脂肪干细胞治疗骨关节炎的研究进展及应用前景

骨关节炎(OA)现有的临床治疗方法疗效并不理想,随着医学及相关领域的迅速发展,再生医学利用干细胞以及细胞因子发挥治疗效应,已逐渐成为一种新的治疗OA的手段。其中种子细胞的选择成为了焦点问题,然而脂肪干细胞(ADSCs)的出现,很大程度上解决了种子细胞选择的问题,有望在脂肪组织工程方向发挥重大作用。ADSCs是在脂肪组织的血管基质成分(SVF)中发现的一类间充质干细胞,具有来源丰富、易于取材、多方向分化潜能(成骨、成软骨、成脂等)、细胞免疫原性低及免疫抑制调节作用等功能。本文旨在介绍ADSCs在治疗OA中的研究进展,并阐述其应用前景。     

脂肪干细胞的研究进展

近年研究结果显示,在脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能及自我复制能力的间充质干细胞,称为脂肪干细胞(ADSCs),他们来源广泛、取材容易,有望成为组织工程新的种子细胞[1].现就ADSCs的提取培养、生物学特性、表面标记、多向分化潜能、应用前景及现存问题作一综述.     

脂肪干细胞的研究进展

近年研究结果显示,在脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能及自我复制能力的间充质干细胞,称为脂肪干细胞(ADSCs),他们来源广泛、取材容易,有望成为组织工程新的种子细胞[1].现就ADSCs的提取培养、生物学特性、表面标记、多向分化潜能、应用前景及现存问题作一综述.     

脂肪干细胞的研究进展

近年研究结果显示,在脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能及自我复制能力的间充质干细胞,称为脂肪干细胞(ADSCs),他们来源广泛、取材容易,有望成为组织工程新的种子细胞[1].现就ADSCs的提取培养、生物学特性、表面标记、多向分化潜能、应用前景及现存问题作一综述.     

大鼠脂肪干细胞向肠神经样干细胞转分化的初步实验研究

目的初步探讨应用小分子SB431542、noggin和LDN1931897将大鼠脂肪干细胞(ADSCs)转分化成肠神经样干细胞的可行性,为先天性巨结肠的细胞治疗提供一种新的种子细胞。方法取SD大鼠腹股沟脂肪组织分离培养ADSCs。当ADSCs传代至第3代时,加入小分子SB431542、noggin、LDN1931897以及肠神经培养基进行转分化实验。通过光学显微镜观察细胞形态学变化和应用免疫荧光染色检测其肠神经干细胞特异性标记物表达情况。结果 ADSCs在含有3种小分子的肠神经细胞培养基中转分化培养7天后形成神经球样的细胞团。免疫荧光染色法检测发现神经干细胞特异性标记物Nestin呈阳性表达,肠神经干细胞标记物Sox2呈阳性表达。结论小分子SB431542、noggin和LDN1931897可在肠神经培养基中将ADSCs转分化为肠神经样干细胞。ADSCs有可能作为先天性巨结肠干细胞移植的种子细胞来源。     

脂肪干细胞定向分化为脂肪细胞的分子信号调节

Zuk等~[1]从脂肪组织中分离出一种多能干细胞,在不同的刺激下具有成脂肪、成软骨、成骨和肌原性的分化潜力,被称为脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSCs).ADSCs是一种间充质干细胞,在细胞形态和免疫学表型上与骨髓干细胞很相似[2],但ADSCs具有取材便捷、痛苦小,量大易扩增等特点,因此在脂肪组织工程应用中引起了极大关注.我们就ADSCs在诱导分化为脂肪组织过程中的分子调控机制进行了综述.     

miRNA调控脂肪干细胞分化的研究进展

目的总结近年来miRNA在调控脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分化中的研究进展。方法查阅近年来与miRNA和ADSCs分化调控相关的文献,详细分析其调节机制,并进行综述。结果在ADSCs分化过程中,miRNA的表达会改变,并且miRNA可通过调节细胞分化相关的信号通路,调控ADSCs定向分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、肝细胞等。结论利用miRNA对ADSCs分化的调控作用,构建出符合需求的组织工程种子细胞,用于临床分子靶向治疗和干细胞治疗。     

大鼠脂肪干细胞体外诱导为神经元样细胞的研究

目的 建立将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法.方法 取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,分离出脂肪干细胞并培养传代.使用诱导剂IBMX诱导ADSCs向神经元样细胞分化,检测神经前体细胞标志Nestin和神经元标志NF200、MAP2,以明确分化结果,而且榆测Nestin在诱导过程中的表达阳性率的变化情况,采用SPSS11.0软件进行统计学分析.结果 从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,经诱导剂IBMX诱导后,ADSCs表现出神经无样细胞形态,大部分细胞表达nestin,少部分细胞表达MAP2和NF200,随着诱导的进行,nestin的表达是升高的.结论 成功地建立了一种将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法,ADSCs有希望成为治疗神经性勃起功能障碍的、理想的组织工程种子细胞.     

