胆汁胆固醇对胆囊收缩素受体表达的影响

目的　探讨胆汁胆固醇对胆囊收缩素受体 (CCK R)表达的影响。　方法　采用放射免疫分析法和受体放射配基结合法检测对照组 (n =2 5 )、高胆固醇组 (n =2 5 )、自然恢复组 (n =2 5 )及治疗组 (n =2 5 )豚鼠门静脉血CCK水平、胆囊CCK R的最大结合容量 (Bmax)和亲和力 (Kd) ,同时观察空腹胆囊体积 (FV)、胆囊胆汁量 (FB)和餐后胆囊体积 (RV)、胆囊胆汁量 (RB)及胆囊收缩率 (E)、胆汁胆固醇浓度的变化。　结果　与对照组比较 ,高胆固醇组豚鼠FV[(0 89± 0 2 6 )～ (1 34± 0 6 1)cm3 ]、FB[(0 6 8± 0 2 0 )～ (1 0 1± 0 4 3)cm3 ]、RV[(0 2 8± 0 0 8)～ (0 90± 0 5 3)cm3 ]、RB[(0 2 3± 0 0 6 )～(0 83± 0 32 )cm3 ]增大 ,E[(6 5 83± 7 32 ) %～ (47 2 2± 5 2 4 ) % ]下降 ,胆汁胆固醇浓度 [(0 4 4±0 11)～ (0 6 0± 0 13)mmol/L]升高 ,门静脉血CCK水平及CCK R的Kd无改变 ,而CCK R的Bmax[(6 0± 2 7)～ (32± 13)fmol/mg蛋白 ]下降 ;与自然恢复组比较 ,治疗组上述各项指标正常。　结论　胆汁中的高胆固醇通过下调胆囊CCK R表达而导致胆囊收缩功能障碍 ,降低胆汁高胆固醇浓度可以促进胆囊动力功能的恢复。     

胆囊幽门螺杆菌感染与胆囊壁胆囊收缩素受体mRNA表达的关系

目的探讨胆囊幽门螺杆(Hp)菌感染与胆囊壁胆囊收缩素(CCK-A)受体mRNA表达的关系。方法采用对照研究方法对35例单纯胆囊结石患者(实验组)及25例单纯胆囊息肉样病变患者(对照组)的胆囊排空功能进行检测,用聚合酶链反应(PCR)方法检测两组患者的胆汁Hp细胞毒素相关基因抗原(cagA),用逆转录(RT)-PCR方法检测两组患者胆囊壁CCK-A受体mRNA的表达。结果实验组空腹胆囊体积、胆囊排空率均低于对照组,差异有统计学意义(t=3．694,t=3．484,P＜0．05)；实验组胆囊壁CCK-A受体mRNA的相对表达量(1．2±0．3)%低于对照组(13．6±5．7)%,差异有统计学意义(t=4．39,P＜0．05),并且,胆囊壁CCK-A受体mRNA表达的变化与胆囊排空率呈显著正相关(r=0．874,P＜0．05)；实验组胆汁标本中Hp cagA基因7例阳性(20．0%,7/35),对照组胆汁标本均阴性。两组胆汁Hp cagA检出率差异有统计学意义(x~2=3．886,P＜0．05),且胆汁Hp cagA基因检出与胆囊壁CCK-A受体mRNA的表达量相关,差异有统计学意义(X~2=3．886,P＜0．05)。结论胆囊结石患者中胆囊壁CCK-A受体基因表达下调,基因表达量的降低与胆囊排空功能障碍有关,胆囊Hp感染可能参与了这一病理生理过程。     

