聚合酶链反应在小儿支原体肺炎诊断中的应用价值

为探讨ＰＣＲ在小儿支原体肺炎诊断中的实际应用价值，对４７例临床疑诊支原体肺炎的病儿做了咽拭子ＰＣＲ－ＭＰ测定，同时做了血冷凝集试验（ＣＡＴ）。结果：ＰＣＲ－ＭＰ阳性２１例，真阳性１５例，假阴性１例，敏感度为９３．８％。假阳性６例，占检测标本的１２．８％，占检测报告阳性总数的２８．６％，ＣＡＴ阳性１２例。确诊支原体肺炎１６例，其中１５例经ＰＣＲ早期确诊。结论：ＰＣＲ－ＭＰ测定有利于支原体肺炎的早期诊     

PCR检测肺炎患儿咽拭子肺炎支原体

本文应用ＰＣＲ技术检测了２７５例肺炎患儿之咽拭子标本中的肺炎支原体特异性ＤＮＡ，结果为７１例患儿之咽拭子阳性，阳性率２５．８％，与国内其他作者的报道相近。本文并就肺炎支原体感染的特异性诊断方法作了复习与讨论。     

套式PCR联合检测儿科疾病中肺炎支原体和生殖支原体的临床研究

为了探讨肺炎支原体（Ｍｐｎ）和生殖支原体（Ｍｇ）在儿科呼吸道感染疾病中的感染情况，本研究采用套式ＰＣＲ联合检测儿科呼吸道患儿咽拭子标本中ＭｐｎＤＮＡ和ＭｇＤＮＡ。结果：上呼吸道感染、支气管炎、肺炎、支气管哮喘患儿咽拭子标本中均检出ＭｐｎＤＮＡ和ＭｇＤＮＡ，阳性率分别在２１．９－４０．８％和２１．７－３１．３％。混合感染占总阳性率的１０．０－２８．５％。结论：在儿科呼吸道感染疾病中Ｍｐｎ和Ｍｇ感染率较高，并且存在混合感染，应引起临床医师重视并加强研究     

婴儿持续性黄疸与巨细胞病毒PCR检测研究

本文应用ＰＣＲ技术对持续性黄疸婴儿进行巨细胞病毒检测，结果６８例患儿血清中巨细胞病毒（ＣＭＶ）３８例阳性，阳性率为５５．９％；尿中ＣＭＶ４５例阳性，阳性率为６６．２％。ＰＣＲ与病毒分离及其它血清学方法相比，既快速又敏感，尿标本用于ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＤＮＡ取材及处理简便，且较血标本检出率为高［１］。     

新生儿肺炎患儿沙眼衣原体PCR检测研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测沙眼衣原体（ＣＴ）ＤＮＡ，８４例新生儿肺炎患儿的咽拭子中共检出２１例，阳性率２５．Ｏ％。其中剖宫产儿阳性率１６．６％（２／１２）；经产道产儿阳性率２６．４％（１９／７２）；早产、低体重儿阳性率５０％（５／１０）；而对照组２０例健康新生儿无１例检出。提示新生儿是ＣＴ感染的高危群体；其感染ＣＴ以通过孕妇产道获得为主，但也有宫内感染；早产、低体重儿最易被ＣＴ感染，ＰＣＲ检测ＣＴ感染具有快速、敏感、特异的优点，有广阔的应用前景。     

聚合酶链反应在肺炎支原体检测和研究中的应用

肺炎支原体（ＭＰ）是呼吸道感染的常见病原之一。我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对２３５例肺炎患儿作ＭＰ－ＤＮＡ的检测，其结果６３例阳性，占２６．８％。对１５例ＭＰ－ＤＮＡ阳性者同时检查血冷凝集试验，仅５例阳性，占３３．３％，提示ＰＣＲ法检测ＭＰ感染具有特异性强、灵敏度高、操作简单、耗时少的优点，对ＭＰ的早期诊断有很大的帮助，并且把ＭＰ感染的病因学诊断提高到分子生物学的水平。     

