中国北方汉族男性铁调素基因rs7251432多态性与HiHiLo训练前后血象指标变化的关联性研究

目的:探讨铁调素(HEPC)基因rs7251432多态性与HiHiLo训练前后血象指标变化的关联性。方法:65名中国北方汉族男性健康受试者在模拟海拔约为2500m～2800m高度(氧浓度14.8%～14.3%)进行30天HiHiLo训练(低氧暴露10h/d,低氧训练3次/周)。分别测定训练前,训练第4、7、16、23和30天的RBC、Hct和Hb。采用RCP-RFLP方法解析基因多态性,探讨HEPC基因rs7251432多态性与30天HiHiLo训练前后血象指标变化率的关联性。结果:3种基因型的分布频率分别为AA(0.11)、AG(0.29)和GG(0.60),符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,具有群体代表性。基因多态性与各项指标初始值不关联,且所有指标未见基因型与HiHiLo效果的交互作用。在HiHiLo过程中,RBC、Hct和Hb均出现不同程度变化趋势,AA基因型受试者RBC、Hct和Hb提高幅度明显高于AG和GG基因型(P<0.05)。结论:rs7251432多态性与HiHiLo训练前后血象指标的变化关联,AA基因型可以作为预测血象指标HiHiLo低氧训练效果的分子遗传学标记。     

中国北方汉族男性血管内皮生长因子受体2基因+4422(AC)n多态性与HiHiLo训练敏感性的关联研究

目的:探讨中国北方汉族男性血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)基因+4422(AC)n多态性与高住高练低训(HiHiLo)训练敏感性的关联。方法:选取71名中国北方平原地区汉族男子进行30天HiHiLo,方案为每日在低氧房(O2浓度为14.8%～14.3%,模拟海拔2800～3000米)居住10小时,每周进行3次75%VO2max强度的低氧训练(O2浓度为15.4%～14.8%,模拟海拔2500～2800米),运动时间为30 min/次,其余时间在常氧环境下训练。在HiHiLo前、后测定VO2 max和SpO2。其中SpO2的测定采用低氧环境下(15.4%O2,模拟海拔约2500米)的定量负荷运动实验,运动强度为HiHiLo前个体75%VO2max,运动时间15min。基因分型采用PCR结合荧光标记复合STR-genescan方法检测+4422(AC)n多态重复次数。结果:HiHiLo后,VO2 max以及定量负荷运动中SpO2均显著性提高,且(AC)11/(AC)11基因型者rVO2max的训练敏感性显著高于(AC)11/(AC)12基因型者。结论:VEGFR2基因+4422(AC)n多态性与HiHiLo后rVO2 max训练敏感性有关联,而与定量负荷下SpO2训练敏感性无关联。提示+4422(AC)n多态性可以作为预测低氧训练效果的分子遗传学标记,但还需加大样本量进一步验证。     

高住高练低训对优秀男子橄榄球运动员心功能的影响

目的:探讨高住高练低训对优秀男子橄榄球运动员心功能的影响。方法:将14名国家男子橄榄球队运动员随机分成HiHiLo组(n=8)和LoLo组(n=6),进行为期4周的实验。HiHiLo组每晚低氧居住10h(O2浓度:14.7%),每周除正常训练外,还有3次30min、O2浓度为15.4%、强度为72%个体VO2max的功率自行车运动,LoLo组训练方案与HiHiLo组基本相同,但无低氧居住和低氧运动,每周3次的30min功率自行车运动在常氧环境下进行,强度为80%个体VO2max;训练前后用多普勒超声诊断仪测定安静时、不同负荷及恢复时心脏结构和功能指标。结果:训练后两组心脏结构和安静状态下心功能无显著性变化;在负荷运动时,LoLo组心收缩指标SV、EF和心舒张指标E、E/A增大,HiHiLo组减小,且变化值在两组间有显著性差异(P<0.05);LoLo组运动后A、E/A恢复显著快于HiHiLo组(P<0.05)。结论:HiHiLo不利于运动员疲劳状态下心功能的恢复。     

