七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1和水通道蛋白2在其中的作用

目的 探讨七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1(BSC1)和水通道蛋白2(AQP2)在其中的作用.方法 健康雄性SD大鼠24只,8～12周龄,体重125 ～145 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8)∶假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚组(Sev组).采用夹闭肾动脉45 min再灌注24 h的方法制备双侧肾脏缺血再灌注损伤模型.Sev组吸入1 MAC(2.2％)七氟醚,意识消失后开始制备模型,并吸入1 MAC(2.2％)七氟醚3h.于模型制备前24 h(T1)和再灌注24 h(T2)时采集尿样,记录尿量,测定尿比重、肌酐(Cr)水平,计算内生肌酐清除率(Ccr);T2时采集下腔静脉血样,测定血清BUN和Cr、MDA浓度、SOD和髓过氧化物酶(MPO)活性浓度;取血后取左侧肾脏,观察肾组织病理学结果,进行肾小管损伤程度评分,测定肾组织SOD和MPO活性、MDA含量,分别采用免疫组化法和Western blot法测定AQP2和BSC1的表达.结果 与S组比较,I/R组和Sev组T2时尿量增加,血清BUN和Cr浓度升高,尿比重和Ccr降低,血清和肾组织MPO、MDA水平升高,SOD活性降低,肾小管损伤评分升高,肾组织AQP2和BSC1表达水平下调(P＜0.05);与I/R组比较,Sev组Ccr升高,血清BUN和Cr浓度降低,血清和肾组织MPO、MDA水平降低,SOD活性升高,肾小管损伤评分降低,肾组织AQP2和BSC1表达水平上调(P＜0.05),尿量和尿比重差异无统计学意义(P＞0.05),肾组织病理学损伤减轻.结论 七氟醚可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与上调BSC1和AQP2的表达有关.     

大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注自由基变化对肾功能影响实验研究

目的 探讨大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注自由基变化对肾功能的影响及其作用机制.方法 Wistar大鼠42只,随机分为对照组,缺血5 h组,缺血5 h分别再灌注2、4、8、12 h组,每组7只.检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及血浆和肾组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,光镜观察各组大鼠肾脏及下肢肌肉形态学变化.结果 缺血及再灌注组大鼠BUN水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),在I/R4 h组达到最高,随后下降;各组间Cr差异无统计学意义.大鼠血浆MDA水平在对照组与I组,L/R 2 h组,I/R4 h组,I/R 8 h组,I/R 12 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05),血浆MDA水平在I/R 4 h组达到高值,随后下降.大鼠血浆SOD水平在对照组与I/R 4 h组,I/R 8 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肾组织匀浆SOD水平在I/R4 h组与对照组,I组,I/R 2 h组,I/R 8 h组.I/R 12 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05),SOD水平在I/R 4 h组达到低值,随后升高.光镜观察缺血组肾脏及下肢肌肉组织可见轻度损伤,再灌注组肾脏及下肢肌肉组织损伤程度较缺血组重.结论 大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注可造成肾功能异常,与缺血再灌注所激发的自由基合成及释放增多有关.     

细胞穿透肽PEP-1导入血红素加氧酶-1蛋白对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价细胞穿透肽PEP-1导入血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠18只,周龄7～9周,体重210 ～ 260 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和融合蛋白PEP-1/HO-1+肾缺血再灌注组(HO组).采用夹闭双侧肾动脉45 min恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注损伤模型.HO组于夹闭双侧肾动脉前30 min时静脉注射融合蛋白PEP-1/HO-1.于再灌注6h时取右侧颈总动脉血样,测定血清BUN和Cr浓度;取肾组织检测MDA含量和SOD活性;采用免疫组化法检测肾组织HO-1的表达.结果 与S组比较,I/R组和HO组肾组织MDA含量、血清BUN和Cr浓度升高,肾组织SOD活性降低,HO-1蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,HO组肾组织MDA含量、血清BUN和Cr浓度降低,肾组织SOD活性升高,HO-1蛋白表达上调(P＜0.05).结论 细胞穿透肽PEP-1将HO-1蛋白成功导入肾组织,导入的HO-1蛋白通过抑制脂质过氧化反应减轻肾缺血再灌注损伤.     

缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重250～280 g,随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)、缺血后处理组(IPo组)和缺血预处理联合后处理组(IP+IPo组).S组仅开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂但不夹闭.采用夹闭双侧肾蒂45 min、再灌注6 h的方法 制备肾缺血再灌注模型.IP组夹闭双侧肾蒂5 min,再灌注5 min,反复3次,余操作同I/R组;IPo组夹闭双侧肾蒂45 min后,再灌注10 8,缺血10 s,反复3次,再灌注6 h.于再灌注6 h时,经心脏抽血后迅速处死大鼠取肾,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的浓度;采用硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜下观察肾组织病理学结果 ;TUNEL法检测肾组织凋亡细胞,计算凋亡指数(AJ).结果 与S组比较,其余各组血清Cr和BUN的浓度升高,肾组织SOD活性降低,MDA含量和AI升高(P<0.05);与I/R组比较,IP组、IPo组和IP+IPo组血清Cr和BUN的浓度降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量和AJ降低(P<0.05),肾损伤减轻;与IP组和IPo组比较,IP+IPo组肾组织SOD活性升高,AI降低(P<0.05),肾损伤减轻.结论 缺血预处理联合后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,较单独应用时效果好.     

七氟醚预先给药对大鼠心肌缺血再灌注损伤时胱硫醚β-合酶和血红素氧合酶-1表达的影响

目的 评价七氟醚预先给药对大鼠心肌缺血再灌注损伤时胱硫醚β-合酶(CBS)和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠30只,体重180～220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和七氟醚组(Sev组).结扎左冠状动脉前降支,缺血30 min,再灌注2h,制备心肌缺血再灌注损伤模型.Sev组于缺血前吸入七氟醚,呼气末浓度1.5％～1.7％,60 min后制备心肌缺血再灌注损伤模型.于再灌注2h时处死大鼠,取心肌组织,测定MDA含量(硫代巴比妥酸法)、SOD活性(黄嘌呤氧化酶法)、GSH含量(荧光法)、H2S含量(分光光度法)、CO含量(分光光度法)、CBS mRNA和HO-1 mRNA表达(RT-PCR法),电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与S组比较,I/R组和Sev组CO、H2S、MDA含量和心肌细胞线粒体变性率升高,CBS mRNA和HO-1 mRNA表达上调,SOD活性及GSH含量降低(P＜0.05);与I/R组比较,Sev组CO、H2S、MDA含量和心肌细胞线粒体变性率降低,CBS mRNA和HO-1 mRNA表达下调,SOD活性和GSH含量升高(P＜0.05).结论 七氟醚预先给药减轻心肌缺血再灌注损伤的机制与下调CBS和HO-1的表达有关.     

α-硫辛酸对肾缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 评价α-硫辛酸对肾缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 健康雄性SD大鼠36只,体重250～280 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和α-硫辛酸组(L组),每组12只.I/R组和L组采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注损伤模型,S组不夹闭双侧肾蒂.L组于夹闭前20 min和再灌注前20 min分别尾静脉注射α-硫辛酸30 mg/kg,I/R组分别尾静脉注射等容量溶剂(35％聚乙二醇+60％生理盐水+5％乙醇).于再灌注24h抽取腹主动脉血,测定血清肌酐(Cr)和MDA浓度,随后处死大鼠取心脏,测定心肌MDA含量和SOD活性,采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,采用免疫组化法测定心肌细胞Bcl-2及Bax的表达,计算Bcl-2/Bax比值.结果 与S组相比,I/R组和L组血清Cr和MDA浓度、心肌MDA含量和心肌细胞凋亡率升高,SOD活性降低,I/R组Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05);与JR组相比,L组血清Cr和MDA浓度、心肌MDA含量和心肌细胞凋亡率降低,SOD活性升高,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).结论 α-硫辛酸可减轻肾缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤,与抑制心肌细胞凋亡有关.     

