化学发光法检测HCV核心抗原在丙型肝炎初期筛查中的应用研究

目的探讨采用化学发光法(CLIA)检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、抗体(HCV-Ab)及HCV-RNA在丙型肝炎初期筛查中的价值。方法应用CLIA分别检测HCV-cAg和HCV-Ab,以HCVRNA定量检测结果作为参照,分别对220例标本进行检测,并对结果进行统计分析。结果 75例疑似人群的筛查标本中HCV-Ab阳性15例(20%)、HCV-cAg阳性6例(8.0%)、HCV-RNA阳性7例(9.3%)。70例确诊组标本中HCV-Ab阳性66例(94.3%)、HCV-cAg阳性62例(88.6%)、HCV-RNA阳性60例(85.7%)。75例健康人群的筛查标本中HCV-Ab阳性5例(6.7%)、HCV-cAg阳性2例(2.7%)、HCV-RNA阳性0例。HCV-Ab和HCV-cAg联合检测与HCV-RNA检测阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论在使用CLIA进行丙型肝炎早期筛查时,建议进行HCV-cAg与HCV-Ab联合检测。若需要确诊建议结合临床表现和作进一步的HCV-RNA定量检测。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及初步应用

目的　研制丙型肝炎病毒核心抗原 (HCV cAg)ELISA检测试剂 ,用于诊断早期丙型肝炎。方法　用基因工程表达的HCV cAg ,免疫Balb/c小鼠 ,制备抗HCV cAg单克隆抗体 ,建立检测HCV cAg双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA) ;以此检测 12 5份抗 HCV、抗 HIV、抗 TP阴性 ,但单项ALT高的献血者血浆。结果　 12 5份单项ALT高的献血者血浆中检出 9份HCV cAg阳性。结论　HCV cAg双抗体夹心ELISA试剂 ,有望用于早期丙型肝炎诊断。     

南宁地区无偿献血人群HCV筛查阳性情况分析

目的了解南宁地区无偿献血者丙型肝炎病毒(HCV)筛查阳性反应人群分布情况。方法收集南宁地区2015-2017年采集的389 518份无偿献血者血液标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)用两种试剂进行检测,ELISA检测合格标本进行核酸检测(NAT),对无偿献血者性别、献血形式、年龄、民族、教育程度和职业与HCV筛查结果进行分析。结果 389 518份无偿献血者血液标本中,HCV筛查阳性631份,阳性率为0.16%,其中ELISA阳性630份,NAT阳性1份。无偿献血者HCV阳性率与年龄、民族因素无关(P0.05);女性献血者HCV阳性率显著低于男性(P0.01),机采血小板成分血献血者HCV阳性率显著低于全血献血者(P0.01);学历越高,HCV阳性率越低(P0.01);医务人员是献血者已知职业中HCV阳性率最低的献血人群(P0.05)。结论提高女性、高学历、医务人员和既往合格献血人群献血比例,献血前进行HCV快速筛查,加强潜在和固定献血者的健康教育等措施可以降低经输血传播HCV的风险,有利于血液安全。     

丙型肝炎核心抗原检测在丙型肝炎诊断中的应用价值

目的 同时检测丙型肝炎患者血清中的丙肝RNA(HCV RNA)载量,抗丙肝抗体,丙型肝炎核心抗原(HCVcAg),对比三项检测结果 ,评价HCVcAg检测的临床应用价值.方法 采用国产HCVcAg ELISA两种定性检测试剂盒,分别检测血清中的游离核心抗原,核心总抗原,将结果 同HCV RNA检测结果 和抗丙肝抗体结果 对照,分析三者的相关性.结果 214例HCV RNA检测阳性的丙肝患者中,103(48.1%)例HCV游离核心抗原检测阳性,162(75.7%)例HCV核心总抗原检测阳性,214(100%)例HCV抗体检测阳性,HCV RNA水平越高,HCV核心抗原检出率也越高.HCVcAg检测试验的特异性为100%.结论 总HCVcAg检测试剂盒具有较高的敏感度和特异性,和HCV抗体相比,HCVcAg是HCV感染更早出现的病毒标志物,它缩短了HCV检测的窗口期,可以用于血站献血员HCV感染的筛查,以及在一些不具备开展PCR的试验室作为HCV RNA检测的替代试验.     

