应用半巢式PCR检测滤泡性淋巴瘤患者骨髓与外周血bcl-2／JH基因重排的临床意义

为探讨非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者骨髓与外周血ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排的临床意义，应用半巢式多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测１０例滤泡性淋巴瘤（ＦＬ）患者骨髓与外周血标本ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排。结果检出６例存在ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因。骨髓细胞形态学检查发现的２例淋巴瘤细胞浸润者均检出该融合基因，另８例骨髓细胞形态学检查正常者中４例ＰＣＲ检查阳性，其中临床分期为Ⅱ期者１例，Ⅲ期者１例。因此，检测ＦＬ患者ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因能够早期发现骨髓淋巴瘤细胞侵犯，对临床分期、预后及微小残留病灶检测都非常重要。动态观察３例发病初期ＰＣＲ阳性患者，发现化疗后即使骨髓细胞形态学检查转为正常，但仍能检出该融合基因，提示常规化疗不能消除ｂｃｌ－２／ＪＨ阳性克隆。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤bcl—2／JH融合基因的检测及临床意义

目的：研究Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）ｂｃｌ－２／ＪＨ重排发生情况及其临床意义。方法：采用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增２３例Ｂ－ＮＨＬ患者新鲜肿瘤组织、骨髓和外周血标本中ｂｃｌ－２重排的主要和次要断裂点（ＭＢＲ、ｍｃｒ）。结果：易位断裂点分别在１０例新鲜肿瘤组织（其中７例滤泡型中有５例，占７１．４％；１６例弥漫型中有５例，占３１．３％）、８例骨髓和７例外周血标本中被测到，绝大部分断裂点发生在ＭＢＲ，仅１例位于ｍｃｒ。同时还发现１８例骨髓形态学检查正常的患者中，有４例ＰＣＲ阳性，其中包括２例临床Ⅰ、Ⅱ期患者，提示其骨髓已有肿瘤细胞存在。从治疗后观察得知，治疗前骨髓ＰＣＲ阴性患者比阳性患者更易达到缓解。结论：ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因的检测对淋巴瘤的诊断与分期、治疗方案的选择、疗效观察及微量残留病的监测均有重要意义。     

滤泡型淋巴瘤t（14;18）易位与bcl—2基因的研究

ｔ（１４；１８）（ｑ３２；ｑ２１）是滤泡型非霍奇金淋巴瘤最常见的核型异常。通过对该易位断裂点的分子学研究而发现了ｂｃｌ－２原癌基因。本文讨论ｂｃｌ－２基因重排的分子学基础及其与程序化细胞死亡、淋巴瘤的关系，以及利用该特异性分子标记在临床应用的意义。     

应用半巢式PCR检测滤泡性淋巴瘤患者骨髓与外周血bcl—2／JH…

为探讨非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患有髓与外周血ｂｅｌ－２／ＪＨ基因重排的临床意义，应用半巢式多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测１０例滤泡性淋巴瘤（ＦＬ）患者骨髓与外周血标本ｂｅｌ－２／ＪＨ基因重排。结果检出６例存在ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因。骨髓细胞形态检查发现的２例淋巴绞细胞浸润者均检出该融合基因，另８例骨髓细胞形态学检查正常者中４例ＰＣＲ检查阳性，其中临床分期为Ⅱ期者１例，Ⅲ期者１例。因此，检测ＦＬ患者ｂ     