七氟醚预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价七氟醚预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠24只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚预处理组(SP组).I/R组和SP组采用切除右肾然后夹闭左侧肾动脉45 min再开放的方法 制备肾缺血再灌注模型.SP组吸入2.2%七氟醚1 h,停止吸入后10 min时进行肾缺血.于再灌注2 h时采集静脉血样,测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和胱抑素C(Cys C)的浓度,取肾组织,光镜下及透射电镜下观察病理学结果,并根据肾小管病变程度进行Paller评分.结果 与S组比较,I/R组血清Cr和BUN浓度差异无统计学意义(P＞0.05),血清Cys C浓度和Paller评分明显升高(P＜0.05);与I/R组比较,SP组血清Cys C浓度和Paller评分明显降低(P＜0.05).SP组肾组织损伤程度轻于I/R组.结论 七氟醚预处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effects of sevoflurane preconditioning on renal ischemia-reperfusion(I/R)injury in rats.Methods Twenty-four adult male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 3 groups(n=8 each):sham operation group (group S);I/R group; sevoflurane preconditioning group (group SP). After the rats underwent right nephrectomy, renal I/R was produced by occlusion of left renal artery for 45 min followed by reperfusion in I/R and SP groups.In group SP, the rats inhaled 2.2% sevoflurane for 1 h, then the inhalation was stopped and renal ischemia was performed 10 min later. Venous blood samples were collected at 2 h of reperfusion to determine the concentrations of serum creatinine(Cr), urea nitrogen (BUN), cystatin C (Cys C) . The renal tissues were obtained for microscopic examination, and Paller's score was recorded. Results Compared with group S, there was no significant difference in the serum Cr and BUN concentrations (P＞0.05), while the serum Cys C concentration and Paller's score for acute renal tubular injury were significantly increased in group I/R(P＜0.05). The serum Cys C concentration and Paller's score were significantly lower in group SP than in group I/R(P＜0.05).I/R-induced renal injury was significantly reduced in group SP compared with group I/R. Conclusion Preconditioning with sevoflurane can provide significant protection against renal I/R injury.     

阿片受体在瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨阿片受体在瑞芬太尼减轻肾脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠75 只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=15):假手术组(S组)、肾脏缺血再灌注损伤组(I/R组)、瑞芬太尼组(R组)、纳洛酮组(N组)、纳洛酮+瑞芬太尼组(NR组).采用夹闭双侧肾动脉45 min再恢复灌注的方法制备大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型.R组和NR组于缺血前15 min至再灌注30 min尾静脉输注瑞芬太尼1.0 μg·kg-1 ·min-1,S组、I/R组和N组输注等容量生理盐水;N组和NR组于缺血前20 min及间隔55 min分别尾静脉注射纳洛酮0.3 mg/kg,S组,I/R组和R组注射等容量生理盐水.再灌注24 h时采集股静脉血样和抽取膀胱尿样,用于测定血清Cr和BUN浓度及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平.随后取肾组织,采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸法分别测定SOD活性及MDA含量,并于光镜下观察肾脏病理学结果.结果 与S组比较,其他4组血清Cr和BUN浓度、尿NAG和γ-GT水平及肾组织MDA含量升高,SOD活性降低(P＜0.05或0.01),其肾组织有不同程度病理学损伤.与I/R组比较,R组血清Cr和BUN浓度,尿NAG和γ-GT水平及肾组织MDA含量降低,SOD活性升高(P＜0.01),其肾组织病理学改变明显减轻;而N组和NR组以上各指标的差异无统计学意义(P＞0.05),肾组织病理学改变相似;与R组比较,N组和NR组血清Cr和BUN浓度、尿NAG和γ-GT水平及肾组织MDA含量升高,SOD活性降低(P＜0.05或0.01).结论 阿片受体介导了瑞芬太尼减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用.     

臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的热休克蛋白表达的影响

目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体蕈,每日 1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSP70的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSPT0表达明显增强(P<0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.     

七氟醚后处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响

目的 评价七氟醚后处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠36只,体重200 ～ 220 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=9)∶假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(Ipo组)和七氟醚后处理组(Sevo组).I/R组、Ipo组Sevo组采用结扎肠系膜上动脉60 min,再灌注120min的方法制备肠缺血再灌注模型.Ipo组于再灌注即刻恢复血流30 s后再阻断30 s,重复3次行后处理.Sevo组于再灌注即刻吸入1.15％七氟醚30 min行后处理.再灌注120 min时,处死大鼠,取小肠组织,采用Chui评分法行病理学损伤评分;采用TUNEL法计算凋亡细胞密度;采用比色法检测MDA含量和SOD活性;采用Western blot法检测caspase-3蛋白表达.结果 与Sham组相比,I/R组、Sevo组和Ipo组病理学损伤评分、凋亡细胞密度和MDA含量均升高,SOD活性降低,caspase-3蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组相比,Sevo组和Ipo组病理学损伤评分、凋亡细胞密度和MDA含量均降低,SOD活性升高,caspase-3蛋白表达下调(P＜0.05);Sevo组和Ipo组病理学损伤评分、凋亡细胞密度、MDA含量、SOD活性和caspase-3蛋白表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 七氟醚后处理可通过减轻脂质过氧化反应和减少细胞凋亡,减轻大鼠肠缺血再灌注损伤,其保护效应与缺血后处理相似.     

