HPLC指纹图谱研究五倍子发酵百药煎化学成分变化

目的建立百药煎HPLC指纹图谱,比较五倍子发酵百药煎化学成分变化,为百药煎的质量评价提供方法。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,Waters Symmmetry ShieldTM RP18(250 mm×4.6 mm,5μm)C18色谱柱,乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.8 m L/min,检测波长280 nm,"Chromap Chromafinger 2005 beta 0.1"色谱软件生成百药煎标准指纹图谱,对10批不同批次的百药煎化学成分指纹图谱进行相似度计算,并且通过对照品比对及高效液相色谱与质谱联用技术(HPLC-MS)对主要共有峰进行指认。结果 10批百药煎指纹图谱中有10个共有峰,HPLC指纹图谱各峰分离度良好,各批次间共有峰的相对保留时间RSD均1.0%,样品间相似度均0.9,共指认出7个共有峰,即没食子酸(1号峰)、表没食子儿茶素(2号峰)、没食子酸甲酯(3号峰)、没食子酸乙酯(5号峰)、表没食子儿茶素没食子酸酯(6号峰)、2,4,6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖(7号峰)、2,4,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖(9号峰);五倍子发酵百药煎后没食子酸、2,4,6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖的量升高,没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、表没食子儿茶素没食子酸酯的量明显降低;表没食子儿茶素、2,4,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为新生成成分。结论百药煎炮制作用机制与发酵过程使五倍子化学成分发生变化和产生新的化学成分有关。指纹图谱法可用于监控百药煎发酵炮制的质量控制。     

黄连木叶化学成分研究

从漆树科植物黄连木叶中分离出6个化合物,经紫外、红外、核磁共振氢谱和质谱分析,鉴定它们的结构分别为没食子酸、间双没食子酸、槲皮素、6-O-没食子酰熊果甙、槲皮甙和槲皮素-3-O-(6″-没食子酰)-β-D-葡萄糖甙。     

不同醋制方法对白芍6种活性成分影响的定量质控

目的 建立HPLC法探讨不同醋制方法对白芍6种活性成分的影响。方法 采用Waters Symmetry C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相：乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;检测波长：230 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：35℃。结果 白芍中的没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷分别在0.77～99.14、0.38～97.52、1.62～208.6、9.66～1236.19、1.17～298.86、0.40～51.52μg/mL浓度范围内线性关系良好。白芍中的没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷的平均加样回收率为99.64%～106.16%,相对标准偏差为0.77%～2.59%。白芍经醋炙后,6种成分的含量均有显著性提升;而白芍经醋浸后,除芍药苷含量无显著性差异之外,没食子酸、芍药内酯苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖的含量均有显著性降低,氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷的含量均有显著性提升。醋炙白芍与醋浸白芍...     

高效液相色谱-电喷雾-质谱法分析山茱萸中的化学成分

目的 建立山茱萸中化学成分的高效液相色谱-电喷雾-质谱分析方法.方法 采用Zorbax SB-C18色谱柱,乙腈-水二元梯度洗脱;Agilent电喷雾离子阱多级质谱仪;负离子检出模式.结果 在负离子检出模式下,山茱萸的总离子流色谱图特征性很强,通过质谱中的主要碎片对莫罗忍冬苷、山茱萸裂苷、没食子酸、1,2,3-三-O-没食子酰葡萄糖和1,2,3,6-四-O-没食子酰葡萄糖5种主要成分进行了结构解析.结论 在谱负离子检出模式下,多数化学成分响应较好,为山茱萸药材质量控制提供了一种新的方法.     

金铁锁体外抗氧化活性研究

目的:研究金铁锁体外抗氧化活性.方法:采用清除采用清除二苯代苦味酰基( DPPH)自由基、清除[2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,对金铁锁体外抗氧化活性进行评价,并阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)比较.结果:金铁锁3个提取物体外抗氧化活性均弱于阳性对照PG,BHA,BHA.在3个提取物中,金铁锁乙酸乙酯提取物清除ABTS自由基(IC50=40.54mg·L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC=(696.9±2.42) μmol·g-1]较强;正丁醇清除ABTS自由基(IC50=83.38 mg· L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC =(166.1±1.06) μmol· g-1]次之,石油醚提取物最弱.结论:金铁锁乙酸乙酯部位体外抗氧化活性较强.     

