Fabry病肾病临床病理分析

目的阐明具有肾脏损害的Fabry病的临床病理特点。方法回顾性分析3例具有肾损害的Fabry病患者的临床表现,并对其肾活检组织进行免疫荧光、光镜及超微结构观察。结果3例患者均出现血尿、蛋白尿;光镜下肾小球足细胞体积增大,空泡变性,肾小管上皮也可出现上述改变;电镜下肾小球足细胞胞质内可见大量嗜锇性髓鞘样包涵体—圆形或卵圆形,明暗相间呈板层状,大小为0.3～10μm,外有单位膜包绕。结论具有肾脏损害的Fabry病患者临床上可出现蛋白尿、血尿,晚期常发展为肾功能衰竭。肾小球足细胞胞质内出现嗜锇性髓鞘样包涵体是Fabry病肾病特征性的形态学改变。     

血栓相关基因缺陷在体内的相互作用

目的 探讨血栓相关基因缺陷之间在体内的相互作用.方法 由α-半乳糖苷酶A(α-galactosidase A,Gla)缺乏和凝血因子V Leiden(factor V I.eiden,Fvl)基因突变小鼠建立二者复合基因突变小鼠,通过器官组织学分析,评价致病基因表现型-纤维蛋白沉积和血栓形成情况.结果 Gla缺乏与Fvl复合基因突变小鼠的器官纤维蛋白沉积较二者之一单独突变明显增加.复合突变比Gla缺乏=Gla/0FvQ/Q和Gla/FvQ/Q 比Gla-/0 Fv+/+=(0.28±0.03)%vs.(0.07±0.007)%,P<0.01;复合突变比Fvl 突变=Gla/0FvQ/Q和Gla-/- FvQ/Q 比Gla+/0 FvQ/Q和Gla+/+ FvQ/Q=(0.28±0.03)%vs.(0.11±0.02)%,P<0.01.同时,Gla缺乏与Fvl复合基因突变小鼠的器官断面血栓形成数日也分别较二者之一明显增加.复合突变比Gla缺乏=1.9±0.7 vs.0.0±0.0,P<0.05;复合突变比Fvl突变=1.9±0.7 vs.0.3±0.1,P<0.05.结论 Gla缺乏与Fvl突变在小鼠体内相互加重血栓前状态和血栓形成,临床上GLA缺乏、FVL突变或其它血栓相关基因缺陷患者出现早发和严重的血栓疾病可能合并其它遗传性血栓相关的基因缺陷.     

猕猴类人血型抗原B酶解的研究

Objective：To study enzymatical digestion of human B-like antigen of cynomolgus monkey for providing basis of preparation of human type O red cells. Methods ：The B-like blood group antigen of eynomlgus monkey was digested by reeombined α-galactosidase and various biochemistry parameters were tested for pre- and post-digestion red cells and it was transfused to animal. Results ：The shape and various biochemistry parameters as weU as function of post-digestion were normal. The blood pressure, pulse and respiration of recipient monkeys had not distinctly charged post-transfusion compared with pre-transfusion. Viabilities within 24 h of digestion cells in vivo were 96.5% and 95.0% versus 97.1% in control,T1/2 were all 16 d versus 16 d in control. Components and concentration in recipient blood and urine did not show a significant change compared with eontrol（P 〉 0.05）. Conelusion：Human B-like antigen on eynomolgus monkey could be α-galaetosidase digested and it did not change the shape and function. There was no transfusion after human A-like eynomolgus monkeys received enzye-digestion huan B-like red cells, our results suggest that it may be possible to modify human ABO blood group.     

衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义

目的:研究衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义.方法:采用组织化学及SABC免疫组织化学检测成年及老年Wistar大鼠脾组织内衰老相关-β-半乳糖甘酶及P16蛋白的表达.结果:衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性细胞主要分布于脾内的边缘区及脾索,老年大鼠较成年大鼠阳性细胞数量显著增多.P16阳性细胞也主要分布于脾内的边缘区及脾索;与成年鼠相比,老年大鼠P16阳性细胞显著增多.结论:P16和衰老相关-β-半乳糖苷酶在大鼠脾内高表达,可能与脾的衰老相关.     

