塞来昔布提高C6胶质瘤放射敏感性实验研究

目的 通过建立裸鼠C6胶质瘤动物模型,观察环氧化酶2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布(celecoxib)对恶性胶质瘤放疗的增敏作用并对其作用机理进行初步探讨。方法 Balb/c裸鼠15只,体外培养大鼠c6胶质瘤细胞,接种于裸鼠右肩皮下建立肿瘤模型。肿瘤形成后随机分成3组:对照组、放疗组、塞来布昔+放疗组。用灌肠法给予塞来昔布16mg/kg/d,4周时对比两组肿瘤瘤重;采用免疫组化方法,分析共济失调-毛细血管扩张症突变蛋白(ATM)和表皮生长因子受体(EGFR)表达变化。结果 周时塞来布昔+放疗组与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 塞来昔布可能通过提高ATM和EGFR的表达增强胶质瘤细胞的放疗敏感性;COX-2选择性抑制剂塞来昔布对胶质瘤的治疗可能具有临床应用价值。     

沉默生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应

目的 探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应。方法 肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射,观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、增殖细胞核抗原(Proliferation Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果 治疗后第3~21d,RNA干扰联合放疗组肿瘤体积明显低于对照组、RNA干扰组和放疗组。RNA干扰联合放疗组裸鼠平均存活时间明显长于对照组、RNA干扰组和放疗组。治疗结束后第1天,RNA干扰联合放疗组裸鼠肿瘤增殖活性和微血管密度明显低于RNA干扰组和放疗组,且凋亡细胞百分数明显升高。结论 RNA干扰Survivin基因联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和RNA干扰治疗。     

人乳铁蛋白提高H460细胞放射敏感性的初步研究

目的 观察hLF对于人非小细胞肺癌H460细胞辐射敏感性的影响。方法 用pBC1-hLF载体转染H460细胞,同时以hLF标准品处理为参照,细胞活力实验、克隆形成试验和流式检测细胞凋亡来观察hLF基因高表达对H460细胞生长特性和辐射敏感性的影响。结果 hLF基因高表达可以显著抑制H460的生长(P<0.01),提高其对射线的敏感性,hLF处理组与pBC1-hLF转染组辐射增敏率分别为1.29和1.59。hLF可促进H460细胞自发和受照后的凋亡,降低克隆形成能力(P<0.01)。结论 hLF基因高表达可以体外显著抑制人非小细胞肺癌H460细胞的生长,提高其辐射敏感性。     

Rb94基因联合放射后荷瘤裸鼠食管癌细胞的的病理改变

目的 探讨视网膜母细胞瘤Rb94基因与放射联合应用后裸鼠种植瘤组织的病理变化。方法 将食管癌K150细胞接种裸鼠建立肿瘤模型,实验分为对照组、Ad-LacZ组、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组(简称联合组),观察食管癌细胞的病理改变。结果 对照组和Ad-LacZ组生长活跃,而Ad-Rb94组和照射组肿瘤细胞出现生长抑制和凋亡;与其他组相比,联合组有较少的核分裂、较浅的核深染。结论 Rb94基因与放疗联合应用对肿瘤生长具有协同抑瘤效应,显著增加食管癌治疗的疗效。     

低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后血清中抗氧化酶活性的影响

目的 观察低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后血清中抗氧化酶活性的影响。方法 采用化学比色法测定不同照射时相点血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果 低剂量全身照射组血清中SOD、GST、CAT活力高于相应对照组;低剂量+局部放疗组(d₃ d₅)血清中SOD、GST、CAT活力显著高于局部大剂量组(c₃,c₅);尤以连续三天照射组明显。结论 低剂量辐射激活荷瘤机体抗氧化物酶可能是低剂量辐射抑瘤作用的部分机制     