胆囊收缩素-A受体在胰腺癌细胞Panc-1中的表达及相关作用

目的 探讨胰腺癌细胞Pane-1中胆囊收缩素-A受体（CCK-AR）的表达及其相关作用。方法 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Pane-1细胞表面CCK-AR的表达情况，不同浓度的CCK-AR激动剂CCK-SS、拮抗剂Lorglumide分别与Pane-1细胞共同培养，噻唑蓝（MTT）比色法、流式细胞术、TUNEL法和侵袭试验分别观察细胞的生长情况、周期改变、凋亡发生以及侵袭能力变化，Western blot法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达变化情况。结果 Pane-1细胞表面存在CCK-ARmRNA的表达，与对照组生长细胞数（70．2±1．5）及侵袭细胞数（102．1±2．7）比较，CCK-8S作用下Pane．1细胞数（85．1±1．7）明显增加，s期细胞比例增多，体外侵袭细胞数（123．8±1．1）显著增多，MMP-2的表达量增加，而Lorglumide则明显抑制Pane-1细胞（52．1±1．8）的生长，细胞被阻滞于G0／G1期，凋亡发生增多，同时显著抑制Pane-1细胞（77．6±0．9）的体外侵袭及MMP-2的表达，CCK-8S组、Lorglumide组分别与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 CCK-8S可能通过“CCK-CCK-AR”途径促进Pane-1细胞增殖、侵袭，而Lorglumide在一定程度上抑制这一恶性生物学行为。     

胆石病患者胆囊收缩素受体与胆囊动力关系的研究

研究胆囊平滑肌的胆囊收缩素-A受体(CCK-R)与胆囊动力的关系。方法:B超测定10例无胆石的正常者和33例胆囊结石患者的胆囊动力。采用放射配基法测定33例患者的胆囊和8例意外创伤死亡者正常胆囊中CCK-R含量和活性。根据无胆石正常者的胆囊残余指数,将胆石患者分为胆囊收缩“正常”组(14例)和收缩减弱组(19例),而将10例无胆石正常者和8例意外死亡者列为正常对照者。结果:收缩减弱组的CCK-R含量和活性都显著低于正常对照组(P<0.01),也显著低于收缩“正常”组。收缩“正常’组的CCK-R活性显著低于正常对照组(P<0.01),但含量与正常对照组无明显差异。CCK-R含量和活性分别与胆囊排空率相关(r=0.964,r=0.635,P<0.01)。结论:胆囊胆汁郁积在胆囊收缩“正常”组是由于胆囊空腹容积增加、胆囊CCK-R活性降低,在胆囊收缩减弱组是由于胆囊CCK-R含量和活性的降低。     

胆囊收缩素及胃泌素对体内生长胆管癌细胞增殖的影响

目的 探讨胆囊收缩素（ＣＣＫ）、胃泌素（ｇａｓｔｒｉｎ）对体内生长胆管癌细胞增殖的影响。方法 将胆管癌细胞ＱＢＣ９３９（ＱＢ）接种在裸鼠背部皮下，１４ｄ后皮下注射ＣＣＫ、胃泌素或／和胆囊收缩素－Ａ受体拮抗剂Ｌ３６４，７１８（Ｌ１８）、胆囊收缩素－Ｂ／胃泌素受体拮抗剂Ｌ３６５，２６０（Ｌ６０），治疗３周后活杀，计算移植瘤体积及重量并用流式细胞仪测定增殖指数和蛋白质总量。结果 ＣＣＫ－８硫酸盐（ＣＣＫ     

胰腺癌胆囊收缩素-A受体基因表达的研究

胆囊收缩素 (ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎ ,ＣＣＫ)是人体正常胰腺生长过程中的一个重要调节介质 ,而且在胰腺癌的发生中也起重要作用[1] ,通过检测其受体可能有助于胰腺癌的诊断和治疗。我们以逆转录聚合酶链反应 (ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｐｏｌｙ ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＲＴ ＰＣＲ)法初步检测了多种胰腺疾病时胰腺组织中ＣＣＫ Ａ受体基因ｍＲＮＡ表达 ,报告如下。1.材料与方法 :取 34例胰腺组织标本 ,包括正常胰腺组织 11例 ,胰腺癌 16例 ,慢性胰腺炎 4例 ,胰腺良性肿瘤 3例。组织标本经手术…     

