剔毒护肝方药物血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的:研究剔毒护肝方药物血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响.方法:传代培养大鼠肝星状细胞(HSC)系HSC-T6与不同剂量剔毒护肝方(大、中、小剂量组)共同培养48小时,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测剔毒护肝方对大鼠HSC凋亡的影响;免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax水平.结果:剔毒护肝方能使大鼠HSC凋亡率明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,促凋亡分子Bax表达增强(P＜0.01).结论:剔毒护肝方可下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC凋亡.     

盐酸地尔硫(艹卓)对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨合贝爽对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 将VSMC随机分为五组,分别为空白组、模型组(AngⅡ10<'-7>mol/L)和模型+合贝爽1、2、3组(剂量分别为10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>mol/L),应用MTT法检测VSMC的生长率,TUNEL法检测凋亡率,RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Fas和P53 mRNA的表达.结果 合贝爽抑制VSMC增殖,促进VSMC凋亡,抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,促进促凋亡基因Bax、Fas和P53的表达.结论 合贝爽使VSMC增殖减少,凋亡增加,其机制可能与抑制抗凋亡基因Bcl-2表达、促进促凋亡基因Bax、Fas和P53表达有关.     

抗HER-2嵌合抗体chA21对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的 探讨抗HER-2嵌合抗体chA21在体外对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用及其分子机制。方法 chA21处理体外培养的SKOV3细胞，采用透射电镜和原位末端标记技术观察和检测细胞凋亡情况，采用免疫细胞化学技术检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-3）表达情况。结果 chA21作用72h，可见SKOV3细胞凋亡，其作用呈剂量依赖性；SKOV3细胞Bax、Fas和caspase-3表达升高、Bcl-2表达下调、Bcl-2／Bax降低，并呈剂量依赖性。结论 chA21在体外可诱导SKOV3细胞凋亡，其分子机制与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及caspase-3的表达有关。     

半乳糖糖基转移酶反义核酸对卵巢癌细胞凋亡的诱导作用及机理探讨

采用脂质体介导的基因转染方法将人工合成α1,4半乳糖糖基转移酶(α1,4 Gal-T)基因反义寡脱氧核苷酸转入卵巢癌细胞株(COC1)中.用流式细胞仪检测其红细胞三糖基神经酰胺(Gb3)、Bcl-2和Bax蛋白表达及COC1细胞凋亡率.结果与对照组及无义核酸组比较,反义核酸组COC1细胞Gb3、Bcl-2表达下降、Bax蛋白表达升高,COC1细胞凋亡率升高(P<0.05、<0.01).提示α1,4 Gal-T基因反义核酸能够诱导COC1凋亡,其机理可能与其降低Bcl-2蛋白表达,升高Bax蛋白表达有关.     

凋亡基因在心肌梗死的表达及血管紧张素转化酶抑制剂的干预作用

目的探讨凋亡基因对大鼠心肌梗死的表达及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的干预作用。方法将大鼠随机分为假手术组、梗死模型组、梗死模型 福辛普利小剂量组、梗死模型 福辛普利大剂量组,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠心肌梗死24h和4周时心肌细胞内凋亡抑制基因Bcl-2与凋亡基因Bax、P53、Fas的mRNA表达量,并探讨它们之间的相互关系。结果急性心肌梗死24hBcl-2表达下降,福辛普利促进其高表达,Bax、P53、Fas增高,福辛普利抑制其表达;急性心肌梗死4周,Bcl-2表达下降,福辛普利促进其表达,Bax、P53表达变化不大,福辛普利对其表达无影响,Fas高表达,福辛普利抑制其表达。结论大鼠急性心肌梗死后心肌细胞存在凋亡现象,Bcl-2表达下降,Bax、P53、Fas表达上调介导心肌梗死后心肌细胞凋亡的发生。ACEI可通过干预上述基因抑制急性心肌梗死后的心肌细胞凋亡。     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达及意义

目的探讨凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax在Graves病(GD)和桥本氏病(HT)中的表达及意义。方法取外科手术切取的GD及HT病人甲状腺组织标本,颈部手术时取正常甲状腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测甲状腺标本Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达和分布状况。结果(1)Fas/FasL在GD和HT甲状腺滤泡上皮细胞表达均较正常对照组增高(P<0.01)。(2)在GD甲状腺滤泡上皮细胞Bcl-2及Bax表达明显高于HT组及正常对照组,以Bcl-2表达强度显著高于同组Bax(P<0.01),而在HT,Bcl-2表达强度与正常对照组比较差异无统计学意义。(3)GD与HT相比较,GD甲状腺滤泡细胞及浸润淋巴细胞Fas,Bcl-2抗原表达均强于HT,但其浸润淋巴细胞表达强度明显低于同组甲状腺滤泡细胞(均P<0.05)。结论Fas/FasL高表达和Bcl-2的低表达可能引起HT甲状腺滤泡上皮细胞的凋亡。在GD,Fas、Bax诱导细胞凋亡的作用可能被高表达Bcl-2对抗,从而致甲状腺体积增大、功能亢进。此外,Bcl-2与Bax表达强度的比值对于凋亡的调控有重要影响作用。     