血管内皮生长因子基因转染自体骨髓血管内皮祖细胞治疗下肢缺血的实验研究

目的:利用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF165)基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),并移植到下肢缺血的高脂血日本大耳兔体内,观测其促进血管新生、改善肢体缺血的效果。方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,并用双荧光染色法及免疫组化等方法进行鉴定。②脂质体介导携带EGFP标记的VEGF165质粒转染EPCs,用激光共聚焦显微镜检测VEGF蛋白的表达,用流式细胞仪检测转染率。③制作兔单侧下肢缺血模型,并将其随机分为A、B、C 3组,分别移植EPCs、VEGF165基因转染后的EPCs及EGM-2培养基,多种方法检测移植效果。结果:①诱导出的梭形细胞,经FITC-UEA-I和DiI-acLDL荧光双染证实为正在分化的EPCs,同时经免疫组化法证实其Flk-1和Ⅷ因子的表达。②激光共聚焦显微镜下见绿色荧光蛋白表达,证实VEGF165转染成功,经流式细胞仪检测得到转染率约22.5%。③DSA及免疫组化检查显示VEGF165基因转染后的EPCs移植后改善肢体缺血的效果优于其他2组。结论:VEGF基因转染EPCs后能改进EPCs质量,移植后促血管新生能力增强,其效果优于未转染组。     

高住高练低训对优秀女子中长跑运动员心功能的影响

目的:探讨高住高练低训对优秀女子中长跑运动员心功能的影响。方法:7名国家女子中长跑运动员,进行为期4周的高住高练低训(HiHiLo):在每日完成正常平原训练计划的基础上,每周进行三次低氧训练,训练方式为蹬功率自行车,强度为个体80%VO2max,时间为40分钟,氧浓度为14.7%左右(相当于海拔2800米高度)。此外,每晚在低氧房居住10小时,房内氧含量为14.7%(相当于海拨2800米高度),实验期为4周。采用负荷彩色超声多普勒监测高住高练低训前后心功能的变化,并且监测高住高练低训前后最大摄氧量、血压和体重的变化。结果显示,高住高练低训后的左室重量、左室重量指数、室间隔舒张末期厚度,左室后壁收缩末期厚度在安静状态下较高住高练低训前显著增加(P<0.05),收缩压和舒张压较高住高练低训前明显升高(P<0.05),右心室前后径较高住高练低训前明显减小(P<0.05)。二尖瓣舒张期充盈时间(DFT)在安静及运动负荷状态下均较高住高练低训前显著增加(P<0.05)。高住高练低训前后空腹体重无明显差异,高住高练低训后血压较训练前明显升高(P<0.05)。高住高练低训后最大摄氧量相对值较训练前有所增加,但无显著性差异。结果提示高住高练低训对心脏功能无不良影响,HiHiLo在某种程度上有利于心力储备功能的增强。     

常压模拟高住低练对大鼠心肌血管内皮生长因子基因表达的影响

目的 :探讨常压下不同低氧 ( 1 4 5 %、1 2 6%氧含量 )模拟高住低练对心肌血管内皮生长因子mRNA表达的影响 ,为运动与低氧适应提供理论依据。方法 :用RT -PCR技术检测大鼠心肌VEGFmRNA水平。结果 :常压下不同低氧模拟高住低练对大鼠心肌VEGFmRNA表达作用结果不同 ,常压下 1 4 5 %氧含量 (相当于海拔 3 0 0 0m)模拟高住低练能稳定VEGF的上调 ,而在常压下1 2 6%氧含量 (相当于海拔 40 0 0m)模拟高住低练时VEGFmRNA基因表达量却减少。结论 :只有选择在适宜的氧含量 (海拔高度 )进行高住和安排好运动训练持续时间 (低练 )才能有效地提高大鼠心肌VEGFmRNA的表达水平     

血管内皮生长因子（VEGF）与胰腺癌的研究现状

外分泌胰腺癌侵袭性强,很早即有局部淋巴结转移,确诊时仅有10％～15％的病人可行手术切除,由于局部浸润,早期淋巴转移和血性转移,其确诊后1年生存率12％,5年生存率小于4％,手术以后的5年生存率也在12％-20％之间,是消化系统肿瘤中预后最差的一种。     

