PTEN在急性白血病中的表达及意义

目的:探讨PTEN在急性白血病中的表达情况及其与临床的关系。方法:用S-P免疫细胞化学方法检测52例初治急性白血病(AL),10例完全缓解期急性白血病(AL-CR)及14例正常对照(骨髓正常的非恶性血液病患者)骨髓单个核细胞中PTEN的表达并分析了PTEN与临床指标的相关性。结果:初治AL组PTEN的表达阳性率为46.2%,AL-CR组的表达阳性率为90%,正常对照组的表达阳性率为92.9%,初治组与AL-CR组,正常对照组比较差异有显著性(P<0.05),ANLL组表达阳性率为44.4%,ALL组表达阳性率为50%,ANLL组与ALL组比较差异无统计学意义(P>0.05),AL-CR组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PTEN蛋白的低表达与患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05)而与外周血白细胞计数及髓外浸润呈正相关(P<0.05)。结论:AL患者存在PTEN蛋白表达缺失,PTEN蛋白在AL的发病中可能起一定作用。     

慢性粒细胞白血病的不同病期PTEN表达及其相关性研究

目的探讨抑癌基因PTEN在慢性粒细胞白血病（CML）病情进展及预后中的意义。方法应用半定量RT-PCR和免疫组化技术分别检测55例CML患者和16例慢性再生障碍性贫血（CAA）及10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞（BMMNC）中PTEN的表达情况。CML患者中慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）29例（慢性期组）,慢性粒细胞白血病加速期（CML-AP）9例（加速期组）,慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）17例（急变期组）。分析PTEN与外周血白细胞数及Bcr/bal融合基因的关系,追踪疾病的转归。结果 PTEN基因阳性表达在对照组CAA 82.33%与正常人90%,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。55例CML患者PTEN阳性表达57.41%明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。PTEN表达在慢性期组、加速期组、急变期组均明显低于正常对照组（P〈0.05）。加速期及急变期的表达低于慢性期（P〈0.05）,在加速期和急变期的表达虽降低,但两者的差异无统计学意义（P〉0.05）。各期PTEN表达与Bcr/bal融合基因无相关性,与患者外周血白细胞数呈正相关性（r≈0.50）。结论 PTEN参与了CML的发生、发展,且与CML的急变有一定相关性,PTEN基因可以作为CML病情进展及判断预后的有价值的分子标志物。     

Pin1在急性白血病中的表达及与Cyclin D1的相关性研究

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在急性白血病发生发展中的作用及其与Cyclin D1的相关研究。方法用S-P免疫细胞化学染色方法检测62例初治急性白血病（AL）,10例完全缓解期急性白血病（AL-CR）及15例正常对照组（骨髓像正常的非恶性血液病患者）骨髓单个核细胞中Pin1、CyclinD1的表达。结果初治AL组的Pin1表达阳性率为59.7%,AL-CR组的表达阳性率为0,正常对照组的表达阳率为0,初治组与AL-CR组、正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,Pin1与CyclinD1的表达呈正相关关系（r=-0.339,P〈0.05）,Pin1蛋白的高表达与患者的年龄、性别、外周血白细胞计数及髓外浸润无明显相关性（P〉0.05）。结论结论Pin1的表达与Cyclin D1的表达密切相关,Pin1和CyclinD1的异常表达可能参与了急性白血病的发生发展。     

X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究

目的 观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值.方法 选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例).应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平.对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组).结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P＜0.01)和非恶性血液病组(P＜0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P＜0.05)和非恶性血液病组(P＜0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关.结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一.     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定对白血病及骨髓增殖异常综合征诊断的临床意义

