCs对Ox-LDL的摄取,这可能是Ang II促动脉粥样硬化的新机制。     

转化生长因子β1抑制树突状细胞的成熟及下调TLR4的表达

目的：研究转化生长因子β1（TGF-β1）对小鼠来源树突状细胞（DC）功能的影响。 方法: 在培养体系中同时应用GM-CSF和TGF-β1培养的TGF β-DC，用脂多糖（LPS）观察其对外源刺激的反应，流式细胞仪（FCM）检测细胞表型，应用BrdU ELISA法通过96 h混合淋巴细胞反应（MLR）检测其同种异基因刺激能力，ELISA法测IL-12 p70的分泌水平，分别用半定量RT-PCR法和FCM检测Toll-like受体4（TLR4）表达。 结果: TGF β-DC与常规培养的未成熟DC（imDC）相比，CD80、CD86、I-Ab、CD40表达更低。LPS对TGF β-DC的促成熟作用反应不明显，其表面共刺激分子升高的幅度不大，异基因的刺激能力提高不显著，且IL-12 p70的分泌下降。RT-PCR与FCM都显示TGF β-DC较imDC弱表达TLR4。 结论: TGF β1能抑制DC共刺激分子的表达，TGF β-DC能抵抗LPS的促成熟作用，并可能与其TLR4表达下降有关。