中国北方汉族男子CKB基因单核苷酸多态性与耐力训练效果关联研究

目的:探讨中国北方平原地区汉族男子脑型肌酸激酶(CKB)基因多态性与耐力训练效果的关联性。方法:102名无训练史的健康男子进行18周有氧耐力训练,测试训练前后的最大摄氧量、跑节省化(RE)各指标。用PCR-RFLP法分析CKB基因启动子上rs3759582和rs3759584两位点的单核苷酸多态性。结果:二个多态位点均符合H-W平衡,不存在强的连锁关系;训练后rs3759582位点AA基因型最大摄氧量变化率、跑节省化变化率与AC基因型组间均无显著性差异(P>0.05);训练后rs3759584位点TT基因型△RE/VO2、△RE/rVO2、△RE/HR和△RE/VE显著低于CT和CC基因型(P<0.05),但是CC基因型频率仅为3%。结论:CKB基因的rs3759582多态性不是预测个体耐力训练敏感性的基因标记;rs3759584与个体的耐力训练敏感性相关,但需加大样本进一步确认。     

应用大鼠海绵移植模型评价血管内皮生长因子基因的成血管作用

为建立一种重要性好，能客观，连续地表明血客内皮生长因子（VEGF）基因的体内促血管生成作用的评价体系，将聚乙烯醇海绵植入大鼠皮下，构建大鼠海绵移植模型。术后5天，以VEGF表达质粒pCMV4-VEGF165与空载体pCMV4分别注射到植入的海绵内，观察转基因后7天，11天的血管生成及组织生长情况，以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）检测VEGF基因在海绵组织，血清及肝组织中的表达情况，对海绵病理切片行苏木精－伊红（HE）染色及血管内皮细胞特异性Ⅷ因子免疫组化，应用计算机图像分析系统分析海绵内组织生长情况，以Stata软件对数据进行分析，结果显示，VEGF基因的表达局限于注射部位并明显促进海绵内组织生长，无远端效应，本研究应用大鼠海绵移植模型成功地观察到血管内皮生长因子基因的成血管作用，为VEGF局部转基因治疗缺血性疾病提供了理论基础。     

纳米粒子介导血管内皮生长因子基因转染的实验研究

目的 观察纳米粒子携带血管内皮生长因子（VEGFl65）基因转染的可行性。方法 应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PL-GA）和聚乙烯醇（PVA）包载VEGFl65基因质粒,制备纳米级粒子混合物,检测其载药量、体外释放情况及粒径;培养心肌细胞,应用RT-PCR及ELISA方法观察纳米级粒子混合物为真核细胞传递基因的可行性;将纳米粒子悬浮液注射至活体家兔心肌组织内,96h后电镜观察其向心肌组织内传递基因的可行性。结果 制备的纳米粒子载药量为1．87％,粒径为25～300nm;RT-PCR和ELISA结果提示纳米粒子可将目的基因转移至心肌细胞中;体内实验显示心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子。结论 纳米粒子可作为向心肌组织转运VEGF基因的载体。     

GLUT1基因SNP/G22999T多态位点作为预测HiHiLo对左心室结构和功能影响效果的分子标记的研究

目的:探讨葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1)基因第2内含子上G22999T单核苷酸多态性(SNP)与HiHiLo(living high-exercise high-training low)对递增负荷运动中左心室结构和动态心功能的影响的关联关系。方法:采用关联分析(Association-Study)研究方法,聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,选取72名健康受试者,在模拟海拔2500米高度进行4周低氧训练(低氧暴露10h/d,3次75%VO2max低氧训练/周,共4周)。实验前后,运用二维及Doppler超声心动图技术,分别于HiHiLo前后测量72名受试者在递增负荷全过程中的心脏结构指标、收缩功能指标及舒张功能指标。结果:(1)GLUT1基因SNP/G22999T经扩增、酶切后得到GG、GT和TT三种基因型,符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,具有群体代表性。2)GLUT1基因SNP/G22999T多态位点T等位基因携带者短轴缩短率(SF)减小量、递增负荷实验100W(负荷下ESV减小量和50W、100W负荷下的EDT增加量均明显高于未携带T等位基因者。结论:SNP/G22999T多态位点T等位基因携带者较非携带者对HiHiLo训练更敏感,但将该多态位点作为筛选HiHiLo对左心室结构和功能影响效果的分子标记还需加大样本进一步研究。     