7型腺病毒疫苗株载体的构建及β-半乳糖苷酶基因的表达

目的构建Ｅ３区缺失的７型腺病毒疫苗株（Ａｄ７ｖ）载体并表达β半乳糖苷酶基因。方法从人二倍体细胞Ｗ１３８培养的Ａｄ７ｖ中分离病毒ＤＮＡ，利用Ａｄ７ｖＤＮＡ天然的酶切位点，经过多步亚克隆，克隆的同时将Ｅ３区７８８８７ｍｕ片段缺失，并将多克隆酶切位点带入Ａｄ７ｖ载体。为了验证载体的功能，将带有巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子β半乳糖苷酶基因插入缺失的Ｅ３区。将这一重组质粒和ＥｃｏＲⅠ酶切Ａｄ７ｖＤＮＡ共转染２９３细胞，获得表达β半乳糖苷酶重组病毒。结果构建了缺失部分Ｅ３区Ａｄ７ｖ载体，在ＣＭＶ启动子的作用下该载体能有效地表达外源基因。结论Ａｄ７ｖ载体的构建并成功表达外源基因为开发和应用这一载体打下了重要的基础     

四例GM_2神经节苷脂沉积症的临床及病理研究

４例患者脑活检组织经组织化学和电镜检查，证实为ＧＭ２神经节苷脂沉积症。临床表现为发育停滞，精神运动衰退（３例），视力减退，视神经萎缩（３例），眼底樱桃色红点（１例），对声音有异常惊吓反应（１例），顽固性抽搐（２例），听觉减退、眼震、共济失调（各１例），锥体系征（４例）。电镜下见沉积物主要为膜性胞浆体、斑马体和类脂褐素体，有别于蜡样质脂褐质沉积症，脑组织的电镜检查对诊断ＧＭ２神经节苷脂沉积症有十分重要的价值。     

提高腺病毒表达载体扩增效率的研究

目的探讨在体外扩增重组腺病毒表达载体的有效方法。方法用含10%胎牛血清RPMI1640培养液常规培养人胚肾293细胞,当细胞生长至70%～80%汇合时,加入含有报告基因LacZ的重组5型腺病毒载体(Ad5CMVLacZ)共同培养36～38h。用X-gal组织化学方法检测Ad5CMVLacZ转染和表达的程度。结果293细胞生长至70%～80%汇合时,分裂增殖旺盛,形态为梭形、多角形,有明显分裂相,为指数生长期细胞。加入Ad5CMVLacZ8h后,293细胞开始出现肿胀,细胞间联系疏松,36～48h后细胞变成圆形、球形,对光折射增强,并聚集成葡萄串状。在此时间段作X-gal组化反应显示,约90%的293细胞被转染和表达产物。结论用上述方法可提高体外扩增腺病毒载体的效率,只要把握好病毒转染的时机和收获被转染293细胞的时机,就有可能制备出高滴度的病毒液,从而满足基因治疗神经退行性疾病的需要。     

阴囊Paget病的临床病理及免疫表型特征

目的　探讨阴囊Paget病的临床病理及免疫表型特征。方法　对8例阴囊Paget病进行光镜观察、免疫组化（SP法）染色,并对其中1例做电镜检查。结果8例Paget病变均局限于表皮层或真皮浅层,病变部位的深部组织及身体其他部位均无肿瘤存在。光镜下肿瘤细胞分别呈印戒样（2例）、大汗腺样（3例）、皮脂腺样（1例）及不规则形（2例）4种形态。肿瘤细胞分别表达CK8（8例）、mucin-1（3例）、AR（5例）,3例大汗腺样细胞共同表达GCDFP-15和AR。1例透射电镜下肿瘤细胞有分泌小管及半桥粒结构。结论阴囊Paget病为原发于表皮的腺癌,可能起源于向大汗腺、皮脂腺及黏液细胞方向或向表皮成角质细胞分化的皮肤多潜能干细胞;阴囊Paget病肿瘤细胞学分型可能有助于探讨Paget病复发、转移的规律以及新的治疗方法的研究。     

正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的变化

目的　研究正常人成纤维细胞老化过程中 β 半乳糖苷酶的变化规律。 方法　取正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养 ,以不同代龄的细胞为实验对象 ,通过细胞生长曲线、群体倍增时间和β 半乳糖苷酶染色等一系列检测方法 ,对成纤维细胞老化过程进行了观察。结果　随着成纤维细胞的连续传代培养 ,SA Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 4 % )到强 (在老化细胞中占 6 0 % )的趋势。结论　本实验结果为建立成纤维细胞衰老模型提供了实验依据     