聚合酶链反应检测早孕妇女巨细胞病毒感染的临床研究

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１０６例早孕妇女进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）检测。其中血标本４９例,阳性者５例,阳性率１０．２％,宫颈分泌物标本５７例,阳性者７例,阳性率１２．３％,总阳性率１１．３％,并对１２例ＨＣＭＶ感染孕妇所分娩新生儿的血液标本进行了检测,其中有５例为阳性,宫内传播率４１．７％,表明ＰＣＲ法具有快速,简便,高度的敏感性和特异性的特点,是早期,快速产前诊断ＨＣＭＶ感染的最佳技术     

用聚合酶链反应和放射免疫法检测肾移植术后人巨细胞病毒感染

将５０例肾移植术后发热病人的尿标本接种细胞，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测第１代细胞培养上清中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ。结果１９例为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为３８．００％，用固相放射免疫法（ＲＩＡ）检测ＨＣＭＶ抗原，阳性的有１５例，阳性率为２７．７７％。将５４倒尿标本接种人胎肺二倍体单层细胞，分离到６株ＨＣＭＶ。用ＥＬＩＳＡ检测６５例病人单份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体，阳性的有１７例，检测４５例病人双份血清ＩｇＧ抗体，１１例的第２份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＧ抗体滴度比第１份有４倍以上升高。上述结果表明，ＰＣＲ检测结果与ＲＩＡ的检测结果基本符合；病人血清抗体的阳性率与ＰＣＲ检测的阳性率基本符合。     

bcl-2、p53蛋白及PCNA表达与横纹肌肉瘤临床病理相关性研究

目的：研究横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ表达与其临床病理的相关性。方法：对５０例（随访４１例）横纹肌肉瘤进行免疫组化ＡＢＣ法标记。结果：ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白和ＰＣＮＡ，发现ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ阳性表达率分别为２８％、７２％、７０％，其阳性表达与年龄、性别及不同组织类型的ＲＭＳ无关（Ｐ＞０．０５）。但与分化程度有关，ｐ５３、ＰＣＮＡ在低分化ＲＭＳ阳性率分别为８５％、９５％，显著高于高分化ＲＭＳ４２．８％和１４．３％（Ｐ＜０．０５），随访存活１年以内的ｐ５３、ＰＣＮＡ阳性率均为８６．７％，亦明显高于存活超过３年以上的阳性率３３．３％和４１．７％（Ｐ＜０．０５）。而ｂｃｌ－２在低分化ＲＭＳ阳性２０％显著低于高分化７１．４％（Ｐ＜０．０５），随访存活１年以内的阳性率１３．４％明显低于存活超过３年以上的４１．４％（Ｐ＜０．０５）。ｐ５３与ｂｃｌ－２阳性表达呈明显负相关，ｐ５３阳性率越高，而ｂｃｌ－２阳性率越低。结论：ＰＣＮＡ、ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白表达能比较准确地反映ＲＭＳ的生物学特性，ｐ５３、ｂｃｌ－２可作为肿瘤预后显著相关的有效指标。     

急性呼吸道感染患儿咽拭子标本的肺炎衣原体套式PCR检测研究

本文应用套式（Nested）PCR技术检测了132例急性呼吸道患儿之咽拭子标本中的肺炎衣原体（CPn）特异性DNA。结果发现．受检标本中有19例检出阳性，即各处呼吸道患儿之咽拭子标本中的CPn－DNA阳性率高达14．4％。提示CPn在我国儿童中有较高的感染率。     

