实验性视网膜脱离时外源性bFGF对视网膜细胞凋亡的干预作用

目的 研究实验性视网膜脱离(RD)后家兔视网膜细胞凋亡情况,探讨RD后视功能损伤机制,观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对细胞凋亡的干预作用.方法 从42只青紫兰兔中随机选取40只兔,将每只兔的左、右眼分为实验对照组和治疗组.视网膜下注射玻璃酸钠(爱维)建立RD动物模型后,取右眼在玻璃体腔内注射10IU/20μl bFGF溶液,作为治疗组;左眼注射平衡盐溶液(BSS)20μl作为实验对照组.剩余2只家兔设为正常对照组,不作任何处理,在实验观察结束时取眼球.三组均采用HE染色、原位末端标记法(TUNEL)和透射电子显微镜观察视网膜细胞凋亡情况,并进行细胞计数和统计学检验.结果 RD早期就有细胞凋亡的发生.视网膜各层细胞均可见凋亡细胞,内核层、节细胞层分布最多.凋亡细胞数随脱离时间延长而变化(P<0.01).bFGF组的凋亡细胞数比BSS组少(P<0.01).电镜下可见除正常对照组基本无凋亡细胞外,其余两组均观察到凋亡细胞,.bFGF组中典型凋亡细胞明显少于实验对照组.结论 实验性RD时视网膜组织细胞中存在异常凋亡,可能是RD后视功能损伤机制之一.玻璃体腔内给予bFGF可以抑制视网膜细胞凋亡,为临床治疗视网膜脱离提供参考.     

神经生长因子对视网膜脱离视细胞保护作用的实验研究

目的 探讨神经生长因子(NGF)对视网膜脱离(RD)视细胞损伤的保护作用。方法 选用健康青紫蓝兔36只随机分为正常对照组、NGF治疗组和生理盐水(NS)模型组，实验组右眼RD模型制作后，NGF治疗组每天结膜下注射NGF0．1mL(1mg／mL)2次；NS模型组每天结膜下注射NS0．1mL，2次；实验动物于3d、14d后处死，取眼球壁做光镜、电镜检查。结果 光镜、电镜检查NGF治疗组内外节损害较轻、视细胞数较多、外核层较厚、视网膜结构和层次排列较好。NGF治疗组视网膜外核层凋亡细胞计数少于NS模型组。视网膜脱离后14d外核层厚度NGF治疗组厚于NS模型组；NGF治疗组视网膜外核层细胞计数多于NS模型组。结论 结膜下注射NGF对视网膜脱离后视细胞损伤有一定的保护作用。     

实验性视网膜脱离时神经生长因子对视网膜的保护作用

目的　研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)在实验性视网膜脱离 (retinaldetachment,RD)时对视网膜神经细胞的保护作用。方法　 31只Spregue Dawley(SD)大鼠 (6 2只眼 )视网膜下注射透明质酸钠建立RD模型 ,分为 4个组 :NGF实验组 (2 1只眼 )、实验对照组 (2 1只眼 )、病理对照组 (14只眼 )和正常对照组 (6只眼 )。 2 1只SD大鼠右眼玻璃体腔内注射NGF 5 μl(浓度为 1g/L ,1次 / 4d) ,作为NGF实验组 ,左眼注射空白载体作为实验对照组 ,不用药物的 7只SD大鼠 (14只眼 )作为病理对照组。分别在建立RD模型后 12h ,1、2、4、8、16及 32d行光镜和电镜检查 ,进行形态学和细胞数目比较。结果　RD发生后NGF实验组和实验对照组视网膜可见光感受器细胞内、外节缺失、内外核层排列紊乱、神经细胞和神经纤维层水肿变性。实验对照组和病理对照组在镜下表现无明显差异 ,NGF实验组、实验对照组与病理对照组视网膜在RD后 1d镜下即产生明显差异 ,病变程度明显轻于病理对照组和实验对照组 ,以光感受器细胞的内、外节改变最为明显。当RD复位后 ,NGF实验组视网膜组织和细胞结构明显优于病理对照组和实验对照组。细胞计数结果显示 ,随着RD时间延长 ,视网膜细胞核数进行性下降 ,即使视网膜复位 ,各组细胞数仍少于正常对照     

