化疗前后肺癌患者外周循环癌细胞数的动态观察

目的:本实验观察32例肺癌患者化疗前后外周循环癌细胞数(CTCs)的动态变化,以寻找新化疗的疗效评判标准.方法:分别于化疗前及化疗1周期后、第3周收集32例肺癌患者外周血标本.同时行胸片或胸部CT扫描,并计算肿瘤的大小.运用实时荧光定量逆录-聚合酶链反应(fqRT-PcR)法定量检测外周血中CK19基因的表达.结果:化疗后CTCs水平显著降低(P=0.000 1).化疗前小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者外周血CK19 mRNA水平明显高于非小细胞肺癌(Non-smallcell lung cancer,NSCLC)患者(P=0.041).治疗前后CK19 mRNA测值变化与瘤负荷间存在正相关(P=0.000).结论:在治疗过程中,运用fqRT-PCR法对肺癌患者CTCs进行定量监测是可行的.通过动态检测可及时评价化疗反应,有助于在早期阶段即对患者设计更合理、更有针对性的治疗方案.     

RRM1在NSCLC患者外周血和组织中的表达及其与吉西他滨疗效相关分析

目的 探讨Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血和肿瘤组织中RRM1(核糖核苷酸还原酶M1)mRNA表达水平的一致性及其与吉西他滨化疗疗效之间的关系.方法 收集49例接受吉西他滨化疗患者化疗前、化疗第1个疗程后、病情恶化或停止治疗前外周血及化疗前病理组织蜡块,应用荧光定量PCR法检测肿瘤组织及外周血中RRM1 mRNA表达水平,并分析其表达量水平和相关变化与吉西他滨化疗疗效之间关系.结果 RRM1 mRNA在病理组织和外周血中的表达水平无统计学差异(P=0.336),RRM1 mRNA在化疗前、化疗第1个疗程后、病情恶化或停止治疗前表达水平的差异无统计学意义(P=0.939;P=0.878).RRM1 mRNA低表达30例(61.2%),高表达19例(38.8%);RRM1 mRNA低表达组有效(CR+PR)为23例(76.7%);RRM1 高表达组有效(CR+PR)4例(21.1%),即RRM1 mRNA低表达组对吉西他滨化疗疗效高于高表达组(P<0.05).结论 RRM1 mRNA表达水平可用于以吉西他滨为化疗基础的NSCLC患者的疗效预测指标.     

早期宫颈癌患者术前外周血CK19 mRNA的检测及其临床意义

目的研究早期宫颈癌患者外周血CK19 mRNA检测及其临床意义.方法昆明医科大学第三附属医院妇科30例早期(ⅠA2~ⅡA)宫颈癌患者为实验组,15例子宫肌瘤患者和15例健康志愿者为阴性对照组,15例晚期(ⅡB~ⅢB)宫颈癌患者为阳性对照组.收集外周血样本,qRT-PCR技术检测外周血CK19表达水平的变化,分析其与临床病理参数、预后的相关性.结果实验组外周血中CK19表达水平与阴性对照组、阳性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);30例宫颈癌患者手术前外周血CK19 mRNA阳性检出率为30%(9/30),与淋巴结转移情况、肌层浸润、术后病理高危因素密切相关(P<0.05),而与患者临床病理因素如年龄、临床分期(FIGO)、肿瘤细胞分化程度、肿瘤直径、病理类型之间均无明显相关性(P>0.05).结论宫颈癌根治术前外周血CK19 mRNA表达水平可作为诊断早期宫颈癌循环肿瘤细胞的标志物,能够弥补影像学、肿瘤标志物等检查不足,可能作为预测复发转移、判断预后的辅助指标,为术后辅助治疗方案选择、判定预后提供依据.     