反复呼吸道感染儿肺炎支原体PCR检测及免疫功能研究

本文对１５２例对复呼吸道感和肺炎支原体ＰＣＲ及免疫功能进行检测。结果咽拭子肺炎支原体ＰＣＲ阳性２５例，阳性率１６．５％。     

聚合酶链反应快速诊断结核病的应用研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术建立了扩增结核杆菌特异重复序列ＩＳ６１１０部分基因的方法。对９种抗酸分枝杆菌、３种普通菌进行检测，结果仅人型结核杆菌、牛型结核杆菌及ＢＣＧ扩增出１２３ｂｐ特异性条带，ＰＣＲ产物经ＳａｌⅠ酶切后产生７０ｂｐ与５３ｂｐ两个片段。ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性达１０ｆｇＤＮＡ或５个菌体。应用ＰＣＲ检测了１０９份结核临床标本，其总阳性率为７２．５％，明显高于抗酸染色涂片（２．８％）与细菌培养（９．２％）的阳性率（Ｐ＜０．００１）。ＰＣＲ的检出率也较ＥＬＩＳＡ法检测抗ＰＰＤ－ＩｇＧ的阳性率（６３．３％）为高，但尚无统计学差异（ｐ＞０．０５），但是ＥＬＩＳＡ检测抗体有１９．０％的假阳性。研究表明，ＰＣＲ是一种特异、敏感、快速诊断结核病的方法。     

常州地区发酵支原体(Mf)对围产儿的影响

目的：探讨围产发酝支原体（Ｍｆ）的母婴传播状况及Ｍｆ感染与不良妊娠结局的关系。方法：采用现阶段被认为是检测临床标本中支原体最灵敏最特异的方法－套式聚合链反应（ｎＰＣＲ）技术。结果：５２例正常妊娠妇女母婴标本无１例检出Ｍｆ－ＤＮＡ,在６５例异常妊娠妇女中,有７例母婴标本检出Ｍｆ－ＤＮＡ,阳性率为１０．７％（明显高于正常妊娠妇女Ｐ〈０．０１）。其中宫颈脱落细胞、羊水、新生儿咽拭子标本均检测到阳性病例。７例Ｍｆ－ＤＮＡ阳性者,均存在不良妊娠结局。结论：围产期存在Ｍｆ感染,并可能是导致不良妊娠结局的原因之一。进一步深入研究是十分必要的。     

潍坊地区儿童喘息性疾病呼吸道病原分析

目的了解潍坊地区喘息性疾病呼吸道病原感染情况以及与喘息性疾病的关系。方法采集2012年1月-2013年3月在潍坊市妇幼保健院儿科住院的喘息性疾病400例患儿的痰标本，用直接免疫荧光法检测呼吸道7种常见病毒一呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒（ADV），流感病毒A（IVA），流感病毒B（IVB），副流感病毒-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（PIV-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），细菌培养检测细菌。采集静脉血3ml离心制备血清，采用金标法检测肺炎支原体抗体。结果400例患儿共检出呼吸道病毒202例，阳性率50．5％，检出肺炎支原体128例，阳性率32％。检出细菌101例，阳性率25．2％。病毒病原中，以呼吸道合胞病毒最常见，细菌病原中以金黄色葡萄球菌最多见。病原混合感染率为28．5％。不同疾病主要感染病原各异，其中毛细支气管炎以病毒感染为主，支气管哮喘以肺炎支原体感染为主，喘息性支气管炎以细菌感染为主。结论本组资料显示呼吸道病毒是潍坊地区喘息性疾病住院患儿的第一病原，肺炎支原体次之，细菌是混合感染的的常见病原，以病毒合并细菌感染为主，其次是病毒合并支原体感染，多见于毛细支气管炎及支气管哮喘组，提示混合感染是毛细支气管炎、支气管哮喘不可忽视的因素，因此进行病原联合检测，明确多种病原是非常重要的。     

PCR与单克隆抗体ELESA夹心法快速诊断结核病的研究

应用聚合酶性反应（ＰＣＲ）技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列ＩＳ９８６基因的方法和用单克隆抗体ＴＢ１５－Ｃ３经ＥＬＩＳＡ夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇，对１０种抗酸杆菌，２种普通菌进行了检测．ＰＣＲ仅对结核杆菌复合体扩增出２４５ｈｐ特异性条带，ＥＬＩＳＡ检测除人型结核杆菌、ＢＣＧ阳性外，还与鸟型及瘰疬分枝杆菌反应阳性．ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性为１ｐｇ，相当于１３个左右细菌，ＥＬＩＳＡ检测的被感性为１５ｎｇ／ｍｌ．应用ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ检测了９６份结核临床标本．ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＰＣＲ的检出率虽高于细菌培养的阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片、细菌培养和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．００１）．ＥＬＩＳＡ的假阳性率高于ＰＣＲ的假阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．研究表明，ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ均是特异、敏感、快速的诊断结核病的方法．但在使用中又各自有其特点．     