辐射对沉默ATRX的H460细胞增殖以及DNA损伤修复的影响

目的 探讨辐射对沉默ATRX的肺癌H460细胞增殖和DNA损伤修复的影响及二者的关系。方法 靶向ATRX的3个慢病毒载体转染293T细胞后,慢病毒感染H460细胞,获得ATRX低/无表达的细胞株shATRX1-H460、shATRX2-H460和shATRX3-H460,并以shControl-H460作为对照,利用Western blot检测沉默效率。分别以克隆形成实验检测细胞增殖,免疫荧光技术检测γH2AX和Rad51焦点数,同时以Western blot检测PARP1、γH2AX和Rad51蛋白的表达。结果 shControl-H460细胞中可见ATRX表达,而shATRX1-H460、shATRX2-H460和shATRX3-H460细胞中ATRX表达均出现不同程度的降低。克隆形成实验显示,shATRX2-H460和shATRX3-H460细胞的存活分数（survival fraction,SF）均较shControl-H460细胞降低。shControl-H460和shATRX3-H460细胞经4 Gy照射后1 h,γH2AX焦点最多,而3 h时Rad51焦点最多,而后均降低,与shControl-H460细胞比较,在1和6 h时shATRX3-H460细胞γH2AX焦点,以及1、3和6 h时Rad51焦点显著增加（P<0.05,P<0.001）。而且shATRX3-H460细胞中PARP1、γH2AX和Rad51蛋白在3和6 h时均较shControl-H460细胞表达增加。结论 成功地获得靶向沉默ATRX的细胞模型,辐射后细胞增殖能力降低,可能与DNA损伤修复能力降低有关。     

放疗加手术治疗Ⅱ期宫颈癌的疗效分析

目的 对放疗加手术与根治性放射治疗Ⅱ期宫颈癌的效果进行分析。方法 52例Ⅱ期宫颈癌用放疗加手术的方法治疗,另抽取52例同期患者做单纯根治性放疗。结果 放疗加手术组(放+术组)与根治性放疗组(单放组)生存率相似;放+术组的放射并发症明显低于单放组。结论 Ⅱ期宫颈癌的治疗应选择放疗+手术的方法     

塞来昔布对宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用及影响因素的研究

目的:研究塞来昔布(Celecoxib)对人宫颈癌HeLa细胞放射增敏作用以及给药顺序对放射增敏作用的影响。方法:采用MTT法测定塞来昔布作用于HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50),应用克隆形成和单击多靶数字模型检测塞来昔布的放射增敏作用及不同给药顺序的细胞存活率及放射增敏比(SER)。结果:塞来昔布对宫颈癌Hela细胞株增殖有抑制作用,其作用呈现剂量-效应和时间-效应依赖性,塞来昔布对Hela细胞的IC50为44μmol/L,取40μmol/L塞来昔布联合X射线照射作用于Hela细胞,先给药后照射组SER为2.46,给药中照射组SER为1.91,先照射后给药组SER为1.44;免疫化学实验证实塞来昔布可下调Hela细胞VEGF的表达。结论:塞来昔布对Hela细胞具有放射增敏作用,其增敏作用有顺序依从性;其机制可能是通过下调人宫颈癌Hela细胞的VEGF表达而实现。     

塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP生长和凋亡的影响

目的探讨塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP生长和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度(0、0. 625、12. 5、25、50及100μmol/L)塞来昔布对COC1/DDP细胞生长的影响,计算出24、48及72h的IC50。将对数生长期的COC1/DDP细胞随机分为对照组(未做处理)、顺铂组(给予2μg/ml顺铂)、塞来昔布组(给予25μg/ml塞来昔布)及联合组(给予25μg/ml塞来昔布+2μg/ml顺铂)。MTT法检测各组细胞的生长情况,FCM检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测各组细胞中增殖细胞核抗原(Ki67)、细胞周期素D1 (Cyclin D1)、生存素(Survivin)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达。结果塞来昔布能够呈时间-浓度依赖性抑制COC1/DDP细胞生长,其在24、48和72 h的IC50分别为47. 05、25. 86和16. 11μmol/L。与对照组相比,顺铂组、塞来昔布组和联合组中COC1/DDP细胞的OD值以及Ki67、Cyclin D1、Survivin及Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低,凋亡率均显著升高;但顺铂对COC1/DDP细胞的作用较弱,塞来昔布对COC1/DDP细胞的作用较强,联合用药能够增强两者对COC1/DDP细胞的作用且高于两者之和。结论塞来昔布联合顺铂能够协调抑制COC1/DDP细胞生长并诱导细胞凋亡,降低COC1/DDP细胞对顺铂的耐药性,其分子机制可能与下调Ki67、Cyclin D1、Survivin及Bcl-2蛋白表达有关。     