目的：基于白血病(acute leukemia,AL)和骨髓增殖异常综合征（myelogram of myelodysplastic syndrome,MDS)患血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（glycylproline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)活力测定,国内外未见报道,为AI和MDS诊断及治疗提供依据。方法：利用Hio改进后的简单易行的测定方法,对32例白血病非缓解（acute leukemia-no-respite,AL-NR)`20例白血病完全缓解（acute elukemia-complete respite,AL-CR)和33例MDS患血清GPDA活力进行测定。结果：AL－NR及MDS组血清GPDS活力较正常组显降低（P＞0．01）,AL－CR组与AL＝－NR组比较明显升高（P＜0．01）,但仍比正常组低（P＜0．05）,MDS组与AL－NR比较,差异无显性（P＞0．05）,但与AL－CR组比较差异非常显（P＜0．01）。结论血清GPDA活力测定作为AL和MDS等疾病的实验诊断标准志,具有一定的临床意义。     

c-FLIP在恶性血液病中的表达及其临床相关性研究

目的：探讨c-FLIP基因在血液肿瘤中的表达以及临床意义。方法以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测22例血液肿瘤骨髓中的c-FLIP mRNA表达,Western-Blot蛋白质印迹(WB)方法检测其c-FLIP蛋白的表达。病例包括急性白血病(AL)12例(其中初治11例及反复复发1例)、完全缓解(CR)后AL 2例、慢性粒细胞性白血病(CML)2例、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)2例、多发性骨髓瘤(MM)2例和骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多2型(MDS-RAEB-2)2例。结果初治和复发AL,初治CML、CLL、MDS-RAEB-2、MM患者c-FLIP mRNA和蛋白均表达异常增高。初治AL c-FLIP mRNA及43 kD蛋白的表达显著高于慢性白血病(CL)(P<0.05)。MDS-RAEB-2、MM与ALc-FLIP mRNA的表达差异均无统计学差异(P>0.05),但MDS 55 KD、43 KD蛋白表达明显低于AL(P<0.05),而MM无明显差异。对照组mRNA及其蛋白均阴性表达,CR后AL mRNA阴性表达,但其蛋白均有表达,低表达于AL,尤其43 kD明显低于AL(P<0.05)。c-FLIP表达在初治AL患者与其年龄、性别、初诊白细胞数、LDH以及核型、免疫表型无关。AL患者c-FLIP mRNA及其蛋白表达与初治疗效无明显相关性(P>0.05)。结论血液肿瘤患者c-FLIP mRNA及其蛋白表达异常增高,能够反映出恶性血液病患者骨髓造血细胞的凋亡抑制情况,与恶性血液病的类型、疾病的状态以及病程中的临床疗效、预后等都密切相关。     

E-cadherin和PTEN在人肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨E-钙黏蛋白（E-cadherin）和PTEN在人肺癌组织中的表达及意义.方法应用免疫组织化学SP法检测99例肺癌组织中E-cadherin和PTEN的表达状况.结果1）肺癌组中E-cadherin和PTEN的总阳性率分别为63.6%和62.6%.2）E-cadherin表达在小细胞癌组和细支气管肺泡癌组间比较,差异有显著性（P＜0.05）.3）在无淋巴结转移组和淋巴结转移组,E-cadherin和PTEN的阳性表达率分别为75.6%、75.6%和53.7%、51.9%,组间比较,差异均有显著性（P＜0.05）.4）E-cadherin和PTEN阳性表达率在Ⅰ、Ⅱ期分别为68.2%和67%,高于Ⅲ、Ⅳ期病例中的表达27.3%,差异均有显著性（P＜0.01）.5）E-cadherin阳性表达与PTEN阳性表达呈正相关.结论肺癌中E-cad-herin和PTEN的低表达在肺癌的发生、恶性演进过程中可能起作用.     

