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1.
目的 研究加味小青龙汤对实验性哮喘小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响,探讨其改善哮喘的疗效和机制。方法 将Balb/c小鼠随机分为4组:对照组、模型组、小青龙汤组、加味小青龙汤组。除对照组,其余组采用卵清蛋白(OVA)致敏、激发制备小鼠哮喘模型,小青龙汤和加味小青龙汤组分别灌胃小青龙汤和加味小青龙进行治疗。末次致敏24 h后,HE染色观察肺组织炎性细胞浸润,PAS染色观察支气管杯状细胞增生,ELISA法检测血清IgE和BALF中IL-6、IL-17A、IL-10水平变化,Giemsa染色统计支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞种类,流式细胞术分析脾组织中CD4+ROR-γt+和CD4+Foxp3+细胞百分比。Real-time PCR检测肺组织中ROR-γt、FoxP3 mRNA的表达,Western blot检测肺组织中RORγt、FoxP3、HO-1及胞核Nrf2蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠肺组织炎症评分、支气管细胞增生及BALF中炎性细胞计数显著增加;与模型组比较,加味小青龙汤可以改善上述变化,且优于小青龙汤组。与对照组比较,模型组血清IgE、BALF中IL-6... 相似文献
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《中华中医药学刊》2015,(12)
目的:研究益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响,初步揭示该方防治哮喘的作用机制。方法:SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分成正常对照组、哮喘模型组,益气涤痰化瘀方低、中、高剂量组。卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法,复制哮喘模型,益气涤痰化瘀方干预治疗。观察各组小鼠行为学改变;制作肺组织病理切片进镜下观察;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及分类计数;取小鼠血清ELISA法检测IL-17的变化。结果:(1)与哮喘模型组比较,药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻。(2)益气涤痰化瘀方中剂量组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)分类计数较哮喘模型组都有减少(P0.05)。(3)益气涤痰化瘀方各剂量组与哮喘模型组比较,小鼠血清IL-17浓度显著降低(P0.01)。结论:益气涤痰化瘀方治疗哮喘的作用机理之一是通过抑制哮喘小鼠IL-17的表达,减轻气道炎症反应,干预哮喘发作。 相似文献
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目的:观察肺"俞募配穴"艾炷灸对哮喘小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)表达的影响,探讨艾炷灸治疗哮喘的可能作用机制。方法:将60只SPF级健康雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、LY294002组(LY剂组)、电针组和艾炷灸组,各12只,采用卵清蛋白(OVA)致敏复制哮喘模型。除正常组外,其他组小鼠于实验第1、7、14天腹腔注射以0.9%氯化钠溶液配制的致敏液(含OVA15μg、氢氧化铝30 mg)0.5 mL/只,第15天起予1%OVA溶液雾化激发,每次20 min,每天1次,连续2周;正常组以0.9%氯化钠溶液代替进行以上操作。LY剂组于实验第13、14、15天予尾静脉注射LY294002;电针组于第15天起予电针"肺俞""中府"穴,疏密波,频率2 Hz/20 Hz,强度1 mA,每次15 min,每日1次,连续2周;艾炷灸组于第15天起予艾炷灸"肺俞"和"中府"穴,每次每穴灸3壮,每日1次,连续2周。每组小鼠于实验第16、18、22天记录引喘潜伏期,第29天统一取材,予ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中IL-17和IL-10表达... 相似文献
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目的观察支气管哮喘(哮喘)大鼠肺组织中维甲酸受体相关孤儿受体(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)的变化情况以及补肾平喘膏方对其的影响,以探讨补肾平喘膏方防治哮喘的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、膏方预防组、膏方治疗组和膏方防治(预防+治疗)组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠以卵蛋白(OVA)致敏并诱发哮喘模型。采用地塞米松或膏方治疗(正常组与模型组除外)后,RT-PCR法检测肺组织中RORγt和Foxp3的mRNA表达情况。结果模型组肺组织Foxp3 mRNA表达低于正常组(P0.01),经膏方干预的各组大鼠肺组织Foxp3 mRNA表达升高(P0.05),与正常组表达相似(P0.05),膏方各组组间差异无统计学意义(P0.05)。模型组肺组织RORγt mRNA表达高于正常组(P0.01),经膏方干预的各组大鼠肺组织RORγt mRNA明显降低(P0.05),膏方各组组间差异无统计学意义(P0.05)。结论补肾平喘膏方可以通过调节哮喘大鼠RORγt/Foxp3平衡,改善Th17/Treg的失衡状态,从而防治哮喘。 相似文献
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目的 探究发酵白芥子穴位敷贴对支气管哮喘大鼠气道炎症和辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡的影响。方法 将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、发酵组、非发酵组及假贴组,每组8只。空白组用生理盐水代替干预,其余组大鼠均用卵清蛋白和氢氧化铝混合液致敏建立支气管哮喘模型。造模成功后,每天雾化激发1 h前,地塞米松组给予腹腔注射地塞米松1 mg/kg, 1次/d,共10次;发酵组、非发酵组将药物贴敷于大鼠大椎、膻中、肺俞(双侧)、脾俞(双侧)、肾俞(双侧)穴,每次5 h, 1次/d,共10次;假贴组用同样方法贴敷凡士林;空白组和模型组不做任何处理。于末次雾化激发时观察各组大鼠哮喘行为并计分;干预结束后,取肺组织行HE染色观察其病理形态,取大鼠血清和肺泡灌洗液,ELISA法检测Th17、Treg相关细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-35(IL-35)水平,Western blot法检测肺组织中IL-17、IL-22、IL-10、IL-35蛋白表达情况。结果 与空白组比... 相似文献