胆囊结石病胆囊排空与缩胆囊素受体基因表达关系的研究

目的探讨胆石病患者缩胆囊素（ＣＣＫＡ）受体基因表达及其与胆囊排空功能的关系。方法２０例单纯胆囊结石病患者和１０例健康正常人,术前用Ｂ超测定胆囊排空功能,另以８例因意外死亡无胆囊结石患者胆囊标本为测定ＣＣＫＡ受体基因表达的正常对照。ＣＣＫＡ受体ｍＲＮＡ表达的测定用ＲＴＰＣＲ方法。结果胆石病组胆囊排空功能明显异常。胆石病组ＣＣＫＡ受体ｍＲＮＡ表达量（０６３３±０１６７）明显低于对照组（０９４４±０２３０）（Ｐ＜００１）;在胆石病患者中,收缩减弱组的ｍＲＮＡ表达（０５４４±０１２４）又明显低于收缩正常组（０７６８±０１３１）（Ｐ＜００５）,且ＣＣＫＡ受体ｍＲＮＡ表达的变化与胆囊排空率呈显著正相关（ｒ＝０９２５,Ｐ＜００１）。结论胆石病患者胆囊ＣＣＫＡ受体ｍＲＮＡ表达降低,此降低的基因表达与胆石病胆囊排空功能损害有关。     

胆囊收缩素对人胆管癌细胞粘附、运动及侵袭能力的影响

目的 研究胆囊收缩素对胆管癌细胞的粘附、运动以及侵袭行为的影响。方法 体外培养人胆管癌细胞系QBC939，应用粘附试验、Transwell趋化运动和侵袭模型，研究CCK85及其不同浓度下对胆管癌细胞的粘附、运动以及侵袭能力的影响。结果 CCK85能够以浓度依赖方式降低QBC939细胞的粘附，而促进其运动和侵袭能力，其受体拮抗剂L18和L60能够明显减弱CCK85抑制QBC939细胞粘附的作用以及促进瘤细胞运动和侵袭的能力，细胞运动和侵袭实验显示L60具有较强的拮抗CCKSS作用的能力。结论CCKSS具有降低QBC939细胞的粘附、促进QBC939运动和侵袭的能力，CCK-2受体在影响QBC939细胞的运动、侵袭能力方面可能具有较强的作用。     

胆源性胰腺炎大鼠胰腺胆囊收缩素受体变化的实验研究

目的　探讨胆源性胰腺炎（biliarypancreatitis,BP）大鼠胰腺胆囊收缩素受体（cholecystokininreceptor,CCK-R）和血浆胆囊收缩素八肽（cholecystokininoctapeptide,CCK-OP）的变化及其之间的关系。　方法　采用放射受体分析法检测36只BP大鼠及36只对照组大鼠胰腺组织膜CCK-R和竞争性酶联免疫法检测其血浆CCK-OP的含量。　结果　胆胰管结扎后3h、6h及24h胰腺组织膜CCK-R的最大结合容量（Bmax）值为179.0±1.1、119.0±1.8、及114.0±1.4fmol/ml;平衡解离常数Kd值为0.26±0.01、0.13±0.07、0.14±0.01nM;6h及24hBmax值和Kd值与对照大鼠存在显著差异(P均＜0.05)。BP大鼠血浆CCK-OP含量各为12.55±2.10、0.81±0.16、0.79±0.24PM/L;与正常大鼠相比,胰腺CCK-R在术后6h及24h期间结合位点数减少,亲合力增大（P＜0.05）;血浆CCK-OP含量仅在术后3h与对照组大鼠差异有显著性意义（P＜0.05）。　结论　BP大鼠发病过程中,胰腺CCK-R及血浆CCK-OP均发生了明显的变化。     

