破壁方法对金葡球菌细胞结合青霉素酶活力的影响

采用酶法、超声波法、冻融法对金葡球菌破壁，ＯＤ５４ｎｍ值表明：酶法破壁效果最好，超声波法次之。而冻融法有利于金葡球菌细胞结合青霉素酶溶出，超声波法、酶法处理，细胞结合青霉素酶部分失活。０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００对破壁后细胞结合青霉素酶具有增溶作用。     

金葡球菌细胞结合青霉素酶的研究

对１９８６年从南京地区临床分离的金葡球菌中筛选出的１株耐药株的细胞结合青霉素酶进行了研究。不同生长条件对实验菌株细胞结合青霉素酶的产酶影响表明，在１％ＣＹ培养基中，含０．０４ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸钠，３７℃培养１８ｈ为有利产酶条件。应用冻融法破壁，细胞结合青霉素酶活力为处理前的２．１４倍。破壁后，细胞结合青霉素酶的溶解度与溶液的ｐＨ值和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００浓度有关，在ｐＨ７．５含０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中，细胞结合青霉素酶的溶解度为２０．７％。     

中药制剂中细胞破壁技术探讨

目的:探讨可用于植物细胞破壁的中药制剂新技术。方法:查阅相关文献,分析总结中药制剂中可用于细胞破壁新技术的特点。结果与结论:超微粉碎、超声波提取、微波萃取、酶法提取等方法是可用于植物细胞破壁的技术。细胞破壁后有利于中药有效成分的溶出速率和溶出率的提高。     

纸片法快速测定青霉素酶

临床分离的金黄色葡葡球菌大部分对青霉素耐药,经研究证明与该菌产生青霉素酶有关。根据青霉素酶可分解青霉素产生青霉酸,而青霉酸能与碘结合,以淀粉为指示剂,根据蓝色消退与否,得知青霉素酶的存在情况。笔者设计了纸片法快速测定青霉素酶试验,5分钟     

金黄色葡萄球菌细胞结合青霉素酶的研究

本文研究了临床分离的致病性金黄色葡萄球菌的总青霉素酶(酶1)、细胞外青霉素酶(酶2)、细胞结合青霉素酶(酶3)以及细胞结合的胞外酶(酶4)。后三者分别是细菌生     

大肠埃希菌周质抗体细胞释放工艺方法研究

本文应用细胞裂解液提取法、超声波细胞破碎法、细胞冻融法、bugbuster提取法和高压细胞破碎法,对比研究了从大肠埃希菌周质中提取可溶性抗体的相关参数,并通过SDS-PAGE电泳,BCA蛋白浓度测定和ELISA法检测了上述四种方法的有效性。结果表明,对于试验室小试规模的抗CEA抗体的细胞释放,超声法破碎,提取的目的抗体量最多,优于细胞裂解液提取法,冻融法和bugbuster法,最佳条件为：细胞缓冲液与湿菌体的比例为     

粉尘螨浸液制备方法探讨

本试验应用几种不同方法制备粉尘螨浸液,皮内试验法测定其生物活性,结果表明反复冻融法好于超声波粉碎法、冻融—负压法、磁力搅拌法。     

注射用头孢拉定与血尿

头孢拉定，又称先锋六号、头孢菌素Ⅵ、先锋霉素Ⅵ、头孢环已烯等，为第一代头孢菌素，对不产青霉素酶和产青霉素酶金葡菌、凝固酶阴性葡萄球菌、A组溶血性链球菌、肺炎链球菌和草绿色链球菌等革兰阳性球菌的部分菌株具良好抗菌作用。适用于敏感菌所致的急性咽炎、扁桃体炎、中耳炎、支气管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮肤软组织感染等。     