视网膜脱离时神经生长因子对Mǖller细胞中间丝蛋白表达的影响

目的研究实验性视网膜脱离(RD)时外源性神经生长因子(NGF)对M櫣ller细胞功能的影响作用。方法29只SD大鼠建立RD模型,并分为NGF实验组、空白、单纯RD、正常对照共4组。在建立RD模型后观察1.5、3、6h,1/2、1、2、4、8、16、32d。NGF实验组在建立模型后每4d在玻璃体腔内注射NGF5μg/5μL/次,空白对照组注射空白载体作为对照。采用免疫组织化学方法对M櫣ller细胞的GFAP和vimentin进行标记。非参数统计方法分析。结果单纯RD组显示随脱离时间延长,二者在M櫣ller细胞的表达强度逐渐增强,分布范围变广。NGF实验组显示M櫣ller细胞内的二者表达强度低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论外源性NGF能抑制RD后M櫣ller细胞过度表达GFAP和vimentin,防止M櫣ller细胞过度反应。     

视网膜脱离时神经生长因子对Müller细胞中间丝蛋白表达的影响

目的研究实验性视网膜脱离(RD)时外源性神经生长因子(NGF)对Müller细胞功能的影响作用.方法29只SD大鼠建立RD模型,并分为NGF实验组、空白、单纯RD、正常对照共4组.在建立RD模型后观察1.5、3、6h,1/2、1、2、4、8、16、32d.NGF实验组在建立模型后每4d在玻璃体腔内注射NGF 5μg/5μL/次,空白对照组注射空白载体作为对照.采用免疫组织化学方法对Müller细胞的GFAP和vimentin进行标记.非参数统计方法分析.结果单纯RD组显示随脱离时间延长,二者在Müller细胞的表达强度逐渐增强,分布范围变广.NGF实验组显示Müller细胞内的二者表达强度低于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论外源性NGF能抑制RD后Müller细胞过度表达GFAP和vimentin,防止Müller细胞过度反应.     

神经再生素对实验性高眼压兔视网膜i-NOSmRNA表达的影响

目的探讨中药有效成分神经再生素（NRF）对实验性高眼压视网膜可诱导型一氧化氮合成酶（i-NOS）表达的影响。方法前房灌注法建立兔右眼实验性高眼压模型，分别给予NRF和磷酸盐缓冲液（PBS）。NRF组（n=6）在灌注前、灌注后4d、7d玻璃体腔内多点注射NRF4．5μg；PBS组（n=6）在灌注前、灌注后4d、7d玻璃体腔内注射等量0．1mol／LPBS；两组兔的左眼为正常对照组（n=12）。以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组兔眼视网膜i-NOS基因表达量。结果NRF组兔视网膜i-NOSmRNA的表达量低于PBS组（P=0．000），但高于左眼正常对照组（P=0．000）。结论神经再生素能抑制青光眼视网膜i-NOSmRNA的表达，对青光眼视网膜神经节细胞可能具有保护作用。     

神经生长因子对脱髓鞘性视神经炎小鼠视网膜神经组织保护作用的实验研究

目的 研究神经生长因子（NGF）对脱髓鞘性视神经炎小鼠视网膜神经组织的保护作用.方法 实验研究.50只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组（10只）、BSS组（20只）和NGF组（20只）,取右眼为实验眼.后两组应用MOG35-55多肽加完全弗氏佐剂皮下注射建立实验性视神经炎小鼠模型,每天对各组小鼠进行称重及神经功能评分.NGF组和BSS组分别于免疫后的第4天和第10天,对右眼进行玻璃体腔注射3μg/μl NGF或2 μl BSS.分别于免疫当天、免疫后的第7天和免疫后的第14天,对每组小鼠进行闪光视觉诱发电位（f-VEP）和闪光视网膜电图（f-ERG）检查;采用HE染色、LFB染色、Bielschowsky银染分别评估视神经炎性细胞浸润、髓鞘脱失、轴突病理改变;使用TUNEL法检测视网膜神经节细胞凋亡并计算凋亡指数.对两组实验数据采用t检验进行统计学分析.结果 NGF组与BSS组小鼠发病时间和临床评分比较,差异均无统计学意义（t=-1.844,P=0.079;t=-2.012,P=0.059）.在不同时间点,NGF组和BSS组的f-VEP差异均无统计学意义（P＞0.05）.在免疫后的第14天,NGF组f-ERG b波潜伏期较BSS组缩短,振幅较BSS组增大,两组差异有统计学意义（t=5.909,P=0.000;t=3.602,P=0.043）.LFB染色示,NGF组和BSS组视神经的脱髓鞘面积占横截面比例分别为（31.50±8.72）%、（29.91±10.00）%,差异无统计学意义（t=0.298,P=0.709）.TUNEL检测结果示,NGF组小鼠视网膜神经节细胞凋亡指数[（15.18±3.36）%]低于BSS组[（34.14±3.83）%],差异有统计学意义（t=11.790,P=0.000）.结论 NGF可以促进脱髓鞘性视神经炎小鼠视网膜神经节细胞的存活,对其视网膜神经组织可能具有一定的保护作用.     