EGFR通路与结直肠癌细胞放疗敏感性的关系及西妥昔单抗对结直肠癌放疗敏感性的影响效果研究

目的:研究EGFR通路与结直肠癌细胞放疗敏感性的关系及西妥昔单抗对结直肠癌放疗敏感性的影响效果。方法:应用Realtime RT—PCR检测9个人结直肠癌细胞系EGFR的表达,应用Western blot检测EGFR在蛋白水平的表达,分析结直肠癌细胞EGFR表达与放疗敏感性的关系;根据RKO在体外培养过程中给予不同干预措施分为2Gy射线照射组、西妥昔单抗联合2Gy射线照射组,行CCK8实验检测细胞增殖情况,分析不同干预方式对RKO结直肠癌细胞系增殖的影响。结果:人结直肠癌细胞系EGFR表达高低与其放疗敏感性之间呈负相关(r=0.717,P0.05),EGFR表达越高克隆形成分数越高,EGFR高表达与放疗抵抗相关;西妥昔单抗联合放射组明显提高了放疗对肿瘤细胞的生长抑制作用与2Gy放射线单独照射的凋亡率,且明显降低了瘤体重量,对比各组差异均有统计学意义(P0.05)。结论:EGFR通路与结直肠癌细胞放疗敏感性之间呈负相关,西妥昔单抗明显增加了2Gy照射对裸鼠移植瘤的生长抑制作用。     

EGFR RNA干扰抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的探讨降低表皮生长因子受体（EGFR）在肺内的表达对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响。方法将40只4-6周龄C57BLB／c雄性小鼠按简单随机法分为正常对照组（气管滴入PBS）、纤维化组（气管滴入博莱霉素3mg／kg）、RNAi组（气管滴入博莱霉素3mg／kg＋气管滴入siR-NA20μl）和RNAi阴性对照组（气管滴入博莱霉素3mg／kg＋气管滴人siRNA阴性对照20μl）。实验第10天处死小鼠,收获肺组织,检测羟脯氨酸含量。肺组织切片行HE染色观察肺组织病理改变,采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法检测EGFR的表达。Westernblot检测EGFR、磷酸化EGFR表达。结果RNAi组与纤维化组比较,肺组织EGFRmRNA表达（0．31±0．05 vs 0．75±0．08,P〈0．01）和EGFR蛋白表达（1．53±O．47vs2．56±0．37,P〈0．01）均显著下降;肺病理损伤较纤维化组减轻,肺羟脯氨酸含量显著减少（543．00±25．89vs900．73±31．77,P〈0．01）;磷酸化EGFR蛋白表达亦较纤维化组明显减少（1．78±0．35 vs 2．84±0．51,P〈0．01）。结论EGFRRNAi抑制了EGFR活化,减轻了博莱霉素诱导的肺纤维化改变。     

新辅助放疗治疗Ⅱ期宫颈癌的临床观察

目的 总结分析新辅助放疗加根治术治疗Ⅱ期宫颈癌患者的3年、5年生存率和新辅助放疗对手术的影响以及放疗副反应,探讨新辅助放疗在Ⅱ期宫颈癌治疗中的意义。方法 选取山西医科大学第二医院2003年7月至2011年4月收治的Ⅱ期宫颈癌患者109例,其中59例行新辅助放疗(盆腔外照射+腔内后装治疗)休息2到3周后行根治性手术即广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术,50例行根治性放疗。结果 ①新辅助放疗加根治术与根治性放疗两组患者3年、5年生存率:由于随访时间较短,还不能得出有统计学意义的结论。②新辅助放疗对手术的影响:59例患者在接受新辅助放疗后均能顺利行根治性手术,且未增加术中术后并发症。③放疗副反应:新辅助放疗组放疗副反应发生率小于根治性放疗组(P < 0.05),差异有统计学意义。结论 新辅助放疗加根治术可使①肿瘤明显缩小甚至消失,扩大手术适应证、提高手术治愈率。②不增加手术难度及术后并发症。③降低患者近期放疗副反应和远期并发症。④降低癌细胞的活力,减少转移的几率。⑤可取得与传统根治性放疗相近甚至更高的远期生存率。     