DcR3 mRNA在白血病细胞中的表达及意义

目的:探讨DcR3 mRNA在急性白血病(AL)细胞中的表达及其临床意义。方法：选择AL患者46例,其中急性髓系白血病（AML）28例,急性淋巴细胞白血病（ALL）18例,27例非恶性血液病患者作为对照组,采用RT-PCR方法检测骨髓单个核细胞（BMNC）中DcR3 mRNA的表达水平,并分析其与临床参数的关联性。结果：AL组DcR3 mRNA表达阳性率（67.4％）及表达水平（0.56±0.09）高于对照组（40.7％,0.39±0.19）（P<0.05）;AML组DcR3 mRNA表达阳性率(71.4%)及表达水平（0.56±0.09）与ALL组(61.1%,0.53±0.08)比较差异无显著性（P>0.05）;AL患者DcR3 mRNA的阳性表达率在白细胞计数≥30×10⁹•L-1时升高。结论：DcR3基因可能通过抑制白血病细胞凋亡途径参与白血病发病过程。     

PTEN、VEGF蛋白表达与乳腺癌病理学特征以及微血管密度的关系

目的 探讨乳腺癌组织中PTEN、VEGF蛋白表达与临床病理学特征的关系及其与微血管密度（MVD）的相关性.方法 采用SP法检测42例乳腺癌组织及15例正常乳腺组织中PTEN、VEGF和CD34蛋白的表达.结果 PTEN蛋白在正常乳腺组织高表达率为80%（12/15）,在乳腺癌组织中的高表达率为35.7%（15/42）,两者比较有显著性差异（P〈0.01）;乳腺癌组织中PTEN蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期无关（P〉0.05）,而与淋巴结转移、组织学分级有关（P〈0.05）;VEGF蛋白在正常乳腺组织高表达率为20%（3/15）,在乳腺癌中高表达率为88.1%（31/42）,两者比较有显著性差异（P＜0.01）;乳腺癌组织中VEGF蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期和组织学分级无关（P＞0.05）,而与腋淋巴结转移有关（P〈0.05）;MVD值在PTEN高表达、VEGF低表达的组织中明显低于PTEN低表达、VEGF高表达的组织,两者比较差异显著（P〈0.05）.结论 联合检测PTEN、VEGF和MVD的表达可作为乳腺癌生物学行为和预后判断的重要指标.     

子宫内膜癌中PTEN与P27^kipl蛋白表达及相关性研究

目的：研究抑癌基因PTEN和P27蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜样腺癌（EECA）临床病理因素的关系,探讨二者在EECA发生机制中的作用与相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测52例子宫内膜癌（45例EECA）、20例正常增殖期子宫内膜、18例子宫内膜增生症中PTEN与P27的表达情况,并对不同组织学类型和临床病理参数进行分析,同时检验PTEN与P27在EECA中表达的相关性。结果：正常内膜组PTEN的表达明显高于EECA组和增生症组（P〈0.05）,而EECA组与增生症组之间无显著差异（P〉0.05）;P27在正常内膜组的表达显著高于EECA组（P〈0.01）,而与增生症组之间无显著差异（P〉0.05）。Ⅰ、Ⅱ型子宫内膜癌组织中PTEN与P27蛋白的表达有显著性差异（P〈0.05）。在不同临床病理因素中,PTEN蛋白在G1级EECA组织中表达显著高于G2、G3级（P〈0.05）。P27蛋白的表达与年龄及手术病理分期呈明显相关（P〈0.05）。同时,在EECA中P27与PTEN的表达有显著相关性（r=0.418,P〈0.01）。结论：PTEN表达缺失可能是EECA的早期分子事件;P27可能是PTEN介导的细胞周期停滞过程中的下游靶基因,其蛋白表达缺失可能与临床预后相关。     

造血干细胞移植治疗儿童血液肿瘤及难治性血液病53例临床观察

目的观察造血干细胞移植治疗儿童血液肿瘤及其他难治性血液病的临床疗效。方法自2007年4月至2009年12月,我们共对53例血液病患儿实施了造血干细胞移植治疗,其中自体移植15例,异基因移植38例,观察其临床疗效和并发症。结果 15例患者行自体外周血造血干细胞移植后造血功能均能顺利重建,无严重并发症发生。异基因移植患儿除1例发生颅内出血早期死亡外,其余均顺利达到造血重建,但其中急性移植物抗宿主病发生率为18.4%,慢性移植物抗宿主病发生率2.6%;15例患儿于移植后0～24个月分别死于颅内出血、感染和疾病复发或进展;移植后6个月至2年存活率65%。结论造血干细胞移植是治疗儿童血液肿瘤及其他难治性血液病的有效方法,可明显改善预后;临床可根据患者原发疾病诊断、供者情况及家庭经济条件选择移植方式。     