加样反应温育条件对ELISA法检测丙肝抗原的影响

目的：探讨丙肝抗原检测（ELISA法）加样后改变反应温度及时间对检测结果的影响。方法：对234例样本分别在37℃温育90min及在43℃温育45min的条件下检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）的S/CO值。结果：两种温育条件对于样本阳性检出率、吸光度值、S/CO值没有显著影响。结论：适当地提高温育温度及缩短温育对HCV-cAg的检测结果影响不明显。这有助于缩短临床检验工作者的工作时间,尽快报告结果,提高工作效率。     

丙型肝炎病毒不同编码区重组抗原在抗体检测中的应用

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)不同编码区重组蛋白片段的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法　分别以 4种HCV单片段抗原 (C、NS3、NS4或NS5 )检测抗 HCV抗体阳性血清 ;以 4种单片段抗原的混合物 (MIX)检测抗 HCV抗体阳性血清、大学生体检血清和抗 HCV抗体阴性质控血清。结果　 90份抗 HCV抗体阳性血清中共有 75份可与一种或多种单片段抗原反应 ,阳性率分别为 70 .0 % (C)、6 1.1% (NS3)、5 2 .2 % (NS4 )、4 4 .4 % (NS5 ) ,其中仅与C、NS3、NS4和NS5一种抗原发生反应的分别有 8份、1份、2份和 3份血清标本 ;90份抗 HCV阳性血清经MIX抗原检测 ,阳性率为 83.3% (75 / 90 ) ;10 0份大学生血清和39份阴性质控血清经混合抗原检测均阴性。结论　HCV不同编码区重组蛋白片段有不同的免疫反应性 ,在发展抗 HCV抗体诊断试剂时 ,应采用各种不同编码区的混合抗原。     

丙肝病毒核心抗原试剂检测进展

丙肝病毒(HCV)核心抗原是HCV结构蛋白之一,其血清中的滴度和HCV RNA水平密切相关。目前使用的HCV抗体诊断试剂和核酸检测技术存在诸多问题。随着HCV核心抗原检测系统的不断完善,该系统将有可能取代抗体和核酸检测,成为筛选献血者HCV的检测项目。     

丙型肝炎核心抗原检测在丙型肝炎诊断中的应用价值

目的同时检测丙型肝炎患者血清中的丙肝RNA（HCVRNA）载量,抗丙肝抗体,丙型肝炎核心抗原（HCVcAg）,对比三项检测结果,评价HCVcAg检测的临床应用价值。方法采用国产HCVcAgELISA两种定性检测试剂盒,分别检测血清中的游离核心抗原．核心总抗原,将结果同HCVRNA检测结果和抗丙肝抗体结果对照,分析三者的相关性。结果214例HCVRNA检测阳性的丙肝患者中。103（48．1％）例HCV游离核心抗原检测阳性,162（75．7％）例HCV核心总抗原检测阳性,214（100％）例HCV抗体检测阳性．HCVRNA水平越高。HCV核心抗原检出率也越高。HCVcAg检测试验的特异性为100％。结论总HCVcAg检测试剂盒具有较高的敏感度和特异性,和HCV抗体相比,HCVcAg是HCV感染更早出现的病毒标志物,它缩短了HCV检测的窗口期．可以用于血站献血员HCV感染的筛查,以及在一些不具备开展PCR的试验室作为HCVRNA检测的替代试验。     

丙肝病毒核心抗原试剂检测进展

丙肝病毒(HCV)核心抗原是HCV结构蛋白之一，其血清中的滴度和HCV RNA水平密切相关。目前使用的HCV抗体诊断试剂和核酸检测技术存在诸多问题。随着HCV核心抗原检测系统的不断完善，该系统将有可能取代抗体和核酸检测，成为筛选献血者HCV的检测项目。     

