尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ（UⅡ）及G蛋白偶联受体14（GPR14）mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期（子痫前期组,其中轻度15例,重度10例））患者和20例正常足月孕妇（正常妊娠组）和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

Endoglin基因在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中Endoglin基因水平的变化及临床意义。方法选择2010年8月至2011年4月在北京军区总医院住院分娩的妊娠期高血压疾病患者共44例（妊娠期高血压疾病组）,其中妊娠期高血压孕妇15例（妊娠期高血压组）,轻度子痫前期孕妇14例（轻度子痫前期组）,重度子痫前期孕妇15例（重度子痫前期组）;以同期正常晚期妊娠孕妇16例为对照组。采用实时定量RT-PCR检测各组孕妇胎盘组织中Endoglin mRNA表达水平。结果妊娠高血压疾病组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论 Endoglin在妊娠期高血压疾病患者尤其是轻度子痫前期及重度子痫前期患者胎盘中高度表达,其表达水平可能与病情的发生发展密切相关。     

TNF-α及TGF-β1 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子-αmRNA（TNF-α mRNA）及转化生长因子-β1mRNA（TGF-β1mRNA）在在子痫前期患者胎盘组织中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测45例正常晚期妊娠妇女及56例子痫前期患者（其中轻度子痫前期21例,重度子痫前期35例）胎盘组织中TNF-α mRNA及TGF-β mRNA的表达水平。结果1.轻、重度子痫前期胎盘组织中TNF-α mRNA表达水平分别为：0.371±0.12、0.892±0.347均明显高于正常妊娠组0.138±0.092（均P〈0.01）,重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P〈0.01）。2.轻、重度子痫前期胎盘组织中TGF-β1mR-NA表达水平分别为：0.752±0.133、1.016±0.346均明显高于正常妊娠组0.384±0.098（均P〈0.01）,重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P〈0.01）。结沦子痫前期胎盘组织中TNF-α mRNA及TGF-β1mRNA表达水平明显升高,并且与子痫前期病情发展密切相关,可作为评价病情严重程度的指标。     

胰岛素样生长因子Ⅱ及基质金属蛋白酶9表达与子痫前期发病的关系

目的检测胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）与基质金属蛋白酶9（MMP-9）在血清及胎盘中的表达,探讨二者的关系及其在子痫前期发病中的作用。方法（1）用酶联免疫吸附法（ELISA）检测30例子痫前期患者（子痫前期组,其中轻度子痫前期20例、重度子痫前期10例）及15例正常晚期妊娠孕妇（对照组）的血清中IGF-Ⅱ及MMP-9的水平。（2）用免疫组化方法检测两组孕妇胎盘组织中IGF-Ⅱ及MMP-9的表达,用计算机图像分析系统进行定量分析比较。结果（1）子痫前期组血清IGF-Ⅱ及MMP-9水平均明显低于对照组（P〈0.01,P〈0.01）。（2）IGF-Ⅱ及MMP-9在子痫前期组胎盘中的表达量均显著低于对照组（P〈0.01,P〈0.01）。（3）子痫前期组患者血清及胎盘组织中IGF-Ⅱ水平分别与相应部位的MMP-9水平呈正相关（r=0.379,P〈0.05;r=0.442,P〈0.05）。结论孕妇血清及胎盘组织中IGF-Ⅱ、MMP-9水平变化与子痫前期发病及病情发展有关。     