更昔洛韦不同用药方式对实验性视网膜坏死的治疗效果

目的 观察更昔洛韦（GCV）不同给药途径治疗实验性急性视网膜坏死（ARN）的疗效。方法 用单纯疱疹病毒（HSV-1，COS株）感染41只青紫蓝兔的右眼，建立ARN动物模型。建模后24、72 h，分别用GCV以玻璃体腔注射（10只眼）、静脉注射（11只眼）以及玻璃体腔注射联合静脉注射（10只眼）三种方式对ARN动物进行治疗，另设GCV联合氟美松玻璃体腔注射组（6只眼）和未进行任何治疗的单纯模型对照组（4只眼）。GCV玻璃体腔注射剂量为800μg，静脉注射剂量为5 mg/kg体重。根据视网膜病变分级标准，在注射后1~21 d观察和记录视网膜坏死分级，对比观察不同用药方式组之间以及不同用药方式组与单纯模型对照组视网膜坏死分级的差异。结果 单纯模型对照组视网膜坏死分级为3.8级。建模后24 h进行治疗者，玻璃体腔注射、玻璃体腔注射联合静脉注射、GCV联合氟美松玻璃体腔注射、静脉注射组视网膜坏死分级分别为0.2、0.4、0.8、2.2级，前三组与静脉注射组视网膜坏死分级比较，差异有统计学意义（P=0.003，0.011，0.045），但前三组之间比较，差异无统计学意义（P=0.881，0.054，、0.107）；建模后72 h进行治疗者，4种给药方法治疗后病变都在1.4级以上，组间相互比较，差异无统计学意义（P=0.214）。结论 GCV玻璃体腔注射能有效降低实验性ARN视网膜坏死分级；玻璃体腔注射联合静脉注射、GCV联合氟美松玻璃体腔注射与单纯GCV玻璃体腔注射比较，视网膜坏死分级无明显差异。     

GM6001预防dispase诱导的兔眼增生性玻璃体视网膜病变

目的评价金属蛋白酶抑制剂GM6001对dispase诱导的兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的预防作用。方法健康成年的青紫蓝兔20只，采用dispase诱导的PVR动物模型，右眼玻璃体腔注射100μmol／LGM60010．05ml，左眼注射PBS作为对照，共观察6周。采用PVR分级评分进行临床观察，流式细胞学方法检测玻璃体细胞增生，免疫组织化学方法标记抗增生核抗原（PCNA），判断视网膜细胞增生状况。结果GM6001组与对照组的PVR分级评分分别是1．19和2．54，差异有显著统计学意义（P〈0．05）；GM6001组的玻璃体增生细胞数低于对照组（P〈0．05）；GM6001组PCNA阳性率低于对照组（P〈0．05）。结论GM6001玻璃体腔注射能抑制和延缓实验性PVR的发生。     