NSCLC术后病人外周血MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC) 术后外周血微转移的基因诊断方法,并分析黏蛋白1 (MUC1) mRNA、角蛋白19 (CK19) mRNA 作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对60例NSCLC病人(肺癌组)的外周血MUC1 mRNA、CK19 mRNA 表达情况进行检测;以10 例肺良性病变病人及15例健康人的外周血标本作对照.结果 肺癌组外周血MUC1 mRNA阳性表达21例(35%),CK19 mRNA阳性表达18例(30%);对照组MUC1 mRNA和CK19 mRNA 表达均为阴性,两组比较差异均有显著性(χ2=7.292、5.921,P＜0.01、0.05).结论 MUC1、CK19 基因均可作为RT-PCR 法检测NSCLC 病人淋巴结微转移的分子标志物,两者联合检测可能有助于肺癌转移早期诊断.     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

检测GK19基因对诊断非小细胞肺癌外周血微转移的意义

目的 探讨CK19(cytokeratin19,CK19)基因表达在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)外周血微转移过程中的意义.方法 采用real-time PCR检测NSCLC、肺良性病(benign lung disease,BLD)患者和健康人外周血中CK19基因的表达及其与NSCLC外周血微转移的关系.结果 NSCLC微转移患者的CK19 mRNA的表达水平明显高于BLD患者和健康人(P＜0.05),其中与健康组比较CK19 mRNA表达水平上升了143％,与BLD组比较CK19 mRNA表达水平上升了53％.结论 CK19基因可作为检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标.     

联合检测外周血CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值

目的采用qRT-PCR技术检测早期宫颈癌患者根治术术前外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化,研究联合检测外周血CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值.方法昆明医科大学第三附属医院妇瘤科30例早期(ⅠA2~ⅡA)宫颈癌患者为实验组,15例子宫肌瘤患者和15例健康志愿者为为阴性对照组,15例晚期(ⅡB~ⅢB)宫颈癌患者为阳性对照组.收集外周血样本,qRT-PCR技术检测外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化.结果实验组外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平与阴性对照组、阳性对照组比较,差异有明显统计学意义(P<0.01);30例宫颈癌患者手术前外周血CK19和SCCAg mRNA阳性检出率分别为30%(9/30)和20%(6/30),手术前联合检测二者的表达可使阳性检出率提高至43.3%,联合检测2种标志物的阳性检出率高于检测单一标志物,差异有统计学意义(P<0.05).结论外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平均可能作为诊断早期宫颈癌微转移的标志物.qRT-PCR技术联合检测两项指标,可提高诊断微转移的敏感度和特异性.     

非小细胞肺癌外周血中CK19mRNA与LUNXmRNA检测的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血细胞角蛋白19(CK19)及肺特异性蛋白X(LUNX)的表达,探讨其对检测NSCLC微转移的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测30例NSCLC患者及15例健康人外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达。结果:NSCLC患者外周血中CK19mRNA及LUNXmRNA的阳性表达率分别为30%及13.3%,而对照组外周血中均无表达,外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达与临床分期密切相关,与病理类型无关。结论:CK19及LUNX均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为敏感的分子标志物,联合检测有助于提高检测结果的阳性率。     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA微转移的临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其作为分子标志物检测NSCLC微转移的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19 mRNA的表达。结果NSCLC患者CK19 mRNA的阳性表达率明显高于BLD患者和健康对照者,差异有统计学意义（Х^2=24．735,P=0．000）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率分别为44．4％（8／18）,75．0％（9／12）,92．3％（12／13）,4／5,不同临床分期NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异有统计学意义（Х^2=8．820,P=0．032）;有无淋巴结转移NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异亦有统计学意义（Х^2=6．813,P=0．009）;而不同病理类型、不同分化程度NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义（Х^2=4．655,P=0．459;Х^2=1．204,P=0．548）。结论检测外周血CK19 mRNA表达可作为诊断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.     

乳腺癌患者血中角蛋白mRNA基因的表达

目的 分析乳腺癌患者外周血液中角蛋白（CK19）mRNA基因的表达。方法 取20例经病理证实的乳腺癌患者外周血，用Tirizol法提取总RNA，然后进行RT－PCR荧光定量检测，并与正常人群进行对照。结果 正常人群外周血中无CK19表达，20例乳腺癌中有6例阳性表达，总阳性率为29．65％，其中单纯癌阳性率为30．7％（4／13），浸润性导管癌阳性率为28．6％（2／7）。结论 CK19可作为检测外周血循环癌细胞的标志物。     