母血和脐静脉血中UrotensinⅡ的水平及其受体GPR14 mRNA在脐静脉的表达与子痫前期的关系

目的研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）在子痫前期孕妇母血和脐静脉血中的水平和UⅡ及其受体GPR14在脐静脉上的表达，探讨UⅡ在子痫前期发病中的作用。方法（1）随机选择子痫前期孕妇30例为子痫前期组（包括轻度20例，重度10例），对照组选择同期正常孕妇15例，用ELLSA法测定母血和脐静脉血血清中UⅡ的浓度。（2）RT—PCR法半定量GPR14在脐静脉上的表达。结果（1）子痫前期组母血中UⅡ水平（5．48±1．61pg／ml）较正常妊娠组（3．28±1．39pg／ml）高（P〈0．05），其中重度子痫前期组与正常组比较差异有显著性（P〈0．05），而轻度子痫前期组与之相比，差异无显著性。脐静脉血中UⅡ的浓度在子痫前期组（5．65±2．66pg／ml）较正常组（3．11±1．27pg／ml）高（P〈0.05），其中重度和轻度组均高于正常对照组，差异均具有显著性（P〈0．001，P〈0．05）。（2）脐静脉上GPR14 mRNA的表达在子痫前期组（0.87±0．31）较正常组（0．50±0．22）高（P〈0.05），且重度和轻度组均比正常组高，差异有显著性（P〈0.05）。结论在子痫前期的发病机制中，UⅡ可能在全身小血管痉挛收缩和血管粥样硬化方面发挥了重要作用。     

ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义

目的：探讨ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义。方法：分别选取重度子痫前期、轻度子痫前期、妊娠期高血压患者各20例,另选同期行剖宫产的单胎初产健康妊娠妇女20例作为对照。检测并比较各组胎盘组织NO和cGMP水平、总NOS活性,免疫组化SP法检测胎盘组织eNOS和iNOS表达。高效液相色谱法检测各组脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）内ADMA水平。结果：重度、轻度子痫前期组胎盘组织NO水平分别为（7.6±3.6） μmol/g、（11.4±4.3） μmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织cGMP水平分别为（3.26±0.31）pmol/g、（4.53±0.42）pmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）,且4组胎盘组织cGMP水平与NO水平呈正相关关系（r=0.672）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织总NOS活性分别为（10.4±3.0）、（14.8±1.6 ）U/mg蛋白质,显著低于对照组（均P＜0.05）,4组胎盘组织总NOS活性与NO水平呈正相关关系（r=0.785）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织eNOS表达显著低于对照组（均P＜0.05）,重度子痫前期组iNOS表达显著高于对照组（P＜0.05）;重度子痫前期、轻度子痫前期及妊娠期高血压3组HUVECs内ADMA水平均显著高于对照组（均P＜0.05）,且4组患者HUVECs内ADMA水平与胎盘组织NO水平呈负相关关系（r=-0.582）。结论：ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统可能在子痫前期的发病中起重要作用。     

子痫前期患者胎盘及血浆uPA、TGF-β1含量变化及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘及血浆uPA和TGF-β1含量的变化及其在子痫前期发病中的意义。方法采用ELISA法测定57例子痫前期患者（轻度24例,重度33例）和30例正常晚孕妇女（对照组）胎盘及血浆uPA和TGF-β1含量。结果 1.对照组胎盘uPA含量为（32.62±2.85）ng/g,子痫前期组为（11.42±4.67）ng/g,两组差异有极显著性（P〈0.001）;重度组明显低于轻度组,差异有极显著性（P〈0.001）;对照组胎盘TGF-β1含量为（0.83±0.21）ng/g,子痫前期组为（1.12±0.37）ng/g,两组差异有显著性（P〈0.05）;轻、重度组间差异无显著性（P〉0.05）。2.对照组血浆uPA含量为（649.47±41.12）pg/ml,子痫前期组为（466.61±34.68）pg/ml,两组差异有显著性（P〈0.01）;轻、重度组间差异无显著性（P〉0.05）。对照组血浆TGF-β1含量为（9.617±4.19）ng/ml,子痫前期组为（13.30±4.57）ng/ml,两组差异有显著性（P〈0.05）;轻、重度组间差异无显著性（P〉0.05）。3.子痫前期患者胎盘及血浆中二者含量呈负相关（r=-0.652,P〈0.001,r=-0.491,P〈0.01）。结论子痫前期患者胎盘及血浆uPA含量异常下降、TGF-β1含量异常升高与其发病及严重程度有关。     

妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘组织中Endoglin水平变化的研究

目的研究妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘组织中Endoglin水平的变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）及免疫组化方法检测68例妊娠期高血压疾病患者（妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压23例、轻度子痫前期22例、重度子痫前期23例）及20例正常妊娠妇女（对照组）血清及胎盘组织中Endoglin水平。结果妊娠期高血压疾病组血清可溶性Endoglin水平（29.66±8.52 ng/ml）明显高于对照组（10.42±4.35ng/ml）,（P〈0.01）。妊娠期高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期患者血清中可溶性Endoglin水平逐渐升高（分别为13.24±6.17ng/ml,28.28±10.19ng/ml,42.50±13.48ng/ml）,各组间差异有显著性（均P〈0.01）。妊娠期高血压疾病组与对照组比较胎盘组织中Endoglin表达明显升高（P〈0.01）。妊娠期高血压、轻、重度子痫前期胎盘组织中Endoglin表达逐渐增强,各组间差异具有显著性（P〈0.05）。两组血清中可溶性Endoglin水平与胎盘组织Endoglin表达呈正相关（r=0.504,P〈0.05及r=0.532,P〈0.05）。结论 Endoglin水平升高可能与妊娠期高血压疾病的发病及病情发展有关。     

解整合素金属蛋白酶19/ADAM19在子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞分泌MMPs的调节

目的通过对子痫前期及正常孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶19（ADAM19）的检测及ADAM19对绒毛滋养细胞分泌MMP2,9的调节,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系。方法应用免疫组织化学（免疫组化）链霉素抗生物素-过氧化物酶法、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测24例正常胎盘组织及46例子痫前期（其中26例为重度子痫前期,20例为轻度子痫前期）胎盘组织中ADAM19蛋白及mRNA的表达;用明胶酶谱方法检测抗ADAM19抗体作用后滋养细胞MMP2,9的分泌变化。结果胎盘组织中,ADAM19主要分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞一和些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号不仅定位于细胞膜上,在细胞质中也有分布。正常胎盘中ADAM19的蛋白表达量为0.372±0.016,重度和轻度子痫前期组ADAM19蛋白定量分别为0.766±0.029和0.693±0.041,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。ADAM19mRNA在正常组胎盘中的量为0.205±0.084,在重度和轻度子痫前期组中分别为0.481±0.057和0.454±0.033,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。在体外培养的滋养层细胞中,100μg/L浓度的抗ADAM19抗体在作用12h即可以抑制滋养细胞MMP2,MMP9的分泌,其作用呈浓度依赖。结论子痫前期胎盘组织中ADAM19过表达可能与子痫前期的发生和发展有关;在子痫前期的发生中,ADAM19可能是在妊娠早期抑制滋养细胞的浸润而导致胎盘浅着床的。     

IGF-Ⅱ在子痫前期患者胎盘中的表达及意义

目的探讨胎盘组织中胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）在子痫前期发病中的作用及意义。方法采用RT—PCR和Western—Blot方法检测30例子痫前期患者（其中轻度20例,重度10例,子痫前期组）和15例正常同期妊娠产妇（对照组）胎盘中IGF—ⅡmRNA及其蛋白的表达。结果（1）子痫前期组胎盘中IGF-ⅡmRNA的表达水平为0．74±0．42,显著低于对照组的0．97±0．12（P〈0．01）。（2）子痫前期组胎盘中IGF—Ⅱ蛋白表达水平为0．65±0．96,显著低于对照组的0．82±0．35（P〈0．01）。结论子痫前期患者胎盘组织中IGF—Ⅱ水平降低,可能在该病的发病中起重要作用。     