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目的 探讨清益调免方通过对关键细胞因子的调控来调节辅助性T细胞17(Helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)平衡的作用机制。方法 采用随机对照试验设计,将CBA/J雌鼠分为3组:正常对照组(Normal control group,N)、模型组(Model group,M)、清益调免方治疗组(QYTMtreated group,Q),每组8只。N组雌鼠和BALB/c雄鼠合笼,M组和Q组雌鼠与DBA/2雄鼠合笼,Q组给予清益调免方溶剂,N组和M组给予等体积的蒸馏水。妊娠第14.5天处死孕鼠取材,计算胚胎丢失率;苏木精-伊红(HE)染色观察蜕膜组织的形态变化;流式细胞术检测孕鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)细胞、CD4+IL-17A+(Th17)细胞占CD4+T细胞的比例;酶联免疫吸附测定胎盘中白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素17A(IL-17A)、白介素6(IL-6)水平变化;实时荧光定量PCR检测胎盘组织中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头状螺旋转录因子3(... 相似文献
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目的从调节性T细胞(Tregs)和Th17细胞亚群平衡方面来探讨抗敏平喘方治疗哮喘的机制。方法将6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为5组:对照组、模型组、泼尼松(5.5 mg/kg)组、抗敏平喘方低和高剂量(4.95、9.90 g/kg)组;用卵清蛋白诱导小鼠哮喘模型,每天雾化后ig给药,连续15 d,末次给药后处死小鼠,通过病理切片HE染色观察肺组织的损伤情况,用流式细胞术测定血液中Th17和Tregs细胞亚群的变化比例;ELISA法检测小鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达水平。结果病理切片HE染色显示抗敏平喘方能够改善哮喘小鼠肺组织损伤,降低淋巴细胞对肺组织的浸润水平;抗敏平喘方能够下调血液中Th17细胞比例和上调Tregs细胞比例,并且存在剂量依赖效应;抗敏平喘方同时能够显著提高血液中IL-4和TGF-β水平并降低TNF-α水平。结论抗敏平喘方能够通过影响Th17细胞和Tregs在血液中的比例以及相关炎症因子的水平而达到治疗哮喘的作用。 相似文献
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目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)和TGF-β1水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β1,与地塞米松比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当(均P>0.05);Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当(均P>0.05)。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β1/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。 相似文献
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目的:探讨益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th1/Th2平衡的调节作用。方法:将SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分为正常对照组、哮喘模型组,益气涤痰化瘀方低、中、高剂量组。采用卵清白蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法构建哮喘模型,益气涤痰化瘀方干预治疗。观察各组小鼠行为学改变;制作肺组织病理切片行镜下观察;收集肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及分类计数;取小鼠血清以ELI SA法检测I FN-γ、I L-4的变化。结果:1)与哮喘模型组比较,药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻;2)益气涤痰化瘀方中剂量组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)分类计数较哮喘模型组减少(P0.05);3)与哮喘模型组比较,益气涤痰化瘀方高、中剂量组小鼠血清I FN-γ浓度升高(P0.05),I L-4浓度降低(P0.05)。结论:益气涤痰化瘀方可对免疫细胞Th2优势所致的免疫失衡状态进行调节,恢复Th1/Th2平衡;益气涤痰化瘀方可能通过调节机体平衡而减轻哮喘急性气道炎性病变,从而起到防治哮喘的作用。 相似文献
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《中华中医药学刊》2017,(6)
目的:观察红景天对支气管哮喘小鼠Th17/Treg T细胞及其细胞因子白介素IL-17、IL-23、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达影响,探讨其可能作用机制。方法:选择8周龄健康雌性BALB/C小鼠,随机分为3组:对照组、支气管哮喘模型组、红景天组,每组10只;支气管哮喘模型采用卵清蛋白致敏方法构建,小鼠支气管灌洗液细胞(BALF)计数,ELISA法测定肺组织中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β1水平,流式细胞术测定外周血CD_4~+IL-17~+与FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+的比例,HE染色观察肺组织病理形态学变化。结果:与对照组比较,模型组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数及肺匀浆IL-17、IL-23、CD_4~+IL-17~+占CD_4~+比例明显升高(P<0.05),肺匀浆IL-10、TGF-β1及FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+比例明显降低(P<0.05),肺组织炎症反应增加;与模型组比较,红景天组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数及IL-17、IL-23、CD_4~+IL-17~+占CD_4~+比例明显降低(P<0.05),IL-10、TGF-β1及FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+比例明显升高(P<0.05),肺组织炎症反应减轻。结论:红景天可有效抑制哮喘小鼠气道炎症反应,其作用可能与调控哮喘小鼠Th17/Treg T细胞及其细胞因子IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β1表达有关。 相似文献
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目的 观察射干麻黄汤对哮喘大鼠气道炎症及对外周血T辅助细胞(Th):Th1/Th2平衡的影响,探讨其治疗哮喘的作用机理.方法 40只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松组和射干麻黄汤组.构建哮喘模型后,采用瑞氏染色对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞进行分类及计数,用ELISA方法测定外周血中白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)水平.结果 (1)射干麻黄汤可有效对抗哮喘大鼠症状发作.(2)射干麻黄汤能显著减少哮喘组大鼠中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等气道炎症细胞计数,与地塞米松组相比有差异.(3)射干麻黄汤可以显著降低IL-4水平,提高IFN-γ/IL-4比率,与地塞米松相近.结论 射干麻黄汤可以减轻哮喘大鼠气道炎症,调节哮喘Th1/Th2失衡,降低气道高反应性,达到治疗哮喘的作用,这可能是其治疗支气管哮喘的作用机制之一. 相似文献