规范化护理评估在头颈部肿瘤放疗致毒副反应中的应用

目的 探讨规范化护理评估在头颈部肿瘤患者放疗致毒副反应中的应用效果。方法 选取2016年1月-2018年1月在我院肿瘤科行头颈部放疗的恶性肿瘤患者144例，随机分为观察组（n=72）和对照组（n=72），观察组应用规范化护理评估对病人进行预见性的护理，对照组采取常规护理；比较两组病人放射性损伤副反应。结果 观察组使用规范化护理评估，放射性口腔炎、放射性皮炎、张口困难、放射性食管炎和放射性鼻烟粘膜炎的发生率低于对照组（P<0.05）。结论 头颈部肿瘤患者放疗期间采用规范化护理评估给予相应预见性护理，患者放疗所致毒副反应程度显著降低。     

荔枝草水提物联合X线放疗对结直肠癌细胞株荷瘤小鼠瘤组织的生长抑制作用

目的 观察荔枝草水提物（water extract of salvia plebeia,WESP）联合X线放疗对结直肠癌CT26细胞株荷瘤小鼠瘤组织生长的抑制作用。方法 建立结直肠癌CT26细胞荷瘤小鼠模型,分为空白对照组、阳性对照组（腹腔注射氟尿嘧啶30 mg/kg）、WESP组（灌胃WESP 500 mg/kg）、放疗组（2 Gy X线照射）和WESP + 放疗组（灌胃WESP 500 mg/kg + 2 Gy X线照射）,每组10只。各组小鼠每日给药1次,连续21 d;放疗组及WESP + 放疗组在给药期间每5 d放疗1次。于给药后第0、7、14及21 d测量移植瘤体积;末次测量瘤体积后,取瘤组织称重;采用RT-PCR和Western blot法测定瘤组织VEGF、Survivin mRNA和蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,其他3组小鼠第7、14及21 d移植瘤体积增长降低,瘤重减轻,瘤组织VEGF、Survivin mRNA与蛋白表达水平下调;与阳性对照组比较,WESP 组和放疗组小鼠第7、14及21 d瘤体积增长较快,瘤重增加,瘤组织VEGF、Survivin mRNA与蛋白表达水平上调。结论 荔枝草水提物与X线放疗合用对结直肠癌生长具有抑制作用,其机制与下调VEGF、Survivin表达有关。     

观察三维适形放射治疗结合同步化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床疗效

目的 研究三维适形放射治疗结合同步化疗在Ⅲ期非小细胞肺癌中的应用价值。方法 研究对象为我院2013年1月-2016年12月收治的Ⅲ期非小细胞肺癌患者，采用随机数字表法分成两组，对照组和实验组各80例。对照组予以同步化疗，实验组予以三维适形放射治疗联合同步化疗。分析和比较两组患者的治疗效果及生存率。结果 对照组的总有效率、生存率相比实验组要低，毒副作用发生率相比实验且要高，差别均有统计学意义（P<0.05）。结论 对Ⅲ期非小细胞肺癌患者应用三维适形放射联合同步化疗效果显著，能够有效提高患者的治疗效果以及生存质量。     

COX-2在上皮性卵巢肿瘤的表达及塞来昔布对卵巢癌A2780细胞株增殖的影响

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在上皮性卵巢肿瘤的表达及环氧化酶-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)在体外对人卵巢癌A2780细胞株增殖的影响。方法:①采用免疫组化SP法检测COX-2在65例上皮性卵巢癌、18例交界性与18例良性上皮性卵巢肿瘤及9例正常卵巢组织中的表达;②采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察塞来昔布在体外对A2780细胞增殖的影响;③流式细胞仪(FCM)测定塞来昔布在体外对A2780细胞周期的影响。结果:①COX-2在上皮性卵巢癌组(73.80%)及交界性卵巢肿瘤组的表达(66.70%)显著高于良性卵巢肿瘤组(16.70%)及正常卵巢组(11.10%),均P<0.05;②MTT显示,塞来昔布在体外以时间-剂量依赖方式抑制A2780增殖(P<0.05);③塞来昔布作用72 h后A2780细胞周期呈剂量依赖方式出现G0/G1期阻滞(P<0.05)。结论:①COX-2在交界性及恶性上皮性卵巢肿瘤中的表达明显增强,COX-2可能在交界性及恶性上皮性卵巢肿瘤的发生、发展中起一定作用;②体外特异性COX-2抑制剂(塞来昔布)能够抑制卵巢癌A2780细胞株增殖,有可能成为卵巢癌化疗的有效药物。     