不同年龄大鼠免疫器官的衰老细胞

目的：研究不同年龄大鼠免疫器官的衰老细胞。方法：应用衰老相关β-半乳糖苷酶组织化学染色显示不同年龄大鼠胸腺、脾、淋巴结的衰老细胞。结果：胸腺内衰老细胞多分布于胸腺小叶皮质和髓质交界处;脾内衰老细胞主要分布于边缘区及脾索;淋巴结内衰老细胞主要分布于皮质淋巴小结之间和髓质。随着年龄的增长胸腺、脾和淋巴结内的衰老细胞逐渐增多。结论：免疫器官胸腺、脾和淋巴结内存在衰老细胞,并随年龄的增长而增多,提示细胞衰老与个体衰老有关。     

结外Rosai-Dorfman病临床病理特征分析

目的探讨结外Rosai-Dorfman病(Rosai-Dorfman disease, RDD)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院2014～2019年收治的16例结外RDD的临床和病理资料,并复习相关文献。结果 16例结外RDD中,男性10例,女性6例,年龄12～69岁,平均年龄46.6岁。发病部位:鼻腔鼻窦4例、乳腺2例、腰部及前臂皮肤2例、骨2例,腮腺、肩部皮下、颞部软组织、眼球巩膜、颊黏膜、额部脑膜各1例。镜检:可见大组织细胞、淋巴细胞和浆细胞弥漫片状分布,低倍镜下呈典型的明暗相间结构,大组织细胞内可见伸入现象,部分病例间质内可见显著的纤维结缔组织反应及席纹状排列结构。免疫表型:组织细胞中S-100、CD68和CD163均阳性,CKpan、CK8/18、CD1a、Langerin、CD30和ALK均阴性,Ki-67增殖指数为1%～10%;背景淋巴浆细胞表达各自相应标志物:CD3、CD20、CD45、CD38和CD138均阳性。8例患者获得随访资料,随访6～58个月,肿块切除后均未复发。结论结外RDD相对罕见,临床表现不具特异性,部分病例具有非典型组织学形态,易误诊。熟悉并掌握其较为广谱的临床病理学谱系并结合S-100蛋白染色可将其与其它类似病变相鉴别。     

β-半乳糖苷酶在ROSAβgeo26小鼠衍生的神经干细胞中的表达变化

目的观察β-半乳糖苷酶(β-gal)在ROSAβgeo26小鼠衍生的神经干细胞(NSCs)中的表达变化。方法体外培养NSCs,并应用X-Gal组织化学和免疫细胞化学染色技术研究NSCs中β-gal的表达变化。结果原代克隆球和亚克隆球的NSCs均稳定表达β-gal;在NSCs分化过程中,NeuN阳性的神经元、GalC阳性的少突胶质细胞和GFAP阳性的星形胶质细胞均表达β-gal,但表达水平有所下降。结论ROSAβgeo26小鼠衍生的NSCs能稳定的表达β-gal,可用作NSCs研究的细胞来源。但在干细胞分化的相关研究中,值得注意存在β-gal不同程度的表达下调现象,并应进一步关注出现该现象的潜在机制。     

移植研究中X-gal染色的影响因素及优化条件

目的　研究在细胞移植过程中 ,利用X gal染色定位lacZ转基因细胞时 ,消除宿主内源性 β 半乳糖苷酶 (β galactosidase ,β Gal)非特异背景的条件。 　方法　分别取成年及新生大小鼠 ,侧脑室注入LacZ转基因神经干细胞C17 2后 ,于两种不同灌注条件下取脑 ,在 5个pH点 ,6个孵育时间点行x Gal染色 ,计数不同条件下海马区非特异性着色细胞数 ,得出X gal染色的最佳条件。　结果　X gal染色中非特异染色随pH增高及孵育时间缩短而减少 ,在pH为 9 5 ,孵育时间为 1h时较为理想。并与宿主的种属 ,年龄有密切关系。　结论　X gal染色必须从动物灌注、pH和孵育时间等诸方面加以优化并设立同种属同年龄的对照才可获得客观可信的结果。     

