考马斯亮兰G—250染料测定蛋白质方法的改进

考马斯亮兰G-250(简称G-250)酸性溶液呈红棕色,与蛋白质结合时变为兰色,A_(max)从465nm移至595nm。在一定条件下,蛋白质浓度与A_(595nm)成正比,据此作蛋白质定量。本法有快速、简便、灵敏和抗多种化学试剂干扰等优点,已得到广泛使用。但此法对不同的蛋白质定量有时差异较大,并时有不稳定的染料蛋白复合物沉出,影响测定准确度~4。作行用正交试验法选出了试剂配制的最佳条件,对经典法作了改进。     

考马斯亮兰G-250法测定胃液蛋白质含量及其临床意义

目的：探讨考马斯亮兰Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量的方法和意义。方法：采用改进的Ｂｒａｄｆｏｒｄ法对２６例正常人、８例胃癌、２４例溃疡及慢性胃炎、４例肠上皮化生以及４例萎缩性胃炎患者胃液进行蛋白质含量测定。结果：Ｇ２５０与胃液蛋白结合后的最大吸收波长为５９５ｎｍ，反应体系中加入２０μｌ１０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ后明显提高光吸收值（Ｐ＜０．０５），线性范围在０～５００μｇ／ｍｌ间，比文献报道的高，胃液蛋白质与Ｇ２５０结合后３０ｍｉｎ内保持稳定，本法重复性好，回收率达９３．７％。结果还提示：胃癌组的胃液蛋白质含量明显高于正常对照组和其它胃疾病组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。结论：用Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量是一种可靠、简便、快速、灵敏的方法，结果具有一定的临床意义。     

改良的考马斯亮兰G—250染色法简便快速测定微量蛋白浓度

应用自制的考马斯亮兰Ｇ－２５０染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合，通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在１００￣１０００ｍｇ／Ｌ范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Ｆｏｌｉｎ－酚法蛋白测定法。实验结果显示，改良的考马斯亮兰Ｇ－２５０染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法。     

改良的考马斯亮兰G-250染色法简便快速测定微量蛋白浓度

应用自制的考马斯亮兰 G- 2 50染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合 ,通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在 1 0 0～ 1 0 0 0 mg/ L范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Folin-酚法蛋白测定法。实验结果显示 ,改良的考马斯亮兰 G- 2 50染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法     

考马斯亮兰法测定壳聚糖中蛋白的含量

目的:运用考马斯亮兰G250显色剂测定壳聚糖中蛋白含量。方法:蛋白质分子均具有酰胺基团,考马斯亮兰G250染料上的阴离子与蛋白质上的酰胺结合,使溶液变为蓝色,于595nm处测定吸光度可计算出样品中蛋白质的含量。结果:考马斯亮兰G250分光光度法测定壳聚糖样品中蛋白质含量是可行的,相对标准偏差为3.6%～4.9%,回收率为93.2%～108.7%。结论:该法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点。     

双波长法快速测定蛋白质含量

目的　为了建立一种快速而灵敏的蛋白质检测方法。方法　在考马斯亮兰法测定蛋白质含量时,通过采用５９０ｎｍ 和４５０ｎｍ 双波长代替单波长检测,并以酶标检测仪取代紫外－ 可见分光光度计作为检测仪。结果　此种改进不但提高了考马斯亮兰法检测蛋白质的灵敏度（０ ．１２７μｇ／ｍｌ） 和检测范围（０ ．１２７ ～３１ ．２５μｇ／ｍｌ）,而且使大量标本的检测可在一次检测过程中完成。标准直线相关系数ｒ２ ＝ ０ ．９９６５,表明在检测限内Ａ５９５／Ａ４５０ 和蛋白质浓度Ｃ呈良好线形关系。结论　双波长法可作为一种快速、灵敏的蛋白质检测方法。     

疟原虫纯化新方法的研究

目的：拟应用去白细胞输血器,建立一种快速简便纯化疟原虫的新方法,以去除宿主白细胞DNA干扰。方法：建立Pb ANKA株鼠疟模型;39只小鼠分为A组（新鲜虫血组,n=18）、B组（冻存虫血组,-80℃保存,n=16）及C组（正常对照组,n=5）;应用去白细胞输血器对血样进行过滤纯化,观察比较过滤速度及血样处理（新鲜、冻存）对去除白细胞效果的影响;血细胞计数板和血涂片吉姆萨染色法计数各样本过滤前后白细胞、红细胞、原虫率并观察疟原虫形态和疟原虫密度。滤过后的血液提取DNA,PCR验证白细胞滤过效果。结果：经血细胞计数板计数,3组白细胞平均去除率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;C组红细胞的回收率高于A组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;B组则仅见原虫。白细胞过滤后疟原虫形态及密度无明显改变。PCR鉴定PbGAPDH结果 A、B组均为阳性,而小鼠GAPDH均为阴性。结论：建立了白细胞输血器一步法纯化疟原虫的新方法。该方法简便、快速、廉价,是进行疟原虫分子生物学、免疫学等方面的研究不可或缺的实用技术。     

