血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。     

双缩脲反应测定血清总蛋白方法的标准化

双缩脲法定量测血清总蛋白已有70余年的历史.1974年,美国临床化学协会(AACC)标准化委员会的总蛋白研究组,用双缩脲法进行了血清总蛋白的室间研究.1978年,国际临床化学协会(IFCC)标准委员会在提出人血清蛋白标准74/1的暂     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的 将双缩脲单试剂改为双试剂法，观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰。方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素．溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白。结果脂血标本对原法干扰十分明显，本法可完全消除脂血的干扰；总胆红素每增加50μmol／L，原法总蛋白增加0．4g／L，本法不受影响；溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响，1g／L血红蛋白对原法总蛋白增加2．85g／L。对本法总蛋白增加0．93g／L；外观正常标本二种方法无显著差异。结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上，消除了脂血、黄疸的干扰，明显减少溶血的影响，有利于自动生化仪的分析。     

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X 0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。     

双缩脲试剂对血清铜测定有携带污染

Ｈｉｔａｃｈ 70 60全自动分析仪的工作方式是先测试一个标本的所有实验项目 ,再测试下一个标本 ;在同一个标本内哪个实验项目先做 ,哪个后做 ,可自行安排。我们在检测血清铜的过程中偶尔发现离群值 ,根据拉依达 (ＰａИＴａ)检验法 ,确定此离群值属异常值。通过查找发现测定总蛋白的双缩脲试剂中含有 18ｍｍｏｌ/Ｌ硫酸铜 ,双缩脲试剂对铜试剂存在试剂针携带污染 ,当改变仪器的分析顺序 ,先测铜再测总蛋白 ,可避免双缩脲试剂对铜测定的携带污染。1　材料Ｈｉｔａｃｈ 70 60全自动分析仪。双缩脲试剂为德国Ｈｕｍａｎ公司生产 ,主要成份为 :…     

用高浓双缩脲试剂直接测定脑脊液总蛋白

脑脊液总蛋白测定的方法虽有多种但各有其缺点.如比浊法灵敏度低,并在高浓度(1g/L 以上)时蛋白沉淀极易聚合不稳定.染料结合法都有与白、球蛋白呈色不一致及比色皿难洗净的缺点。免疫学方法虽灵敏高度、特异性强、但不适用于常规工作.我们配制的高浓双缩脲试剂可直接测定脑脊液中总蛋白,适用于手工及自动分折仪法,现报道如下.     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

不受高脂血症影响的双缩脲试剂

历来所用的双缩脲试剂(BR),在遇到某些高脂血清时,因脂血增加540nm 处的内源性吸光度而产生正干扰.而这种干扰常用Chromy 报道的用丙酮处理脂血标本.鉴于处理脂血标本手续较烦,我们通过实验用KOH 代替NaOH,按Doumas 配方配制     

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的将双缩脲单试剂改为双试剂法,观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰.方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素,溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白.结果脂血标本对原法干扰十分明显.本法可完全消除脂血的干扰;总胆红素每增加50μ mol/L,原法总蛋白增加0.4g/L,本法不受影响;溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响,1g/L血红蛋白对原法总蛋白增加2.85g/L,对本法总蛋白增加0.93g/L;外观正常标本二种方法无显著差异.结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上,消除了脂血、黄疸的干扰,明显减少溶血的影响,有利于自动生化仪的分析.     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白对比分析

目的 探讨改良双缩脲双试剂法在全自动生化分析仪中直接测定脂浊标本血清总蛋白.方法 用酒石酸作为络合剂防止形成氢氧化铜沉淀,血清空白增加方法的敏感性而同时使脂血症对光普的最小干扰.结果 改良双缩脲双试剂法测定脂浊标本血清总蛋白与单试剂法测定结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 改良双缩脲双试剂法能有效的清除脂肪的干扰,具有很好的准确度和精密度,适合于自动分析,提高工作效率.     

