三氧化二砷与顺铂联用对肝癌HepG2细胞的作用

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)与顺铂(CDDP)联合对肝癌细胞HepG2的作用.方法 应用MTT法和细胞免疫组化酶法检测人肝癌HepG2细胞Bax,Bcl-2,Fas蛋白的表达情况.结果 As2O3与CDDP联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡,增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达方面均较各自单用的作用明显增强.结论 As2O3与CDDP联合应用具有明显的协同抗肝癌作用,其主要机制可能为As2O3联合化疗能诱导肝癌细胞凋亡,与增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达有关.     

顺铂、氧化苦参碱对肝癌QGY细胞生长及端粒酶活性的影响

目的：观察顺铂、氧化苦参碱对人肝癌细胞株QGY端粒酶活性的影响,进一步探讨两种药物的可能作用机制。方法：采用人肝癌细胞株QGY作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的药物对细胞增殖的抑制作用,以及对QGY细胞粘附能力的影响;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR—ELISA法检测端粒酶活性的变化。结果：两种药物均具有抗QGY细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡及抑制端粒酶活性的作用。结论：对端粒酶活性的抑制可能是两种药物发挥抗肿瘤作用的机制之一。     

索拉非尼联合顺铂对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 探讨索拉非尼联合顺铂(DDP)对肝癌细胞HepG2的抑制作用及其可能分子机制.方法 单独及联合给药后以MTT法测定HepG2细胞的增殖,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,用Western blotting观察ERK及pERK蛋白的表达.结果 索拉非尼及DDP单药对HepG2均有抑制作用,两药联合具有协同或相加作用(P＜0.05).索拉非尼及DDP分别主要使细胞阻滞于G1及G2期.两药联用后同时阻滞于G1及G2期.联合组凋亡率明显比单药组高(P＜0.05).单用及联合用药对HepG2细胞ERK表达无明显影响,索拉非尼及联合用药减少pERK的表达.结论 索拉非尼和DDP对肝癌HepG2细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用,其机制可能与细胞周期的双重阻滞及细胞增殖通路Raf/MEK/ERK的抑制有关.     

索拉非尼对顺铂诱导肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的 探讨索拉非尼对顺铂抑制肝癌细胞HepG2增殖的影响及其可能机制.方法 分别及联合应用两药后以MTT法检测HepG2细胞的增殖抑制,用流式细胞术检测细胞凋亡,用RT-PCR检测MDR-1的mRNA表达.结果 索拉非尼及DDP单药对HepG2均有抑制作用,两药联合具有协同或相加作用.联合用药细胞凋亡率明显高于单药组(P＜0.05).单药顺铂组与联合组MDR-1的mRNA表达高于对照组及索拉非尼单药组,其中单药顺铂组表达最高(P＜0.05).结论 索拉非尼联合顺铂对肝癌HepG2细胞有更强的抑制及促凋亡作用,其机制可能与增加HepG2细胞的凋亡,索拉非尼下调MDR-1,增强顺铂对HepG2细胞的诱导凋亡作用有关.     

顺铂对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的实验研究

目的探讨顺铂对肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法将肝癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的顺铂,并设空白对照组,用MTT比色法观察顺铂对体外培养的肝癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果 MTT比色法测定显示,顺铂作用于肝癌HepG2细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性。结论顺铂能抑制体外培养的肝癌Hepg2细胞的增殖。     

胡桃醌联合顺铂对肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的 探讨胡桃醌与顺铂（DDP）联合应用对人肝癌HepG2细胞增殖的影响.方法采用不同浓度的胡桃醌或（和）顺铂处理肝癌HepG2细胞24 h,采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化,通过MTT法检测其对HepG2细胞生长的抑制作用.结果 不同浓度的药物作用可导致HepG2细胞发生形态学变化,MTT比色法测定显示,采用胡桃醌、顺铂合用,可显著抑制HepG2细胞的增殖,单用不同浓度的胡桃醌与顺铂分别作用于肝癌HepG2细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性.胡桃醌联合顺铂增强了HepG2细胞的凋亡.结论 胡桃醌联合顺铂与单药相比能更显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,促进其凋亡,两药对肝癌细胞的杀伤效应具有一定的协同作用.     

加味八珍汤对奥沙利铂神经毒性减毒增效研究

目的:观察加味八珍汤减轻奥沙利铂致神经毒性临床疗效。方法:选择60例患者随机分为治疗组30例,对照组30例,两组患者均采用奥沙利铂联合化疗方案。治疗组在对照组化疗基础上加用加味八珍汤。结果:治疗组、对照组有效率分别为83.33%和60.00%;治疗组与对照组总有效率比较有显著性差异(P0.05),治疗组临床疗效优于对照组。结论:加味八珍汤对奥沙利铂致神经毒性有减毒增效作用。     

丹参二萜醌对顺铂的增效作用及抗肺癌相关机制研究

[目的]对活血化瘀代表药物丹参的有效成分丹参二萜醌（diterpenoid tanshinones,DT）抗肺癌进行研究,验证DT的抗肺癌效能以及其对顺铂的增效作用,并探寻DT抗肺癌的相关机制。[方法]构建A549肺癌BALB/c-nu裸鼠模型56只,根据腹腔注射及灌胃药物不同分为空白组、模型组、顺铂组、DT低剂量组、DT中剂量组、DT高剂量组、顺铂+DT高剂量组,测量并记录各组肿瘤直径,计算肿瘤体积和抑瘤率。采用免疫印迹法检测各组肿瘤组织血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、Ras、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B(cyclin dependent kinase inhibitor 1B,CDKN1B)、Bcl-2关联X(Bcl-2 associated X,Bax)蛋白表达。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR）分析维甲酸受体相关孤儿受体-γt(retinoic acid receptor-r...     