羟考酮预给药对大鼠肾缺血-再灌注损伤的影响

目的评价羟考酮预给药对大鼠肾缺血-再灌注损伤的影响。方法健康成年雄性SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其分为三组(n=10),假手术组(S组):仅切除右肾、分离左侧肾动脉、肾静脉和输尿管;缺血-再灌注组(IR组):切除右侧肾脏,夹闭左侧肾动脉和肾静脉45min恢复灌注2h;羟考酮预给药+缺血-再灌注组(O组):缺血-再灌注前5min静脉注射羟考酮2mg/kg。于再灌注2h时经腹主动脉采集动脉血样,血清尿素氮(BUN)浓度采用脲酶法测定,血清肌酐(Cr)浓度采用速率法测定。处死大鼠,取部分左肾组织,超氧化物歧化酶(SOD)活性采用黄嘌呤氧化酶法测定,丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法测定。采用Western blot检测肾组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关x蛋白(bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果与S组比较,IR组和O组血清BUN和Cr的浓度明显升高(P0.05),肾组织MDA的含量明显升高,SOD活性明显降低(P0.05),肾组织bax、Caspase-3蛋白表达明显升高(P0.05),而bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05)。与IR组比较,O组血清BUN和Cr的浓度明显降低(P0.05),肾组织MDA的含量明显降低,SOD活性明显升高(P0.05)肾组织bax、Caspase-3蛋白表达明显降低(P0.05),而bcl-2蛋白表达明显升高(P0.05)。结论羟考酮预给药可减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤,其机制可能与其抑制肾组织氧化应激反应和细胞凋亡有关。     

不同剂量瑞芬太尼对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同剂量瑞芬太尼对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠60只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、模型组(M组)、低、中和高剂量瑞芬太尼组(RL组、RM组和RH组).除S组外均采用夹闭双侧肾动脉45 min后恢复再灌注法建立肾脏缺血再灌注模型.RL组、RM组和RH组于缺血前15min分别经尾静脉输注瑞芬太尼0.2、0.6、1.0μg·kg-1·min-1至再灌注30 min;S组和M组给予等容量生理盐水替代.于再灌注30 min及24 h时经股静脉采集血样1 ml,测定血清BUN及Cr浓度;于再灌注24h时取肾组织,测定MDA含量及SOD、Ca2+-ATP酶活性,光、电镜下观察肾组织病理学结果.结果 与S组比较,其余4组血清BUN和Cr浓度、肾组织MDA含量升高,SOD和Ca2+-ATP酶活性降低(P＜0.05或0.01),肾组织有不同程度的病理学损伤.与M组比较,RL组、RM组和RH组血清BUN和Cr浓度、肾组织MDA含量降低,SOD和Ca2+-ATP酶活性升高(P＜0.05或0.01),肾组织病理学损伤减轻o RL组、RM组和RH组随瑞芬太尼剂量增加,血清BUN和Cr浓度、肾组织MDA含量逐渐降低,SOD和Ca2+-ATP酶活性逐渐升高(P＜0.05或0.01),肾组织病理学损伤逐渐减轻.结论 瑞芬太尼可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,且与剂量有关,其机制与抑制脂质过氧化反应、提高Ca2+-ATP酶活性有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different doses of remifentanil on the renal ischemiareperfusion (I/R) injury in rats. Methods Sixty male SD rats weighing 220-250 g were randomly divided into 5 groups ( n = 12 each): sham operation group (group S), model group (group M), low, median and high doses of remifentanil groups (RL, RM and RH groups). The rats were anesthetized with intraperitoneal 5% chloral hydrate 6 ml/kg. Renal ischemia was induced by clamping the bilateral renal arteries for 45 min using an atraumatwere infused via the caudal vein 15 min before ischemia respectively and the infusion was stopped at 30 min of reperfusion, while S and M groups received equal volume of normal saline instead. Blood samples were collected from the femoral vein at 30 min and 24 h of reperfusion for measurement of serum creatinine (Cr) and blood urea nitrogen (BUN) concentrations. The rats were sacrificed at 24 h of reperfusion and the renal tissues were removed for determination of MDA content, SOD and Ca2+ -ATPase activities. Pathological changes in renal tissues were observed with light and electron microscopes. Results Compared with group S, the concentrations of serum Cr and BUN and content of MDA were significantly increased, while activities of SOD and Ca2+ -ATPase were significantly decreased in the other 4 groups ( P ＜ 0.05 or 0.01). Compared with group M, the concentrations of serum Cr and BUN and content of MDA were significantly decreased, activities of SOD and Ca2+ -ATPase were significantly increased (P ＜0.05 or 0.01) and the pathological changes were reduced in RH, RM and RL groups. The plasma BUN and Cr concentrations and MDA content were decreased gradually and SOD and Ca2+ -ATPase activities were increased gradually with the increase in the doses of remifentanil in RL, RM and RH groups ( P ＜ 0.05 or 0.01 ).Remifentanil infusion significantly attenuated the pathologic changes in a dose-dependent manner. Conclusion Remifentanil can reduce the renal I/R injury in a dose-dependent manner by inhibiting lipid peroxidation and increasing Ca2+ -ATPase activity.     

罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的研究罗格列酮对肾缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法将60只大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注损伤组、罗格列酮10 mg/kg组、罗格列酮20 mg/kg组、罗格列酮40 mg/kg组和罗格列酮80 mg/kg组,每组各10只。利用血管夹夹闭大鼠双侧肾蒂构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达量;Western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和p-PPAR-γ表达水平;RT-PCR检测肾脏IL-8、TNF-α和IL-6信使核酸序列(mRNA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法检测丙二醛(MDA)的含量;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,缺血再灌注损伤组肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6、p-PPAR-γ以及MDA表达水平均明显增加,而CAT、GPX和SOD活性明显降低以及PPAR-γ表达差异无统计学意义;与缺血再灌注损伤组相比,罗格列酮预处理可明显减少肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6以及MDA表达水平,但可明显增加CAT、GPX和SOD活性以及p-PPAR-γ表达水平,但对PPAR-γ表达水平无影响。结论罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护,其作用机制与激活PPAR-γ抑制氧化应激和炎症相关。     

缺血后处理减轻犬肾缺血再灌注损伤的作用

目的 探讨缺血后处理减轻犬肾缺血再灌注损伤的作用及其相关机制.方法 随机将犬分为假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,每组5只.假手术组:犬麻醉后,取其腹正中切口进入腹腔,游离双侧肾脏,切除右肾后,关腹.缺血再灌注组:手术操作与假手术组相同,仅在切除右肾和游离左肾之后,将左肾动、静脉夹闭60 min,然后开放血管.缺血后处理组:手术操作与缺血再灌注组相同,仅在肾动、静脉被夹闭60 min后,以再灌注(开放血管)30 s、夹闭血管30 s为1个循环,共进行6次循环,然后完全放开血管.分别于术后24、48及72 h采集犬静脉血2 ml,使用全自动生化分析仪测定各组犬血清肌酐(Cr)和尿素氮(BIJN)水平;术后第3天取犬肾组织,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用化学比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性,并观察犬肾组织的病理改变和细胞凋亡情况.结果 术后各时间点,缺血再灌注组、缺血后处理组和假手术组犬的血清Cr和BUN水平均依次降低,3组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).术后第3天,缺血再灌注组、缺血后处理组和假手术组犬肾组织中SOD活性依次升高,而MDA含量和MPO活性均依次降低,3组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).假手术组肾小球和肾小管结构正常,未见明显病理改变;缺血再灌注组肾间质水肿,大量炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞刷状缘消失,大量上皮细胞坏死、脱落,管腔扩张,其中可见大量管型;缺血后处理组可见肾间质轻度水肿,肾小管上皮细胞扁平,部分刷状缘消失、坏死,偶见管型,管周血管有少量淤血.假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组犬肾的细胞凋亡指数分别为2.7±1.3、28.4±6.2和15.4±4.1,3组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 缺血后处理能减轻犬肾缺血再灌注损伤,其机制可能与缺血后处理减少氧自由基的产生、抑制细胞凋亡及减少炎症细胞浸润有关.     

外源性硫化氢抑制TLR2和TLR4表达并减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的观察外源性硫化氢(H₂S)供体硫氢化钠(NaHS)能否抑制Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达、减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)。 方法24只6~8周龄雄性SD大鼠随机分为3组：假手术(Sham)组、肾脏缺血再灌注(I/R)组、NaHS+I/R组。采用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法诱导肾IRI。夹闭左肾动脉前，NaHS+I/R组给予NaHS(300 nmol/min)连续输注10 min，Sham组和I/R组则给予等体积生理盐水。分别留取各组腹主动脉血及肾组织标本。Western印迹法检测肾组织TLR2、TLR4蛋白的表达；免疫组织化学法检测肾组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达；比色法检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。HE染色观察肾脏组织学改变；TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。 结果与Sham组比较，I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均增加(P<0.05)，BUN、Scr亦明显升高(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较高(P<0.05)，肾组织凋亡细胞增加(P<0.05)。与I/R组比较，NaHS+I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均减少(P<0.05)，BUN、Scr亦明显下降(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较低(P<0.05)，肾组织凋亡细胞减少(P<0.05)。 结论外源性H₂S可以抑制TLR2、TLR4途径，减少炎症因子释放及细胞凋亡，减轻大鼠肾脏IRI。     