3418例孕产妇外周血与活产新生儿脐血乙型肝炎病毒感染的PCR检测

采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术，随机抽样检测了３４１８名孕产妇外周血乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ），结果发现阳性标本８９例，阳性率为２．６０４％（８９／３４１８），随后，随机对其中３５名母血ＩＢＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿脐血进行了检测，发现阳性标本５例，阳性率为１４．２９％（５／３５）。     

人型支原体套式PCR检测研究

本文报告灵敏、特异、快速的人型支原体套式ＰＣＲ检测技术，１２种标本中，Ｍｈ特异阳性，其他均阴性。在３８８例临床标本检测中，盆腔炎症阳性率６６％，早产合并肺炎７４．４％，输卵管妊娠占５７．７％。     

3418例孕产妇外周血与活产新生儿脐血乙型肝炎病毒感染的P…

采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术，随机抽样检测了３４１８名孕产妇外周血乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ），结果发现阳性标本８９例，阳性率为２．６０４％（８９／３４１８），随后，随机对其中３５名母血ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿脐血进行了检测，发现阳性标本５例，阳性率为１４．２９％（５／３５）。     

用聚合酶链反应行巨细胞病毒感染产前诊断的研究

对５０例正常育龄妇女、６３例正常孕妇及２０例有异常孕产史的孕妇进行了血清巨细胞病毒抗体ＣＭＶ－ＩｇＧ、ＣＭＶ－ＩｇＭ的检测及聚合酶链反应（ＰＣＲ）的检测，并对正常孕妇及异常孕产史孕妇进行绒毛ＣＭＶＰＣＲ检测。结果正常孕妇血清ＣＭＶＰＣＲ阳性率为３１．７５％，远远高于正常非孕妇的血清ＣＭＶＰＣＲ的阳性率１６％。正常孕妇人流的绒毛ＣＭＶＰＣＲ阳性率为２０．６３％，明显低于有异常孕产史孕妇绒毛ＰＣＲ的阳性率４５％，且异常孕产史孕妇血清ＣＭＶＰＣＲ阳性率明显高于正常孕妇。另对血清ＰＣＲ阳性的１２例早孕时抽取绒毛测ＰＣＲ，阳性率为７５％（９／１２），提示宫内感染率相当高。对正常和异常孕产史孕妇血清ＩｇＭ与ＰＣＲ比较，后者敏感性远超过前者，用ＰＣＲ方法对早孕期ＣＭＶ感染能比较正确地早期作出宫内感染的诊断。     

发酵支原体感染与不良妊娠结局的研究

目的：探讨围产发酵支原体（Ｍｆ）的母婴传播状况及Ｍｆ 感染与不良妊娠结局的关系。方法：采用现阶段被认为是检测临床标本中支原体最灵敏最特异的方法套式聚合链反应（ｎＰＣＲ）技术。结果：５２ 例正常妊娠妇女母婴标本无１ 例检出ＭｆＤＮＡ,在６５ 例异常妊娠妇女中,有７ 例母婴标本检出ＭｆＤＮＡ,阳性率为１０－７％ （明显高于正常妊娠妇女Ｐ＜０－０１） 。其中宫颈脱落细胞、羊水、新生儿咽拭子标本均检测到阳性病例。７ 例ＭｆＤＮＡ 阳性者,均存在不良妊娠结局。结论：围产期存在Ｍｆ 感染,并可能是导致不良妊娠结局的原因之一。进一步深入研究是十分必要的。