生长分化因子15在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的探讨生长分化因子-15（GDF-15）在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法选择2009年12月至2010年10月在青岛市市立医院住院分娩的子痫前期孕妇140例,其中早发型轻度子痫前期孕妇35例（早发轻度组）,晚发型轻度子痫前期孕妇35例（晚发轻度组）,早发型重度子痫前期孕妇35例（早发重度组）,晚发型重度子痫前期孕妇35例（晚发重度组）;另选同期健康孕妇35例为对照组。采用RT—PCR检测胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA的表达量;采用免疫组化方法检测胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白的表达。结果RT—PCR显示子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化显示GDF-15表达于胎盘滋养细胞的细胞浆和细胞外基质中,并在各组胎盘滋养细胞中均表达。子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白表达水平均高于对照组组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDF-15在子痫前期胎盘滋养细胞中表达升高,GDF-15的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。     

转化生长因子-β1在子痫前期患者胎盘组织中的表达研究

目的探讨转化生长因子-β1mRNA（TGF—β1mRNA）在子痫前期发病机制中的作用。方法采用RT—PCR技术检测45例正常晚期妊娠妇女及56例子痫前期患者（其中轻度子痫前期21例，重度子痫前期35例）胎盘组织中TGF－β3mRNA的表达水平。结果轻、重度子痫前期胎盘组织中TGF－β1mRNA表达水平分别为：0．752±0．133、1．0164-0．346均明显高于正常妊娠组0．384±0．098（均P〈0．01），重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P〈0．01）。子痫前期胎盘组织中TGF-β1mRNA表达水平与24h尿蛋白、血压、新生儿体重及胎盘重量均有明显相关性。结论1．子痫前期胎盘组织中TGF-β1mRNA表达水平明显升高，并且与子痫前期病情发展密切相关。2．胎盘组织TGF－β1mRNA的表达水平与子痫前期患者胎儿发育密切相关。     

全血微量元素含量与妊娠期高血压相关性研究

目的探讨妊娠高血压的发生发展与全血微量元素含量的关系,为妊娠期高血压的预防及治疗提供理论依据。方法按妊娠期高血压疾病诊断标准将入选的78例晚孕孕妇分为妊娠期高血压、子痫前期轻度、子痫前期重度3个组,40例正常健康晚孕孕妇为对照组;采用火焰原子吸收光谱法分别测定患病组和对照组孕妇全血微量元素（铜、锌、钙、镁、铁）浓度水平,对数据统计处理并进行对照研究。结果患病各组与对照组比较微量元素铜、钙、镁含量无显著性差异（P〉0．05）;微量元素锌含量在正常对照组、妊娠高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组之间依次递减,妊娠高血压组与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）,子痫前期轻、重度组锌元素含量显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,子痫前期轻、重度组锌元素含量显著低于妊娠高血压组,差异有统计学意义（P〈0．05）,子痫前期重度组锌元素含量显著低于子痫前期轻度组,差异有统计学意义（P〈0．05）;微量元素铁含量在正常对照组、妊娠高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组之间依次递增,妊娠高血压组与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）,子痫前期轻、重度组铁元素含量显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,子痫前期轻、重度组铁元素含量显著高于妊娠高血压组,差异有统计学意义（P〈0．05）,子痫前期重度组铁元素含量显著高于子痫前期轻度组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论妊娠高血压是孕期常见合并症,要加强妊高征孕妇微量元素的均衡摄入,确保母婴健康。     