急性白血病患儿hTERT基因的表达

目的：探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达与儿童急性白血病(AL)的关系和临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测K562白血病细胞株、40例急性白血病患儿和10例正常对照的hTERT基因表达。结果：K562白血病细胞株、30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中23例、10例急性髓系细胞白血病(AML)患者中7例有hTERT基因表达。hTERT基因表达见于AL所有亚型,其相对表达水平与AL的完全缓解(CR)率有相关性,相对表达水平≥1．O的患儿CR率低及生存期短。结论：hTERT基因表达与儿童急性白血病发生有关,hTERT基因高表达的患者CR率低、无病生存期短,hTERT基因表达的检测可作为判断儿童急性白血病预后的一项指标。     

急性白血病患者骨髓组织survivin表达的研究

目的 探讨急性白血病(AL)患者骨髓组织survivin基因表达及其与疗效的关系.方法 采用RT-PCR检测57例急性白血病患者治疗前后骨髓中survivin基因表达水平,并与正常对照组进行比较.结果 初发白血病患者survivin的表达高于正常对照(P＜0.05),survivin高表达的急性非淋巴细胞白血病缓解率低,急性淋巴细胞白血病的缓解率与survivin表达无关.结论 survivin在白血病中均高表达,survivin可作为判断急性白血病的疗效和预后指标.     

免疫分型在FAB难以分类急性白血病中的诊断价值

分析40例按FAB标准难以分类的急性白血病（AL）免疫表型主要分为3种类型：①M2／M3难以鉴别；③过氧化酶阴性的AL；③杂合型急性白血病（HAL）。提示在FAB难以分类AL的诊断中具有不可缺少的作用。     

恶性血液病凝血指标的变化及意义

目的: 探讨恶性血液系统疾病凝血指标的改变及其临床意义。方法: 回顾性分析135例血液肿瘤患者初发时凝血指标的差异,并总结急、慢性白血病及恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤凝血指标的变化。结果: 急性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和D-二聚体(D-D)与正常对照组差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01),纤维蛋白原(FIB)、纤维蛋白降解产物(FDP)与正常对照组差异均无统计学意义(P>0.05),而慢性白血病各项指标与对照组差异均无统计学意义(P>0.05),急性白血病组中急性非淋巴细胞白血病-M3凝血指标PT、APTT、D-D、FDP与其他各组差异均有统计学意义,各组FIB差异无统计学意义(P>0.05),淋巴瘤组中霍奇金组与非霍奇金组各项凝血指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论: 恶性血液病患者存在凝血、纤溶异常,通过测定FIB、D-D、FDP等指标,可早期判断患者是否处于高凝状态,为及时干预治疗提供客观依据。通过对PT、APTT的监测,可为弥散性血管内凝血的发生及临床用药监测提供实验依据。     

急性白血病的形态、细胞化学、免疫分型及MPO mRNA表达

目的:进一步了解急性白血病 ( AL)形态、细胞化学、免疫分型及髓过氧化物酶基因 ( MPO m RNA)表达。方法:采用细胞形态学、细胞化学染色、间接免疫荧光法和链亲和素 -胶体金原位杂交法对 137例 AL 患者进行分型。结果 :4 1例急性淋巴细胞性白血病 ( AL L)中有 5例表达髓系抗原 ,7例 MPO m RNA表达为阳性 ;91例急性髓系白血病 ( AML)中有 8例表达淋系抗原 ,所有髓系均不同程度的表达 MPO基因。 5例为 FAB不能分类的 AL( U AL) ,其中 1例表达淋系抗原 ,2例表达髓系抗原 ,3/ 5例 MPOm RNA为阳性。 结论 :联合分析 AL 形态学、细胞化学、免疫学及 MPO m RNA表达等特点 ,对于 AL 的诊断和指导治疗均有重要意义。此分型弥补了 FAB分类法的不足     

