BRM释介素抗肿瘤作用及作用机理研究

目的：研究中药复方胶囊BRM释介素的抗癌活性及诱导人神经胶质瘤细胞SHG-44、人乳腺癌细胞MCF-7的凋亡作用。方法：运用MTT法检测BRM对体外人癌细胞株的抑制作用；运用小鼠移植瘤模型观察BRM体内瘤活性，应用电镜、AnnexinV-FITC／PT双染流式细胞胞仪分析、琼脂糖凝胶电泳观察BRM诱导SHG-44，MCF-7细胞发生凋亡的作用。结果：BRM释介素体外对SHG-44，MCF-7细胞具有明显的抑制作用。体内对小鼠移植性肿瘤：胰腺癌(MPC-83)、艾氏腹水癌(EAC)、肉瘤(S-180)、神经胶质瘤(G422)表现出较显著的抗癌活性，SHG-44和MCF-7在BRM水提液作用下发生细胞凋亡，表现为细胞固缩、核染色质靠边，出现马蹄形，半月形。Annexin V-FITC／PT流式细胞仪分析，BRM作用24—38h，早期和中晚期凋亡细胞明显增多。BRM水提液(2．5mg生药)作用24～48h，细胞DNA裂解片断呈典型的梯带。结论：BRM释介素的抗肿瘤活性与诱导细胞凋亡有关。     

BRM释介素抗肿瘤作用研究

 目的　研究中药复方胶囊BRM释介素的抗癌活性及诱导人神经胶质瘤细胞SHG 4 4凋亡。方法　运用MTT法检测BRM对体外人癌细胞株的抑制作用 ;运用小鼠移植瘤模型观察BRM体内抑瘤活性 ;应用电镜、流式细胞仪分析、琼脂糖凝胶电泳观察BRM诱导SHG 4 4。结果　BRM释介素体外对SHG 4 4、MCF 7具有明显的抑制作用 ;体内对小鼠移植性肿瘤表现出较显著的抗癌活性 ;SHG 4 4在BRM水提液作用下发生细胞凋亡。结论　BRM释介素的抗肿瘤活性与诱导细胞凋亡有关     

白藜芦醇抑制人脑胶质瘤细胞生长及诱导凋亡比较

 目的 探讨白藜芦醇（Resveratrol，Res）体外抑制U251、U87和SHG-44脑胶质瘤细胞生长及诱导凋亡的不同作用比较，验证Re8确可导致U251细胞凋亡。方法 MTT比色法测量不同剂量的Res作用U251、U87和SHG-44胶质瘤细胞24h后对增殖的影响及不同剂量的Res作用U251、U87和SHG-44细胞6h、24h、48h后的影响。流式细胞仪用Annexin V-FITC和PI双染检测U251、U87和SHG-44细胞凋亡率。HE染色、Hoechst 33342荧光染色、透射电镜（TEM）观察U251细胞形态改变，流式细胞仪测定U251细胞的细胞周期改变。结果 Res明显抑制U251、U87和SHG-44细胞的生长和增殖（P〈0．01）且对U87细胞的抑制作用最强，U251和SHG-44细胞次之；对U251细胞的抑制作用呈浓度及时间依赖性反应；Re8所致的U251、U87和SHG-44胶质瘤细胞凋亡为浓度依赖关系，且对U87细胞的凋亡作用强于U251和SHG-44细胞。U251凋亡细胞的细胞周期主要发生G，期阻滞。结论 Res对U251、U87和SHG-44细胞生长抑制及凋亡作用以U87细胞更明显，对U251细胞的抑制作用呈浓度及时间依赖性反应并引起了其细胞周期改变。     

Apatinib联合5-Fu协同抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外研究

目的 探讨阿帕替尼(Apatinib)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用.方法 采用人乳腺癌细胞株MCF-7,首先采用MTr法及应用流式细胞仪测定不同浓度apatinib作用后对其细胞增殖和周期的影响,其次将MCF-7细胞分为4组,即对照组、Apatinib单药组、5-Fu单药组、Apanitib+ 5-Fu联合组.对各组细胞给予相应药物处理,48 h后分别应用流式细胞仪检测各组药物对MCF-7细胞株凋亡的作用.结果 Apatinib单药对MCF-7细胞有增殖抑制作用,且存在时间剂量依赖关系,而对其细胞周期影响不大.与对照组相比,Apatinib联合5-Fu作用后有协同诱导凋亡作用,经流式细胞仪检测,Apatinib组诱导的细胞凋亡率为12.05％,5-Fu组为25.76％.与单药组比,Apatinib+5-Fu联合组凋亡率升高更为明显,达34.90％ (P＜ 0.05).结论 Apatinib和5-Fu的联合应用在体外协同抑制乳腺癌MCF-7细胞并诱导凋亡,使抗肿瘤活性显著增强.     