丙泊酚对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨丙泊酚预处理对急性肾缺血再灌注损伤(acute renal ischemia reperfusion injury ,ARIRI)的保护作用及其机制.方法 采用完全随机研究设计(randomized controlled trial,RCT),健康近交系清洁级的雄性SD大鼠63只,随机分为3组:假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、丙泊酚预处理组(C组),每组21只SD大鼠.采用切除右侧肾,用无损伤微动脉夹夹闭左侧肾蒂60分钟后解除阻断,建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型.用24号套管针股静脉穿刺置管,实验过程中各组使用微量注射泵注入不同注射液.分别于手术前15分钟、再灌注后2小时、24小时留取血和肾组织标本同时处死大鼠,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及观察这三个时点肾组织的病理学改变.结果 丙泊酚预处理组各个时点的肾组织病理学变化均轻于缺血再灌注组.缺血再灌注组中血清BUN、Cr、MDA和TNF-α水平增加均高于丙泊酚预处理组(p＜0.05),丙泊酚预处理组血清SOD、IL-6水平均高于缺血再灌注组(p＜0.05).结论 丙泊酚预处理组血清BUN、Cr、MDA、TNF-α、SOD、IL-6水平与缺血再灌注组均有统计学差异.结果 表明丙泊酚能减少氧自由基释放,抑制和减少炎症反应,在急性肾缺血再灌注损伤能起到保护肾脏的作用.     

七氟醚预先给药对大鼠肾脏缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 探讨七氟醚预先给药对大鼠肾脏缺血再灌注时细胞凋亡的影响.方法 健康清洁级雄性SD大鼠30只,体重220～260 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚组(S组).I/R组和S组采用夹闭左肾蒂45 min后恢复再灌注的方法 建立肾脏缺血再灌注模型,C组腹部正中切口,右肾切除,左肾蒂游离后,缝合腹腔;S组模型制备前30 min开始吸入2.2%七氟醚和氧气的混合气体至再灌注3 h.于再灌注3 h时采集下腔静脉血样5 ml,测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度,然后取肾组织,光镜下观察肾组织病理学结果,TUNEL法检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数,采用RT-PCR和Western blot法测定血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平.结果 与C组比较,I/R组和S组血清BUN、Cr浓度、肾脏近曲小管坏死程度、细胞凋亡指数升高,HO-1 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,S组血清BUN、Cr浓度、细胞凋亡指数、肾脏近曲小管坏死程度降低,HO-1 mRNA表达上调(P＜0.05).结论 七氟醚预先给药可通过抑制细胞凋亡而减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,其抑制细胞凋亡作用可能与HO-1 mRNA表达上调有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of sevoflurane pretreatment on renal ischemia-reperfusion (I/R)-induced apoptosis in kidney in rats. Methods Thirty pathogen-free male SD rats weighing 220-260 g were randomized into 3 groups (n=10 each):group control (group C);group I/R and group sevoflurane(group S). Renal I/R was induced by clamping the left renal pedicle for 45 min in I/R and S groups. In group S inhalation of 2.2% sevoflurane in O2 was started at 30 min before operation and maintained throughout the experiment.Venous blood samples were taken at 3 h of reperfusion for determination of serum BUN and Cr concentrations. The animals were then sacrificed and the left kidneys were removed for microscopic examination, detection of apoptosis(by TUNEL)and determination of heme oxygenase-1(HO-1) mRNA and protein expression (by RT-PCR and Western blot).Results Renal I/R significantly increased serum BUN and Cr concentrations, apoptotic index(percentage of apoptotic cells) and the severity of necrosis of renal proximal convoluted tubules (0=normal,4=necrosis of whole segment of proximal convoluted tubules).Sevoflurane inhalation attenuated the I/R-induced changes mentioned above.HO-1 mRNA and protein expression was up-regulated by I/R and HO-1 mRNA expression was further up-regulated by sevoflurane inhalation.Conclusion Sevoflurane pretreatment can protect kidney against I/R injury by attenuating cell apoptosis.Up-regulation of HO-1 mRNA expression may be involved in the mechanism.