胆囊收缩素对人胆管癌细胞粘附、运动及侵袭能力的影响

目的研究胆囊收缩素对胆管癌细胞的粘附、运动以及侵袭行为的影响。方法体外培养人胆管癌细胞系QBC939,应用粘附试验、Transwell趋化运动和侵袭模型,研究CCK8S及其不同浓度下对胆管癌细胞的粘附、运动以及侵袭能力的影响。结果CCK8S能够以浓度依赖方式降低QBC939细胞的粘附,而促进其运动和侵袭能力,其受体拮抗剂L18和L60能够明显减弱CCK8S抑制QBC939细胞粘附的作用以及促进瘤细胞运动和侵袭的能力,细胞运动和侵袭实验显示L60具有较强的拮抗CCK8S作用的能力。结论CCK8S具有降低QBC939细胞的粘附、促进QBC939运动和侵袭的能力,CCK2受体在影响QBC939细胞的运动、侵袭能力方面可能具有较强的作用。     

PUMA蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨PUMA蛋白在胆管细胞癌组织中的表达及与胆管癌的临床病理关系。方法:应用免疫组化法检测60例肝外胆管细胞组织与正常胆管细胞组织中PUMA蛋白的表达情况。结果:胆管细胞癌组织PUMA蛋白的表达率为38.3%,低于癌旁组织中(48.3%)和正常胆管组织(63.3%)。PUMA蛋白的表达与肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移情况有关,与患者年龄、性别及肿瘤部位无关。结论:PUMA蛋白的表达缺失与肝外胆管癌的发生发展密切相关。     

烧伤后肾组织内皮素-1及其受体基因的表达

目的探讨烧伤后肾组织内皮素-1(ET-1)升高的效应部位以及效应的 ETR 亚型。方法采用斑点杂交和原位杂交技术对大鼠30％体表面积Ⅲ度烧伤模型的 ET-1及其受体亚型(ETA、ETB)的基因表达进行了研究。结果烧伤后1小时,ET-1、ETA、ETB、mRNA 均明显升高;烧伤后24小时仍维持较高水平。ET-1和 ETA mRNA 杂交信号于烧伤后3小时达高峰。ET-1mRNA 主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管,ETA 受体 mRNA 则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ETB 受体mRNA 于烧伤后6小时达高峰,主要分布髓质肾小管、集合管。结论烧伤后肾脏内皮素受体亚型上调在皮质以 ETA 为主,在髓质以 ETB 为主,它们分别与增强表达的 ET-1结合可能导致肾皮质缺血和水钠代谢异常,是烧伤后肾功能障碍的重要因素。     

烧伤后肾组织内皮素-1 及其受体基因的表达

目的探讨烧伤后肾组织内皮素－１（ＥＴ－１）升高的效应部位以及效应的ＥＴＲ亚型。方法采用斑点杂交和原位杂交技术对大鼠３０％体表面积Ⅲ度烧伤模型的ＥＴ－１及其受体亚型（ＥＴＡ、ＥＴＢ）的基因表达进行了研究。结果烧伤后１小时，ＥＴ－１、ＥＴＡ、ＥＴＢ、ｍＲＮＡ均明显升高；烧伤后２４小时仍维持较高水平。ＥＴ－１和ＥＴＡｍＲＮＡ杂交信号于烧伤后３小时达高峰。ＥＴ－１ｍＲＮＡ主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管，ＥＴＡ受体ｍＲＮＡ则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ＥＴＢ受体ｍＲＮＡ于烧伤后６小时达高峰，主要分布髓质肾小管、集合管。结论烧伤后肾脏内皮素受体亚型上调在皮质以ＥＴＡ为主，在髓质以ＥＴＢ为主，它们分别与增强表达的ＥＴ－１结合可能导致肾皮质缺血和水钠代谢异常，是烧伤后肾功能障碍的重要因素。     

