结核分枝杆菌的潜伏感染与检测方法

结核分枝杆菌是一种复杂的病原微生物。人感染结核分枝杆菌后，大约有10％的初始感染者发生结核病，对于那些没有临床表现的感染者，有相当数量的一部分人体内存在潜伏感染的结核分枝杆菌，即机体的免疫系统能够控制结核分枝杆菌的复制而不表现出临床症状但又不能彻底清除感染的结核分枝杆菌。     

重视非结核分枝杆菌感染的实验诊断

由于艾滋病（AIDS）患者增加,肺部非结核分枝杆菌病（NTM）和非结核分枝杆菌（MOTF）感染已日益严重。我国MOTT感染常为速生长分枝杆菌（脓肿、龟分枝杆菌和偶然分枝杆菌）、鸟胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌和蟾分枝杆菌等所致。     

结核分枝杆菌实验室检测产品和技术应用进展

结核病是全球面临的重大公共卫生问题,结核病患者的早期快速检测对提高患者的疗效,并有效阻断结核人际传播至关重要.结核病诊断能力不足是导致发现率和报告率较低的根本原因,尤其在患者面对交通、经济负担等一系列问题时,进一步加剧患者的漏诊.然而传统的结核分枝杆菌实验室检测方法已无法满足临床的实际需求,亟待在结核病高负担国家使用和...     

结核分枝杆菌实验室获得性感染事件分析

加强疫苗、结核病新药和诊断方法研究是当前“遏制结核病策略”之一。为此,国家在“十一五”科技重大专项中设立了“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”专项,其中包括结核病防治课题。而在展开结核病防治研究的过程中,如何避免实验室获得性感染则是首先需要解决的问题。本研究收集了20世纪50年代以来国际上文献报道的实验室获得性结核感染事件,并对事件原因进行了分析,以期为我国实验室安全开展Mtb研究提供参考。     

结核分枝杆菌耐药性检测专家共识

耐药结核病尤其是耐多药结核病(MDR-TB)和广泛耐药结核病(XDR-TB)是目前临床亟待解决的难题之一,而对抗结核药物进行药物敏感性试验(DST)可为耐药结核病的诊断提供实验室依据。本专家共识简要地介绍了我国临床常用的结核分枝杆菌(MTB)DST方法(包括表型DST和分子DST);提出了MTB耐药性检测策略和正确判读检测结果的建议;指出目前DST检测技术和临床应用存在的问题,并对未来DST的发展前景进行了展望。     

分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药性分析

目的了解本地区就诊患者分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药情况。方法用对患者标本进行分枝杆菌培养鉴定和药敏试验。结果 9653份标本分枝杆菌培养阳性2759例,其中1229株分枝杆菌行菌种鉴定和药敏试验,非结核分枝杆菌219株,结核分枝杆菌1010株,纳入929株药敏结果进行分析,对4种一线抗结核药物至少耐一药232株,耐二药51株、耐三药49株,耐四药33株,耐多药92株。结论本地区分枝杆菌非肺部感染应引起高度重视,结核菌总耐药率和耐多药率近几年维持在稳定高位,结核菌耐药情况仍然十分严重。     

结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的病例分析

目的研究结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的病例特点。方法对南京市胸科医院实验室培养阳性的10389例菌株,经菌性鉴定为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的223份样本,共70例患者的培养结果进行分析。结果结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌可以互为先后顺序感染,也可以同时感染,以先感染结核分枝杆菌,后感染非结核分枝杆菌为多。结论对于特殊人群和治疗效果欠佳的的患者,应定期、多次的进行相关的培养、菌型鉴定和药物敏感试验,尽早发现存在混合感染及时调整治疗。     