青蒿琥酯增强顺铂对人肝癌HepG2细胞的细胞毒作用

目的 研究青蒿琥酯(Art)及其联合顺铂(DDP)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法 分别采用不同浓度的Art(0.16、0.8、4、20、100μmol/L)、DDP(0.16、0.8、4、20、100 mg/L)及Art(4μmol/L)和DDP(4 mg/L)联合处理HepG2细胞24 h、48 h和72 h,MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测Art(4μmol/L)组、DDP(4mg/L)组和Art(4μmol/L)+DDP(4 mg/L)联合处理组细胞48 h的凋亡状况.结果 随着处理时间延长(24～72h),Art和DDP对HepG2细胞生长的抑制/杀伤作用明显增强;它们在暴露72 h的条件下分别在0.16 μmol/L和0.8 mg/L以上浓度具有浓度依赖性细胞毒作用.Art联合DDP处理细胞组对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用比单用Art或DDP组更强(P＜0.05);人肝癌HepG2细胞48 h的早期凋亡率分别为:Art组23.5％,DDP组27.8％,Art+DDP联合用药组49.7％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 青蒿琥酯可抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导其凋亡;它与顺铂联合应用可能增强后者对人肝癌HepG2细胞的细胞毒作用.     

肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

[目的]研究肿节风挥发油（SGE）对环磷酰胺（CTX）治疗H22、S180小鼠的增效和减毒作用。[方法]建立小鼠体内移植性肉瘤、肝癌模型,通过两种给药途径,观察肿节风挥发油与环磷酰胺联合用药对荷瘤小鼠抑瘤率的影响;观察SGE拮抗CTX引起血小板、白细胞及血红蛋白下降。[结果]肿节风挥发油与CTX合用时,对肝癌H22、肉瘤S180两种肿瘤均有不同程度的抑瘤增效作用。CTX（10mg／kg或15mg／kg）分别联用iv．SGE（36．6mg／kg）,对小鼠H22、S180的抑瘤率均高于相应剂量的单用CTX（P〈0．05）;CTX（20mg／kg）联用ig．SGE（73．2mg／kg）,对H22的抑瘤率高于单用CTX（P〈0．05）。肿节风挥发油能明显拮抗CTX引起的血小板、白细胞下降（P〈0．05～0．01）。[结论]肿节风挥发油能增强CTX的抗肿瘤作用,同时减轻CTX的毒性。     

ATF4在顺铂致肝癌细胞HepG2凋亡中的作用

目的 探讨ATF4在顺铂诱导的肝癌细胞HepG2凋亡中的变化,并对其作用进行初步研究.方法 人肝癌细胞HepG2经不同浓度顺铂处理24和48 h后,MTS法检测细胞活力;Western blot 检测内质网应激反应及凋亡相关蛋白(Bip、 ATF4、PARP、activated-Caspase3、CHOP)表达的变化;使用siRNA干扰技术沉默ATF4 的表达,并观察沉默ATF4蛋白表达后,肝癌细胞对顺铂敏感性的变化;利用Annexin V-FITC 和PI双标法,在倒置荧光显微镜中检测细胞凋亡情况.平板克隆形成实验用于判断单个细胞克隆生长速度.结果 与溶剂对照组相比,顺铂明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡;时间和浓度依赖性地引起内质网应激反应相关蛋白CHOP、ATF4表达水平上调,但不影响Bip的蛋白表达;同时导致activated-Caspase3的活化,引起PARP蛋白的切割. 使用siRNA沉默ATF4的蛋白表达后,能部分逆转顺铂引起的细胞凋亡以及克隆形成抑制.结论 顺铂可以通过上调ATF4的表达,触发内质网反应,从而诱导肝癌细胞凋亡.     

麻疹减毒活疫苗联合顺铂抗卵巢癌细胞体外实验研究

卵巢癌是女性生殖器3大恶性肿瘤之一,治疗上多采用手术辅以化疗的综合治疗,但疗效欠佳[1].近年来,生物治疗作为肿瘤治疗的一种新型模式日益受到重视.病毒治疗属于生物治疗中的一种.我们以体外原代培养的卵巢癌细胞为研究对象,探讨麻疹减毒活疫苗(MV)在体外对卵巢癌细胞的杀伤作用及联用顺铂(DDP)时两者是否产生协同效应.     