DNA甲基转移酶在肝门部胆管癌中的表达及临床意义

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMTs)在肝门部胆管癌中的表达及其临床意义.方法 收集1997年4月至2007年3月中山大学附属第一医院收治的111例肝门部胆管癌患者(胆管癌组)和39例胆总管囊肿患者(对照组)胆管组织标本,构建组织芯片,采用免疫组织化学方法检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平;比较胆管癌组与对照组的胆管组织中DNMTs蛋白表达的差异;分析肝门部胆管癌组织中DNMTs蛋白表达与临床病理因素的关系,计数资料的比较采用x2检验或Fisher确切概率法,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况分析采用Log-rank检验.结果 胆管癌组的DNMT1和DNMT3b高表达率分别为54.1％ (60/111)和47.7％ (53/111),显著高于对照组的28.2％ (11/39)和23.1％ (9/39),两组比较,差异有统计学意义(x2=7.740,7.240,P＜0.05).DNMT1的高表达与Bismuth-Corlette分型、T分期存在明显相关性(x2=12.200,17.800,P＜0.05);而DNMT3a在胆管癌组和对照组的高表达率比较,差异无统计学意义(x2=3.370,P＞0.05);DNMT3b的高表达则只与Bismuth-Corlette分型存在明显相关性(x2=8.300,P＜0.05).111例患者中66例行肝门部胆管癌切除术,其中42例获得随访.DNMT1低表达者的术后中位生存时间为23.9个月,明显长于DNMT1高表达者的11.8个月(x2=3.980,P＜0.05).结论 DNMT1和DNMT3b高表达在肝门部胆管癌发生、发展中起重要作用;DNMT1的表达水平与肝门部胆管癌根治性切除术后生存时间明显相关,可望成为有价值的预测因子.     

原位杂交染色法检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达及临床意义

目的: 通过联合检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达,探讨其与肿瘤生物学特性的关联及临床意义.方法: 应用石蜡包块切片组织原位杂交染色法检测42例肝外胆管癌中PTENmRNA,P73mRNA的表达,并以同期20例慢性胆管炎作对照.结果: PTENmRNA阳性表达率为57.1%(24/42),显著低于良性对照组(为100%);P73mRNA表达率为54.8%(23/42),显著高于良性对照组(为0).经统计学分析PTENmRNA,P73mRNA的表达都分别与肝外胆管癌的临床病理分期及预后显著相关(P<0.05);PTENmRNA的表达还与肝外胆管癌的组织学分级显著相关(P<0.05).尚不能认为PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌的表达两者有相关关系.结论: PTEN,P73基因在肝外胆管癌的发生发展过程中可能起重要作用,联合检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达,有助于了解其生物学特性,为预后判断提供参考指标.     

hTERT mRNA和MDR mRNA在人肝癌中的表达及其意义

目的　探讨hTRTmRNA及MDRmRNA在人肝细胞肝癌 (HCC )组织中的表达及其意义。方法　检测 5 8例HCC患者癌组织及癌旁组织中hTERTmRNA和MDRmRNA的表达情况。结果　在 5 8例肝癌患者癌组织及其癌旁组织中 ,hTERTmRNA阳性率分别为 44 .83 % ( 2 6/5 8)和 5 .17% ( 3 /5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;MDRmRNA阳性率分别为 60 .3 4% ( 3 5 /5 8)和 3 2 .76% ( 19/5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。hTRTmRNA ,MDRmRNA在人肝癌组织中的检出率与临床分期、肝外转移、术后复发、肿瘤大小等明显相关 (均P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤数目、血清AFP水平等无明显相关 (P >0 .0 5 )。MDRmRNA检出率与术前化疗明显相关 (P <0 .0 1) ,但与门静脉癌栓无关 (P >0 .0 5 ) ;而hTERTmRNA与术前化疗无相关 (P >0 .0 5 ) ,但与门静脉癌栓有关 (P <0 .0 5 )。结论　hTERTmRNA和MDRmRNA可能与肝细胞的恶性转化及术后复发有关 ,故可望作为预测肝癌复发、转移的参考指标和肝癌治疗的靶基因     