急性白血病病人血清免疫抑制酸性蛋白测定的意义

目的 探讨免疫抑制酸性蛋白(IAP) 测定在急性白血病病人中的临床意义.方法 采用单向免疫扩散法测定74例急性白血病、25例非恶性血液病及56例正常对照者血清中IAP含量,并进行比较.结果 急性白血病病人血清IAP含量明显高于正常对照组(F=12.08,q=4.98,P<0.01);非恶性血液病病人血清IAP低于急性白血病病人(q=3.94,P<0.01),而与正常对照组比较无显著性差异(q=2.42,P>0.05).化疗后完全缓解的急性白血病病人血清IAP含量明显低于化疗前(t=3.129,P<0.01).结论 监测IAP对急性白血病诊断、鉴别诊断及预后判断均有参考价值.     

PTEN?VEGF?FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在白血病中的表达及其相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达。结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关。结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FLT1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病。     

急性白血病患者P-糖蛋白的表达及功能分析

目的:研究P-糖蛋白(P-gp)在急性白血病(AL)患者中的表达及功能.方法:用免疫组化检测CD34、P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的表达、功能.结果:CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关(P=0.001,r=0.475;P=0.003,r=0.429),P-gp表达与功能呈正相关(P=0.031,r=0.341).初治急性早幼粒细胞白血病(APL)组中无P-gp表达 、P-gp功能 ,明显低于初治急性髓细胞白血病(AML)组(41.1%,35.3%,P＜0.05).初治急性淋巴细胞白血病(ALL)组中P-gp表达 28.6%,P-gp功能 28.6%,与初治AML组无差异(P＞0.05).初治AL组P-gp表达 25%,复发/难治组中P-gp表达 33.3%,两组无差异(P＞0.05);P-gp功能 22.7%,低于复发/难治组P-gp功能 66.7%(P＜0.05).＜50岁初治AL组P-gp表达 26.3%,与≥50岁初治AL组无差异(P＞0.05);P-gp功能 15.8%,低于≥50岁初治AL组(P＜0.05).结论:P-gp功能的检测对AL的化疗更有临床指导意义.     

初诊急性白血病患者化疗前后血浆可溶性血管内皮细胞蛋白C受体、血管性血友病因子、P-选择素水平的变化

目的探讨初诊急性白血病(AL)患者化疗前后血浆可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(s EPCR)、血管性血友病因子(v WF)、P-选择素(P-selectin)含量变化的临床价值。方法选取105例初诊AL患者以及120例健康体检者作为研究对象,再根据疾病类型将入组的初诊AL患者分为急性淋巴细胞白血病(ALL,35例)、急性早幼粒细胞白血病(APL,37例)、不包括APL的急性粒细胞白血病(non-APL AML,33例)。ALL组患者采用VDLP方案诱导化疗,APL组患者采用全反式维甲酸、三氧化二砷、柔红霉素方案诱导化疗,non-APL AML组患者采用DA方案或IA方案诱导化疗。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测初诊AL患者化疗前后以及健康体检者的血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平。结果 1初诊AL患者化疗前血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著高于健康体检组(P0.05)。初诊AL患者化疗完全缓解后血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著低于化疗前(P0.05),但是血浆s EPCR、v WF水平仍然显著高于健康体检组(P0.05),而血浆P-selectin水平与健康体检组相比差异无显著性(P0.05)。2不同类型初诊AL患者化疗前血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平相比差异有显著性(P0.05),APL患者血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著高于ALL患者、non-APL AML患者(P0.05),ALL患者与non-APL AML患者之间血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平相比差异无显著性(P0.05)。结论初诊AL患者在治疗前往往伴随有血管内皮细胞损伤、血小板活化以及血液高凝状态,这种情况以APL表现更为显著。