以地榆根组织培养生产鞣质

自然干燥的地榆Sanguisorba officinalisL.根药用作止血、抗炎和收敛剂。目前已对该植物内的鞣质和皂甙做了深入的研究,但未报道这类化合物的体外生产。本文作者将地榆根置于含有1mg/L(IAA)的MS培养基中培养,从中分离出11种酚类化合物,包括没食子酸(1);(+)-儿茶素(2);(+)-没食子儿茶素(3);前矢车菊甙元B-3(procyanidin B-3)(4);β-葡萄糖没食子鞣甙(β-glucogallin)(5);1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖(6);1,2,3,4,6-五-o-没食子酸-β-O-葡萄糖     

三白草体外抗氧化活性

目的:研究三白草体外抗氧化活性.方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基和[2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基测定法,对三白草提取物抗氧化活性进行评价.结果:正丁醇提取物清除DPPH自由基(IC50=16.94)的能力比BHT清除能力(IC50=18.71 mg·L-1)强,弱于阳性对照PG和BHA清除DPPH自由基的能力(IC50分别为0.89,3.2mg· L-1);清除ABTS自由基的能力(IC50=12.90 mg·L-1)弱于阳性对照PG和BHA清除ABTS自由基的能力(IC50分别为0.81,1.95 mg·L-1),比阳性对照BHT( IC50为7.72mg· L-1)清除ABTS自由基的能力略弱;石油醚提取物和乙酸乙酯提取物清除DPPH和ABTS自由基的能力均比阳性对照PG,BHT,BHA清除DPPH和ABTS自由基的能力弱.结论:三白草正丁醇提取物有抗氧化活性.     

桑叶抗氧化活性成分的研究

目的：研究桑叶的抗氧化活性成分。方法：以桑叶为原料,经不同方法提取分离桑叶中的有效成分,利用核磁共振等波谱学方法进行结构鉴定,采用DPPH法和ABTS法测定其抗氧化活性。结果：从桑叶中分离鉴定了四个黄酮类化合物,分别为kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside（Ⅰ）、quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside（Ⅱ）、quer-citrin（Ⅲ）、morin-3-O-β-Dglucopyranoside（Ⅳ）;化合物Ⅲ和Ⅳ对DPPH自由基和ABTS自由基具有较好的清除能力,其半数清除率浓度（IC50）分别为109.3、20.1、9.2、3.6μg/ml,对DPPH自由基和ABTS自由基的清除率呈量效关系。结论：化合物Ⅲ和Ⅳ均有较好的抗氧化活性,其中化合物Ⅳ清除ABTS自由基的能力最强。     

白芍化学成分研究

目的研究白芍Paeonialactiflora的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱等分离手段,并通过波谱方法对结构进行解析和鉴定。结果从白芍中分离并鉴定了15个化合物:芍药苷(1)、白芍苷(2)、4-O-没食子酰白芍苷(3)、没食子酰芍药苷(4)、6′-O-没食子酰白芍苷(5)、6-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(6)、邻苯三酚(7)、没食子酸(8)、没食子酸甲酯(9)、没食子酸乙酯(10)、儿茶素(11)、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(12)、二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(13)、蔗糖(14)、β-谷甾醇(15)。结论化合物6为首次从芍药属植物中分离得到,化合物7为首次从该植物中分离得到。     

绒毛诃子果实多酚类化学成分及抗氧化活性研究

目的：研究绒毛诃子果实中多酚类化学成分及其抗氧化活性。方法：采用ToyopearlHW-40和MCIgelCHP-20P柱分离并结合制备型高效液相色谱,对诃子70％丙酮提取部分进行分离纯化,利用MS、1H—NMR和13C·NMR进行结构鉴定;以紫外分光光度法测定诃子多酚类对DPPH’和ABTS。的清除率。结果：从诃子果实中分离鉴定了9个化合物,分别鉴定为：诃黎勒酸（1）、诃子酸（2）、1,3,4,6-四-O-没食子酰-／3-D-葡萄糖苷（3）、1,3,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷（4）、没食子酸（5）、诃子素（6）、1,2,3,4,6一五-O-没食子酰巾-D-葡萄糖苷（7）、新诃黎勒鞣花酸甲酯（8）、新诃黎勒鞣花酸酯（9）。其中4、8为首次从诃子中分离得到。抗氧化实验中,化合物4的TEAC值为（3．912±0．21）mmol·g-1,抗氧化活性最强,与其他单体化合物比较,差异具有统计学意义（P〈0．01）,化合物3、5和6的TEAC值与对照品维生素c接近,有较强的抗氧化活性,与对照组比较差异没有统计学意义,但是与其他化合物比较差异具有统计学意义（P〈0．01）,化合物8的抗氧化活性最低。     

钩锥化学成分研究(Ⅰ)