胆管癌组织中信号转导及转录激活因子3信号通路相关基因的表达与意义

目的 探讨胆管癌组织中信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路相关基因Survivin及环氧化酶2（COX-2）的表达及其与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系.方法 收集2007年9月至2012年7月安徽医科大学附属省立医院收治的43例胆管癌患者的癌组织标本,收集同期行胆肠内引流术和胆管修复的12例肝内外胆管结石和胆管损伤患者的正常胆管组织标本作为对照.应用免疫组织化学染色检测胆管癌及正常胆管组织中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）、Survivin及COX-2蛋白的表达,并分析其与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系.采用门诊或电话方式对胆管癌患者进行随访,随访时间截至2014年3月.计数资料采用x2检验,相关性分析采用Spearman检验.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验.结果 STAT3、p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中阳性表达率分别为69.8％ （30/43）、65.1％（28/43）、72.1％ （31/43）、79.1％（34/43）,在正常胆管组织中阳性表达率分别为41.7％（5/12）、8.3％（1/12）、16.7％（2/12）、41.7％（5/12）.p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中的阳性表达率显著高于正常胆管组织,两组比较,差异有统计学意义（x2=12.136,9.811,4.679,P＜0.05）.p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中的高表达与肿瘤局部浸润转移有关（x2=14.700,5.959,4.075,P＜0.05）;p-STAT3蛋白阳性表达与肿瘤神经侵犯有关（x2=10.384,P＜0.05）;Survivin、COX-2蛋白表达与胆管癌患者肿瘤神经侵犯无关（x2=2.718,3.024,P＞0.05）;p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白表达与胆管癌患者性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、肿瘤直径无关（x2=0.148,0.720,1.835,1.040,0.236;0.001,0.009,0.029,1.863,0.197;0.433,0.686,0.002,2.974,0.029,P＞0.05）.Survivin及COX-2蛋白的表达与p-STAT3呈正相关（r=0.524,0.583,P＜0.05）.43例胆管癌患者获得随访,随访时间为6个     

Girdin蛋白在胆管癌组织中的表达及意义

目的 探讨Girdin蛋白在胆管癌与癌旁组织中蛋白表达水平的差异及其与胆管癌临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学SABC法,检测Girdin蛋白在42对胆管癌与其癌旁组织切片中的表达情况,并结合临床病理资料进行统计分析.结果 胆管癌组织中Girdin蛋白表达阳性率（79％）高于癌旁组织（52％）（P＜0.05）.胆管癌组织中Girdin的蛋白表达与胆管癌的淋巴结转移及远处转移呈正相关（P＜0.05）,与患者年龄、性别、病理分级、浸润深度、临床分期等的相关性无统计学意义（P＞0.05）.结论 Girdin蛋白在胆管癌组织中高表达,可能参与了胆管癌的转移与进展,这为胆管癌的预后判断和基因治疗提供新的理论依据.     

肾透明细胞癌中c-FLIP mRNA表达及临床意义

目的探讨细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白（c-FLIP）在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学及RT-PCR方法对56例肾透明细胞癌组织及10例癌旁正常肾组织中c-FLIP蛋白及c-FLIP mRNA表达进行分析,观察c-FLIP mRNA表达与临床分期及预后之间的关系。结果c-FLIP蛋白及c-FLIP mRNA在肾透明细胞癌组织中呈高表达（P〈0.05）,其表达与肾透明细胞癌的临床分期无关,但阳性表达患者的生存率低于阴性表达者（P〈0.05）。结论肾透明细胞癌组织中c-FLIP mRNA表达较高,特异性较强,可作为观察肾透明细胞癌预后的重要指标之一。