青蒿琥酯对内毒素诱导的炎性因子合成抑制作用的研究

目的：探讨青蒿琥酯（AR）对内毒素诱导的巨噬细胞炎性因子产生的影响。方法：采用体外培养的巨噬细胞系RAW 264．7细胞,向细胞悬液中分别加入细菌脂多糖（LPS）、AR或LPS＋AR,于37℃、15％CO2条件 下培养24小时后,收集细胞培养上清液,测定上清液中的肿瘤坏死因子－α（TNF－α）和一氧化氮（NO）含量。此外,采用角叉菜胶致敏的小鼠,静注LPS制备内毒素血症模型,观察青蒿琥酯对内毒素血症小鼠血清中炎性因子TNF－α水平的影响。结果：在体外培养的RAW 264．7细胞上,AR2．5－10.0mg/L可明显抑制LPS诱导的TNF－α产生,同时对NO产生也有明显的抑制作用。给小鼠肌注青蒿琥酯后,可使小鼠单核－巨噬细胞、内皮细胞系统对LPS刺激的反应明显降低,可使内毒素血症小鼠体内诱导产生的TNF－α明显减少。结论：青蒿琥酯在体内和体外均可明显抑制内毒素诱导的巨噬细胞炎性因子产生,表明对内毒素诱导的炎症反应具有明显的抑制作用。     

青蒿琥酯治疗非小细胞肺癌的初步临床研究

作者2003年3月～2005年12月试用青蒿琥酯（ane Sunate）联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）51例，并与同期单纯NP方案化疗的55例NSCLC患者进行对照研究，现报告如下。[第一段]     

青蒿琥酯诱导HL-60细胞凋亡的研究

本研究旨在研究青蒿琥酯体外诱导HL-60细胞凋亡及其过程中Bcl-2与ICAD蛋白表达的变化。采用MTT法测定青蒿琥酯对HL-60细胞的生长抑制作用;用光学显微镜检、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术观察和检测青蒿琥酯诱导HL-60细胞的凋亡;应用蛋白印迹法检测青蒿琥酯诱导HL-60细胞凋亡过程中Bcl-2与ICAD的表达变化情况。结果表明：青蒿琥酯对HL-60细胞有明显的生长抑制作用,并呈时间、剂量依赖性。48小时IC50值为18.33μg/ml,其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;Bcl-2和ICAD在HL-60细胞中均有表达,且随药物浓度的增高表达量逐渐降低。结论：青蒿琥酯可诱导HL-60细胞凋亡,Bcl-2和ICAD在青蒿琥酯诱导HL-60细胞凋亡的信号传导途径中可能是重要的调控因子。     

青蒿琥酯预防日本血吸虫病临床试验

目的　客观、正确评价青蒿琥酯预防日本血吸虫病的现场应用效果及其影响因素和毒副反应 ,为拟定规范的服药方案提供科学依据。方法　在江西、安徽和湖北三省血吸虫病流行区的志愿者中 ,采用双盲试验法将受试居民随机分成实验和对照两组 ,先服单剂吡喹酮 ( 4 0～ 5 0mg/kg)清虫 ,随后实验组于接触疫水后每隔 7天和 15天口服青蒿琥酯 ( 6mg/kg) 1次 ,对照组口服与青蒿琥酯剂型相同的安慰剂。末次给药后 3 0天用孵化法和改良Kato法作粪便检查。在服药过程中和中止服药后不同时期观察毒副反应。结果　在江西省所有 467例实验组“7天间隔服药”粪检阳性率为 0 ,保护率为 10 0 % ;在对照组 3 97例居民粪检平均阳性率为 10 .3 %。湖北省的上述剂量预防作用与江西的相同。而“15天间隔服药”受试志愿者保护率为 3 7.7%～ 10 0 % ,实验组保护率与对照组感染率和暴露率存在明显负相关。青蒿琥酯的副作用轻 ,血和尿常规、心电图、肝、肾功能治疗前后无明显改变。结论　通过上述研究 ,阐明了青蒿琥酯的预防效果及其影响因素 ,并据此提出了获得最佳保护率的服药方案。     