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《中华中医药学刊》2016,(8)
目的:观察变应性接触性皮炎Treg/Th17细胞平衡的变化,探讨龙胆泻肝汤治疗变应性接触性皮炎的部分干预机制。方法:将40只小白鼠随机分为4组:空白组、模型组、龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组,每组10只。采用DNCB皮肤涂抹方法制备小鼠背部ACD模型。模型复制成功后,龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组小鼠均按照成人2倍等效剂量灌胃,连续给药21 d,空白组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。实验结束后,取小鼠致敏部位皮肤,对皮肤组织中Foxp3、RORγt、IL-17 mRNA及蛋白的表达水平进行检测。结果:与空白对照组比较,模型对照组、西药组、龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型对照组比较,西药组和龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论:Treg/Th17细胞失衡可能是变应性接触性皮炎的发病机制之一,而龙胆泻肝汤可能就是通过作用于该靶点,调节Treg/Th17细胞平衡,而实现其对变应性接触性皮炎的治疗作用。 相似文献
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阿胶对哮喘大鼠气道炎症及外周血Ⅰ型/Ⅱ型T辅助细胞因子的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨阿胶对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响及其防治哮喘的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组(A),低剂量阿胶组(B),中剂量阿胶组(C),高剂量阿胶组(D),斯奇康组(E),哮喘对照组(F)。用酶联免疫吸附试验(EIASA)检测血液中自介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。HE染色观察肺组织病理学变化。结果与NS对照组比较,哮喘模型组血液中IFN-γ水平显著降低(P<0.01)。与哮喘模型组比较,阿胶低、中剂量组和斯奇康组IL-4水平显著降低(P<0.01),NS对照组、阿胶低、中剂量组和斯奇康组人鼠肺组织嗜酸性细胞浸润程度也明显减轻。结论哮喘大鼠存在Th2型细胞优势反应,而阿胶可能具有抑制哮喘Th2细胞优势反应的作用,从而调节Th1/Th2型细胞因子平衡,同时,可减轻哮喘大鼠肺组织嗜酸性细胞炎症反应。 相似文献
17.
《辽宁中医杂志》2013,(5):1020-1023
目的:观察咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠肺组织中气道炎症的影响。方法:将40只雄性Balb/C小鼠随机分为4组,每组10只。PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组。OVA组应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏。OVA/RSV组和咳喘六味合剂组(KLH组)在应用OVA致敏后用RSV滴鼻,复制急性病毒性哮喘模型。咳喘六味合剂组(KLH组)还用咳喘六味合剂治疗。处死动物,RT-PCR检测肺组织中白细胞介素13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)mRNA的表达;HE染色观察肺病理变化。结果:HE染色显示咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘小鼠气道炎症。与PBS组相比,OVA组IFN-γ降低,IL-13、IL-17A增高(P<0.05,P<0.01);OVA/RSV组IL-13、IL-17A增高(P<0.01),IFN-γ虽降低,但无统计学意义(P>0.05),且IFN-γ、IL-13均较OVA组增高(P<0.05,P<0.01)。较OVA/RSV组相比,KLH组能显著升高IFN-γ(P<0.05,P<0.01);降低IL-13、IL-17A mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎性因子的表达,达到控制哮喘的目的。 相似文献
18.
目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响.方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg-1),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg· kg-1)组.除正常组... 相似文献
19.
目的 观察古代经典名方二妙散(EMS)对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化的影响。方法 按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS(5.4 g·kg-1)组及甲氨蝶呤(MTX,0.5 mg·kg-1)组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型(此为第2次免疫),并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光(IF)双标法检测CIA小鼠关节中CD4+T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17(IL-17)和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3(FoxP3)在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果 与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重(P<0.01);小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高(P<0.01);小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高(P<0.01),Treg细胞表达比例显著减少(P<0.01);与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低(P<0.01);小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低(P<0.01),Treg细胞的表达比例显著增加(P<0.01)。结论 EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。 相似文献