目的:研究钩锥Castanopsis tibetana Hance新鲜叶的化学成分。方法:采用Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P、Toyopearl HW-40F和Toyoperal Butyl-650C等柱色谱对钩锥新鲜叶的乙醇提取物进行化学成分研究。结果:从中共分离纯化得到13个化合物,经NMR、质谱等波谱学数据分析及与文献数据对比,分别鉴定为:没食子酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、间二聚没食子酰甲酯和对二聚没食子酰甲酯的混合物(4)、间二聚没食子酰乙酯和对二聚没食子酰乙酯的混合物(5)、5-O-没食子酰基-奎宁酸甲酯(6)、5-O-没食子酰基-莽草酸(7)、3-O-没食子酰基-莽草酸(8)、3,4-di-O-没食子酰基-莽草酸(9)、3,5-di-O-没食子酰基-莽草酸(10)、1,6-di-O-galloyl-β-D-glucose(11)、1,2,6-tri-O-galloyl-β-D-glucose(12)、5-O-galloylhamamelose(13)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

狗脊中化学成分及其对DPPH清除作用研究

目的:研究狗脊的化学成分,探讨其对二苯代苦味基肼自由基(DPPH)的清除作用。方法:采用硅胶色谱、凝胶色谱、高效液相色谱等技术对狗脊70%乙醇提取物进行分离纯化,通过波谱方法鉴定其结构,并对化合物进行清除DPPH活性试验。结果:从狗脊70%乙醇提取物中分离得到10个成分,分别为1-O-咖啡酰-β-D-葡萄糖(1),6-O-咖啡酰-D-葡萄糖(2),3-O-咖啡酰-D-葡萄糖(3),3-hydroxymethyl-2(5H)-furanone(4),β-miroside(5),cibotiumbaroside A(6),原儿茶酸(7),甘露糖(8),corchoionoside C(9),曲酸(10)。对DPPH清除能力试验结果表明,3个化合物对DPPH自由基都有较强的清除能力。结论:化合物1～5均为从狗脊中首次分离得到。化合物1,3,6均具有较强的抗氧化活性,其中化合物1的清除效果与维生素C(Vit C)相当。     

沙棘叶中鞣质类成分及其抗炎和抗肥胖活性研究

目的研究沙棘Hippophae rhamnoides叶的化学成分及其抗炎和抗肥胖活性。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、MCI CHP20柱色谱和半制备液相等方法进行分离纯化,通过波谱分析鉴定化合物的结构。对分离得到的化合物进行体外抑制RAW264.7巨噬细胞一氧化氮生成的抗炎活性和抑制3T3-L1脂肪细胞三酰甘油蓄积的抗肥胖活性评价。结果从沙棘叶中分离得到18个鞣质类化合物,分别鉴定为1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(1)、1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(2)、1,4,6-三-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(3)、1,3,4,6-四-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(4)、1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(5)、1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(6)、1-O-没食子酰基-4,6-(S)-六羟基联苯甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(7)、1-O-没食子酰基-2,3-(S)-六羟基联苯甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(8)、1,3-二-O-没食子酰基-4,6-(S)-六羟基联苯甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(9)、1,6-二-O-没食子酰基-2,3-(S)-六羟基联苯甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(10)、木麻黄鞣亭(11)、1,2,3-三-O-没食子酰基-4,6-(S)-六羟基联苯二甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(12)、1,4,6-三-O-没食子酰基-2,3-(S)-六羟基联苯二甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖(13)、hippophaenin B(14)、pedunculagin(15)、木麻黄鞣宁(16)、鞣花酸(17)和松醇(18)。结论化合物2、3、5、6、8、10、12和13为首次从该属植物中分离得到,沙棘叶中的鞣质类化合物具有较强的抗炎活性和抗肥胖活性。     

泽漆的多酚类成分

目的：研究泽漆Euphorbia helioscopia的多酚类成分。方法：用Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,硅胶等柱色谱技术,结合制备液相和重结晶方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果：分离并鉴定了10个化合物,即没食子酸（1）,没食子酸甲酯（2）,连苯三酚（3）,（-）-莽草酸-4—O-没食子酸酯（4）,（-）-莽草酸-5-O-没食子酸酯（5）,1—O-没食子酰基-2,3-六羟基联苯二甲酰基-a—D-吡喃葡萄糖（6）,1,3,6-三-O-没食子酰基侈D-吡喃葡萄糖（7）,1,2,3,6-四-O-没食子酰基-声-D-吡喃葡萄糖（8）,间二苯酚（9）,没食子酸-4-D-（6＇-O-没食子酰基）β-D-吡喃葡萄糖（10）。结论：化合物3-10为首次从该植物中分离得到。     