青蒿琥酯治疗非小细胞肺癌的初步临床研究

<正>作者2003年3月～2005年12月试用青蒿琥酯(artesunate)联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)51例,并与同期单纯NP方案化疗的55例NSCLC患者进行对照研究,现报告如下。1资料与方法入选标准:①组织学或细胞学证实的晚期NSCLC(Ⅲ、Ⅳ期)患者;②既往未接受化疗、近3个月内未接受放疗;③ECOG评分0～2;④治疗前外周血白细胞≥4.0×109/L、血小板≥80×109/L、血红蛋白≥10 g/L;⑤没有明显肝肾功能     

青蒿琥酯诱导凋亡的U937细胞负载树突状细胞后的免疫应答

本研究探讨凋亡白血病细胞负载的树突状细胞（dendritic cells,DC）能否诱导特异性细胞毒T淋巴细胞反应。用青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡,从正常人外周血单个核细胞诱生DC,将凋亡U937细胞负载DC,并添加TNF-α诱导DC成熟,然后与自体T淋巴细胞共育,并联合IL-2以诱生细胞毒性T淋巴细胞（CTL）;应用流式细胞术分析DC和T细胞免疫表型,采用Dextran-FITC内吞试验检测DC的抗原摄取能力;用ELISA法检测IL-12p70的产生;采用MTT法检测凋亡U937细胞负载及未负载DC诱导的自体T淋巴细胞对不同的靶细胞（U937细胞和NB4细胞）的杀伤效应。结果表明：青蒿琥酯1μg/ml作用于U937细胞48小时后,U937细胞的凋亡率达51.52%,DC在未成熟阶段时吞噬Dextran-FITC的能力最强,负载凋亡U937细胞之后并不能促使未成熟DC（iDC）分化为成熟DC（mDC）。凋亡U937细胞负载后的iDC在TNF-α的作用下能够成为mDC。与未负载的mDC相比,凋亡U937细胞负载后的mDC（mDC-^ApoU937）分泌IL-12p70水平明显增高,而且由其所激发和扩增的T细胞以CD8^＋的T细胞为主。细胞毒性实验显示：mDC-^ApoU937诱导的T细胞的对U937细胞的杀伤显著超过对NB4细胞的杀伤。结论：mDC-^ApoU937能有效地诱导特异性抗白血病效应。     

芹菜素对宫颈癌U14细胞增殖抑制作用的实验研究

目的:探讨芹菜素对宫颈癌U14细胞增殖的抑制作用.方法:在昆明鼠腹腔孵育宫颈癌U14瘤株后,无菌抽取腹水,制成细胞悬液接种于培养瓶中,取对数生长期细胞用于实验.实验当日配制芹菜素液,浓度分别为0、20、40、80 μmol/L,以MTT法检测不同浓度芹菜素分别在24、48、72 h对宫颈癌U14细胞增殖活性的影响.结果:芹菜素(20 ～ 80 μmol/L)能够抑制小鼠宫颈癌U14细胞增殖,并表现为时间、浓度的依赖性.结论:芹菜素在一定浓度下可抑制体外U14细胞增殖并有时间依赖性.     

青蒿琥酯对K562细胞的抑制作用及对VEGF表达的影响

本研究探讨青蒿琥酯（artesunate，ART）对K562的抑制作用和对VEGF表达的影响，为青蒿琥酯可能成为一种新的抗白血病药物提供实验基础和理论依据。实验以K562细胞为靶细胞．设对照组及各ART浓度（12．5、25、50、100μg／ml）组，绘制其生长曲线。用光学显微镜观察K562细胞生长情况及不同浓度ART作用不同时间后的细胞形态变化，同时用ELISA检测ART作用K562前后细胞上清液中VEGF含量变化.结果表明：ART对K562细胞的生长有明显的抑制作用（P〈0．01），ART在抑制K562细胞生长时也下调其VEGF的表达（P〈0．01）。K562细胞抑制率与其上清液中的VEGF浓度的相关分析表明：随着各ART组作用浓度递增，在一定时间范围内K562细胞抑制率升高，与此同时K562细胞VEGF表达下调，此变化差异有显著统计学意义（P〈0.01）。结论：青蒿琥酯能显著地抑制K562细胞的生长；青蒿琥酯在抑制K562细胞生长时对VEGF的表达明显下调，K562细胞抑制率与其VEGF表达呈负相关；青蒿琥酯抑制K562细胞生长的机制可能是通过下调细胞的VEGF的表达实现的。     

