菟丝子与其混淆品的鉴别

菟丝子为旋花科植物菟丝子CuscutachinensisLam .的干燥成熟种子 ,为常用中药。在市场上发现有南方菟丝子、欧洲菟丝子、金灯藤与菟丝子混用现象。为了准确区分药材真伪 ,确保临床用药安全有效 ,现将它们的性状、薄层色谱鉴别进行比较如下。1　性状鉴别1 .1　菟丝子　呈类椭圆形 ,直径 0 .1～ 0 .1 5cm。表面灰棕色或黄棕色 ,粗糙、布满白霜状的细颗粒。上端渐窄 ,身向腹面弯曲 ,成不明显喙状。一端有微凹的线形种脐、乳白色、稍隆起 ;胚黄色、螺旋卷曲 ,具胚根及子叶、内胚乳坚硬 ,半透明 ,质坚实 ,不易压碎 ,气微、味淡。1 .2　南方菟丝…     

快速PCR技术鉴别中药材蛤蚧的方法研究

目的:建立简单快速鉴别蛤蚧的特异性PCR方法。方法:对比蛤蚧及其伪品细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)序列,设计蛤蚧特异性PCR鉴别引物,优化特异性PCR条件,对蛤蚧及其7种常见混淆品进行扩增及荧光检测。结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光检测,所有蛤蚧药材均能扩增出约400 bp的特异性条带,加入SYBR Green I染料后,在365 nm下出现强烈绿色荧光,混伪品不具特异条带和绿色荧光,鉴别操作可在30 min内完成。结论:快速PCR结合荧光染料检测可快速鉴别蛤蚧及其常见伪品,为蛤蚧的快速鉴定提供了新的思路和方法。     

快速PCR方法在金银花真伪鉴别中的应用

建立简单快速的金银花真伪分子鉴别方法。该研究依据金银花trn L-trn F 625位G/T SNP位点设计快速位点特异性PCR引物,优化位点特异性PCR条件,对金银花及其9种混淆品进行扩增及检测。当在87℃预变性1 min;87℃变性5s,68℃延伸5 s,30个循环时,通过加入SYBR Green I染料染色,金银花样品显绿色荧光,混淆品无荧光。整个PCR反应可在30 min内完成。该研究结果说明快速位点特异性PCR能简单快速鉴别金银花及其混淆品。     

木通与川木通及关木通的快速PCR鉴别

目的:建立一种准确、快速、高效鉴别木通、川木通及关木通的分子鉴别方法。方法:采集不同产地的木通、川木通及关木通基原植物,所有样品进行总DNA的提取,通过对木通、川木通及关木通样品trn L-trn F片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,采用2步法进行PCR扩增,从而对木通、川木通及关木通进行鉴别。结果:通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪进行考察,分别获得木通、川木通及关木通快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。结论:快速PCR方法可以简单快速鉴别木通、川木通及关木通,为实现药材分子鉴别的现场运用提供技术支撑。     

菟丝子与混淆品欧菟丝子的鉴别

本文从性状、显微、薄层色谱和紫外吸收光谱几方面对菟丝子与混淆品欧菟丝子进行了鉴别比较,实验结果可使二者准确区别。     

基于快速PCR方法的人参属药用植物鉴别研究北大核心CSCD

目的:建立一种准确、快速、高效鉴别人参属药用植物的分子鉴别方法。方法:采集不同产地的人参、西洋参及同属近缘种植物,所有样品进行总DNA的提取并使用mat K片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计西洋参特异性鉴别引物,人参以文献报道的特异鉴别引物为基础,分别采用两步法进行PCR扩增,从而对人参、西洋参及同属近缘种进行鉴别。结果:通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪进行考察,分别获得人参、西洋参快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR GreenⅠ染料,正品显示出明亮绿色荧光,而近缘种不显示荧光。结论:快速PCR方法可以简单快速鉴别人参、西洋参,为实现药材分子鉴别的现场运用提供技术支撑。     

快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45 min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。     

快速PCR方法在哈蟆油真伪鉴别中的应用研究

该研究依据哈蟆油Cyt b基因155位SNP位点设计位点特异性PCR引物,采用碱裂解法提取基因组DNA,2步循环PCR程序进行PCR反应,并对PCR反应条件进行优化,从而建立起一种哈蟆油及其4种常见混伪品的快速PCR鉴别方法。该方法在90℃变性3 s,62℃退火延伸20 s进行32个循环时,加入2μL 100×SYBR GreenⅠ染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。该方法准确、简便,40 min内即可完成鉴别,为哈蟆油药材现场快速鉴定提供技术支持。     

菟丝子及其混淆品芜菁子的比较鉴别

目的：区分菟丝子及其混淆品芜菁子。方法：采用性状、理化鉴另0、薄层色谱及液相色谱鉴别方法。结果：菟丝子和芜菁子外形较为相似,但理化鉴别、薄层色谱有比较明显的区剐。结论：菟丝子和芜菁子是不同科的两种植物,功效用途不同,不能混用。     

菟丝子及其混淆品的鉴别

菟丝子及其混淆品的鉴别赵惠萍范力力周富荣(北京市药品检验所北京100035)菟丝子为常用中药。《中国药典》1995年版规定为旋花科植物菟丝子CuscutachinensisLam.的干燥成熟种子。具有补肝肾、益精、明目、安胎之功效。最近发现北京地区销售的菟丝子与《中国药典》规定不符。为此,笔者进行了栽培,并将其腊叶标本经江苏省中国科学院植物研究所鉴定为十字花科植物芸苔BrasicacampestrisL.。为菟丝子的混淆品。本文就二者的形性特征....     

