从抗蛇毒药探寻内皮素拮抗剂的初步报告

内皮素(endothelin,ET)在许多心血管疾病中具有重要发病学意义,但目前尚无临床可用的有效拮抗剂。ET与某些蛇毒具有同源的结构及相似的生物学效应,因此我们在整体动物及离体血管条上,初步观察了几种抗蛇毒中草药对ET生物学效应的影响。本工作发现:季德胜蛇药水提剂对ET_1收缩的血管有短暂舒张作用;七叶一枝花和半边莲水提剂可部分拮抗ET_1致小鼠死亡作用,抑制ET_1的升压作用和缩血管效应;半边莲和白叶藤有效成份组成的复方三号对ET_1生物学效应无明显拮抗作用。结果提示:从抗蛇毒药中筛选ET拮剂是可行的,有可能为心血管疾病的治疗提供新的途径。     

牛磺酸对内皮素生物学效应的机理探讨

目的 :探讨牛磺酸对内皮素 (ET)生物学效应的作用及意义。方法 :在整体动物和离体组织观察ET作用和牛磺酸的拮抗作用。结果 :牛磺酸可拮抗ET引起的升压作用 ,抑制ET缩血管和促平滑肌增殖作用 ,减少缺氧刺激引起的ET释放。结论 :牛磺酸能有效拮抗ET生物学效应 ,并抑制其合成释放     

郑氏熏洗泡腾颗粒抗炎作用研究

目的考查郑氏熏洗泡腾颗粒的抗炎作用,为其临床应用提供实验依据。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、小鼠皮肤毛细血管通透性亢进及大鼠蛋清性足肿胀实验分别观察郑氏熏洗泡腾颗粒对二甲苯致小鼠耳肿胀度、冰醋酸注射后伊文思蓝渗出OD值和蛋清性足肿胀度的影响来评价其抗炎作用。结果与模型对照组比较,郑氏熏洗泡腾颗粒高、中剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀度有显著的抑制作用(P0.05);对冰醋酸所致小鼠毛细血管通透性亢进具有良好的拮抗作用(P0.05);对蛋清所致的足肿胀具有良好的拮抗作用(P0.05)。结论郑氏熏洗泡腾颗粒具有显著的抗炎作用。     

牛磺酸对内皮素生物学效应的机理探讨

目的：探讨牛磺酸对内皮素（ET）生物学效应的作用及意义。方法：在整体动物和离体组织观察ET作用和牛磺酸的拮抗作用。结果：牛磺酸可拮抗ET引起的升压作用。抑制ET缩血管和促平滑肌增殖作用。减少缺氧刺激引起的ET释放，结论：牛磺酸能有效拮抗ET生物学效应，并抑制其合成释放。     

金蝉止痒胶囊抗过敏作用的实验研究

目的 研究金蝉止痒胶囊的抗过敏作用,为其临床应用提供实验依据.方法 采用2,4二硝基氯苯（2,4-Dinitrochlorobenzene,DNCB）致小鼠迟发性超敏反应模型、抗血清致大鼠同种被动皮肤过敏反应模型和抗血清致大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒模型,分别观察金蝉止痒胶囊对小鼠超敏反应强度（耳肿胀度）、同种抗原攻击后皮肤伊文思蓝渗出抑制率和大鼠颅骨肥大细胞脱颗粒率的影响.结果 与模型对照组比较,金蝉止痒胶囊高、中、低剂量组对DNCB所致小鼠超敏反应强度（耳肿胀度）有显著抑制作用（P＜0.05）;对抗血清致大鼠同种被动皮肤过敏反应有显著拮抗作用（P＜0.05）;对抗血清所致大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒率有显著抑制作用（P＜0.05）.结论 金蝉止痒胶囊具有良好的抗过敏作用.     

