镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠脑组织氧化应激的影响

目的探讨镇肝熄风汤抑制帕金森病肝阳上亢证大鼠脑组织氧化应激的可能机制。方法 105只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、镇肝熄风汤高、中、低剂量组[32,16,8 g/(kg·d)]及司来吉兰[0.9 mg/(kg·d)]组,每组15只。以附子汤灌胃联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质制备帕金森病肝阳上亢模型。镇肝熄风汤组大鼠按体重剂量灌胃,每日1次,共4周。分光光度法检测大鼠中脑组织MDA含量,Western blot检测海马Nrf2和HO-1蛋白表达。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠中脑组织MDA含量明显升高,HO-1蛋白表达代偿性上调。与模型组比较,镇肝熄风汤显著降低了PD肝阳上亢证大鼠中脑组织MDA含量,上调Nrf2和HO-1蛋白表达。结论镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑组织氧化损伤具有保护作用,其机制可能与镇肝熄风汤活化脑组织Nrf2抗氧化防御体系有关。     

镇肝熄风汤对帕金森病大鼠易激惹程度和结膜充血及NQO-1,TH的影响

目的:观察镇肝熄风汤对帕金森病肝大鼠易激惹程度和结膜充血的影响及可能机制。方法:将105只Wistar大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,司来吉兰组(0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),镇肝熄风汤低、中、高剂量组(8,16,32 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组15只。采用附子汤ig联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质法复制帕金森病肝阳上亢型病证结合大鼠模型,灌胃4周。蛋白质免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测酪氨酸羟化酶(TH)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组比较,帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血显著升高,中脑组织NQO-1蛋白和mRNA表达增加,而TH蛋白表达明显降低(P0.05)。与帕金森病肝阳上亢证模型组比较,镇肝熄风汤组大鼠易激惹程度和结膜充血显著降低,TH蛋白表达显著增加,NQO-1蛋白和mRNA表达均明显增加(P0.05),而司来吉兰组大鼠易激惹程度、结膜充血和中脑组织NQO-1蛋白表达无显著性差异。结论:镇肝熄风汤能显著改善帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血,其机制可能与上调大鼠中脑组织TH和NQO-1分子表达有关。     

镇肝熄风汤预处理对MCAO大鼠脑组织病理学变化和神经元凋亡的影响

目的:研究镇肝熄风汤对大脑中动脉梗死(MCAO)大鼠脑组织的病理学变化和神经元凋亡的影响.方法:MCAO术前给予高、低剂量镇肝熄风汤(15,30 g·kg-1)灌胃14 d,采用线栓法制备MCAO.术后6h称重法检测脑水肿程度,TTC染色观察脑梗死范围、HE染色观察缺血组织病理形态和海马神经元密度,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)及Western bolt检测凋亡效应蛋白半胱胺酸蛋白酶蛋白(Caspase 3)和聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达情况.结果:与假手术组比较,模型组大鼠出现行为障碍,梗死面积及缺血侧脑组织含水量显著增加,海马CA1区神经元密度明显降低.与模型组比较,镇肝熄风汤高、低剂量均能有效改善大鼠行为学积分,可明显改善MCAO大鼠缺血侧脑组织含水量,减少梗死面积,改善局灶性脑缺血引起的海马CA1区神经元密度降低.镇肝熄风汤预处理后,明显减少MCAO大鼠缺血侧脑组织神经元细胞凋亡率,明显降低缺血侧脑组织活化Caspase-3和PARP蛋白表达量.结论:镇肝熄风汤可能通过影响神经细胞凋亡,发挥保护缺血大鼠脑组织的作用.     