新藤黄酸抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的实验研究

目的 探讨新藤黄酸对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖抑制情况及其作用机制。方法 0.5～20μg／ml新藤黄酸处理MCF-7细胞72h,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测MCF 7细胞增殖抑制率;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测线粒体跨膜电位变化;Western blotting检测Fas、FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果 0.5～20μg／ml新藤黄酸均能够抑制MCF-7细胞增殖,且增殖抑制作用呈浓度依赖,半数抑制浓度（IC₅₀）为1763 μg／ml。0.5～3.0μg／ml新藤黄酸即可诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡作用呈时间和浓度依赖。0.5μg／ml新藤黄酸处理MCF 7细胞48h后早期凋亡率为3.7％,总凋亡率为7.2％,72h早期凋亡率为6.7％,总凋亡率为13.7％;3μg／ml新藤黄酸48h后早期凋亡率为69.5％,总凋亡率为71.7％,72h早期凋亡率为76.9％,总凋亡率为81.5％。0.5、1.0、1.5 μg／ml新藤黄酸导致线粒体跨膜电位下降的细胞比例升高,促凋亡相关蛋白 FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9表达水平呈浓度依赖性上升,Fas和Bax蛋白表达水平变化不大,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平则呈浓度依赖性下降。结论 新藤黄酸通过诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡,抑制细胞增殖,其诱导凋亡的分子机制与死亡受体及线粒体凋亡途径密切相关。     

致康胶囊对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨致康胶囊对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响。方法:采用0（对照组）、0.5、1.0、2.0 mg/ml 致康胶囊培养液分别处理乳腺癌细胞MCF-7,分别于培养后24、48和72 h计数MCF-7细胞数。采用MTT法检测致康胶囊对乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期;PI 单染流式细胞仪检测致康胶囊对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:不同浓度致康胶囊能有效地抑制MCF-7细胞增殖,且随浓度增加和作用时间延长,细胞的增殖抑制率增加。0.5、1.0、2.0 mg/ml的致康胶囊作用MCF-7细胞72 h后,G0/G1期细胞所占细胞周期的比例分别为19.33%±10.38%、14.12%±5.37%和26.84%±2.13%;而对照组G0/G1期比例为51.83%±1.90%。0.5、1.0、2.0 mg/ml致康胶囊处理48 h后细胞的凋亡率分别为2.09%±0.74%、3.84%±0.78%和 5.35%±0.83%。结论:致康胶囊能抑制MCF-7细胞的体外增殖,且抑制作用表现为时效和量效关系;并能通过阻滞细胞周期于G2/M期,促进乳腺癌细胞凋亡。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的：榄香烯是从姜科植物莪术中提取的抗肿瘤药物,我们应用榄香烯治疗神经胶质瘤取得了较为显著的疗效,本研究探讨榄香烯的抗胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡作用。方法：^3H-TdR掺入法检测榄香烯对鼠源性C6胶质瘤细胞及人源性SHG-44胶质瘤细胞的体外增殖抑制效应,Hoechst33258／PI荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：榄香烯能有效抑制C6／SHG-44胶质瘤细胞的恶性增殖,^3H-TdR掺入法检测榄香烯处理不同时间(1～4天)的IC50,C6细胞为7．33--11．02mg／L,SHC-44细胞为13．29～27．16mg／L。在相同药物浓度下,C6细胞较SHG-44细胞敏感。经榄香烯作用后,C6／SHG-44胶质瘤细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成,DNA直方图观察到特征性亚倍体峰(Ap峰),DNA凝胶电泳出现有明显的梯状条带。结论：榄香烯有显著的抗胶质瘤细胞增殖作用,并能诱导胶质瘤细胞凋亡。     