内源性促红细胞生成素对大鼠脱离视网膜光感受器细胞的保护作用

背景促红细胞生成素（EPO）对多种视网膜疾病模型中视网膜神经元具有一定的保护作用,但EPO对视网膜脱离（RD）后光感受器细胞是否具有保护作用尚不清楚。目的探讨内源性EPO对RD状态下光感受器细胞的保护作用及可能机制。方法利用视网膜下腔注射质量分数1．4％透明质酸钠建立大鼠RD模型,按每组情况各组玻璃体腔内分别单次注射PBS或不同剂量的外源性可溶性EPO受体（EPOsR）,采用计算机产生随机数字法将72只SD大鼠随机平均分为正常对照组、RD组、RD＋PBS组、RD＋EPOsR2、20、200ng组。分别于造模后3d和14d用过量麻醉法处死大鼠并获得大鼠视网膜标本,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测光感受器细胞的凋亡情况,并分别采用Westernblot和免疫荧光法检测视网膜中caspase-3的活性,RD造模后14d进行组织病理学检查并测量外核层（ONL）厚度。结果RD造模后3d,RD组ONL出现凋亡细胞核,玻璃体腔注射EPOsR组光感受器细胞凋亡进一步增加,随着玻璃体腔注射EPOsR的剂量增加,ONL凋亡细胞核有增加趋势。Westernblot和免疫荧光检测结果均显示,各组视网膜caspase-3表达的条带灰度值分别为（0．15±0．04）、（0．49±0．03）、（0．50±0．07）、（0．63±O．03）、（0．69±0．04）、（0．83±0．04）,各组的总体差异有统计学意义（F=76．016,P=0．000）,RD＋EPOsR200ng组的caspase-3活性均强于其他各组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。RD造模后14d,正常对照组、RD组、RD＋PBS组、RD＋EPOsR2、20、200ng组的ONL厚度分别为（47．39±3．39）、（33．96±3．54）、（31．83±5．21）、（31．40±2．63）、（24．99±2．06）、（19．30e3．71）μm,总体差异有统计学意义（F=44．733;P=0．000）;EPOsR处理组ONL厚度明显薄于单纯RD组和RD＋PBS组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论RD状态下,EPOsR通过剂量依赖的方式诱导视网膜细胞的凋亡和caspase-3活性增强,而缺氧状态下视网膜神经上皮的内源性EPO表达增强可通讨抑制casDase-3活性和抗凋亡作用发挥对光感受器细胞的保护作用。     

视网膜脱离模型中外源性促红细胞生成素对其受体表达的影响

目的探讨外源性促红细胞生成素（EPO）对促红细胞生成素受体（EPOR）在脱离的视网膜中表达的影响。方法通过视网膜下腔注射质量分数1.4%透明质酸钠在60只SD大鼠的右眼建立视网膜脱离（RD）模型,12只正常SD大鼠为正常对照组。不同组RD模型眼（每组12只眼）玻璃体腔内分别注射PBS或100、200、400ng重组大鼠源性EPO。玻璃体注射后3d应用Westernblot法半定量检测各组SD大鼠脱离的视网膜中EPOR蛋白表达水平的变化并进行比较,应用免疫组织化学法定位检测脱离的视网膜中EPOR蛋白的表达。结果 Westernblot检测结果表明大鼠正常视网膜中EPOR表达量少,为0.28±0.02;造模后3d,EPOR在脱离的视网膜中表达量明显增加,为0.41±0.05,差异有统计学意义（P〈0.05）。RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组EPOR蛋白的表达量分别为0.39±0.03、0.41±0.03、0.43±0.07、0.44±0.05,明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组间EPOR蛋白的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。RD组与RD＋不同剂量EPO组比较EPOR表达的差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组织化学检测结果证实EPOR蛋白表达于视网膜各层,RD＋不同剂量的EPO处理组EPOR表达均强于正常对照组。结论 RD发生后补充外源性EPO对EPOR的表达并无影响。     

睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压眼视网膜神经节细胞的保护作用

背景 青光眼可以引起视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡,据报道睫状神经营养因子(CNTF)对外伤性视神经损伤有修复作用,其是否对青光眼视神经病变有保护作用尚少见报道. 目的 观察CNTF对大鼠急性高眼压眼RGCs的保护作用.方法 24只Wistar大鼠双眼采用眼前房平衡盐液加压灌注法建立大鼠急性高眼压模型,造模前2d左眼玻璃体内注入0.5μg CNTF 5μl,右眼以同样的方法注射磷酸钠溶液5μl,另取3只正常大鼠作为正常对照.造模后1、3、7、14 d过量麻醉法处死动物并摘除眼球,制备视网膜组织学切片后采用苏木精-伊红染色法进行形态学观察,光学显微镜下计数RGCs数目;采用免疫组织化学染色法观察RGCs层谷氨酸的表达情况.结果 正常对照组大鼠视网膜各层排列整齐,细胞边界清晰;模型对照组大鼠RGCs细胞膜、细胞核均发现异常改变,有细胞空泡样变;CNTF治疗组大鼠造模后变性的RGCs数量少.与模型对照组比较,造模后3、7、14 d CNTF治疗组RGCs数目明显增加,差异均有统计学意义(均P=0.000).免疫组织化学染色表明,造模后3～7d,CNTF治疗组RGCs层谷氨酸阳性细胞数分别为(5.50±1.04)个／3个高倍视野和(6.00±1.41) 个/3个高倍视野,明显低于模型对照组的(9.00±2.91)个／3个高倍视野和(10.83±1.94)个／3个高倍视野,差异均有统计学意义(均P=0.000),而造模后1d和14 d两组间谷氨酸阳性细胞数的差异均无统计学意义(P=0.578、0.180).结论 CNTF能够下调急性高眼压眼谷氨酸在RGCs中的表达,从而对RGCs提供保护作用.     