移植肾集合管癌2例临床病理特征分析

目的 探讨肾移植术后患者移植肾发生集合管癌(collecting duct carcinoma, CDC)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法 收集2例移植肾CDC的临床资料,采用免疫组化染色检测PAX-8、FH、CK19、INI-1、SDHB、CK7、CKH、vimentin、CAIX、CK20、p63、S-100P、GATA-3、TFE3、OCT3/4、CD117、ALK、Ki-67的表达,并复习相关文献。结果 2例患者均为女性;年龄48～57岁,平均52.5岁;病变位于左、右侧肾各1例;主要临床表现为肉眼血尿、腰痛、发热、肾功能异常、腹部肿块等;2例均行根治性肾切除术。病理检查：肿物位于肾髓质,最大径4～7 cm,边界不规则,呈浸润性生长,切面灰白、灰褐色,质脆;镜下见癌细胞排列呈腺管状或条索状结构,局灶见乳头状结构,间质促纤维组织增生反应明显,并伴炎细胞浸润。癌细胞异型显著,呈立方状或鞋钉样,胞质嗜酸,胞核深染,多形性明显,易见核仁及核分裂象。免疫表型：PAX-8、FH、CK19、INI-1、SDHB均阳性,CK7、CKH、vimentin和CAIX不同程度阳性,CK20、p6...     

糖尿病性微血管病的临床病理生理

糖尿病患者大多死于心血管并发症。糖尿病心血管并发症的发生发展与糖尿病性微血管病（diabetic microangiopathy）密切相关。本文将针对糖尿病性微血管病的临床病理生理展开讨论。     

2013~2017年我院402例肾活检临床病理分析

目的 分析北部湾沿海钦州地区肾脏疾病临床及病理特点。方法 对广西钦州市第一人民医院2013年~2017年共402例肾活检患者的临床和病理资料进行回顾性分析。结果 402例肾活检患者,原发性肾小球疾病(PGN)297例,占73.88%;继发性肾小球疾病(SGN)88例,占21.89%。PGN病理分型中最常见为膜性肾病,其次为微小病变型肾病及IgA肾病,SGN中狼疮性肾炎居于首位,其次为乙肝相关性肾炎。结论 本地区肾活检患者临床表现以肾病综合征为主,PGN最常见的病理类型是膜性肾病,非肾病综合征最常见的病理类型是IgA肾病,本地区无症状尿检异常有肾活检指征患者检出率低。     

克罗伊茨费尔特-雅各布病1例临床与病理分析

克罗伊茨费尔特-雅各布病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)是一种以快速进展的痴呆、肌阵挛和具有特征性脑电图表现为特点的中枢神经系统慢病毒脑炎,呈散发性.随着近年来对本病的研究不断深入,医生对其的识别能力在不断增强.现将我们收治的1例CJD的临床与病理改变结合文献报告如下.     

B超监测Bard针肾活检术后的腹膜后血肿——110例临床及病理

对110例用Bard针肾活检的患者术后采用B超检查,结果发现腹膜后血肿发生率为10.9%,穿刺针较粗可能是血肿形成的有关因素.采用B超导向下用18G Bard针进行肾活检、改进穿刺技术、对肾功能衰竭者肾活检前用低分子肝素抗凝并加强透析等措施,有可能减少腹膜后血肿的发生.     

增强子样序列对不同类型启动子作用的研究

目的 探讨大肠杆菌谷氨酰胺合成酶基因上游增强子样序列（BELE）有无严格的启动子选择性.方法 人工合成51bp的BELE插入质粒PATNF153并位于trp启动子和肿瘤坏死因子基因上游;在另一质粒PAL-B中,BELE插入痘苗病毒7.5K蛋白基因启动子和β-半乳糖苷酶基因上游,测定TNF及Lac基因的生物学活性.结果 活性测定结果表明BELE对上述两种启动子的转录作用有增强效应.结论 BELE无严格的启动子选择性.     

种痘水疱病样淋巴瘤2例临床病理分析

目的探讨种痘水疱病样淋巴瘤(hydroa vacciniforme-like lymphoma,HVLL)的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断。方法对2例HVLL进行临床资料分析、病理形态观察、免疫组化和EB病毒原位杂交检测、T细胞受体基因重排检测。结果 2例患者分别为15岁和18岁,均有10年以上的反复头部种痘水疱病样皮疹伴高热。肿瘤细胞浸润真皮或至皮下组织,小到中等大,轻中度异型性,围绕皮肤附件和嗜血管生长。2例肿瘤细胞CD2、CD3、CD7、CD8、TIA-1和Granzyme B均(+);CD56和CD30均(-)。2例EBER均(+)。例1标本TCR克隆性重排检测(+)。例1患者行CEOD方案化疗1次,确诊后1年因肺部感染、呼吸循环衰竭死亡。例2患者行化疗4次,病情得以控制。结论 HVLL是一种罕见的发生于儿童的EB病毒相关性T细胞淋巴瘤,临床病史尤其是皮损特点为诊断重要提示,结合病理形态、免疫表型、EB病毒原位杂交、T细胞受体基因重排可确诊。