沙立度胺抑制乳腺癌细胞增殖的体外实验

背景与目的:观察沙立度胺对体外乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制作用,以及对细胞凋亡细胞周期的影响.材料与方法:经不同浓度(10μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml.、200 μg/ml)的沙立度胺处理MCF-7和MDA-MB-231细胞不同时间(24 h、48 h、72 h)后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活和生长情况,分析量效关系、时效关系.采用流式细胞仪检测沙立度胺对细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:在10～200μg/ml浓度范围,沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖均有抑制作用(P＜0.01＝.在药物作用48 h后,对各组细胞的抑制率均达到高峰,尤以100μg/ml浓度组抑制率最高.沙立度胺作用后的乳腺癌细胞在流式细胞分析图上见细胞凋亡峰(亚G1峰),100μg/ml沙立度胺作用48 h后,MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率分别为9.66%和11.18%,与对照组凋之率比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外增殖具有明确抑制作用,并可诱导细胞凋亡.     

格尔德霉素衍生物G0705的抗肿瘤作用及分子机制

目的格尔德霉素（Geldanamycin）属于苯醌胺莎类抗生素,其作用靶点为热休克蛋白90（Heat Shock Protein HSP90）,细胞水平实验表明格尔德霉素对肿瘤细胞有明显的杀伤作用,但动物实验中发现格尔德霉素具有肝毒性,而且水溶性很差。这些问题限制了格尔德霉素在动物实验的疗效。近年来,寻找溶解性好、肝脏毒性低的格尔德霉素衍生物成为新的研究热点。其中17-AAG和17-DMAG已经开始进行Ⅰ、Ⅱ期临床实验。G0705为本实验室合成的格尔德霉素衍生物。本实验研究了G0705对乳腺癌MCF-7细胞株的抗细胞增殖作用、诱导细胞凋亡作用及其对HSP90下游相关靶点及其下游信号分子的影响。方法采用MTT法测定G0705对乳腺癌MCF-7细胞的抗增殖作用。用Hoechst33258染色法、Hoechst-PI双染色法、活细胞Annexin-FITC／PI双染法测定G0705诱导MCF-7细胞早期凋亡作用。用Western blot测定G0705对MCF-7细胞中HSP90下游相关靶点及其下游信号分子的影响。结果MTT法测定G0705抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的IC50值为13．6μg／ml。Hoechst33258染色法、Hoechst-PI双染色法结果表明,使用G0705不同浓度0．0001mg/ml、0．001mg／ml、0．01mg／ml,细胞凋亡数量随浓度增高而明显增加,且呈剂量依赖性。活细胞Annexin-FITC／PI双染法检测表明,G0705浓度0．01mg／ml在给药24h后细胞早期凋亡率为7．79％,48h后细胞早期凋亡率35．85％,对照组则分别为2．44％和5．88％。与对照组相比G0705诱导MCF-7细胞的凋亡作用明显。Western blot法的结果表明,G0705不同浓度0．0001mg／ml、0．001mg／ml、0．01mg／ml,在给药48h后AKT、RAF-1、EGFR、HER-2等的蛋白水平均有明显降低,且呈剂量依赖性。结论实验结果显示G0705对乳腺癌MCF-7细胞有一定的增殖抑制作用。G0705可诱导MCF-7细胞凋亡,其诱导的细胞凋亡作用呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性。G0705?     

贝母素乙通过调控PI3K/Akt信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：探究贝母素乙（Peiminine）对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法：采用不同浓度贝母素乙或联合PI3K抑制剂LY294002干预MCF-7细胞,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测细胞中PI3K(p110α)、Akt、p-Akt(ser473)、Bad、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3以及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)等蛋白表达水平。结果：贝母素乙可呈时间-浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞出现凋亡形态改变,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,上调细胞中Bad、Bax、cleaved-Caspase-3及胞浆中Cyt C蛋白表达水平,下调PI3K(p110α)、p-Akt、Bcl-2和线粒体中Cyt C蛋白表达水平,而Akt蛋白表达水平无显著变化。然而,联合LY294002干预可增强贝母素乙对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论：贝母素乙可诱导乳腺癌MCF-7细胞凋...