菟丝子及其伪品的蛋白质电泳研究

目的考查不同种、不同寄主的菟丝子及其伪品的种子蛋白差异。方法利用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术鉴别菟丝子及其伪品。结果各菟丝子与伪品之间存在明显差别;南方菟丝子与菟丝子之间电泳条带差别较大;同种菟丝子,不同寄主之间亦存在一定差异。结论 PAGE可用于不同种、不同寄主菟丝子及其与伪品的鉴定与质量评价。     

炮制抑制莱菔子中萝卜苷酶解转化的初步研究

目的:探索莱菔子炒制前后量变与质变特征成分A209,B221的生成机制.方法:提取、分离、鉴定A209与B221的前体物质C3,C3,并证明它们之间的转化关系.结果:莱菔子中的萝卜苷可在内源性酶作用下生成莱菔子素,莱菔子在不同的煎煮条件下可生成含硫化合物A209,B221.结论:为探讨莱菔子炮制机制提供了一定的实验依据.     

中药菟丝子的显微鉴定研究

用显微镜观察了八种菟丝子,找出了各种在其组织形态上的鉴别特征,并列出了药材的显微特征检索表。     

菟丝子质量研究

对7种菟丝子类生药作了总黄酮和总多糖的定量分析:菟丝子Seman Cuscutae Chinensis总黄酮含量为3.0%,南方菟丝子Seman Cuscutae Australis为3.2%,而欧洲菟丝子:Seman Cuscutae Europaea为4.5%。总多糖含量中以菟丝子为最高(5～6%)。实验结果为合理使用菟丝子类生药提供了科学依据。     

炒莱菔子饮片质量与萝卜苷含量分析

目的:考察10地市售炒莱菔子饮片质量并进行萝卜苷含量测定。方法:采用HPLC和重量法对10地市售炒莱菔子饮片萝卜苷含量和杂质,水溶性浸出物含量进行测定,并按《中国药典》检测了水分与醇溶性浸出物含量。结果:供试饮片中萝卜苷含量为8.02%～3.35%,杂质在0.3%～3.46%,水浸出物含量在17.32%～18.59%,水分与浸出物基本合格。结论:莱菔子饮片质量标准宜增加杂质检测和萝卜苷含量测定项,以有效控制其饮片质量。     

高效液相色谱测定莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐含量

目的:建立莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-0.08 mol·L-1KH2P04溶液(12:88)为流动相,流速1.0 mL·min-1进行检测.结果:芥子碱硫氰酸盐线性范围为0.482 ～2.892 μg,平均加样回收率103.63％.结论:该法快速、简便,结果准确、可靠,可用于莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的测定.     

菟丝子的酶法提取工艺优选

目的:优选菟丝子的酶法提取工艺,以提高菟丝子中金丝桃苷及总黄酮的提取率。方法:以金丝桃苷提取量为指标,通过单因素试验考察酶种类、酶用量、酶解时间、酶解p H及温度对酶解效果的影响;以金丝桃苷与总黄酮提取量的综合评分为指标,采用正交试验考察酶用量、酶解p H及酶解温度对酶解工艺的影响。采用HPLC测定金丝桃苷含量,流动相乙腈-0.1%磷酸溶液(17∶83),检测波长360 nm。结果:选择纤维素酶,最佳提取工艺为酶用量2.0%,酶解时间2.0 h,酶解p H 4.0,酶解温度45℃;金丝桃苷、总黄酮提取量分别为1.408,26.966 mg·g-1。结论:优选的酶法提取工艺稳定合理,适用于菟丝子的工业生产。     

酸性染料比色法测定莱菔子中总生物碱的含量

目的:探讨莱菔子中总生物碱含量测定的方法。方法:采用酸性染料比色法测定莱菔子中总生物碱含量。结果:酸性染料比色法显色的条件为pH4.2的缓冲液10mL,0.04%的溴甲酚绿溶液2.0mL,氯仿萃取4次,每次5mL,检测波长332nm。芥子碱硫氰酸盐在1.696~16.960ug.mL-1范围内,与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率99.75%,RSD为1.16%(n=6)。结论:该方法灵敏度高,准确性、重现性好。     

炮制与用法对莱菔子-苦杏仁药对中总成分及芥子碱溶出的影响

目的: 探讨炮制、粉碎、分煎与合煎对莱菔子、苦杏仁及其药对中水、醇溶性总成分,芥子碱,脂肪油溶出的影响. 方法: 采用HPLC测定芥子碱溶出量,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液(15:85),检测波长326 nm;重量法测定水、醇溶性浸出物及脂肪油溶出量.利用GC-MS技术鉴定苦杏仁脂肪酸组成及含量,DB-5石英毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m),进样口温度230℃,气化室温度270℃,分流比50:1,程序升温(100~180℃,10℃ ·min^-1;180~200℃,4℃ ·min^-1;200~220℃,1℃ ·min^-1;220~270℃,5℃ ·min^-1),MS条件为EI离子源,70 eV,扫描范围m/z 30~500. 结果: 炮制有利于样品总成分及芥子碱的溶出,其中水溶性成分溶出最高增加9.61%,醇溶性成分141.03%,芥子碱20.00%;粉碎后样品中水、醇溶性成分与芥子碱的溶出量分别增加了0.36~1.85,38.41~62.06,1.40~2.60倍;分煎与合煎对样品中水、醇溶性成分溶出无明显影响,芥子碱溶出量合煎后降低45.16%~68.75%. 结论: 种子类中药如不粉碎不宜采用醇提取或入酒剂,粉碎能显著增加所测成分的溶出量,莱菔子和苦杏仁合煎不利于莱菔子中芥子碱的溶出.依法炮制与合理使用相结合才能确保中药疗效.