青蒿琥酯对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的:观察青蒿琥酯对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC)凋亡的影响。方法:用不同浓度的青蒿琥酯刺激脂多糖诱导增殖的大鼠肾小球系膜细胞,HE染色观察凋亡细胞形态,DAPI荧光染色观察细胞核凋亡情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:青蒿琥酯对系膜细胞凋亡有明显诱导作用,呈一定剂量依赖性。结论:青蒿琥酯能够剂量依赖性地诱导大鼠系膜细胞凋亡。     

高强度超声对宫颈癌小鼠再次接种同种肿瘤的抑制作用

目的探讨高强度超声(HIU)治疗对宫颈癌小鼠再次接种同种肿瘤的抑制作用。方法72只接种成功的U14宫颈癌小鼠随机分为HIU组、手术组和对照组,每组24只,于接种肿瘤后第7天分别接受HIU治疗、手术治疗及HIU假治疗;于接种肿瘤后第17天,每组小鼠再随机分为3组,分别再次接种2×106(n=8),2×107(n=8)或0(n=8)个U14肿瘤细胞,记录各组小鼠的无癌存活数。结果HIU组、手术组和对照组再次接种2×106个U14肿瘤细胞,其无癌存活率分别为100.0%,75.0%和0.0%,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);接种2×107个U14肿瘤细胞时,无癌存活率分别为87.5%,25.0%和0.0%,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);未行第2次肿瘤接种的小鼠无癌存活率,HIU组(100%)、手术组(100%)均较对照组(0%)差异有统计学意义(P<0.05)。结论HIU治疗小鼠宫颈癌是有效的,HIU较手术治愈的小鼠对同种肿瘤有更强的抑癌作用,这可能是由于HIU杀死的肿瘤细胞起到了“HIU原位固化瘤疫苗”作用。     

RNAi沉默GALNT7基因对宫颈癌细胞恶性行为的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7（polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 7．GALNT7）基因对宫颈癌细胞生长、侵袭及迁移能力的影响。方法利用RNA干扰技术沉默GALNT7（siR—GALNT7）,以非特异性序列（pSilencer2．1）转染细胞作为阴性对照,转染宫颈癌细胞Heh和C33A细胞,采用MTT实验、集落形成实验、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验来检测干扰GAL-NT7基因后宫颈癌细胞生长、侵袭以及转移能力的变化。结果Western Blot检测结果显示,转染siR—GALNT7质粒的实验组中两种宫颈癌细胞中GALNT7的蛋白表达水平明显降低,与转染siR—Ctrl的对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞生长活性分别下降了19％和22％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞的集落形成能力分别下降了56％和52％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞侵袭能力分别下降了48％和54％,与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa细胞迁移能力下降了约30％,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论RNA干扰在体外明显降低了宫颈癌细胞中GALNT7基因的表达,同时抑制了宫颈癌细胞的生长侵袭以及迁移能力．GALNT7基因有可能成为宫颈癌基因治疗的重要靶点。     

大麻素2型受体在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达

目的研究大麻素受体2(CB2受体)在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中的表达,探讨其在宫颈癌的发生发展中的作用和意义。方法采用免疫组织化学方法分别检测正常宫颈组织、各级宫颈上皮内瘤变组织和宫颈癌中CB2受体的表达情况。结果 CB2受体在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织和宫颈癌中均有表达;宫颈上皮内瘤变组织和宫颈癌中CB2受体表达水平明显高于正常组;CB2受体表达水平随组织恶性程度的增加而升高(P均<0.01)。结论 CB2受体在宫颈上皮内瘤变组织和宫颈癌中表达明显升高,且其升高水平随病变组织恶性程度的增加而增加,提示CB2受体可能在正常宫颈组织向宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的逐级演变过程中起着重要作用。     