bcl-2基因转染阻断Fas介导的Jurkat细胞凋亡

目的：通过ｂｃｌ２阻断Ｆａｓ介导的细胞凋亡了解ｂｃｌ２基因在淋巴瘤癌变过程中逃避机体免疫监控的作用机制。方法：应用基因重组技术重组ｐＬＸＳＮｂｃｌ２，采用电穿孔法将其与空载体分别转染包装细胞系ＰＡ３１７，将阳性克隆病毒上清感染人Ｔ淋巴瘤细胞株Ｊｕｒｋａｔ，用Ｇ４１８筛选，其阳性克隆进行免疫组化检测，应用抗Ｆａｓ抗体诱导细胞凋亡来模拟细胞毒Ｔ细胞的杀伤机制，观察ｂｃｌ２在淋巴瘤逃避免疫机制中的作用。结果：转染人ｂｃｌ２基因的Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２）细胞较对照Ｊｕｒｋａｔ及转染空载体Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｎｅｏ）细胞，ｂｃｌ２表达量明显增加，而Ｆａｓ基因表达量无明显变化。其Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２能明显耐受抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结论：人ｂｃｌ２基因在淋巴瘤中过量表达，能部分阻断抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡，ｂｃｌ２基因过量表达可能是淋巴瘤癌变过程中逃脱机体免疫监控的机制之一。     

凋亡相关基因Bcl-2和C-myc在阴茎癌组织中的表达

目的 探讨Ｂｃｌ－２和Ｃ－ｍｙｃ在阴茎癌组织中的表达及其意义。方法 应用免疫组化法（ＳＡＢＣ）对４９例阴茎癌组织和９例正常阴茎组织标本进行ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ蛋白产物检测。结果 ４９例阴茎癌标本中２６例ｂｃｌ－２检测阳性（５３．１％）,２５例ｃ－ｍｙｃ检测阳性（５１％）,９例正常阴茎２例ｂｃｌ－２检测阳性（２２．２％）,Ｃ－ｍｙｃ未见阳性染色。Ｂｃｌ－２阳性率在高、中、低分化肿瘤中分别为８３．３     

抗凋亡基因bcl－2在急性白血病骨髓与细胞株中的转录水平表达

采用原位杂交方法检测了急性白血病骨髓活检标本及细胞株中ｂｃｌ－２基因表达水平。结果２２例白血病患者骨髓中２１例（包括髓系和淋巴系）存在ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ高表达；６种白血病细胞株中５种ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ阳性（Ｍｏｌｔ－４例外），它们分别为ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２。表明造血系统肿瘤中广泛存在ｂｃｌ－２基因转录水平激活，其基因产物可能通过抑制细胞凋亡过程而影响急性白血病细胞的生物学特性。     

抗凋亡基因bcl—2在急性白血病骨髓与细胞株中的转录水平表达

采用原位杂交方法检测了急性白血病骨髓活检标本及细胞株中ｂｃｌ－２基因表达水平。结果２２例白血病患骨髓中２１例存在ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ高表达；６种白血病细胞株中５种ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ阳性（Ｍｏｌｔ－４例外），它们分别为ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２。表明造血系统肿瘤中广泛存在ｂｃｌ－２基因转录水平激活，其基因产物可能通过抑制细胞凋亡过程而影响急性白血病细胞的生物学特性。     

急性髓细胞白血病M2b型AML1—ETO融合基因转录本的检测

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）－Ｍ２ｂ患者约９０％有ｔ（８；２１）。已经证明它导致ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因。我们应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测了２２例ＡＭＬ－Ｍ２ｂ，其中ｔ（８；２１）阳性１６例，阴性２例，不能确定有无ｔ（８；２１）的４例，发现全部２２例患者均可检出ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因转录本。同时在５例ｔ（８；２１）阴性的ＡＭＬ中，包括Ｍ２ａ例，Ｍ3 １例，均未检出上述融合基因转录本     