PPAR—γ和COX-2用于预测重度子痫前期合并胎儿生长受限的研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活型受体-1（peroxisomeproliferatoractivatedreceptor-γ,PPAR-1）和环氧化酶-2（Cyclooxγgenase-2,COX-2）在重度子痫前期及重度子痫前期合并胎儿生长受限（FGR）发病中的作用,以探讨重度子痫前期合并FGR的发病机制,为其早期诊断、早期治疗及病情预测提供新的理论和实验依据。方法收集重度子痫前期合并FGR患者30例（SPF组）,单纯重度子痫前期患者30例（sP组）,随机选取同期住院的正常晚期妊娠孕妇30例（NP组）,采用酶联免疫吸附法（ELISA）方法检测这三组孕妇母血血浆和脐血血浆中COX-2的表达。采用免疫组化技术检测胎盘组织中PPAR—γ蛋白的表达。结果SPF组、sP组、NP组脐血血清COX-2水平分别为（55．30±8．10）,（39．25±7．90）,（10．60±5．50）mg／mL,三组差异显著（P〈0．05）;SPF组、SP组、NP组孕妇血清COX-2水平分别为（35．25±6．58）,（26．13±6．10）,（7．20±5．36）mg／mL,三组亦有显著差异（P〈0．05）;SPF组孕妇血清与脐血血清中COX-2水平呈正相关（r=0．526,P〈0．01）;SPF组、sP组、NP组胎盘组织中PPAR-1的阳性表达率分别为87．5％、53．1％、29．6％,三组差异显著（P〈0．05）。结论1．COX-2的升高在重度子痫前期和重度子痫前期合并FGR的预测中起着重要作用,COX-2明显升高可预测在重度子痫前期的发病基础上出现FGR;2．出现重度子痫前期合并FGR的胎盘组织PPAR-1蛋白呈强阳性表达;3．通过测定孕母血清COX-2水平能预测胎儿血清COX-2水平。     

子痫前期患者胎盘滋养细胞血管生长抑素、血管内皮因子表达的临床意义

目的检测胎盘部位血管生长抑素（AS）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的水平,探讨在子痫前期患者发病中的临床意义。方法取84例孕妇胎盘绒毛组织,其中正常妊娠组30例,轻度子痫前期23例,重度子痫前期组31例。采用免疫组织化学方法检测在AS、VEGF胎盘部位的表达,光镜下观察表达的分布特点、细胞染色强度和阳性细胞数。结果在子痫前期组绒毛滋养细胞AS表达强度与正常对照组比较显著增强（P〈0.05）,表达强度与子痫前期病情呈正相关（r=0.371 P〈0．05）。子痫前期组与正常对照组胎盘VEGF的表达分布特点相同,子痫前期组较正常对照组显著降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,表达强度与子痫前期病情呈负相关（rs=-0．473P〈0．05）。对正常对照组及子痫前期组的AS、VEGF的表达进行组内相关性分析,显示As与VEGF之间存在关联关系,呈负相关。相关系数分别为r=-0．476P〈0．05,r=-0．419P〈0．05。结论AS和VEGF在子痫前期患者胎盘部位的表达有显著变化,两者之间呈显著负相关,可能是子痫前期发病的重要因素之一。     

sFlt-1mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的检测可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1）在子痫前期胎盘组织中的mRNA表达水平,探讨其在子痫前期发生发展中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测25例子痫前期患者（轻度（n=8）,重度（n=17））和15例正常妊娠孕妇。结果（1）sFlt-1mRNA在正常孕妇、轻度和重子痫前期患者胎盘组织中均有表达。（2）sFlt-1mRNA的表达水平在轻度和重度子痫前期组均高于正常组,差别有显著性（P〈0.01）。结论胎盘组织中sFlt-1mRNA的过度表达可能与子痫前期的发病有关,并参与了子痫前期的病理生理过程。     

NT—proBNP在妊娠高血压心功能评估中的价值

目的探讨N-端脑利钠肽前体（NT—proBNP）在妊娠高血压疾病（PIH）心功能评估中的价值。方法将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT—proBNP浓度。结果PIH组、正常妊娠组和对照组的NT—proBNP水平分别为（300．52±134．44）、（83．42±26．26）和（59-83±12．89）pg／ml,三者间比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为（488．56±155．54）、（323．39±148．90）和（185．73±43．78）pg／ml,三者间比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。NT—proBNP与孕妇体重指数（BMI）呈正相关（r=0．602）,与新生儿体重呈负相关（r=-0．279）。结论孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一。