丽春红2R-亮绿染色法显示大鼠皮质脊髓束的实验研究

目的:探索显示和区分皮质脊髓束在大鼠脑干和脊髓内定位的染色方法。方法:通过丽春红2R-亮绿双重染色法对正常SD大鼠延髓、脊髓(颈5、胸10、腰3、骶2节段)组织切片进行染色。结果:丽春红2R-亮绿染色后,延髓和脊髓白质中神经纤维束轴索、髓鞘呈橙红色,灰质背景呈淡绿色,其中神经元呈绿色。在延髓锥体、锥体交叉中及在脊髓颈、胸段后索腹侧最深层可见皮质脊髓束染成橙红色,着色略深,与其背侧的薄束和腹侧的灰质界限分明、对比清晰。结论:丽春红2R-亮绿染色法可以清楚地显示成年大鼠皮质脊髓束在脑干和脊髓内的位置,为中枢神经损伤与修复研究提供一种简便、快速、可靠的神经纤维束定位染色方法。     

耐尔蓝A硫酸盐作探针的共振散射法测定痕量肝素钠

目的以耐尔蓝A硫酸盐为探针，建立一种共振散射（Rs）技术测定痕量肝素钠的新方法。方法在pH 3．29的Britton-Robinson缓冲溶液中，肝素钠与耐尔蓝A硫酸盐反应，导致体系的共振散射强度增强，最强共振散射峰为732nm。本文研究了耐尔蓝A硫酸盐-肝素钠体系的光谱特征、适宜的反应条件和共存物质的影响。结果肝素钠的浓度在0．16～4．52μg／mL范围内与732nm处的共振散射强度增强呈良好的线性关系，其回归方程为△IRS=3．22＋50．48c（R：0．9991），检出限（3σ）为3．33ng／mL，该方法已用于肝素钠注射液的分析，回收率在95．6％-104．2％之间。结论建立了一种简便、快速、灵敏的RS法测定痕量肝素钠的方法。     

利用绿色荧光蛋白筛选酵母突变株的新方法

目的建立快速简便筛选酵母突变株的方法。方法利用同源重组技术,通过转座子上的GFP基因,从酵母基因组文库中,检测发生突变的菌株,从而筛选出酵母突变株。结果应用荧光显微镜观察SC-ura 选择平板筛选出的酵母,有绿色荧光发出的即为阳性菌落。结论利用同源重组技术,初步筛选出了所需的酵母突变株。     

A new method for internal cardioversion in patients with persistent atrial fibrillation

Ａｔｒｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｔｉｏｎ (ＡＦ) ,ａｃｏｍｍｏｎａｒｒｈｙｔｈｍｉａｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ,ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃｉｍｐａｉｒｍｅｎｔｏｆｃａｒｄｉａｃｆｕｎｃｔｉｏｎ ,ｉｎｃｒｅａｓｅｄｒｉｓｋｏｆｓｅｒｉｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｃｅｖｅｎｔｓ,1　ａｎｄ 1 5ｔｏ 1 8ｔｉｍｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ 2Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｏｆｓｉｎｕｓｒｈｙｔｈｍｉｓｔｈｅｄｅｓｉｒａｂｌｅｅｎｄｐｏｉｎｔｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉ…     

A new method for internal cardioversion in patients with persistent atrial fibrillation

Atrial fibrillation (AF), a common arrhythmia in clinical practice, is associated with hemodynamic impairment of cardiac function, increased risk of serious thromboembolic events,1 and 1.5 to 1.8 times increased mortality.2 Restoration of sinus rhythm is the desirable end point in patients with AF. Transthoracic electrical cardioversion is currently a safe and effective method to restore sinus rhythm, yet its efficacy is limited, especially in cases with AF duration more than 36 months and left atrial size more than 60 mm.3-5 Studies in animals and humans have shown that internal cardioversion has a higher success rate compared to that of transthoracic cardioversion.6-8 We present two special cases with atrial fibrillation of long duration or refractory to transthoracic cardioversion that were successfully converted by a newly developed low energy internal cardioversion technique.     

静态调强放射治疗新方法的研究

目的 通过静态调强放射新方法的研究，使得各级医院能利用现有普通放疗设备，通过增加精确定位设备和计算机放射治疗计划系统，开展调强放射治疗。方法 在适形放射治疗技术的基础上，提出的一种“切片”的方法，把难以实现的三维立体问题转换为二维平面问题，从而能方便地制作出三维物理补偿器。结果 实验表明运用该方法制作的三维物理补偿器，不仅能实现靶区高剂量的形状在三维方向上与肿瘤的形状一致，而且可对照射野内剂量分布按要求的方式调整。结论 该方法简单可行，性能价格比较高，在我国各级中小医院具有良好的临床应用前景和推广意义。