人脐带间充质干细胞对大鼠视网膜光损伤的保护作用

目的　观察体外人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）能否由视网膜匀浆上清液诱导分化为神经样细胞及移植到视网膜光损伤大鼠玻璃体内后存活、迁移、整合及分化的情况。方法　无菌条件下采集健康足月剖宫产胎儿的正常脐带组织，经2.5 g·L^-1胰蛋白酶和1 g·L^-1胶原酶消化、贴壁培养获得hUCMSCs。将CM-Dil标记的hUCMSCs注入光损伤大鼠玻璃体内，观察眼内整合分化情况，对正常对照组、光损伤组、PBS治疗组和hUCMSCs治疗组大鼠视网膜外核层层数和厚度进行对比分析。结果　hUCMSCs培养48 h后贴壁生长，呈长梭形，14 d后可见细胞融合成片。光损伤后大鼠视网膜外核层结构紊乱、细胞层数减少，厚度变薄，与正常对照组［（40.73±1.32）μm］相比，hUCMSCs治疗组［（31.28±1.79）μm］与PBS治疗组［（17.21±1.02）μm］及光损伤组［（12.68±1.42）μm］的视网膜外核层厚度均变薄（均为P<0.05）。与光损伤组相比，PBS治疗组和hUCMSCs治疗组视网膜外核层层数显著增加。结论　HUCMSCs移植到光损伤大鼠玻璃体内后能存活、迁移及整合到受损伤视网膜，hUCMSCs玻璃体内移植可抑制光损伤大鼠光感受器的凋亡。     

出血性视网膜脱离模型的建立

目的探索在兔眼建立出血性视网膜脱离（hemorrhagic retinal detachment，HRD）模型的方法，为HRD损害及其救治的研究奠定基础。方法14只健康青紫蓝兔 28只眼，随机分为HR D组（12只眼）和对照组（16只眼）。HRD组兔眼用特制的玻璃微管直视下经玻璃体腔在视网膜下注入自体抗凝血0.2 ml，造成HRD。对照组兔眼用同样方法在视网膜下注入0.2 ml 含肝素钠（2.5 U/ml）的生理盐水(肝素盐水对照组，6只眼)或生理盐水（盐水对照组，3只眼），形成视网膜脱离（retinal detachment，RD）。并建立假注射对照（单纯视网膜穿刺而不注射，3只眼）和正常对照（2只家兔的4只正常眼）。手术后1 h~28 d行直接检眼镜、光相干断层扫描（optical coherence tomography，OCT）、A和（或）B型超声检查以观察和分析视网膜脱离的发生和表现。结果手术后HRD组兔眼均发生HRD，视网膜明显隆起，范围为10～12个视盘直径（disc diameter, DD），持续约14 d，28 d 时仍可见视网膜下部分血液残留。肝素盐水及盐水对照组兔眼均发生RD，该RD仅在手术后12 h内明显。假注射对照组兔眼视网膜穿刺孔多在手术后2 d内消失，正常对照组兔眼视网膜无变化。结论经玻璃体腔在兔眼视网膜下注入自体抗凝血建立HRD动物模型的方法简便、实用、有效。（中华眼底病杂志，2003，19：175-178）     