镇肝熄风汤对急性脑出血大鼠模型抗脑水肿作用研究

目的:研究镇肝熄风汤对急性脑出血大鼠的抗脑水肿作用。方法:注射胶原酶于大鼠大脑苍白球,建立急性脑出血模型,观察镇肝熄风汤对脑出血大鼠神经缺损症状、脑指数、脑组织含水量、脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、血浆及脑组织内皮素(NT)含量的影响。结果:镇肝熄风汤和脑血康均可显著降低脑出血大鼠的神经缺损症状积分、脑含水量和脑指数,镇肝熄风汤显著降低大鼠脑组织中MDA含量,提高SOD活性,脑血康对脑组织中MDA含量无显著影响,镇肝熄风汤和脑血康均可显著降低大鼠血浆和脑组织中ET含量。结论:镇肝熄风汤可缓解急性脑出血大鼠的脑水肿症状,作用机制可能与提高机体抗氧自由基及缓解脑血管痉挛有关。     

3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑能量代谢相关酶影响的比较研究

目的比较3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑能量代谢相关酶动态的影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星蒌承气汤组,分别给予相应的药物灌胃。采用密度离心及差速离心法提取脑组织线粒体用于琥珀酸脱氢酶（SDH）活性测定,采用化学比色法测定脑组织匀浆Na^＋-K^- -ATPase、肌酸激酶脑型同工酶（CK—BB）活性。结果模型组再灌注各时间点脑组织SDH、Na^＋-K^＋-ATPase活性显著降低,CK—BB活性显著升高（均P〈0．01）;48h和72h时各药物组SDH、Na^-K^＋-ATPase活性显著升高,24h时仅镇肝熄风汤组Na^＋-K^＋-ATPase活性显著升高;各药物组CK—BB活性均显著降低（P〈0．05）;24h以镇肝熄风汤组为优,48h以星蒌承气汤组为优,72h以益气活血方组为优。结论3种中药复方可以通过升高SDH、Na’一K^＋-ATPase活性,降低CK—BB的活性抗脑缺血再灌注损伤,24h镇肝熄风汤作用效果最佳,48h星蒌承气汤作用效果最佳,72h益气活血方作用效果最佳。     

高血压病肝阳上亢证与血瘀病机的相关研究

目的：证实高血压病肝阳上亢让与血瘀病机的相关性，方法：临床调查症状出现率及多项实验室检测；镇肝活血组与镇肝组的临床观察，结果：证明高血压病肝阳上亢证多伴有血瘀病机，镇肝熄风汤与活血化瘀药伍使用，在改善高血压病肝阳上亢证及其血瘀证的相关症状和指标方面优于单纯用镇肝熄风汤。结论：在高血压病肝阳上亢证辨证时，应注意意阏病机；配伍活血药物可增强疗效。     

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠胆囊收缩素mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)胆囊收缩素(CCK) mRNA及其蛋白的影响。方法:14周龄雄性SHR 75只随机分为模型组、贝那普利0. 0009g/kg组、镇肝熄风汤15、30、60 g/kg组,以Wistar Kyoto大鼠(WKY)作为正常对照,模型组及正常对照组每日灌服同体积的蒸馏水,干预8周后,应用酶联免疫法检测血清中CCK的含量;采用RT-PCR法检测十二指肠中CCK mRNA表达;采用Western blot法检测十二指肠和脑中CCK蛋白表达。结果:干预8周后,与正常对照组比较,模型组十二指肠中CCK mRNA和蛋白表达、脑中CCK蛋白表达均显著降低,但血清CCK无变化;与模型组比较,贝那普利组、镇肝熄风汤15g/kg组十二指肠中CCK mRNA和蛋白表达显著升高,30g/kg组蛋白亦显著增高;各给药组脑中CCK蛋白表达显著升高;与贝那普利组比较,镇肝熄风汤15g/kg组十二指肠CCK mRNA及镇肝熄风汤60g/kg组蛋白表达显著升高,镇肝熄风汤30g/kg组脑中CCK蛋白表达显著升高。结论:SHR十二指肠和脑组织中CCK调节失衡,贝那普利和镇肝熄风汤的降压作用可能通过调节CCK的表达而达到降压目的,而镇肝熄风汤的调节作用更为明显。     

高血压病肝阳上亢证与血瘀病机的相关研究

目的证实高血压病肝阳上亢证与血瘀病机的相关性.方法临床调查症状出现率及多项实验室检测;镇肝活血组与镇肝组的临床观察.结果证明高血压病肝阳上亢证多伴有血瘀病机,镇肝熄风汤与活血化瘀药配伍使用,在改善高血压病肝阳上亢证及其血瘀证的相关症状和指标方面优于单纯用镇肝熄风汤.结论在高血压病肝阳上亢证辨证时,应注意血瘀病机;配伍活血药物可增强疗效.     