中国北方汉族男子fms样酪氨酸激酶基因多态性与高住高练低训敏感性的关联性研究

目的:探讨fms样酪氨酸激酶(Flt-1)基因多态性与低氧训练敏感性的关联性。方法:选取70名中国北方平原地区汉族男子进行4周高住高练低训(HiHiLo),方案为每日在低氧环境(O2浓度为14.5%～14.8%,大约相当于海拔3000米)中休息10h,每周进行3次75%VO2max低氧训练(O2浓度为15.4%,大约相当于海拔2500米),其余时间在常氧下训练。测试其HiHiLo前后的VO2max及训练期间的血象指标。用PCR-RFLP法分析Flt-1基因SNP/A193019G多态性。结果:(1)4周HiHiLo后,AA基因型VO2max增加幅度高于AG基因型57.54%,但无显著性差异。(2)在HiHiLo期间(除第23天外),AA基因型Hb的变化幅度始终高于AG基因型,但无显著性差异。结果提示,与AG基因型者相比,AA基因型者可能有对低氧训练更敏感的趋势。     

中国北方汉族男子FECH基因IVS3-48T/C多态与有氧运动能力表型指标的关联性研究

目的:探讨亚铁螯合酶(FECH)基因IVS3-48T/C多态在中国汉族男性中的分布特征及其与耐力训练前后有氧耐力表型指标的关联,为提高耐力训练效果提供分子标记。方法:选取102名中国北方汉族男性健康受试者,以95%～105%个体无氧阈强度进行5000米跑训练,每周3次,共18周。训练前后测定VO2max、通气阈(VT)、跑节省化(RE)等指标。使用PCR-RFLP和测序方法解析该基因多态性的分布特征,并对该多态与上述生理指标进行关联性分析。结果:(1)3种基因型在中国北方汉族男性中的分布频率依次为CC基因型8%、TC基因型45%、TT基因型为47%;(2)耐力训练前,TT基因型RE/HR、RE/rVO2初始值均显著性低于CC基因型(P<0.05);(3)耐力训练后,TT基因型受试者在RE时的通气量(△RE/VE)的下降幅度显著高于CT基因型(P<0.05)。结论:FECH基因IVS3-48T/C多态性中,TT基因型具有较高的有氧运动能力起始水平,还有较高的训练敏感性,可作为预测有氧耐力训练敏感性的分子标记。     

中国北方汉族男性雄激素受体基因(CAG)n多态与低氧训练后心功能变化的关联性

目的:探讨雄激素受体(AR)基因外显子1中(CAG)n多态与中国北方汉族男性心功能对低氧训练应答的关联性。方法:58名中国北方汉族健康青年男性进行为期30天的HiHiLo(常压低氧)训练,晚上居住房间的氧浓度为14.8～14.3%(模拟海拔约2800～3000米);每周进行3次、每次30分钟的低氧训练,训练强度为常氧75%VO2max强度,训练环境氧浓度15.4%～14.8%(模拟海拔约2500～2800米);每周进行5次、每次90分钟常氧环境下的专项训练。分别于低氧训练前和低氧训练后使用超声心动仪测试安静时,50W、100W、150W递增负荷运动,以及运动后恢复期的心功能。使用GeneScan和测序方法分析AR(CAG)n多态性。结果:(1)短链重复组(≤21和≤22)身高和低氧训练前体重基础值分别显著低于长链组(>21和>22);(2)≤22次重复组低氧训练前安静时、三种负荷和恢复时的每搏输出量基础值均显著低于>22组;(3)与低氧训练前相比,低氧训练后各基因型组安静、运动和恢复时的心率均显著下降,但是仅两个短链组每分输出量和心指数呈现显著性降低;(4)除≤21组50W和≤22组150W外,低氧训练后短链重复组安静和运动时ΔCI下降幅度均显著大于长链组。结论:AR基因(CAG)n多态与中国北方汉族男性心功能对模拟常压低氧环境下HiHiLo训练的应答可能存在关联性。     