AIDS合并结核非结核分枝杆菌感染临床特征及预后的差异性北大核心CSCD

目的总结并分析艾滋病病毒（HIV）合并结核分枝杆菌（MTB）感染（HIV/MTB）、合并非结核分枝杆菌（NTM）感染（HIV/NTM）的临床特征及预后。方法 2013年1月至2015年12月,在重庆市公共卫生医疗救治中心,收集、整理艾滋病合并结核分枝杆菌的病例及艾滋病合并非结核分枝杆菌感染病例的资料,运用SPSS软件分别分析其临床症状、实验室检查、影像学特点。结果共纳入HIV/MTB感染者91例,HIV/NTM感染者23例。HIV/MTB感染者、HIV/NTB感染者的浅表淋巴结肿大的发生率分别为19.8%、69.6%,中度以上贫血的发生率42.9%、69.6%,胸腔积液的发生率35.2%、60.9%,病死率6.6%、21.7%。HIV/NTM感染者HIV核糖核酸（RNA）定量水平（P=0.003）和严重低蛋白血症（P=0.019）的发生率,均明显低于HIV/MTB感染者。同时,HIV/MTB感染者肺部病变范围≥2个肺叶的比例,明显高于HIV/NTM合并感染者（P=0.039）。结论 HIV/NTM感染与HIV/MTB感染在浅表淋巴结肿大、贫血及胸腔积液发生率、病死率有差异,可为鉴别诊断提供参考;HIV/MTB感染者更易发生低蛋白血症,肺部病变更广泛。     

应用低温等离子技术灭活体外结核分枝杆菌效果的初步研究

目的:初步探讨低温等离子技术在体外实验中对不同类型结核分枝杆菌的杀灭效果,旨在为结核分枝杆菌的杀灭提供新的技术和方法。方法:将结核分枝杆菌标准株(H37Rv)、广泛耐药结核分枝杆菌(extensive drug-resistant Mycobacterium tuberculosis,XDR-MTB)、耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)菌液接种在培养基上,于培养3周内配置成0.5麦氏浓度的菌悬液,再倍比稀释为试验用菌悬液,分别取2.0 ml菌悬液样品置于无菌试管中;分别采用低温等离子系统PLACOAG(止血、凝固)模式对菌悬液行0、3、6、9、12、15 s处理,随后放入培养箱,21 d后分别计算各组不同作用时间存活的菌落数、杀菌对数值及杀菌率。结果:(1)H37Rv菌株(F=20.313,P=0.003)、XDR-MTB菌株(F=13.956,P=0.006)及MDR-MTB菌株(F=20.355,P=0.006)不同作用时间杀菌对数值差异均有统计学意义;3种菌株在作用9 s时杀菌对数值比...     

591株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的回顾性分析湖南省结核病医院结核病人中结核分枝杆菌耐药状况并分析耐药形成原因。方法分析2003年5月1日—2007年12月31日间分离培养出并使用噻吩-2羧基肼（TCH）和对硝基苯甲酸（PNB）进行分型确认的591株结核分枝杆菌药物敏感试验结果,包括异烟肼（INH、H）、利福平(RFP、R)、硫酸链霉素（SM、S）、对氨基水杨酸钠(PAS、P)、乙胺丁醇(EMB、E)、卡那霉素(KM、K)、左氧氟沙星（OFLX、O）。7种药物采用绝对浓度法进行药物敏感性检测。结果591株结核分枝杆菌中,至少耐一药为63.6%（376/591）;同时对7种药物耐药率为0.2%（1/591）;耐多药率（MDR）为38.6%(228/591)。结论结核病人耐药情况比较严重,需要更严格的执行结核病控制策略,防止耐药病人及耐药菌株的产生和传播。     

我国结核与非结核分枝杆菌混合感染的系统性回顾及Meta分析

目的 了解我国结核(TB)与非结核分枝杆菌(NTM)混合感染的流行现状以及对结核病防控的影响。方法 检索中外文文献数据库,纳入2020年以前发表的包含大陆地区结核病患者临床样本中分枝杆菌分离鉴定数据的原始文献,系统性回顾分析TB/NTM的混合感染情况。结果 在疑似/确诊结核病患者中,分枝杆菌的粗分离率为35.4%(28.9%~41.9%),NTM的粗分离率为5.2%(4.7%~5.7%),NTM在分枝杆菌中的占比为12%(11.2%~12.7%);NTM/TB混合感染在疑似/确诊结核病人中的分离率为0.6%(0.2%~1.1%),在分枝杆菌中的占比为1.4%(1.1%~1.8%)。结论 国内对NTM/TB混合感染的报道非常有限,检测方法和成本阻碍了混合感染的检出。     

结核分枝杆菌多重感染的初步研究

目的 鉴定结核分枝杆菌多重感染的存在.方法 从上海市疾病预防控制中心结核病参比实验室保存的菌株中,选择1999年至2004年在同一抗结核疗程中前后2次分离菌株的耐药表型改变的患者为研究对象.挑选并活化入选病例的首次分离株,分离培养单菌落.利用可变数目串联重复序列多态性分型(VNTR)方法,对每个分离株的30个单菌落进行基因型分析.结果 在22例入选病例中,2例患者的首次分离株中存在2种不同基因型的菌株.2种不同基因型菌株在单菌落中占的比例分别是24:6和29:1.其余20例患者分离株各自的30个单菌落的基因型相同.结论 上海地区结核病患者中存在结核分枝杆菌的多重感染.     

吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌的噬菌体检测技术研究

目的 建立噬菌体生物扩增法（PhaB）快速测定吡嗪酰胺耐药性，并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法 应用建立的PhaB测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性，并与绝对浓度法的药敏结果进行比较，对不符合的菌株进行最低抑菌浓度（MIC）测定和序列测定分析。结果 PhaB检测吡嗪酰胺耐药性的最佳测定条件为pH值5．5、药物浓度200μg／ml、37℃作用48h。用绝对浓度法检测108株结核分枝杆菌临床分离株，其中吡嗪酰胺敏感33株、耐药75株；用PhaB检测该108株结核分枝杆菌临床分离株，若以噬菌斑减少95％为判断标准。则吡嗪酰胺敏感32株，耐药76株。2种方法检测均为敏感的为28株，均为耐药的为71株，符合率为91．7％；2种方法检测结果不符的为9株，其中5株的PhaB结果与MIC结果相符，4株的结果不符，测序结果表明9株中有7株的PhaB结果与测序结果相符。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准，PhaB检测吡嗪酰胺耐药性的敏感性为94．7％，特异性为84．8％，阳性预测值为93．4％，阴性预测值为87．5％，准确性为91．7％。结论 PhaB测定吡嗪酰胺耐药性简便、快速，3d即可获得药敏结果，可作为吡嗪酰胺耐药性的快速筛选方法。     

388例患者结核分枝杆菌耐药情况分析

目的回顾性分析陕西省结核病防治院肺结核病人中结核分枝杆菌耐药状况并分析耐药形成原因。方法分析2008年分离培养388株结核分枝杆菌药物敏感试验结果,包括异烟肼（H）,利福平（R）,盐酸乙胺丁醇（E）,硫酸链霉素（S）。结果 388株结核分枝杆菌中,至少耐一种药物耐药率为64.43%,同时对4种药物耐药率为4.12%,耐多药率为10.31%。结论结核病人耐药情况比较严重,需要更严格执行结核病控制策略,防止耐药病人及耐药菌株的产生和传播。     

结核分枝杆菌感染的免疫学检测技术研究进展及临床应用现状

结核病仍然是全球和我国重点防控的传染病之一。尽管目前已将结核分枝杆菌核酸检测阳性纳入结核病确诊依据之一,但临床仍然存在大量病原学阴性的结核病患者,需要依靠免疫学检测技术进行辅助诊断。结核分枝杆菌入侵宿主后引发的免疫病理反应及抗结核免疫应答反应是开发免疫学检测技术的基础,参与免疫应答不同阶段的各类细胞、细胞因子、趋化因子、抗体等都是潜在的免疫学诊断靶标。近年来,基于这些靶标开发了多项免疫学检测新技术,包括γ-干扰素释放试验、新型结核菌素皮肤试验、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)检测、γ-干扰素/白细胞介素-2(IFN-γ/IL-2)双因子检测等,为结核分枝杆菌感染和结核病的诊断带来了新的希望。此外,尚有一些处在研发过程的新型蛋白标识物、多功能淋巴细胞等也表现出较好的潜在诊断价值。笔者将对已用于临床的免疫学诊断技术的应用现状及优缺点进行综述,并探讨未来可能进入临床应用的标识物和其他潜在靶标。     

结核分枝杆菌热休克蛋白16.3及其合成肽诱导小鼠免疫应答的研究

1±3)mg/L],3个实验组之间均无显著差别.3个实验组均对MTB在脾脏[细菌数为(6.74±0.14)～(6.81±0.28)lgCFU]和肺脏[细菌数为(5.74±0.27)～(6.65±0.32)lgCFU]中的增殖有明显抵抗作用,但效果均未超过卡介苗组[细菌数分别为(5.95±0.17)和(5.62±0.23)lgCFU].结论 HSP16.3和HSP16.3合成肽在免疫学特性方面各有优势,提示二者均有望成为结核病疫苗的候选组分.     