柴胡疏肝散联合BMSCs移植对AMI大鼠心肌细胞PI3K/Akt、GSK-3β信号通路的影响

目的:探讨柴胡疏肝散联合BMSCs移植对AMI大鼠心肌细胞PI3K/Akt、GSK-3β信号通路的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养BMSCs;经结扎冠状动脉制备大鼠心肌梗死模型。将SD大鼠随机分为假手术组(SH组),急性心肌梗死模型组(AMI组),BMSCs移植组(BMSCs组),柴胡疏肝散+BMSCs移植组(MCB组);BMSCs移植+LY294002组(MBL组);BMSCs移植+柴胡疏肝散+LY294002组(MBCL组)。MBC组和MBCL组予柴胡疏肝散灌胃。7 d后,TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数;Western blot检测p-Akt、t-Akt、p-GSK-3β、t-GSK-3β蛋白表达。结果:AMI组心肌细胞凋亡指数增加,Akt与GSK-3β磷酸化水平均降低;BMSCs组和MBC组心肌细胞凋亡指数降低,Akt与GSK-3β磷酸化水平均升高;当使用PI3K阻断剂LY294002后,保护作用消失。结论:BMSCs移植联合柴胡疏肝散治疗心肌梗死大鼠,可降低大鼠心肌细胞凋亡指数,其机制可能与启动PI3K、Akt/GSK-3β信号途径相关。     

镇肝熄风汤加减治疗肝阳上亢型高血压病45例

目的：观察镇肝熄风汤治疗肝阳上亢型高血压病的临床疗效.方法：对45例原发性高血压病肝阳上亢型患者服用镇肝熄风汤临床疗效观察.结果：45例病患中痊愈17例,占37.7%;显效21例,占46.6%;总有效率：84.4%.结论：镇肝熄风汤加减治疗肝阳上亢型高血压病疗效明显.     

基于CaMkkβ/AMPK通路介导线粒体自噬探讨敛肝熄风止颤方的神经保护机制

目的:观察敛肝熄风止颤方对帕金森病(Parkinson Disease,PD)的影响,探讨其神经保护机制。方法:将60只SD大鼠分为假手术组10只,造模组50只,造模组大鼠接受PD模型制备,将成模的40只大鼠随机分为模型组10只、低剂量组(0.36 g/kg)10只、中剂量组(0.72 g/kg)及高剂量组(1.44 g/kg)10只,持续灌胃给药30 d,比较各组大鼠阿扑吗啡诱导旋转次数、圆筒实验,纹状体超微结构以及CaMkkβ、AMPK、p-AMPK水平的变化。结果:1)敛肝熄风止颤方可明显减少大鼠转圈以及肢体碰壁的次数,随着剂量增加次数减少更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。2)造模大鼠纹状体线粒体自噬现象减弱,敛肝熄风止颤方可明显促进脑组织线粒体自噬。3)中药干预后大鼠纹状体CaMkkβ、p-AMPK蛋白表达上调,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中高剂量组较低剂量组上调明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:敛肝熄风止颤方对帕金森病具有神经保护作用,其机制之一可能是通过激活CaMkk/AMPK通路活性促进线粒体自噬有关。     