高强度超声对荷U14宫颈癌小鼠脾细胞Th1/Th2亚群的影响

目的探讨高强度超声（HIU）对荷U14宫颈癌小鼠脾细胞Th1／Th2亚群的影响。方法将32只雌性BALB／c小鼠随机分为HIU治疗组、手术治疗组、荷瘤对照组及正常对照组，每组8只。各组于种植肿瘤或生理盐水后第7天，分别接受相应治疗；于第17天制备并培养小鼠脾淋巴细胞，收集上清液，应用双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠脾淋巴细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。结果受刀豆球蛋白A（Con A）刺激时，HIU治疗组IL-2浓度为（1110．13±338．10）pg／ml，较手术治疗组[（641．50±93．29）pg／ml]、荷瘤对照组[（215．75±62．54）pg／ml]明显增高（P〈0．05）；HIU治疗组IFN-γ浓度为（64984．86±9778．80）pg／ml，较荷瘤对照组[（42613．75±4050．75）pg／ml]明显增高（P〈0．05）；HIU治疗组IL-4浓度为（224．94±55．89）pg／ml，较手术治疗组[（330．56±94．63）pg／ml]、荷瘤对照组[（418．13±104．78）pg／ml]明显减少（P〈0．05）。未受ConA刺激时，HIU治疗组IL-2浓度为（1099．25±233．51）pg／ml，较手术治疗组[（241．00±35、44）pg／ml]、荷瘤对照组[（136．75±37．52）pg／ml]、正常对照组[（277．50±57．59）pg／ml]明显增高（P〈0．05）；HIU治疗组IFN-γ浓度为（45390．00±9961．26）pg／ml，较荷瘤对照组[（33662．50±14111．99）pg／ml]明显增高（P〈0．05）。结论HIU固化的U14肿瘤细胞可能激活机体免疫功能，促使其由Th2占优势向Th1占优势逆转，从而提高小鼠抗肿瘤免疫功能，抑制肿瘤生长。     

全自动DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值

目的通过与常规细胞学诊断相比较,探讨细胞DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值。方法对2003例患者的宫颈细胞学标本分别采用常规细胞学和DNA定量分析系统检测,并将结果进行对比。结果常规细胞学检测为高级别以上的病变15例,DNA定量检测均为(+)。在细胞学检测为非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)的57例中,28例DNA定量分析(+),25例因为非整倍体细胞未达到诊断阳性标准而建议4～6个月复查;4例为(-)。结论 DNA定量分析技术有明确的诊断标准,结果客观,可与常规细胞学结合应用于宫颈癌及宫颈癌前病变的筛查。对于细胞学检测为ASC-US的人群有分流作用,需组织学证实。     

卵巢癌与宫颈癌放射治疗中CT诊断的临床应用价值研究

目的:探讨CT诊断在卵巢癌与宫颈癌放射治疗中的的应用价值;方法:选择卵巢癌患者40例、宫颈癌患者60例,分别进行CT诊断,比较CT检查分期与手术病例分期的差异;结果:卵巢癌患者CT检查结果显示,浆液性囊腺癌25例,卵巢未成熟畸胎瘤与库肯勃瘤各2例,粘液性囊腺癌9例,1例未检出,1例交界性囊腺癌。FIGO分期中I、Ⅱ、Ⅲ、IV期分别为1、11、21、6例。宫颈癌CT检查结果显示,鳞癌、腺癌、腺鳞癌分别34、15、11例,FIGO分期中I、Ⅱ、Ⅲ、IV期分别为2、15、20、21例。放射治疗前后患者CT分期结果与手术病理分期结果无明显差异(P>0.05);结论:CT检查能够有效的诊断卵巢癌与宫颈癌,并准确FIGO分期,为临床治疗方案的制定提供了依据。     

细胞DNA定量分析技术在宫颈癌及癌前病变早期筛查中的应用价值

目的 探讨细胞DNA定量分析技术在宫颈癌及癌前病变早期筛查中的应用价值.方法 对23698例参加宫颈癌筛查的适龄女性采用宫颈刷取材,宫颈液基细胞学制片2张,一张用硫堇-Feulgen染色后,采用细胞DNA定量分析系统对细胞核DNA含量进行定量检测；另一张行巴氏染色做常规细胞学检查.任一个结果为阳性均建议行阴道镜或阴道镜指导下取活检,以活检结果作为金标准比较二种方法检测的准确性.结果 随访到活检结果者221例,其中细胞DNA定量分析检测出198例阳性,常规细胞学检测出78例阳性,活检发现CIN2以上病变100例,细胞DNA倍体定量分析相对敏感性为96％,相对特异性99.6％,常规细胞学检测相对敏感性为40％,相对特异性为99.8％,虽然阳性预测值略高于细胞DNA倍体定量分析技术,但是有25例漏诊.结论 细胞DNA倍体定量分析技术较常规细胞学敏感性高,特异性也较好,在宫颈癌早期筛查中具有重要的应用价值,可作为宫颈癌筛查的方法之一.     