核酸检测联合酶联免疫吸附试验在献血者血液感染性指标筛查中的应用

目的 探讨核酸检测(NAT)联合酶联免疫吸附试验(ELISA)在献血者血液乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病筛查中的应用,为提高血液质量及确保输血安全提供依据。方法 选择周口市中心血站2016年3月至2017年4月采集的无偿献血者血液标本64 420例为研究对象,分别应用两种不同厂家ELISA试剂进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)血清学检测,同时对血清学检测合格标本进行NAT检测,分析两种方法的检测结果。结果 64 420例献血者中血清学检测共1362项不合格,21例存在两项指标重叠感染,63 079例血清学检测合格;血清学检测合格献血者中,HBV-DNA阳性57例(0.09%),HIV-RNA阳性1例,未检出HCV-RNA阳性;HBV-DNA阳性检出率男性和女性比较差异无统计学意义(P>0.05),初次献血者与重复献血者比较及不同年龄段献血者比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 ELISA筛查献血者血液标本存在一定的漏检现象,NAT检测可有效降低经输血传播乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病的风险,提高血液质量和临床输血安全。     

微板法初步筛查批量标本Rh血型D抗原的检测方法

目前,Rh血型的筛查及鉴定基本上采用盐水法、酶法及聚凝胺等技术在试管中进行[1],操作周期长,效率低,判定标准的人为因素影响多.随着多克隆(Polycolne)抗血清的生产以及微板技术的应用,出现了盐水介质抗血清一步法筛查Rh血型的微板操作技术.本中心于1999年4月建立了Rh血型大规模初筛的自动化操作方法,实现了Rh系统初筛的标准化,使也其成为本中心的常规检测项目.     

丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值

目的通过同时检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)两项指标,且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测,探讨HCV-cAg检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对90例HCV-Ab阳性的感染者血清以及391例丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高但HCV-Ab阴性的高危人群血清同时检测HCV-cAg,其中高危人群组中有2例为阳性,对其做HCV-RNA定量检测。结果 90例丙肝抗体阳性组中,34例为HCV-cAg阳性,阳性率为37.78%;391例丙肝抗体阴性的高危人群组中,2例为HCV-cAg阳性,阳性率为0.51%,此2例经HCV-RNA定量检测确证为1例阳性,1例阴性。结论丙型肝炎病毒核心抗原检测能够有效缩短窗口期,操作简便,费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。     

单项抗-HBc阳性献血者血液乙型肝炎病毒感染性的研究

在健康人群体检和献血者筛查中,常发现有些人的血清乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)中仅抗-HBc阳性,即单项抗-HBc阳性者.单项抗-HBc阳性的意义还不太清楚[1],因此对献血者抗-HBc筛查的必要性仍存在争议.笔者应用PCR技术检测无偿献血者中发现的单项抗-HBc阳性者血液HBV DNA,现报告如下.     

HCV核心抗原酶联免疫检测与HCV—RNA定量检测敏感性的比较

[目的]比较ELISA法测定总HCV—cAg与荧光定量PCR法测定HCV—RNA两种检测方法对诊断HCV感染的敏感性,分析HCV—cAg ELISA法诊断试剂的重要意义。[方法]ELISA法测定血清样本中的HCV抗体,改进型ELISA法测定血清样本中的HCV—cAg,实时荧光定量PCR法测定血清样本中的HCV—RNA,阳性样本经重复实验确认。[结果]通过用HCV抗体检测试剂对门诊病人或献浆员进行筛查,获得HCV抗体阳性血清样本264例。对这些病例别进行ELISA法测定总HCV—cAg实验和荧光定量PCR法测定HCV—RNA实验,测到HCV—cAg阳性病例101例,HCV—RNA阳性病例115例。经统计学分析,两种检测方法的敏感性差别不太大（0．01〈P〈0．05）。[结论]HCV—cAgELISA法检测和HCV—RNA定量检测具有相近的敏感性,日存某种稗序上HCV—cAg ELISA法榆测可以作为HCV—RNA定量榆测的有效替代。     