脂肪来源干细胞治疗慢性创面的研究进展

脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一种从脂肪组织中提取的多项潜能干细胞,ADSCs拥有着强大的分化和分泌能力.脂肪来源干细胞可以通过多种途径如促进血管化、调节炎症反应、构建细胞外基质、促进成纤维细胞活动和促进上皮化来加快慢性创面的愈合.现就ADSCs治疗慢性创面的可能机...     

负载人骨形态发生蛋白-7基因的兔脂肪干细胞向成骨细胞分化的实验研究

目的 探讨人骨形态发生蛋白-7(hBMP-7)基因修饰对兔脂肪干细胞(ADSCs)成骨能力的影响. 方法 原代培养兔脂肪干细胞,免疫组织化学方法检测细胞表面抗原CD44、CD49d、CD106的表达,对细胞进行鉴定;阳离子脂质体介导hBMP-7基因转染ADSCs,绿色荧光蛋白表达观察转染效率、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测目的基因hBMP-7的表达;ALP定量测定,Western blot检测Ⅰ型胶原、骨钙素的表达,以评价转基因ADSCs向成骨细胞分化的情况. 结果 从兔脂肪组织中分离出来的ADSCs CD44、CD49d表达呈阳性,CD106表达呈阴性.RT-PCR检测筛选后的ADSCs稳定表达hBMP-7.转染后7、10、14 d ALP定量测定转染组明显高于未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);成骨标志物Ⅰ型胶原、骨钙素的表达转染组明显高于未转染组.结论 从脂肪组织中分离出的ADSCs是一种较好的组织工程种子细胞.hBMP-7重组质粒转染ADSCs后表达目的蛋白,并诱导ADSCs向成骨细胞分化.     

不同吸脂技术对脂肪来源干细胞功能的影响

肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一类具有多向分化、自我复制能力的成体干细胞.随着ADSCs的成功获取,逐渐发现其具有多向分化的潜能,并能广泛用于多种疾病的治疗.因此,如何获取功能良好的ADSCs成为研究热点.吸脂是获取ADSCs的主要方法,为研究不同吸脂术对ADSCs的...     

脂肪来源干细胞在创面愈合和衰老皮肤中的应用

2001年,Zuk等[1]首次从吸脂术中废弃的脂肪组织中分离出一种具有成纤维样细胞形态的细胞亚群,命名为脂肪组织提取细胞(processed lipoaspirate, PLA),证实为间叶细胞来源,具有多向分化潜能;次年又从PLA中分离并证实了干细胞的存在,命名为脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)[2].2003年,Gimble等[3]发现,ADSCs可分化为脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、神经元及成骨细胞.ADSCs被证实与BMSCs在生长动力学、细胞衰老、多向分化潜能和基因转导能力无显著差异[4],可将ADSCs作为替代物应用于组织工程,由此拉开了ADSCs应用研究的帷幕.笔者现就ADSCs在创面愈合和衰老皮肤中的应用作一述评.     

脂肪间充质干细胞在脂肪组织工程中的研究现状

脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是由 PA Zuk 等在2002年首先从脂肪组织中分离出的一种成纤维细胞样细胞,形态与骨髓间充质干细胞相似,可以向软骨细胞、成骨细胞、肌细胞、神经细胞和脂肪细胞等不同胚层来源的细胞分化,具有自我更新能力和多向分化潜能[1]。因其具有来源充足、取材方便、无伦理争议的优势,近年来,作为脂肪组织工程的种子细胞受到研究者的广泛关注。笔者以 ADSCs 为种子细胞构建组织工程脂肪的研究进展作一综述。     

脂肪干细胞在皮肤组织工程中的研究应用进展

组织工程皮肤作为一种皮肤组织替代物,主要用于覆盖和修复损伤缺损的皮肤组织,以改善其形态和功能。其中,种子细胞、支架材料及细胞因子是皮肤组织工程研究的三要素。脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)具有来源丰富、取材方便、低免疫原性、易扩增等优点,是皮肤组织工程较为理想的种子细胞。本文就ADSCs在组织工程皮肤中,包括创面修复、抑制瘢痕增生等的相关应用研究进展及前景进行综述。     