黄蘑多糖对荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用

目的研究黄蘑Hohenbuehelia serotina多糖对环磷酰胺(CTX)化疗H22荷瘤小鼠的减毒和增效作用。方法建立小鼠体内移植性肝癌模型;小、中、大剂量治疗组分别ip黄蘑多糖提取物20、40、80mg/kg,连续给药10d,测定荷瘤小鼠的生命延长率和化疗药物CTX的毒副作用以及黄蘑多糖对CTX的减毒和增效作用。同时检测黄蘑多糖对淋巴细胞转化率、IL-2水平等免疫系统功能的影响。结果中、大剂量黄蘑多糖具有抑制肿瘤生长,延长荷瘤小鼠的生存率的作用。与CTX伍用可发挥协同作用,提高抑瘤率(P<0.05、0.01);提高荷瘤小鼠生存质量,体重、白细胞计数及免疫器官指数,与CTX阳性对照组比较均显示显著差异(P<0.05、0.01);实验结果显示黄蘑多糖与CTX伍用具有良好的减毒和增效作用,可增强荷瘤小鼠机体免疫力,提高淋转和IL-2的水平(P<0.05、0.01)。结论黄蘑多糖作为生物反应调节剂可提高机体的免疫力,增强CTX的抗肿瘤作用,同时减轻CTX的毒性。     

大黄素与顺铂联用抗人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的研究

目的 研究大黄素与顺铂（DDP）联合应用对人肝癌细胞株HepG2生长抑制与促凋亡作用。方法 大黄素与顺铂联合应用肝癌细胞株HepG2分别24h、48h、72h后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测凋亡,并与单药大黄素、单药顺铂作用相比较,计算两药相互作用系数,检验其协同性。结果 大黄素和顺铂单独应用48、72h HepG2细胞抑制率分别为21％、28％和29％、34％,二药联合时抑制率为49％和61％,3个药物组CDI值分别为0．93、0．91、0．82,流式细胞术显示二药联用较单药有更明显的促凋亡作用。结论 大黄素单药应用能抑制HepG2细胞生长增殖,诱导凋亡,与顺铂联用能增强其抗肿瘤作用,二药有协同效应。     

人肝癌顺铂耐药细胞株 HepG2的建立

目的：体外建立顺铂（ DDP）诱导的人肝癌耐药细胞株（ HepG2／DDP）,研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2／DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2／DDP的半数抑制浓度（IC50）和耐药系数（RI）,绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪（ FCM ）检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2／DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1．35μg／ml,HepG2／DDP的IC50为23．35μg／ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0／G1期细胞减少、S期与G2／M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2／DDP。     

人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2的建立

目的体外建立顺铂(DDP)诱导的人肝癌耐药细胞株(HepG2/DDP),研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2/DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2/DDP的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2/DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1.35μg/ml,HepG2/DDP的IC50为23.35μg/ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0/G1期细胞减少、S期与G2/M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2/DDP。     

黄芪注射液对顺铂化疗肾毒性减毒增效作用的临床观察

目的观察黄芪注射液防治大剂量DDP肾毒性的临床疗效,验证其在抗肿瘤的辅助治疗中起到的减毒增效作用.方法选择1999年8月～2000年6月在我院肿瘤科接受高剂量DDP(80～120mg/m2)为主要治疗方案的恶性肿瘤患者60例,随机分为黄芪实验组和水化对照组.二组患者均采用DDP的联合化疗方案,使用DDP剂量均为90mg/次.治疗过程中不使用其它有毒性药物.黄芪实验组于DDP给入前7日开始用苋芪注射液,连用14日,化疗前后每日液体总量不超过1500ml.水化对照组于DDP给入后按3000～3500ml/日输液量行政规水化治疗3日.二组均观察化疗前后血尿素氮(Bun)、血肌酐(Cr)、血β2微球蛋白(β2-m)、血NAG、尿NAG、尿蛋白及化疗后24h尿量.所有指标经统计学处理.结果黄芪实验组在效率略高于水化对照组,但统计学无显著差异.二组治疗后较治疗前生化指标均稍下降,但无显著差异性.黄芪实验组治疗后血Cr、尿NAG较水化对照组在显著差异,优于水化组.结论黄芪有益气补肾,利水退肿功效,结合现代药理学,确能防治DDP所致肾脏形态及功能的损害,且不降低其抗肿瘤活性,尤其适用于老年及心肺功能不全不能耐受水化的患者.     

松花粉对环磷酰胺增效减毒作用研究

目的研究松花粉对环磷酰胺化疗有无增效和减毒作用。方法采用腹水型S180小鼠为实验系统,通过检测抑瘤率、血液学和肝功能指标,评价松花粉对环磷酰胺化疗的增效和减毒作用;采用免疫低下小鼠模型为实验系统,通过检测巨细胞吞噬功能、溶血素水平和胸腺、脾脏指数,评价松花粉的免疫调节作用。结果松花粉(150、300、600 mg/kg)与环磷酰胺合用后抑瘤率明显提高,可明显抑制环磷酰胺引起的白细胞下降和肝功能的损伤,可提高免疫低下小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能、溶血素水平和免疫器官系数。结论松花粉可通过调节免疫对环磷酰胺化疗起到明显的增效减毒作用。