孕妇外周血游离 ＤＮＡ 检测用于胎儿 １６－三体筛查的 临床价值

摘要：目的 探讨孕妇血浆游离 ＤＮＡ（ｃｆ ＤＮＡ）检测技术用于胎儿 １６－三体综合征（１６－三体）筛查的临床应用价值。方法 收 集２０１７ 年 １ 月至 ２０２１ 年 １２ 月在南京市妇幼保健院进行孕妇血浆 ｃｆ ＤＮＡ 检测且结果为 １６－三体高风险的孕妇，对其侵入性 产前诊断验证结果，并对妊娠结局进行回顾性分析。结果 在 ５６ ２４７ 例进行 ｃｆ ＤＮＡ 检测的孕妇中，检出 １６－三体高风险 ２２ 例（０．０４％，２２ ／ ５６ ２４７）；其中 ８ 例选择了侵入性产前诊断，检出 ２ 例单亲二倍体，未检出胎儿真阳性，阳性预期值为 ０；妊娠结 局回访发现 ２２ 例 １６－三体高风险孕妇中，１９ 例（８７．４％，１９ ／ ２２）孕妇存在流产、胎儿发育异常、早产、生长发育迟缓等。结论 血浆 ｃｆ ＤＮＡ 检测提示１６－三体高风险中胎儿真阳性的可能性小，多数可能是限制性胎盘嵌合；ｃｆＤＮＡ 检出 １６－三体高风险中 大部分孕妇存在不良妊娠结局，应密切关注这类胎儿的生长发育情况及围产期可能的并发症。     

急性髓细胞白血病M_（2b）型AML_1－ETO融合基因转录本的检测

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）－Ｍ＿（２ｂ）患者约９０％有ｔ（８；２１）。已经证明它导致ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因。我们应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测了２２例ＡＭＬ＿１－Ｍ＿（２ｂ）其中ｔ（８；２１）阳性１６例，阴性２例，不能确定有无ｔ（８；２１）的４例，发现全部２２例患者均可检出ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因转录本。同时在５例ｔ（８；２１）阴性的ＡＭＬ中，包括Ｍ＿（２ａ）２例，Ｍ＿４２例，Ｍ＿３１例，均未检出上述融合基因转录本。我们的初步结果提示ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因可以作为ＡＭＬ－Ｍ＿（２ｂ）的基因标志。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清IL—6和sIL—2R水平及其临床意义

非霍奇金淋巴瘤患者血清ＩＬ－６和ｓＩＬ－２Ｒ水平及其临床意义杨镜明董戴玉陈玲玲卞锦国陈晓任梅玉余金妹我们检测１８例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）的血清白细胞介素６（ＩＬ－６）和可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，并与β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）、乳...     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl-2和c-myc转录水平表达及其意义

采用原位分子杂交方法，检测了５４例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平，并与患儿临床表现进行对比分析。结果表明：小儿ＡＬＬｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达与非白血病对照组比较普遍增高，呈显著性差异（Ｐ＜００１）；ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平呈明显相关（ｒ＝０８０４８，Ｐ＜００１）；两者的表达水平表明复发病例明显高于初诊病例；高危型明显高于普危型（Ｐ＜００１）。结果提示：ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因的异常表达在小儿ＡＬＬ的发生发展过程中起重要作用。综合分析ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达情况可作为评价小儿ＡＬＬ病情和恶性程度的重要指标，也可作为判断预后的指标。     

鼻腔及咽淋巴环恶性淋巴瘤的免疫组化与基因重排检测

对４３例鼻腔及咽淋巴环非何杰金淋巴瘤（Ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ＇ｓＬｙｍｐｈｏｍａ，ＮＨＬ）重点进行了免疫表型和基因重排检测，其中鼻腔２５例、咽淋巴环１８例。免疫表型检查结果４３例ＮＨＬ中，ＵＣＨＬ－１和Ｌ２６表达阳性各为２６和７例，１０例无确切免疫表型表达，常有ＵＣＨＬ－１和Ｌ２６阳性细胞同时存在于组织中；ＴＣＲβ和ＩｇＨ基因重排检测：４１例中２８例出现特异性基因重排扩增单带，其中２１例ＴＣＲβ基因重排检测阳性，７例ＩｇＨ阳性，包括１２例ＵＣＨＬ－１和６例Ｌ２６阳性表达者和１０例无确切免疫表型表达者；１例高度反应性增生病例ＴＣＲβ基因重排检测阳性，２例低分化癌和２例淋巴组织高度反应性增生均为阴性。结果表明，免疫表型和基因重排检测有一定互补性；同时讨论了用常规石蜡切片的刮取组织进行基因重排检测的意义。     

bcl—2蛋白对T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用

为探讨ｂｃｌ－２蛋白对足叶乙甙触发Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ程序性死亡的调控作用，采用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ法，将ｂｃｌ－２基因逆转录病毒载体转入人Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ中，并使其稳定、高效地表达。结果，经足叶乙甙处理后，高表达ｂｃｌ－２蛋白的ＣＥＭ产生梯状ＤＮＡ的量低于对照（Ｐ〈０．０５）。这表明高水平ｂｃｌ－２蛋白对白血病细胞程序性死亡过程可能具有较强的抑制效应。     