镍—双缩脲反应测定血清总蛋白质方法学研究

本文探讨了镍—双缩脲反应测定血清总蛋白质的方法,并对其实验条件作了研究.应用本法测定在37℃6分钟即能反应完全,且色泽稳定.批内、天内和天间CV 分别为1.09%、1.76%和2.28%;平均回收率99.8%;线性达150g/L;血清中常见高浓度血红蛋白、胆红素、甘油三酯,葡萄糖,钙、镁和叠氮钠不参与反应,也不干扰显色;与铜—双缩脲反应法和凯氏定氮法比较,相关系数分别为0.9975、0.9979。600例参考值调查为62.8～80.0g/L,男、女间无差异,临床常见疾病观察,与铜—双缩脲法基本一致.本法简便、快速、特异,适宜临床应用.     

右旋糖苷干扰双缩脲法测血清总蛋白的实验研究

观察不同浓度的右旋糖苷对双缩脲法测血清总蛋白的影响 ,探索消除其干扰的方法。首先用手工法筛选出与右旋糖苷发生干扰的双缩脲试剂成分及干扰血清总蛋白测定的最低右旋糖苷浓度 ,然后在全自动生化分析仪上分别测定含有 3个右旋糖苷浓度水平的 30份血清总蛋白浓度 ,与原始血清对比 ,观察有无差异。通过离心沉淀法观察消除右旋糖苷干扰的效果。结果 :(1)发现右旋糖苷与双缩脲试剂中的铜离子反应 ,产生浑浊 ,从而干扰血清总蛋白测定 ;(2 )对含有不同右旋糖苷浓度的血清总蛋白进行测定 ,结果表明随着血清中右旋糖苷含量的逐渐增加 ,总蛋白浓…     

血清和血浆总蛋白双缩脲法测定结果的比较

目前，多数实验室测定血中总蛋白通常采用双缩脲法。样品用血清或血浆。我们在多年的工作实践中，发现用双缩脲法测定血清总蛋白的值较血浆高，从而导致了Ａ／Ｇ比值的不一致性，影响了临床的诊断和治疗。为此我们对１００例正常人的血清和血浆用双缩脲法同时测定其总蛋白...     

双缩脲试剂对血清铜测定的携带污染探讨

目的：探讨双缩脲试剂对血清铜测定的携带污染问题及处理措施。方法：第一步,取当天患者血清10份（包含线性范围内的高、中、低值）单独测定Cu。第二步,用同样10份血清先测定TP,紧跟着测定Cu。比较两组铜的结果。结果：10对样品d-=111.054,Sd=11.3459,t=30.9523,P〈0.01。两组结果的差别有统计学意义。结论：双缩脲试剂对铜的测定有极显著的影响。更改试剂位置;更改清洗程序,增加样品针和比色杯的清洗次数;擦拭样品针;更换比色杯可以有效地改善双缩脲试剂对血清铜测定的携带污染的问题。     

右旋糖酐干扰双缩脲法检测血清总蛋白的实验研究

目的研究不同浓度的右旋糖酐对双缩脲法测定血清总蛋白的影响。方法双缩脲法测定含不同浓度右旋糖酐的血清总蛋白,结果采用t检验统计处理分析。结果血清中右旋糖酐浓度大于或等于1．5g／L时,双缩脲反应总蛋白测得值差异有统计学意义（P〈0.01）。结论右旋糖酐对双缩脲反应有显著的正干扰。     

凝块分离双缩脲比色测定纤维蛋白原的改进方法

当前纤维蛋白原(Fib)的测定方法甚多,按其测定的原理大体上可分为三大类:热/盐沉淀法、可凝固蛋白法(功能法)和免疫学方法[1]。凝块分离双缩脲比色法是卫生部医政司编印的《全国临床检验操作规程》(下称《规程》)推荐的方法[2],属于可凝固蛋白法。我们将其与参考方法——Jocobsson法和冯·克劳斯(vonClauss)法作了比较,探讨其实用性和可靠性,同时对方法本身进行了部分改进。方　　法一、Jocobsson法　系WHO推荐的Fib参考方法,具体操作见参考文献[3]。二、克劳斯法　系NCCLS推荐的Fib常规测定方法,具体操作见参考文献[4]。三、凝块分离…