结核分枝杆菌潜伏相关蛋白Rv2204c的生物信息学分析

目的 应用生物信息学方法分析结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)潜伏相关蛋白Rv2204c的结构及功能。方法 从NCBI数据库中搜索Rv2204c蛋白的氨基酸序列,运用ProtParam, Signal 6.0 Server, ProtScale, TMHMM Server v.2.0,ProtCompB,NetNGlyc-1.0及NetPhos-3.1预测蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、跨膜螺旋区、亚细胞定位及糖基化和磷酸化位点;运用SOPMA、SWISS-MODEL预测蛋白的二、三级结构;运用IEDB预测蛋白的B细胞抗原表位;采用SYFPEITHI,RANKPEP,NetMHC和NetCTL预测其细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原表位;采用SYFPEITHI、RANKPEP预测其辅助性T(Th)淋巴细胞表位;利用MEGA构建Rv2204c蛋白进化树;运用STRING蛋白相互作用数据库预测Rv2204c相互作用蛋白。结果 Rv2204c蛋白氨基酸总数为118,为亲水性稳定蛋白;该蛋白无信号肽,无跨膜螺旋区;亚细胞定位主要为细胞质;无糖基化位点,含...     

结核分枝杆菌药物敏感性表型检测的研究进展

全球耐药结核病疫情依旧严峻,我国尤甚,结核分枝杆菌药物敏感性表型检测在耐药结核病的诊断中仍占有重要地位,本综述论述了近年来多种表型药敏检测方法及国内外研究进展,讨论汇总了各种药敏试验方法的敏感度、特异度及各方法的优缺点,为临床及实验室根据不同需求选择药敏方法提供依据。     

结核分枝杆菌L型的实验诊断研究进展

结核分枝杆菌L型（mycobacterial L—forms）又称为结核分枝杆菌细胞壁缺陷型（mycobacterial cell wall—deficient forms,CWDF）,1960年Mattmand等对其生物学特征进行了具体阐述．其发现由于细胞壁部分或完全缺失,其生物学性状、致病性、药物敏感性和染色体DNA等均发生改变。结核分枝杆菌发生L型变异后仍具有一定致病性,与多种疾病有关,易引起疾病过程慢性化．预后差,由于不形成典型结核结节．故造成结核病的诊断和治疗困难。分枝杆菌L型在常规罗氏培养基上不易生长,涂片中细菌形态不易识别,因此开展分枝杆菌L型的检测具有重要的临床意义。     

依赖利福平结核分枝杆菌的动物实验研究

目的通过对依赖利福平结核分枝杆菌的豚鼠结核病模型研究,探讨依赖利福平结核分枝杆菌是否存在。方法豚鼠按随机数字法分成依赖利福平结核分枝杆菌(1130株、1219株、b858株)组、耐利福平结核分枝杆菌(1290株)组和对豚鼠强毒力致病株(ATCC 35810株)组,每株组再设实验组和对照组。建立豚鼠1130株、1219株、b858株、1290株和 ATCC 35810株攻毒模型,实验组用利福平治疗,对照组用生理盐水治疗,各组分别于4、7、10周观察豚鼠脏器(脾、肺、肝)致病指数、脏器重量指数(WI)、脏器(脾、肺)结核分枝杆菌培养的荷菌量及组织病理学检查。结果 1130株、1219株、1290株和 b858株攻毒豚鼠7周时,致病指数值:实验组分别为68.7±13.8、60.0±13.5、70.0±5.8和23.8±18.9,对照组分别为76.2±18.9、40.0±16.8、63.8±10.3和22.5±15.5,差异均无统计学意义(t 值分别为0.64、1.85、0.35和0.10,P 均>0.05);脾 WI 值:实验组分别为0.229±0.048、0.256±0.067、0.324±0.054和0.199±0.029,对照组分别为0.278±0.025、0.216±0.076、0.368±0.033和0.213±0.038,差异均无统计学意义(t 值分别为1.75、0.79、1.41和0.57,P 均>0.05);脾荷菌量的对数值:实验组分别为(4.98±0.30)、(4.68±1.26)、(5.07±0.47)和(3.85±0.45)CFU,对照组分别为(4.90±1.03)、(4.79±0.45)、(5.08±0.55)和(4.23±0.95)CFU,差异均无统计学意义(t 值分别为0.11、0.15、0.03和0.73,P 均>0.05),实验组和对照组的病理检查结果相似。结论依赖利福平结核分枝杆菌豚鼠结核病模型研究结果与耐利福平结核分枝杆菌株豚鼠结核病模型近似,未见明显依赖利福平现象。