筑巢式PCR检测白血病微量残留bcr／ablmRNA

采用逆转录－筑巢式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）技术检测３３例不同临床阶段的慢性粒细胞白血病（ＣＭｕ及１８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ。结果：３３例ＣＭＬ中３１例阳性，其中２１例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，７例表达ｂｃｒｅｘｏｎ２／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例同时表达这两种ｍＲＮＡ。在１８例ＡＬＬ中阳性６例，其中４例表达ｈｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２＋ｂｃｒｅｘｏｎｌ／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ。本实验的敏感度达１０￣（－６）～１０￣（－７）水平，有助于临床上白血病微量残留病的早期诊断。     

bcl－2蛋白对T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用

为探讨ｂｃｌ－２蛋白对足叶乙甙触发Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ程序性死亡的调控作用，采用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ法，将ｂｃｌ－２基因逆转录病毒载体转入人Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ中，并使其稳定、高效地表达。结果，经足叶乙甙处理后，高表达ｂｃｌ－２蛋白的ＣＥＭ细胞产生梯状ＤＮＡ的量低于对照（Ｐ＜０．０５）。这表明高水平ｂｃｌ－２蛋白对白血病细胞程序性死亡过程可能具有较强的抑制效应。     

9—顺式维甲酸诱导HL—60细胞凋亡

目的：检测９－顺式维甲酸（９－ｃｉｓＲＡ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的能力，并探讨其分子机制。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、流式细胞仪分析检测细胞凋亡，应用流式细胞仪检测ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２含量。结果：９－ｃｉｓＲＡ可以诱导ＨＬ－６０细胞在分化后发生典型的凋亡。在ＨＬ－６０细胞分化和凋亡的过程中ｂｃｌ－２含量逐渐下降。９－ｃｉｓＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡能力和降低ｂｃｌ－２表达的能力均显著强于全反式维甲酸（Ａ－ＴＲＡ）。结论：９－ｃｉｓＲＡ具有诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。ｂｃｌ－２表达水平的降低可能是经诱导分化成熟的白血病细胞走向凋亡的重要条件。     

大黄对小肠上皮细胞ICE基因mRNA表达水平的影响

目的：研究缺血－再灌注损伤后肠粘膜上皮细胞亡与ＩＣＥ和ｂｃｌ－２基因ｍＲＮＡ表达的关系,并探讨药用大黄的肠道屏障保护作用机制。方法：制备小鼠肠系膜上动脉（ＳＭＡ）缺血－再灌注损伤的实验模型,琼脂糖凝胶电泳法检测肠上皮细胞凋亡,逆转录定量多聚酶链式反应（ＲＴ－Ｑ－ＰＣＲ）检测肠上皮细胞中ＩＣＥ和ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ的表达。结果：大黄治疗组小鼠肠上皮细胞致伤后各时间点ＤＮＡ梯状电泳条带强度显著弱于对照     

bcl－2蛋白在非小细胞肺癌的意义

ｂｃｌ－２蛋白在非小细胞肺癌的意义｜｜（ＰｅｚｚｅｌｌａＦ，ｅｔａｌ．ＮＢｎｇｌＪＭｅｄ，１９９３；３２９：６９０）原癌基因（Ｐｒｏｔｏ－ｏｎｃｏｇｅｎｅ）ｂｃｌ－２可对抑制程序化细胞死亡（脱噬作用，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的蛋白质编码。这种蛋白质在正常...