PCR快速鉴定actinobacteria三种模板制备方法的比较

目的 本研究旨在建立准确、简便、快速的放线细菌鉴定技术，为普通和极端环境放线细菌资源的调查和开发利用创造条件。方法 从放线细菌固体培养基上挑取少量菌体，用微波炉法快速制备基因组DNA作为PCR模板，与液体培养法得到的菌体以超声波法或冻融法制备的模板进行了PCR扩增效果的比较研究。结果P CR检测结果表明微波炉法制备的模板可进行有效的体外扩增，目的条带特异，而超声波法或冻融法并不对所有菌株有效，并有非特异扩增产物产生。结论 组合微波炉法快速制备放线细菌基因组DNA技术和23S rRNA特异插入序列PCR扩增技术建立了准确、简便、快速的actinobacteria鉴别体系。     

灵芝孢子粉破壁率的检验方法研究进展

目的综述近些年来对灵芝孢子粉破壁率检验的具体方法方面的研究进展。方法搜索并阅读大量相关文献,听取相关专家意见,进行分析并作出合理总结归纳。结果灵芝孢子粉破壁率的检测方法可分为血球计数法、水装片结合显微技术法、悬浮法结合物理技术、化学指纹法。结论灵芝孢子粉的药用价值潜力巨大,目前的破壁方法及破壁率检测形式多样,但仍具有发展的空间。     

泌尿系统感染患者尿液培养及药敏分析

目的：观察泌尿系统感染患者尿液中病原菌的种类及其耐药性，以指导临床合理用药。方法：收集了2005年5月-2006年4月我院174例泌尿系统感染且尿培养阳性患者。采集标本均为使用抗生素前的新鲜中段晨尿，培养48小时，对培养出的致病菌进行抗生素敏感测定。结果：革兰阴性杆菌感染120例，占68．97％，其中大肠埃希菌占革兰阴性杆菌的65．83％。革兰阳性球菌53例，占30．46％，其中粪肠球菌占革兰阳性球菌62．26％。真菌感染1例，占0．57％。致病菌对青霉素、氨苄青霉素及喹诺酮类药物耐药性高；对氨苄青霉素加耐青霉素酶、阿米卡星、三代头孢的敏感性较高，对亚胺培南及万古霉素的敏感性最高，达100％。结论：泌尿系统感染女性多于男性，主要病原菌为革兰阴性杆菌，其中大肠埃希菌居首位，应首选三代头孢及耐青霉素酶青霉素。     

丹参破壁饮片、常规饮片及传统粉末对小鼠肠道菌群的影响

目的研究丹参破壁饮片、丹参常规饮片及丹参传统粉末对小鼠肠道菌群的影响。方法 C57BL/6小鼠50只,随机分为5组,分别为空白组、常规饮片组、低剂量破壁饮片组、高剂量破壁饮片组及传统粉末组。连续灌胃给药14 d后,选择性分离培养粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌及肠杆菌,鉴定和计数;并提取回盲部粪便的总DNA,进行PCR-DGGE(PCR-梯度凝胶电泳)分析,以观察小鼠肠道菌群的变化。结果细菌培养结果显示低剂量破壁饮片组及常规饮片组双歧杆菌及乳酸杆菌数量增加、肠球菌和肠杆菌数量则减少,差异有显著性意义;高剂量破壁饮片组及传统粉末中4种菌均无显著性差异。PCRDGGE结果显示,低剂量破壁饮片组的物种丰度和多样性指标均高于其他各组。结论丹参破壁饮片、常规饮片及传统粉末对肠道菌群无不良影响,且低剂量长期服用丹参破壁饮片对肠道菌群具有调整作用。     

星点设计效应面法优化耐冻融茴三硫口服纳米乳剂的处方

目的借助星点设计效应面法优化耐冻融茴三硫口服纳米乳剂的最优处方。方法采用超声波细胞粉碎仪制备茴三硫口服纳米乳剂,依据星点设计效应面法,以平均粒径、变异系数及冻融稳定性常数为评价指标,考察处方中聚氧乙烯40氢化蓖麻油、大豆卵磷脂及中链甘油三酸酯的用量对制剂的影响,预测最优处方。结果最优处方制得的茴三硫口服纳米乳剂的平均粒径为(163.7±0.3)nm,变异系数为0.290±0.035,冻融稳定性常数为1.84±0.03,与预测值相比偏差较小。结论星点设计效应面法所建立的模型能较好地用于茴三硫口服纳米乳剂的处方优化。     