Fas-Fasl系统及凋亡与再生障碍性贫血关系的研究

目的 :研究Fas Fasl系统及凋亡与再生障碍性贫血 (Aplasticanemia ,AA)发生、发展的关系。方法 :分别用TUNEL方法和免疫组织化学标记方法检测凋亡细胞和Fas、Fasl表达细胞 ,并计算其百分率 ;用ELISA方法检测血清中的sFas含量。结果 :AA患者骨髓单核细胞 (BMMNC)中的凋亡细胞百分率为 2 9.6 3%± 17.71% ,Fas表达细胞百分率为 2 4 .81%± 9.4 5 % ,Fasl表达细胞百分率为 2 1.83%± 7.91% ,血清sFas含量为 5 .72± 0 .34μg/L ,与正常对照组 (分别为 2 .2 7%± 0 .74 %、1.93%± 0 .32 %、4 .18%± 1.0 2 %及 7.5 5± 0 .79μg/L)比较差异均有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;AA患者凋亡细胞百分率与Fas+ 细胞或Fasl+ 细胞百分率之间无直线相关关系 (P >0 .0 5 )。结论 :Fas Fasl系统介导的凋亡以及机体对其调控的失常可能参与了AA患者骨髓造血衰竭的病理生理过程 ,但体内可能还存在另外的机制 ,可造成AA患者BMMNC凋亡增加     

卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠CT-1及凋亡相关基因表达的影响

目的研究卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌营养素1及凋亡相关基因表达的影响。方法将Wistar雄性大白鼠随机分为3组：对照组、Iso损伤组、Cap预处理组;用TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测Fas、Bcl-2和Bax表达,用Western blot方法检测心肌组织CT-1表达。结果 Cap预处理组与Iso损伤组比较,心肌细胞凋亡指数减少,Fas和Bax表达降低,Bcl-2和CT-l表达增高（P〈0.01或〈0.05）。结论卡托普利预处理可能通过促进CT-1的表达,来调节凋亡相关基因的表达,并发挥心肌保护作用。     

凋亡基因Bcl-2,Fas及Bax在慢性肝病的表达及临床价值

目的观察凋亡调节基因Bcl-2,Fas及Fax在慢性肝病中发病中的意义.方法95例慢性肝病肝脏或癌组织石蜡包埋标本.其中慢性肝炎69例,肝硬变11例,原发性肝癌15例.均取连续切片HE染色及Bcl-2,Fas,Bax免疫组化检测.对其中10例慢肝取外周血单个核细胞(PBMC)进行上述免疫组化染色.结果肝组织Bcl-2阳性表达63例(66.3%),其表达阳性率依次为肝癌>肝硬变>慢性肝炎,各组相比差异显著(P<0.01).强阳性表达率依次为肝癌>慢性肝炎>肝硬变.Fas表达的慢性肝炎的阳性率为100%,Bax为95.2%,但Bcl-2仅为33.4%,慢性肝炎时以Fas及促凋亡因子Bax的表达为主,而在肝癌时以抗凋亡因子Bcl-2的表达为主.结论三种凋亡基因的异常表达与肝癌发生密切相关,在肝组织或PBMC中联合检测可能对肝硬变癌变的早期诊断和预后判断有指导意义.     

食管癌引流淋巴结细胞诱导肿瘤细胞凋亡机制探讨

目的 探讨食管癌引流淋巴结(TDLN)细胞诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 将TDLN细胞分为3组进行培养.TDLN-Ⅰ组培养基中添加IL-2,TDLN-Ⅱ组添加IL-2 + IL-4 +GM-CSF,TDLN-Ⅲ组添加IL-2+IL-4+GM-CSF+自身食管癌细胞抗原(tAg).用术中切取的食管癌组织块建立荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组,分别给予生理盐水、IL-2及相应TDLN细胞.利用流式细胞术检测瘤细胞凋亡率和Fas、FasL、Bax、Bcl-2、survivin蛋白的表达.结果 对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组肿瘤细胞的凋亡率分别为6.4%±3.1%、11.1%±1.3%、22.0%±2.8%、23.3%±1.9%、33.6%±5.2%,两两比较,P均＜0.05;Fas蛋白的FI值分别为1.38±0.02、1.39±0.09、1.36±0.06、1.34±0.11、1.32±0.05,两组相比,P均＞0.05;FasL蛋白的FI值分别为1.45±0.09、1.49±0.11、1.50±0.15、1.47±0.06、1.49±0.08,两组相比,P均＞0.05;Bax蛋白的FI值分别为1.18±0.08、1.20±0.12、1.48±0.18、1.56±0.08、1.66±0.07.结论 TDLN细胞可能通过影响Bax/Bcl-2和survivin蛋白表达诱导肿瘤细胞凋亡.