外周血CK-19评价乳腺癌术后化疗及监控血液微转移

目的以外周血CK-19为指标评价术后化疗作用及其监控血液微转移意义。方法以120例乳腺癌术后患者为研究对象,巢式RT-PCR检测外周血CK-19mRNA,比较化疗前后表达差异及CK-19表达与乳腺癌远处转移关系。结果化疗前血液微转移阳性率为23．33％,化疗后为3．33％,差异有统计学意义（P〈0．01）;CK-19阳性组肿瘤转移率为76．9％,阴性组肿瘤转移率为8．6％,两组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论术后辅助化疗能降低乳腺癌血液微转移．外周血CK-19能监控乳腺癌血液微转移。     

Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周中的表达及其在胃癌诊断及预后方面的价值。方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89 例胃癌患者及健康对照外周血中SurvivinmRNA 和CK19 mRNA 的表达情况，并利用统计学方法分析血清Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌中的诊断和预后价值。结果 RT-PCR 结果发现胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 的表达均高于健康对照组；ROC 曲线显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 为胃癌有效诊断分子靶点；χ2检验显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 与胃癌患者的TNM 分期呈正相关；Kaplan-Meier 生存曲线显示Survivin 和CK19 双阳性组的胃癌患者术后5 年生存率低于其他各组。结论 胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 表达水平增高，是胃癌早期诊断和判断预后的潜在分子指标。     

乳腺癌患者外周血癌胚抗原及细胞角蛋白19 mRNA表达的临床意义

目的 探讨细胞角蛋白19(CK19)mRNA、癌胚抗原(CEA)mRNA的表达在诊断乳腺癌患者外周血微转移的临床意义及与临床病理指标的关系.方法 采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)法,测定28名健康女性志愿者、20例良性乳腺疾病患者、108例乳腺癌患者(88例行手术切除乳腺癌患者、20例复发转移乳腺癌患者)的外周血中CK19、CEA mRNA的表达.以上有一项为阳性即判定为转移.结果 28名健康对照者CK19 mRNA和CEA mRNA两个指标检测结果均为阴性.20例良性乳腺疾病患者中,CK19 mRNA阳性1例(5%),无CEA mRNA表达阳性者.108例乳腺癌患者中,26例(24.1%)CK19 mRNA阳性,23例(21.3%)CEA mRNA阳性,15例(13.9%)两者均阳性.在108例乳腺癌患者中,复发转移乳腺癌患者CK19 mRNA和(或)CEA mRNA的表达高于行手术切除乳腺癌患者.88例行手术切除乳腺癌患者外周血微转移阴性组、阳性组在肿瘤大小、病理分期、kI67,细胞黏附分子CD44变异型v6(CD44v6),血管内皮生长因子(VEGF)表达方面差异有统计学意义(P<0.05),但在年龄、肿瘤位置、病理组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、CerbB2、基质金属蛋白酶9(MMP9)表达等方面差异无统计学意义(P>0.05).多因素分析表明肿瘤大小、病理分期、kI67、CD44v6、VEGF与患者外周血微转移有关.结论 联合检测CK19mRNA和CEA mRNA可提高乳腺癌患者外周血微转移的检出率.肿瘤大小、病理分期、kI67、CD44v6、VEGF可评估乳腺癌患者外周血微转移风险.     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

三种基因在非小细胞肺癌外周血有核细胞中阳性表达的意义

目的 为确定外周血有核细胞中LUNX基因、CK19基因和S100A4基因是检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标提供实验依据.方法 术前抽取外周血,通过荧光定量PCR （PCR）检测其肺组织特异性蛋白（LUNX）、细胞角蛋白19（CK19）和钙结合蛋白A4（S100A4）的表达情况,并对其进行半定量分析.结果 肺癌患者外周血标本中LUNX mRNA、CK19 mRNA和S100A4mRNA的阳性表达率分别为66.7％、62.5％和56.3％,明显高于肺良性疾病患者和健康志愿者（P＜0.05）,这三种基因的表达与组织学类型、肿瘤位置有关,在腺癌中的阳性表达高于鳞癌,在周围型肺癌中的表达高于中央型肺癌.3种基因的表达与肿瘤的大小无明确关系.随着肿瘤分期的增高和淋巴结转移的发生,三种基因的表达有明显增高的趋势.结论 LUNX mRNA和CK19 mRNA、S100A4mRNA可作为检测肺癌微转移的分子标志物.