大枣缓解甘遂毒性部位致炎作用的效应

目的： 对大枣各分离部位拮抗甘遂致炎毒性的效应进行评价,初步确定大枣中具有解毒作用的有效部位。方法： 体外培养小鼠脾淋巴细胞和大鼠腹腔巨噬细胞,分别以MTT法分析脾淋巴细胞增殖和Griess法分析大鼠腹腔巨噬细胞NO释放情况。首先观察甘遂各提取部位对脾细胞和巨噬细胞的影响,以确定毒性部位;再以确定的甘遂毒性部位评价大枣不同提取部位对该毒性部位的拮抗作用。在整体动物水平上,采用组织病理切片,观察大枣有效部位对甘遂提取物致小鼠胃肠急性损伤的影响。结果： 甘遂致炎的毒性以RK-3（二萜）部位最为明显;大枣提取部位B（小分子糖和氨基酸）、D（黄酮苷）、E（三萜）对甘遂毒性部位RK-3的致炎毒性具有明显的拮抗作用;大枣有效部位对甘遂提取物致小鼠胃肠急性损伤有保护作用。结论： 以细胞模型对甘遂致炎的毒性部位进行分析,进而确定了大枣拮抗甘遂致炎毒性部位的活性部位,为进一步进行大枣的减毒活性成分及作用机制研究提供了实验基础。     

The role of hypertension-related gene in aortic vascular smooth muscle cells from mice and rats

目的　研究高血压相关基因 (HRG 1)在心血管病发病中的作用。方法　用RT PCR和Northernblot分析HRG 1的表达。用3 H TdR掺入和组织学方法检测血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖。结果　Northernblot分析显示 ,HRG 1mRNA不仅可在VSMC中表达 ,亦可在大鼠多种组织中表达 (心、脑、肺、肾和肝 )。此外 ,在SHR大鼠的心、脑、肾和肝组织的HRG 1基因表达均明显低于正常WKY大鼠。半定量RT PCR和组织学分析表明 ,ApoE敲除小鼠和再狭窄动物模型的HRG 1mRNA表达减少 ,并且均可见到新生内膜形成。刺激VSMC增殖的ET ,AII和IL 1可减少VSMCHRG 1mRNA的表达。ANF ,CGRP和Adm可抑制VSMC增殖 ,增加HRG 1mRNA表达。这些作用能被相应的阻断剂或抗体所阻断或抑制。结论　HRG 1是一种与VSMC增殖相关的基因 ,它在动脉粥样硬化 ,再狭窄和高血压等心血管疾病中可能具有重要作用。     

不同剂量牛磺酸对大鼠高同型半胱氨酸血症生物学效应的影响

目的观察牛磺酸对大鼠高同型半胱氨酸血症生物学效应的影响,探讨牛磺酸拮抗高同型半胱氨酸血症生物学效应和防治动脉粥样硬化的作用机制。方法选择40只雄性Wistar大鼠随机分为4组（每组10只）：对照组、模型组、低剂量牛磺酸组及高剂量牛磺酸组,观察8周,分别检测各组8周末同型半胱氨酸（Hcy）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、内皮素（ET）的含量。结果对照组Hcy明显低于其它3组（P〈0．05）;模型组MDA、ET明显高于其它3组（P〈0．05）,模型组NO明显低于其它3组（P〈0．05）,不同剂量牛磺酸之间差别没有显著性;模型组SOD明显低于其它3组（P〈0．05）,高剂量牛磺酸组SOD的升高幅度大于低剂量牛磺酸组（P〈0．05）。结论在以Wistar大鼠为实验对象的动物实验中,蛋氨酸饲料喂养可造成大鼠高同型半胱氨酸血症。牛磺酸的干预不能降低同型半胱氨酸的水平,但可改善同型半胱氨酸诱导的血清MDA、ET含量的升高,血清SOD、N0含量的降低,表明牛磺酸可能是通过拮抗同型半胱氨酸的生物学效应保护内皮功能、抗氧化而发挥其防治心血管疾病的作用。     