在安全输血中应用丙型肝炎病毒核心抗原检测技术的初步探索

本研究探讨用丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶联免疫吸附技术（HCV-cAg ELISA）筛查献血员感染HCV的可行性.对我医院2003年1月-2005年12月间的8 677份献血者血清标本进行抗-HCV初检和复检.将仅初检阳性的15份血清标本和仅复检阳性的14份血清标本,分别再做HCV-cAg ELISA和HCV RT-PCR检测.结果表明：经HCV-cAg ELISA检测,29份仅初检（15份）和仅复检（14份）抗-HCV阳性血清标本中只有5份结果为阳性,阳性率为17.24%.经HCV RT-PCR检测,29份仅初检和仅复检抗-HCV阳性血清标本中同样也只有5份阳性结果,阳性率也为17.24%.结论：HCV-cAgELISA检测技术的敏感性与HCVRT-PCR技术类似,但成本明显降低,有可能作为HCV感染的辅助确证试验,或作为抗-HCV检测技术的更新换代技术用于安全输血中献血者血液的筛查.     

献血前丙氨酸氨基转移酶初筛意义的探讨

目的探讨在献血者献血前使用干式自动生化仪快速初筛丙氨酸氨基转移酶（ALT）的意义。方法使用Reflotron干式生化仪及其配套测试条在采血前初筛献血者ALT。献血后应用全自动生化仪采用速率法对献血者血液进行ALT检测。同时,比较施行ALT初筛前后因单项ALT不合格的报废率。结果使用干式化学法在献血前对献血者进行ALT初筛后,血液的报废率显著降低。结论献血前对献血者初筛ALT是一种筛除ALT异常的有效方法,能够最大限度地保留献血者和减少宝贵血源的浪费。     

生殖支原体抗原快速检测方法的初步建立与应用

本文报告了快速检测生殖支原体（Ｍｇ）抗原的ＥＬＩＳＡ双抗夹心法的初步建立及对部分地区性病门诊就诊者Ｍｇ 感染状况的检测结果与分析。该方法具有一定的灵敏度和特异性，适用于检测泌尿生殖道标本中的Ｍｇ 抗原。用本方法检测天津和江门地区ＳＴＤ 门诊患者，Ｍｇ 抗原阳性率分别为１２％ 和１９ ％ ，提示两地性病高危人群中均存在Ｍｇ 感染，应予以重视。     

乙型肝炎病毒表面抗原血液复查阳性结果确认方案的研究

目的为探讨简便、经济、可行的HBsAg阳性结果确认方案,为今后在检验常规工作中开展血液筛查阳性结果的确认奠定基础。方法随机抽取2004～2006年奉贤区血站HBsAg检测不合格血浆标本441份,采用Murex、Organon、新创和科华酶标(EIA)试剂进行复检,对Murex复检为阳性的标本采用Murex中和试验进行确认,并对无法确认或确认为可疑的标本进行HBV DNA检测。结果经EIA复检、中和试验确认及HBV DNA检测,确认441份标本中406份为阳性,7份为可疑,28份为阴性。通过对4种EIA试剂阳性预期值和漏检情况的分析,发现其阳性预期值均达98.74%以上,试剂间差异无统计学意义,而漏检率分别为0.49%、4.19%、3.45%和9.36%,其差异无统计学意义。进一步分析发现,无论4种、3种或2种试剂组合检测,其阳性预期值的差异无统计学意义,但2种EIA试剂组合检测时,"Organon+新创"、"Organon+科华"、"新创+科华"组合的漏检率明显较其他组合为高。结论选择合适的2种EIA试剂组合检测,结果同时为阳性时,不必做中和试验而直接判断待检标本为真阳性,当2种试剂组合中其中一种为Murex...     

型别特异性丙型肝炎病毒嵌合抗原在血清分型中的应用

目的克隆表达型别特异性丙型肝炎病毒HCV 1b、2a嵌合抗原,并用于HCV血清分型检测。方法分别对HCV 1b、2a的C区和NS4区进行表位预测,选取优势表位序列连接后,于PGEX-4T-2载体中克隆表达嵌合的HCV 1b、2a抗原,应用竞争抑制酶联法对44份HCV 1b和18份2a血清进行血清分型检测。结果 62例血清样品中50例能分型,其中1b型34例,2a型16例,其分型率为80.6%(50/62),与基因型的符合率为90.0%(45/50)。结论丙型肝炎病毒HCV 1b、2a嵌合抗原用于HCV的血清分型检测,具有较高的准确率和分型率,可用于HCV血清分型检测。