甘草次酸诱导U266细胞凋亡及对Survivin表达的影响

本研究旨在观察甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)对人骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及survivin表达的影响。用MTT法检测GA对U266细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测不同浓度GA作用于U266细胞后细胞凋亡,细胞周期的变化;扫描电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;实时定量PCR检测GA对U266细胞survivin基因表达的影响。结果表明:GA对U266细胞有增殖抑制作用,其抑制作用呈现为时间和浓度依赖性;GA可以诱导U266细胞凋亡;扫描电子显微镜下可见核仁染色质边集,凝聚成块;GA可以诱导U266细胞周期阻滞于G0/G1期,表现为G0/G1期细胞比例升高,而G2/M及S期细胞比例下降。GA可以下调U266细胞survivin基因的表达,下调作用与浓度呈正相关。结论 :CA能抑制U266细胞增殖,呈浓度和时间依赖性,诱导其凋亡,其作用机理可能与细胞周期阻滞于G0/G1期和下调survivin基因表达有关。     

Evaluation of intervention to prevent hypomagnesemia in cervical cancer patients receiving combination cisplatin and radiation treatment

Purpose  The purpose of this study was to evaluate the impact of increasing the magnesium (Mg²⁺) supplementation in the pre- and posthydration of patients receiving cisplatin plus radiation (CisXRT) to prevent chemotherapy-induced hypomagnesemia (CIH) events. Materials and methods  The study was conducted on newly diagnosed cervical cancer patients receiving CisXRT. The first prospective intervention to prevent CIH was to increase the pre- and posthydration Mg²⁺ from 1 to 2 g. After completion of the first intervention, the analysis demonstrated the persistent occurrence of CIH on cycle 3, and later, a second intervention was implemented to increase Mg²⁺ to 3 g in the pre- and posthydration. Patients that failed to complete at least five cycles or received cisplatin in combination with another chemotherapy regimen were excluded from the study. Baseline group included 70 patients that had received CisXRT prior to any changes in magnesium supplementation. Results  There were 62.8% (44/70) and 32.6% (22/70) of patients with episodes of CIH in the baseline and first intervention groups, respectively (P = 0.007). In the second intervention group, a 49.6% decrease in the total number of episodes compared to control group was observed. Patients in the second intervention group showed a 100% improvement incidence of persistent CIH over the two other cohorts (P = 0.001). Conclusions  The increase of Mg²⁺ to 2 g for the initial two cycles and then to 3 g with the third cycle of CisXRT therapy prevented episodes of CIH and decreased associated treatment delays. This is original research that has not been published elsewhere. A preliminary report was presented as a poster at the HOPA/ISOPP Joint Meeting June 20th, 2008.     

Lobaplatin arrests cell cycle progression,induces apoptosis and alters the proteome in human cervical cancer cell Line CaSki

Cervical cancer is one of the most common gynecologic tumors. There is an upward trend in the incidence. The objective of this research was to explore the effect of lobaplatin on cervical cancer CaSki cells proliferation, cell cycle and apoptosis and analysis of the differential expressed proteins of CaSki cells after exposed to lobaplatin. Our findings have shown that lobaplatin inhibits cell proliferations in human cervical cancer CaSki cells in dose- and time-dependent manner. Flow cytometry assay confirmed that lobaplatin affected cervical cancer cell survival by blocking cell cycle progression in S phase and G0/G1 phase and inducing apoptosis in dose- and time-dependent manner. Lobaplatin treatment reduced polypyrimidine tract-binding protein 2, ribose-phosphate pyrophosphokinase, hypothetical protein, terminal uridylyltransferase 7, ubiquitin specific protease 16 and heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1 expression and increase zinc finger protein 91, zinc finger protein, C-X-C motif chemokine 10 precursor, stromal cell protein and laminin subunit alpha-4 expression. Some of the differentially expressed proteins may be associated with antitumor effect of lobaplatin. Lobaplatin showed a good antitumour activity in in vitro models of human cervical cancer cells. These results indicate that lobaplatin could be an effective chemotherapeutic agent in human cervical cancer treatment by inducing apoptosis, cell cycle arrest and changing many kinds of protein molecule expression level.