参七消痞颗粒抗炎作用实验研究

目的：观察参七消痞颗粒（SQ）的抗炎作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验模型,观察参七消痞颗粒对急性炎症的作用;采用大鼠棉球肉芽肿实验模型,观察参七消痞颗粒对慢性炎症的作用。结果：参七消痞颗粒各剂量均可明显抑制小鼠耳廓肿胀率,抑制醋酸导致的小鼠腹腔毛细血管通透性的增加,显著减小致炎后大鼠足肿胀率;参七消痞颗粒中剂量和低剂量可显著抑制大鼠棉球肉芽肿形成。结论：参七消痞颗粒对急性炎症和慢性炎症均有明显的抑制作用。     

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞脂质代谢及AMPK的影响

目的观察降钙素基因相关肽（CGRP）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）增殖过程中细胞脂代谢的影响,探索影响脂代谢的腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号蛋白在该作用中的变化。方法贴块法体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞（VSMC）,取第3-10代用于实验。分别用CGRP或／和AngⅡ处理细胞。细胞计数法观察CGRP对AngⅡ诱导大鼠VSMC增殖的影响;油红O染色检测细胞内脂质含量;Western blot检测细胞p-AMPK、p-ERK1／2的表达。结果CGRP预处理能减少AngⅡ诱导的大鼠VSMC数目（P〈0．05）和细胞内脂质聚集的作用,在此过程中伴随细胞内p-AMPK、p-ERK1／2表达下调（P〈0．05）;CGRP8—37（CGRP受体拮抗剂）能拮抗CGRP对AngⅡ促增殖和脂代谢作用（P〈0．05）;PD98059（ERK1／2抑制剂）能部分拮抗CGRP对p—AMPK的抑制作用（P〈0．05）。结论CGRP能显著降低AngⅡ诱导大鼠VSMC增殖过程中的脂质代谢,其细胞内信号通路可能涉及到p—ERK1／2和p—AMPK信号蛋白。     

心钠素对哮喘豚鼠内皮素及动脉血氧分压影响的实验研究

目的探讨外源性心钠素（ＡＮＦ）对内皮素－１（ＥＴ－１）及动脉血氧分压（ＰａＯ２）水平的影响。方法检测哮喘豚鼠输注不同剂量ｒＡＮＦ（大鼠ＡＮＦ）前后ＰａＯ２水平,以及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和血浆ＥＴ－１、环磷鸟苷（ｃＧＭＰ）含量。结果实验对照组哮喘豚鼠血浆及ＢＡＬＦ中ＥＴ－１、ｃＧＭＰ含量均显著高于正常对照组,ＰａＯ２水平明显降低,ＰａＯ２与ＥＴ－１水平呈负相关。实验组哮喘豚鼠停止输注ｒＡＮＦ后３０ｍｉｎ,ＰａＯ２水平均明显升高,并呈剂量依赖性;血浆及ＢＡＬＦ中ＥＴ－１水平均明显下降,呈剂量依赖性;ｃＧＭＰ水平显著升高,也呈剂量依赖性。结论表明ＡＮＦ不仅能缓解支气管痉挛,而且能抑制哮喘豚鼠ＥＴ－１合成及分泌,拮抗其生物效应,外源性ＡＮＦ的使用可望成为哮喘病治疗的新方法。     