放疗前后荷瘤小鼠及肿瘤患者的体重变化观察

目的 观察肿瘤患者及荷瘤小鼠放疗前后的体重变化。方法 对63例肿瘤患者放疗前后的体重分别进行测量并与治疗疗程中位数时间间隔内的23例健康志愿者体重变化数据进行比较分析。另将45只成功接种人乳腺癌细胞SK-BR-3的裸鼠分为肿瘤部位接受照射及不照射的两组,分别在照射开始前和结束后进行体重测量并对体重变化数据进行分析。结果 照射组小鼠体重变轻,而未照射组小鼠体重增加,两组小鼠体重变化各自均有统计学意义,两组小鼠的体重变化也存在显著的统计学差异。63例肿瘤患者及其中的鼻咽癌、食道癌及肺癌共四组患者平均体重都是减轻的但只有鼻咽癌、肺癌患者的体重减轻有显著的统计学意义。同一时间间隔内正常人的体重是保持的。四组患者中,除食道癌患者外,其余三组患者与正常人的体重变化数据比较均有显著差异。结论 肿瘤患者放疗期间可能会体重减轻,应密切关注此变化对治疗的影响。     

冷诱导RNA结合蛋白在放射性肺损伤模型中的表达变化

目的探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)在放射性肺损伤模型中的表达变化。方法将30只雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为2组,每组15只,对照组小鼠不做任何处理,模型组小鼠经20 Gy X射线单次胸部照射,构建放射性肺损伤模型,于照射后5周解剖。采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色观察肺组织病理改变及胶原的沉积;采用免疫组织化学法检测肺组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;采用qRT-PCR技术检测肺组织中CIRBP mRNA的表达;采用免疫荧光技术和Western blotting技术检测肺组织中CIRBP蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组肺组织血管扩张充血、炎细胞浸润、部分肺泡间隔增厚,IL-6的表达[(187.22±34.77) vs (129.41±5.58),t=3.179,P <0.05]和TNF-α的表达[(187.02±19.16)vs (137.52±23.53),t=5.069,P <0.05]均升高,差异具有统计学意义,而且模型组肺组织中CIRBP mRNA的表达明显升高[(1.97±0....     

大豆甙元对小鼠肝癌H22瘤细胞生长抑制作用

目的探讨大豆甙元(daidzein)诱导H22肿瘤细胞凋亡的作用及机制。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量大豆甙元(0.1～150.0μmol/L)对H22细胞增殖的影响;昆明雄性小鼠60只,随机分为6组,每组10只,腹腔注射给药,分别为模型组、对照组(不含血清的RPMI 1640培养液),低、中、高剂量大豆甙元组(大豆甙元分别为501、00、200 mg/kg),阳性对照组(环磷酰胺30 mg/kg);给药14 d后比较各组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数及瘤重;采用western blot检测bax、bcl-2的蛋白表达。结果 MTT检测结果显示大豆甙元对H22细胞有抑制作用,150μmol/L大豆甙元作用72 h,抑制率达30.3%,与低剂量组比较有明显抑制作用(P<0.05);大豆甙元能使Bax表达上调,Bcl-2表达下调,与对照组比较,10.0μmol/L大豆甙元组bax表达灰度值增加50.05%,凋亡抑制基因bcl-2表达减少52.62%;中、高剂量大豆甙元组小鼠胸腺指数和脾脏指数均明显升高(P<0.01),与模型组比较,大豆甙元各组瘤重指数下降明显(P<0.01)。结论大豆甙元对小鼠肝癌H22细胞的生长具有明显抑制作用,可诱导H22细胞凋亡,并在一定程度上抑制小鼠移植性肿瘤的生长,增强宿主免疫功能。