多核苷酸磷酸化酶(PNPase)的提取研究

用溶菌酶·超声波法处理大肠杆菌使其破壁。用聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化的PNP_(ase)定性,再根据PNP_(ase)活力测定及poly Ⅰ的聚合情况,对PNP_(ase)的质量进行综合评价。     

青霉素酶标IgG酶联免疫吸附测定初探

本文报道了应用青霉素酶作为标记酶，以戊二醛偶联法制备“青霉素酶一羊抗人ＩｇＧ”复合物，以聚苯乙烯板作为免疫吸附载体，采用夹心法，碘一淀粉显色系统，对ＩｇＧ进行了酶联免疫吸附测定初探。     

山茱萸微粉细胞破壁率的测定

目的建立山茱萸微粉细胞破壁率的检测方法。方法采用细胞计数法,以石细胞为评价指标,考察超细粉碎技术对山茱萸细胞破壁率的影响,测定山茱萸微粉的细胞破壁率。结果山茱萸细粉称样量与完整细胞计数的回归分析结果表明,两者显著相关。山茱萸经超细粉碎后细胞破壁率为92.75%。结论山茱萸粉末细胞计数方法简便,稳定,可靠。     

山茱萸微粉细胞破壁率的测定

目的 建立山茱萸微粉细胞破壁率的检测方法。方法 采用细胞计数法,以石细胞为评价指标,考察超细粉碎技术对山茱萸细胞破壁率的影响,测定山茱萸微粉的细胞破壁率。结果 山茱萸细粉称样量与完整细胞计数的回归分析结果表明,两者显著相关。山茱萸经超细粉碎后细胞破壁率为92.75%。结论 山茱萸粉末细胞计数方法简便,稳定,可靠。     

第九期《药品不良反应信息通报》相关内容头孢拉定与血尿

头孢拉定（别名先锋六号、头孢菌素Ⅵ、先锋霉素Ⅵ、头孢环已烯等）,为第一代头孢菌素,对不产青霉素酶和产青霉素酶金葡菌、凝固酶阴性葡萄球菌、A组溶血性链球菌、肺炎链球茵和草绿色链球菌等革兰阳性球菌的部分菌株具良好抗菌作用。适用于敏感茵所致的急性咽炎、扁桃体炎、中耳炎、支气管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮肤软组织感染等。     

酶法测定血清肌酸激酶试剂的研究

本文介绍了酶法测定血清肌酸激酶试剂的研制,以及临床测试的结果。着重就试剂盒中的己糖激酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶进行了制备及性质的研究。本文报道了一个较简便的方法,从肠膜状明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)中,通过超声波破壁、链霉素沉淀、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephadex A50柱层析等工艺,得到了葡萄糖-6-硫酸脱氢酶。另外,从新鲜面包酵母 (Saccharomyces Cererisi-ae中,通过甲苯冷冻破壁,硫酸铵分级沉淀和DEAE-纤维素柱层析等工艺得到了己糖激酶。并就这二个酶的性质进行了一些研究,为酶试剂盒的研制提供了条件。用本实验提取得到的酶,配制成CK测     

石花多糖脱蛋白工艺研究

［摘要］目的对地衣类石花多糖进行脱蛋白处理，筛选最佳方法。方法采用Sevag法、酶法、Sevag/酶法、三氯醋酸 正丁醇法、酶法结合三氯醋酸 正丁醇等5种方法对石花多糖进行脱蛋白处理。结果酶法结合三氯醋酸 正丁醇联合使用脱蛋白效果较其他4种方法好。结论酶法和三氯醋酸 正丁醇联合使用脱蛋白方法，当蛋白酶用量为底物浓度的1%，pH为7时，50 ℃水浴酶解3 h，再加入与多糖溶液同体积的三氯醋酸 正丁醇液（V/V＝1：10），振摇20 min，静置1.0 h，蛋白质去除率最高且多糖损失较少，是一种良好的脱蛋白方法。