中国北方汉族男性雄激素受体基因(CAG)n多态分布及其与低氧训练效果的关联性研究

目的:探讨雄激素受体(AR)基因外显子1中(CAG)n多态在中国北方汉族男性中的分布特征及其与低氧训练后VO2max变化的关联性。方法:65名中国北方汉族健康青年男性进行为期30天HiHiLo(常压低氧)训练,晚上居住房间氧浓度为14.3~14.8%(模拟海拔2800~3000米),每周进行3次75%常氧VO2max的低氧训练,训练环境氧浓度约15.4%(模拟海拔约2500米)。实验前后测试体重和VO2max等指标,采用GeneScan和测序方法分析AR(CAG)n多态的等位基因(基因型)。结果:(1)共观察到(CAG)12、(CAG)16-28、(CAG)30共15种重复次数的等位基因(基因型),其中22次重复等位基因分布频率最高;(2)当分别以21和22次重复为分割点划分基因型时,短链组体重基础值均显著低于长链组;(3)当分别以21和22次重复为分割点划分基因型时,低氧训练后短链基因型携带者ΔVO2max和ΔrVO2max均显著高于长链组(P<0.01)。结论:中国北方汉族男性AR基因(CAG)n多态与HiHiLo(常压低氧)训练效果之间存在关联,重复次数较少基因型携带者的低氧训练敏感性较好。     

高住高练低训对男子大学生运动员安静状态下左心室功能的影响

目的:探讨高住高练低训(HiHiLo)对运动员安静状态下左心室功能的影响。方法:大学生运动员在O2浓度相当于海拔2800m~3000m的常压低氧舱房每天居住10小时,在O2浓度相当于海拔2500m~2600m的室内每周训练3次,期间维持常氧训练,实验为期4周;采用超声心动图技术,于HiHiLo前后分别测量48名受试者心脏在安静时的形态结构学指标、收缩功能指标及舒张功能指标。结果:与HiHiLo前相比,4周后受试者左心室形态结构学指标中的LVIDd(左室舒张末期内径)、LVM(左室心肌质量)和LVMI(左室心肌质量指数)分别增加了0.93%(P=0.007)、2.87%(P=0.009)和3.59%(P=0.002);泵功能及舒张功能方面,SV(每搏量)、SI(每搏指数)和EDV(舒张末期容积)分别增加了1.99%(P=0.001)、2.71%(P=0.000)和0.97%(P=0.032),且DSV(每搏量变化量)与DEDV(舒张末期容积变化量)之间存在相关关系;DP(二项乘积)下降了9.35%(P=0.000)。结论:4周HiHiLo后受试者的左心室除产生了生理性肥厚外,其泵功能也显著改善,主要体现在舒张功能明显增强,而且心肌耗能趋向节约化。     

中国北方地区汉族男性PPARGC1基因多态性与耐力训练效果的关联性研究

目的:探讨中国北方平原地区汉族男子过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(PPARGC1)基因多态性分布特点以及与耐力训练效果的关联性。方法:102名无训练史的健康男子进行18周有氧耐力训练,测试训练前后的最大摄氧量、跑节省化。用PCR-RFLP法分析PPARGC1基因的G482S、A2962G和T394T多态性。结果:(1)3个多态位点分布频率均符合H-W平衡,且有显著的种族差异。(2)A2962G多态性与ΔVO2max(ml/min/wt)可能关联,GG基因型群体显著性高于AG和AA,但GG基因型频率仅为3%;未发现其他单点多态性和单体型与训练敏感性有较强的关联。结论:PPARGC1基因的G482S和T394T多态性不是预测个体耐力训练敏感性的基因标记;对于A2962G,则有必要加大样本进一步确认。