卡托普利对慢性心衰大鼠内皮素受体系统表达的影响

目的 研究慢性心衰大鼠在心衰早期、晚期及应用卡托普利诒疗慢性心衰时的左心室内皮素A(ETA)和内皮素B(ETB)受体的mRNA的表达水平,了解心衰时心肌内皮素受体系统的变化及其与病程的关系,以及卡托普利慢性给药对心衰大鼠内皮素系统的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测冠脉结扎心衰模型大鼠和卡托普利治疗时大鼠的左心室ETA和ETB受体的mRNA的表达,以放射免疫技术检测血浆中内皮素1(ET1)和心钠素(ANF)的浓度。结果 冠脉结扎10d后,血浆ET1和ANF的水平以及ETA和ETB受体mRNA表达水平明显增加;冠脉结扎70d后,血浆ET1和ANF的水平进一步显著升高(P<0.01或0.05),ETA受体mRNA表达水平和假手术组相比差异无显著性(P>0.05),而ETB受体mRNA表达水平仍明显增加,但和冠脉结扎10d组相比表达水平显着降低。卡托普利慢性给药治疗60d后,血浆ANF水平显著低于冠脉结扎70d组(P<0.01或0.05),但血浆ET1、ETA、ETB受体mRNA表达水平与冠脉结扎70d组差异无显著性(P>0.05)。结论 在慢性心衰的不同阶段,左心室内皮素受体系统表达的改变参与机体心脏功能的调节;卡托普利对内皮素系统没有直接影响。     

冠心病患者血浆内皮素和循环激素变化的临床观察

本文对９０例冠心病患者，３０例正常人应用放免法测定了血浆内皮素、肾素、血管紧张素Ⅱ、心钠素和皮质醇的含量。结果显示在稳定、不稳定型心绞痛和心肌梗塞患者血浆ＥＴ、ＡＴⅡ水平均较正常组显著增高，不稳定型心绞痛和心肌梗塞组较稳定型心绞痛组增高更为明显，血浆ＡＮＦ水平在不稳定型心绞痛和心肌梗塞组中有明显增高。     

降钙素基因相关肽对心钠素释放的影响

本工作应用大鼠离体心脏和培养的心肌细胞结合心钠素的放射免疫测定,研究了降钙素基因相关肽对心钠素释放的影响。结果发现,无论在离体心脏或培养的心肌细胞,降钙素基因相关肽均可引起心钠素的释放,并具有剂量效应关系;降钙素基因相关肽对心钠素的释放作用可能不完全依赖于Ca~(2+)的存在。提示心钠素的释放受降钙素基因相关肽的调节。     

鹿角方对充血性心力衰竭大鼠血浆心钠素的影响

目的：为了观察鹿角方对充血性心力衰竭（ＣＨＦ）大鼠血浆心钠素（ＡＮＦ）的影响。方法：采用实验性腹主动脉银夹狭窄大鼠模型,观察左室重量指数（ＬＶＭＩ）,放免测定血浆ＡＮＦ。结果：模型组血浆ＡＮＦ水平较假手术组明显升高（Ｐ＜０．０１）,鹿角方大剂量组和鹿角方小剂量组血浆ＡＮＦ水平较模型组显著下降（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）;模型组ＬＶＭＩ较假手术组显著升高（Ｐ＜０．０１）,鹿角方大剂量组和鹿角方小剂量组ＬＶＭＩ较模型组明显下降（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。结论：鹿角方具有逆转ＣＨＦ大鼠左室肥厚及降低血浆ＡＮＦ水平的作用     

依那普利的血药浓度与高血压等因素的关系

对11例原发性高血压(EH)患者顿服依那普利20mg后,动态观察血清依那普利拉浓度与血压、血浆血管紧张素Ⅱ(AⅡ)、内皮素(ET)心钠素(ANF)水平变化的关系,结果示服药后血药浓度3h达峰值,4h开始下降,7h降至最低;血压效应在1h开始起效,3h最明显,4～7h维持在有效水平;2、4、6h血浆AⅡ、ET和ANF水平逐渐下降,与治疗前比较有显著差异,血药浓度与血压效应的变化一致,血药浓度与血浆AⅡ水平之间呈非线性关系。     