丹参酮ⅡA对急性脑梗死模型大鼠脑组织Cyclin D1、GSK-3β和p-GSK-3β的影响

目的观察丹参酮ⅡA对实验性急性脑梗死(ACI)大鼠的治疗作用及脑组织Cyclin D1、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)和p-GSK-3β的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,急性脑梗死组,丹参酮ⅡA低、中、高剂量组。采用线栓法制备动物大脑中动脉栓塞模型,造模成功后,丹参酮ⅡA低、中、高剂量组分别给予丹参酮ⅡA 10、20、40 mg/kg腹腔注射,每日1次,连续给药14 d,对大鼠进行神经功能评分,检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,对脑组织进行TTC染色和脑含水量测定,检测脑组织中Cyclin D1、GSK-3β和p-GSK-3β的表达。结果与假手术组比较,急性脑梗死组大鼠神经功能评分、脑梗死体积和脑含水量显著升高,血清中MDA含量显著升高,SOD、CAT和GSH-Px含量显著降低(P 0.05),脑组织中Cyclin D1含量和p-GSK-3β/GSK-3β比值变化不显著;与急性脑梗死组比较,各丹参酮ⅡA治疗组大鼠神经功能评分、大鼠脑梗死体积和含水量明显降低,血清中MDA含量显著降低,SOD、CAT和GSH-Px含量显著升高(P 0.05),脑组织中Cyclin D1含量和p-GSK-3β/GSK-3β比值显著升高(P 0.05),且随药物剂量增大而增加。结论丹参酮ⅡA对实验性ACI大鼠具有一定的治疗作用,可抑制氧化应激,上调cyclin D1含量和p-GSK-3β/GSK-3β比值。     

镇肝熄风汤联合美多芭治疗帕金森病临床观察

目的：观察镇肝熄风汤联合美多芭治疗帕金森病肝肾阴虚型临床疗效。方法：50例随机分为治疗组25例和对照组25例。两组均服美多芭,治疗组加服镇肝熄风汤加减,两组观察周期均为3个月,并在治疗结束后评定疗效。结果：治疗后治疗组UPDRSⅠ、Ⅱ、Ⅲ评分明显低于对照组,临床疗效明显高于对照组,均有统计学意义（P＜0．05）。结论：镇肝熄风汤治疗帕金森病肝肾阴虚型可明显提高临床疗效。     

养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马CA1区GSK-3β及β-catenin蛋白表达的影响

目的：观察养血清脑颗粒对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1 区糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白及β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响。方法：72只实验SD大鼠随机分为假手术组、VD模型组（模型组）和养血清脑颗粒治疗组（治疗组）,采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制作VD大鼠模型,分别在术后1、2、4和8周采用免疫组化法和Western blotting法检测海马CA1区GSK-3β及β-catenin表达水平。结果：模型组各时间点GSK-3β蛋白表达增多,1周时即有多量表达,2周时大量表达,4周时达高峰,8周时开始下降但仍较高。与假手术组相比,模型组各时间点GSK-3β蛋白表达增多,有统计学意义（P<0.01）。各时间点β-catenin蛋白表达增多,但与假手术组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗组各时间点GSK-3β及β-catenin蛋白表达明显增多,与模型组相比,有统计学意义（P<0.01）。结论：养血清脑颗粒可通过上调GSK-3β及β-catenin蛋白的表达,发挥对VD的治疗作用。     

镇肝熄风汤治疗原发性高血压肝阳上亢证疗效观察

目的:观察镇肝熄风汤治疗原发性高血压肝阳上亢证的治疗效果。方法:80例随机分为对照组和观察组各40例,对照组用卡托普利治疗,观察组用镇肝熄风汤治疗。结果:总有效率观察组高于对照组(P0.05),不良反应发生率观察组低于对照组(P0.05)。结论:镇肝熄风汤治疗原发性高血压效果较好,有助于减少不良反应。     