疏花假地豆体外抗氧化活性研究

目的:对疏花假地豆体外抗氧化活性进行研究。方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、清除[2,2’-联氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,评价疏花假地豆体外抗氧化活性,并与阳性对照二丁基羟基甲苯(BHT)比较。结果:疏花假地豆体外抗氧化活性较好。其中乙酸乙酯提取部位清除DPPH自由基(IC50=35.66 mg.L-1)、ABTS自由基(IC50=8.49 mg.L-1)及还原Fe3+的能力(TEAC=756.20μmol.g-1)较好,但仍低于阳性对照BHT(IC50=3.69 mg.L-1,IC50=6.64 mg.L-1和TEAC=4 997.76μmol.g-1)。结论:疏花假地豆乙酸乙酯提取部位体外抗氧化活性相对于其他部位最好。     

酸模叶蓼抗氧化活性

目的:评价酸模叶蓼体外总抗氧化活性。方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、清除[2,2-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法。结果:将测定结果与6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(trolox)及阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)进行比较,发现乙酸乙酯和甲醇提取物清除DPPH自由基、清除ABTS自由基及还原Fe3+的能力均比BHT强,比PG和BHA弱。结论:酸模叶蓼具有良好的体外抗氧化活性。在3种提取物中,乙酸乙酯提取物抗氧化能力最强,甲醇提取物次之,石油醚提取物几乎没有抗氧化活性。     

藿香蓟挥发油抗氧化活性研究

目的:观察藿香蓟挥发油的体外抗氧化活性.方法:用95％乙醇将藿香蓟挥发油配制成不同质量浓度(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0 g·L-1)溶液,采用二苯代苦味酰自由基(DPPH·)法、2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS+·)法和铁氰化钾还原法测定不同浓度挥发油的抗氧化能力.结果:不同浓度的藿香蓟挥发油对ABTS+·,DPPH·的清除能力及对铁离子还原能力强弱顺序为:2.0 g·L-1＞1.6 g·L-1＞1.2 g·L-1＞0.8 g'L-1 ＞0.4 g·L-1,其中对ABTS+·的清除能力较强,最高可达64.63％,但对DPPH·清除能力较弱,仅为19.61％.结论:藿香蓟挥发油具有较强的ABTS+·清除能力和还原能力,但清除DPPH·能力较弱,同时其抗氧化能力均与其浓度有关,可作为天然抗氧化剂及功能性食品的开发资源.     

不同提取温度的五倍子主要化学成分HPLC含量测定

目的:采用高效液相色谱法测定并分析不同提取温度对五倍子中单宁酸、五没食子酰基葡萄糖、没食子酸含量的影响。方法:以醋酸-醋酸钠缓冲溶液(p H4.0)为提取溶剂(液料比1∶100),分别在65、75、85、95℃中水浴3.5h,HPLC法测定含量。结果:在85℃温度提取条件下,三者可测得最大含量。结论:本实验初步提示提取五倍子中单宁酸、五没食子酰基葡萄糖、没食子酸的最佳提取温度为85℃,可为五倍子的实验研究和工艺研究提供一定参考。     

生物活性结合UPLC-Q/TOF分析的芒果核仁中抗炎药效物质筛选研究

目的探究芒果Mangifera indica核仁的抗炎活性,并筛选出其中具有抗炎作用的药效物质。方法利用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人胚肾细胞293(HEK-293)炎症模型对芒果核仁提取物的抗炎作用进行评价,并采用UPLC-Q/TOF结合核因子-κB(NF-κB)萤光素酶报告基因检测系统进行谱效关系研究,筛选芒果核仁提取物中具有抗炎活性的药效物质。结果芒果核仁提取物能显著改善小鼠耳廓的肿胀情况并能显著抑制细胞中NF-κB的表达;经UPLC-Q/TOF谱效关系分析筛选出10个具有NF-κB抑制活性的化合物为芒果苷和没食子酸鞣质类化合物,后者包括:没食子酸、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-半乳糖苷、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷、1,2,3-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4-四没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、六没食子酰葡萄糖。结论芒果核仁提取物具有较好的抗炎作用,芒果苷和没食子酸系列衍生物为其提取物中主要的抗炎活性物质。     

HPLC法同时测定不同产地牡丹皮中13种化学成分的含量

目的建立同时测定不同产地牡丹皮中没食子酸、5-羟甲基糠醛、没食子酸甲酯、氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、1,2,3,6-O-四没食子酰葡萄糖、1,2,4,6-O-四没食子酰葡萄糖、苯甲酸、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、牡丹皮苷C、苯甲酰氧化芍药苷、丹皮酚13种化学成分的HPLC方法。方法采用50%甲醇回流提取,色谱条件采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长254nm,柱温30℃。结果所测13种化学成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好,r均大于0.999 5,有良好的精密度、稳定性、重复性和回收率。结论所建立的HPLC方法可用于同时测定牡丹皮中13种化学成分的含量,该方法高效、准确、重复性好,可用于牡丹皮药材的质量控制。