甘露醇对血管活性物质的影响

目的:利用甘露醇(mannitol)诱导急性肾功能衰竭动物模型,观察不同剂量甘露醇对血管活性物质的影响,探讨甘露醇诱导急性肾功能衰竭(ARF)的可能机制.方法:将18只健康新西兰大白兔随机分为3组,分别给予小剂量甘露醇(n=6, 2 h内给予甘露醇)、生理盐水(n=6, 2 h内给予相同溶积生理盐水)、大剂量甘露醇并自由饮水(n=6; 3 d内给予甘露醇40～60 g/kg),观察用药后血中肾素、血管紧张素、内皮素及心钠素浓度的变化.结果:小剂量甘露醇组用药后的血浆肾素、血管紧张素Ⅰ、血管紧张素Ⅱ、内皮素及心钠素浓度与对照组比较差异不明显(P＞0.05);而大剂量并自由饮水组血浆肾素、血管紧张素Ⅰ、血管紧张素Ⅱ浓度明显高于对照组及小剂量组;血浆内皮素浓度明显低于对照组(P＜0.05),但与小剂量组比较差异不显著;大剂量并自由饮水组血浆心钠素浓度与对照组及小剂量组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:大剂量甘露醇可能通过影响肾素-血管紧张素系统(RAS),进一步降低肾血流量,参与诱导急性肾功能衰竭,但对血管内皮细胞的损伤并不明显.     

心钠素基因甲基化状态与表达调控

目的 :研究在大鼠老化过程中心钠素 ( ANF)基因的甲基化状态和该基因表达与调控的关系。方法 :采用限制性核酸内切酶 Hpa 和 Msp 消化大鼠基因组 DNA,用 [α- 3 2 P]d CTP进行ANF- c DNA标记探针 ,Southern blot杂交。结果 :老化过程中大鼠心房和心室 ANF基因内部至少存在一处未甲基化的序列。结论 :在老化过程中 ,大鼠心房和心室组织中的 ANF基因甲基化状态在转录水平上可能未参与该基因的表达调控 ,ANF基因表达调控的机制有待进一步研究     

胸痹通胶囊对大鼠缺血心肌的保护作用研究

目的探讨胸痹通胶囊对大鼠急性缺血心肌的保护作用机制。方法将动物随机分为3组,即正常对照组(A组)、模型对照组(B 组)、模型治疗组(C)组,制作异丙基肾上腺素性心肌缺血模型,测定各组大鼠血浆中超氧化物歧化酶的总活性(T-SOD)、血栓素 A_2、前列腺素 PGI_2的中间代谢产物(TXB_2、6-Keto-PGF_(la))、血浆内皮素(ET)、血浆降钙素基因相关肽(CGRP)、心肌心钠素(ANF)及心肌 ATP 酶活性等的活性,并进行组间比较。结果心肌缺血(模型对照组)大鼠血浆 T-SOD 活性降低、TXB_2、ET 含量增加、6-Keto-PGF_(la)、CGRP 减少,心肌 ANF 减少,ATP 酶活性降低。而模型治疗组(胸痹通 XBTC 组)上述变化则明显改善。结论 XBTC 可通过提高 SOD、ATP 酶的活性以及纠正缺血时血管活性物质的释放而发挥心肌保护作用。     

内皮素参与溶血磷脂酸促血管平滑肌细胞的增殖

目的 :观察内皮素 (endothelin ,ET)对溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用。方法 :离体培养的VSMCs经不同浓度的LPA孵育后测定 [3 H] 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入 ,ETmRNA含量及ET的合成和释放量。结果 :LPA(5、10和 2 0 μmol·L-1)增加VSMCsETmRNA表达 ,VSMCsETmRNA含量分别较对照组高 16 %、2 1%和 2 3%。LPA亦以浓度依赖的方式增加VSMCsET的合成释放。 5～2 0 μmol·L-1LPA处理组细胞培养上清中ET含量较对照组高 14 0 %～ 2 0 0 % (P <0 .0 1)。 5～ 2 0 μmol·L-1LPA以浓度依赖的方式促进VSMCsDNA合成 ,非选择性的ETA 受体拮抗剂BQ12 3显著拮抗LPA刺激的VSMCs的DNA合成增加。结论 :LPA可促进VSMCs的ET产生 ,LPA的促VSMCs增殖效应部分是通过ET/ETA 受体途径介导。提示LPA和ET作为内源性活性物质相互协调发挥其生物学效应