肝阳上亢证型与T淋巴细胞亚群等指标的关系研究

给实验动物耳静脉注射多巴胺模拟肝阳上亢证型．发现此证型动物其T淋巴细胞亚群中之T3、L4明显低于正常，T8无明显改变，红细胞免疫中之红细胞C3b受体活性明显下降，其红细胞免疫复合物无明显变化，经中药镇肝熄风汤治疗后，其T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能均恢复正常。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠血小板PDK1/Akt Thr308通路的影响

目的:研究补阳还五汤预处理对急性脑缺血再灌注损伤大鼠血小板蛋白PDK1、Akt Thr308的影响,初步探讨补阳还五汤抗血小板活化作用与PDK1/Akt Thr308信号通路的关系。方法:用不同剂量补阳还五汤(29.69、14.84、7.42 g/kg)及硫酸氢氯吡格雷(7.81×10~(-3)mg/kg)分别ig预处理大鼠,模型组、假手术组及空白组给予蒸馏水ig,1天/次,连续14天。14天后采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注损伤模型,缺血2h再灌注6h后进行神经功能缺损评分及脑组织TTC染色,流式细胞术(FCM)检测全血中血小板CD62P含量,Western blot检测富血小板血浆(PRP)中PDK1、Akt Thr308蛋白磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组血小板CD62P显著增高;与模型组比较,补阳还五汤组(29.69、14.84、7.42 g/kg)及硫酸氢氯吡格雷组(7.81×10~(-3)mg/kg)均明显降低血小板CD62P的表达;与假手术组比较,模型组PDK1、Akt Thr308蛋白磷酸化水平显著升高,而补阳还五汤组(29.69、14.84、7.42 g/kg)及硫酸氢氯吡格雷组(7.81×10~(-3)mg/kg)PDK1、Akt Thr308蛋白磷酸化水平明显低于模型组。结论:补阳还五汤预处理可降低急性脑缺血再灌注损伤大鼠血小板CD62P含量,并降低PDK1、Akt Thr308蛋白磷酸化水平,提示补阳还五汤可能通过抑制PDK1/Akt Thr308信号通路发挥抗血小板活化作用。     

针灸预处理对AD大鼠海马组织GSK-3β和PP2A影响的实验研究

目的探讨针灸预处理对老年性痴呆模型大鼠GSK-3β和PP2A影响,揭示针灸防治AD的机制。方法建立AD大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组、预电针组、预电针加灸组,通过酶联免疫法检测蛋白质磷酸酶2A(PP2A)和糖原合酶激酶-3β[(GSK-3β)]的活性。结果模型组GSK-3β的活性比正常组亦明显升高(P<0.01),而PP2A的活性比正常组和假手术组明显降低。预电针和预艾灸均可起到调节作用。结论针灸防治老年性痴呆的作用机制可能是通过调节Wnt信号转导通路,影响了学习记忆相关酶在海马区的表达而发挥作用的。     

3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织MPO与ICAM-1表达影响的比较研究

目的比较益气活血方、镇肝熄风汤与星蒌承气汤3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性与细胞间黏附分子-1（ICAM-1）蛋白表达的动态影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星蒌承气汤组，采用比色法测定MPO活性、免疫组织化学染色SABC法检测ICAM-1表达。结果模型组再灌注各时间点脑组织MPO活性显著增高，ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著增加（P〈0．05或P〈0．01）：24h和48h时各治疗组MPO活性显著降低，72h时益气活血方与镇肝熄风汤MPO活性显著降低（P〈0．05或P〈0．01），且24h时星萎承气汤优于其它治疗组（P〈0．01）；24h和72h时各治疗组ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著减少（P〈0．05或P〈0．01），48h时星萎承气汤组显著减少（P〈0．01），且24h以镇肝熄风汤组优于其它治疗组，48h星萎承气汤组优于其它治疗组（P〈0．05或P〈0．01）。结论3种中药复方可以通过降低MPO活性，抑制ICAM-1蛋白表达，抗脑缺血再灌注损伤，24h（MPO）、48h（ICAM-1）星蒌承气汤作用效果最佳，24h（ICAM-1）镇肝熄风汤组作用效果最佳。