长期体外培养对人脂肪源性间充质干细胞生物学特性的影响

目的通过观察长期体外培养对人脂肪源性间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响,鉴定ADSCs作为组织工程种子细胞的优越性。方法通过流式细胞技术观察长期体外培养对人ADSCs表面抗原表达和凋亡的影响。通过碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色及RT-PCR检测长期体外培养对人ADSCs成骨分化潜能的影响。结果原代ADSCs表面高表达间充质干细胞表面标记物,而不表达血源性细胞表面标记物,标记物不随传代次数变化。早期ADSCs凋亡率为1%～2%,随传代次数增多凋亡率逐渐增加．但幅度不大。碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色和RT-PCR检测显示ADSCs传至第8代时仍能保持成骨分化潜能。结论ADSCs生物学特性稳定,是较为理想的组织工程及再生医学研究的种子细胞。     

兔脂肪干细胞体外成骨诱导培养及成骨活性鉴定的实验研究

目的体外分离培养兔脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,在成骨诱导条件下鉴定其成骨活性。方法取4月龄新西兰大白兔腹股沟区脂肪,Ⅰ型胶原酶消化,分离、培养及传代原细胞,将第3代ADSCs消化后,加入成骨培养液中诱导分化,分别行碱性磷酸酶染色、茜素红染色、VonKoss（a钙结节）染色,以鉴定分化结果。结果体外分离培养的细胞增殖活跃,成骨诱导后碱性磷酸酶染色、茜素红染色及Von Kossa染色均呈阳性表达。结论脂肪干细胞具有成骨分化能力,是一种理想的骨组织工程种子细胞。     

微创获取人脂肪来源干细胞的分离培养和鉴定

目的探讨一种新型的采用微创技术获取脂肪来制备脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)的方法。方法自2018年5月至2019年8月在北京雷华医疗美容诊所通过腹部穿刺方法获取5例患者腹部脂肪(0.5～1.5 g)组织进行分离培养,扩增ADSCs,并进行干细胞的分化与鉴定分析。结果经过对ADSCs的增殖能力、特异性表面标志物的流式鉴定,成脂分化、成骨分化、软骨分化、血管内皮细胞分化及神经分化的多项分化能力的鉴定,确定了分离出的细胞为脂肪间充质干细胞。结论采用微创技术可以分离获取ADSCs。     

脂肪来源干细胞对增生性瘢痕影响的实验研究进展

增生性瘢痕是机体在创伤后的愈合过程中发生异常修复而形成突出于皮肤表面的瘢痕组织。近年来,应用脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)治疗和预防增生性瘢痕已成为一种很有前景的治疗方法。ADSCs可以通过免疫调节、中和活性氧、分泌抗纤维化的细胞因子和生长因子、调节成纤维细胞以及分化为各种皮肤细胞等参与正常皮肤创伤的修复,达到抑制瘢痕和修复的作用。现回顾近年发表的文献,对ADSCs治疗增生性瘢痕的可能机制作一综述。     

脂肪干细胞原代培养及其向表皮细胞诱导分化的研究

目的 探讨人脂肪干细胞(adipose-derivedstem cells,ADSCs)体外原代培养方法及诱导分化为表皮细胞的可能性.方法 利用酶消化法原代培养ADSCs,免疫细胞化学检测其相关表面抗原CD29、CD34、CD44、CD49d、CD80、CD106的表达;用表皮细胞诱导培养基对ADSCs进行体外诱导,观察细胞的生长情况及形态变化;对诱导前后两种细胞行细胞增殖活性及细胞角蛋白表达检测.结果 利用脂肪抽吸液成功培养出ADSCs,且能稳定传代;免疫组织化学染色证实有特定的干细胞表面标记物表达;对ADSCs成功进行了体外诱导培养,其细胞形态及蛋白表达均有向表皮细胞分化的倾向,并且仍具较高增殖活性.结论 利用酶消化法可在体外成功培养ADSCs,并能持续传代;ADSCs表达特定的干细胞表面抗原;ADSCs可成功进行体外诱导,有向上皮细胞分化的倾向.     

脂肪干细胞在脂肪组织修复重建中的应用

目的总结脂肪干细胞(ADSCs)的分离方法、生物学特性、多向分化能力及其促血管化作用,以探讨其在脂肪组织修复重建中的作用。方法回顾性分析国内外的ADSCs相关文献,探讨其在脂肪组织修复重建中的作用。结果 ADSCs作为人体储量最丰富的间充质干细胞,从体表脂肪组织中分离而来,具有多向分化能力,经诱导可分化为脂肪、软骨、骨、心肌、肌肉、血管上皮细胞等多种组织细胞,其中其成脂分化能力可保持数代不衰减。ADSCs还具有旁分泌功能,分泌血管上皮生长因子、成纤维细胞生长因子2(FGF-2)等细胞因子,能促进组织血管化,提高游离脂肪组织移植的存活率。结论 ADSCs可用于脂肪组织工程、脂肪组织移植和软组织创伤修复中,在乳腺组织的修复重建方面具有重要的应用前景。