重组人促红细胞生成素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 制作Sprague-Dawley (SD)大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤模型,探讨腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对急性RIR损伤所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用及其对热休克蛋白72(HSP72)表达的影响.方法 采用前房灌注的方式建立RIR损伤模型,灌注压110 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),缺血时间1h;腹腔注射rHuEPO.78只SD大鼠随机分组:正常组6只,EPO组、EPO+槲皮黄酮组、RIR组各24只,均以右眼为实验眼.采用免疫组织化学法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)分别测定正常对照组和各实验组大鼠再灌注24h、48 h、72 h和1周视网膜中HSP72及凋亡细胞的表达,观察各组大鼠视网膜病理学改变.结果 ①正常组大鼠视网膜中HSP72表达微弱,各实验组大鼠视网膜中HSP72表达自再灌注12 h开始增强,24h达到高峰,随后逐渐减弱,72 h时表达稍高于正常.再灌注后各时间段,EPO组大鼠视网膜中HSP72表达均高于RIR组、EPO+槲皮黄酮组(P＜0.05).②正常大鼠视网膜中几乎没有凋亡细胞.再灌注后12 h,各实验组大鼠视网膜中可见凋亡细胞,24 h达高峰,48 h后凋亡细胞数逐渐减少;再灌注后各组大鼠视网膜中凋亡细胞数比正常组多(P＜0.05).③再灌注后,RIR组,EPO+槲皮黄酮组大鼠内层视网膜明显水肿,炎性细胞侵入,膜结构逐渐破坏;EPO组大鼠视网膜结构保持相对完整,炎性细胞相对较少.结论 ①HSP72在正常大鼠视网膜中表达微弱,RIR损伤后表达增多.腹腔注射EPO可以明显诱导大鼠视网膜中HSP72的表达增多.②EPO可以减少大鼠RIR损伤后视网膜细胞凋亡,减少视网膜内炎性细胞的浸润,保护视网膜结构,对视网膜具有明显的保护作用.其机制可能与使HSP72表达上调有关.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:30-35)     

Effects of nerve growth factor for retinal cell survival in experimental retinal detachment

PURPOSE: To investigate the neuron protective effect of recombined nerve growth factor (rNGF) on retinal cell damage induced by experimental retinal detachment. METHODS: Experimental retinal detachment models were created in Sprague-Dawley rats by subretinal injection of sodium hyaluronate. Intravitreal injection of rNGF (5 microg/eye) or phosphate-buffered saline (PBS) was separately applied every 4 days after retinal detachment. The rat eyes were then observed and sacrificed at various time points. Morphologic changes were observed by light microscopy, electron microscopy, and cell counts. Apoptosis of retinal cells was detected by TUNEL assay. RESULTS: After retinal detachment, most eyes from NGF-treated groups showed better organized structure of retinal cells than those from the PBS-treated control groups. Cell counts indicated that the nuclei numbers in the outer nuclear layer (ONL), inner nuclear layer (INL), and ganglion cell layer (GCL) of NGF-treated groups were significantly more than those from PBS-treated control group (p < 0.05) after retinal reattachment. TUNEL-positive cells were identified in ONL, INL, and GCL. They peaked at the fourth day after retinal detachment in both the NGF-treated groups and the control groups. But the cell counts of apoptosis revealed that the NGF-treated retina had less TUNEL-positive cells than the control groups (p < 0.05). CONCLUSIONS: The results showed that intravitreal injection of exogenous NGF can protect retinal cells from degeneration and apoptosis in experimental retinal detachment. It may exert its neuroprotection effect by preventing the apoptosis of retinal cells after retinal detachment.     

Safety and efficacy of intravitreal injection of recombinant erythropoietin for protection of photoreceptor cells in a rat model of retinal detachment

Purpose

To elucidate the safety and efficacy of exogenous erythropoietin (EPO) for the protection of photoreceptor cells in a rat model of retinal detachment (RD).

Methods

Recombinant rat EPO (400 ng) was injected into the vitreous cavity of normal rats to observe the eye manifestations. Retinal function was assessed by flash electroretinograms. Histopathological examination of retinal tissue was performed at 14 days and 2 months after injection, respectively. To investigate the inhibitory effect of EPO on photoreceptor cell apoptosis in RD rats, 100, 200, or 400 ng EPO was injected into the vitreous cavity immediately after RD model establishment. Apoptosis of photoreceptor cells was determined at 3 days after injection. Caspase-3 activation was measured by western blot analysis and immunofluorescence, respectively, and the level of Bcl-X_L expression was analyzed by western blot.

Results

Intravitreal injection of EPO 400 ng into normal rats had no significant impact on retinal function, morphology, or structure. Apoptosis of retinal photoreceptor cells apparently increased after RD and was significantly reduced following EPO treatment. The thickness of the outer nuclear layer in the RD+400 ng group was significantly thicker than that in other experimental RD groups both at 14 days and at 2 months after RD (P<0.05). Western blot and immunofluorescence analyses showed decreased caspase-3 activation and increased Bcl-X_L expression following EPO treatment.

Conclusion

Intravitreal injection of EPO 400 ng is safe, and EPO may suppress caspase-3 activation and enhance Bcl-X_L expression, resulting in inhibition of apoptosis and protection of photoreceptor cells.