乙型肝炎病毒基因型和血清亚型在我国部分地区的分布及其特点

目的 研究乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）基因型和血清亚型的分布特点及其基因的相关性。方法 湖南、广西、河南和河北4省（区）25个县（市）280例慢性HBV携带者,应用聚合酶链反应（PCR）扩增和脱氧核糖核酸（DNA）序列分析,确定HBV基因型和血清亚型。结果 HBV基因型B、C和D均有分布,分别占29.3%、67.9%和2.9%,其中B和C为优势基因型。adr、adw2、ayr、aywl、ayw2和ayw3等6种血清亚型均有分布,其中adr和adw2为优势血清亚型,分别占64.3%和31.4%。基因型B与adw2血清亚型,基因型C与adr血清亚型有非常密切的基因相关性。280例HBV携带者表面抗原基因序列每100个核苷酸的平均置换频数为2.94。基因型B(adw2血清亚型）毒株核苷酸置换频数为5.63(5.48）,而基因型C（adr血清亚型）仅为1.6(1.51）。结论 HBV基因型和血清亚型的分布均有明显的地区性;基因型B及相对应的adw2血清亚型毒株的基因可变性明显高于基因型C及相应的adr血清亚型。     

兰州地区乙型肝炎病毒相关肝癌患者中病毒基因型分布特征

目的 了解中国兰州地区HBV相关肝癌患者中病毒基因型分布特征,探讨HBV基因型及其亚型与HCC之间的相关性.方法 筛选兰州地区慢性HBV感染者包括慢性乙型肝炎组(CHB组)、乙型肝炎肝硬化(LC组)和乙型肝炎相关性HCC(HCC组)共142份血清样本,其中HBeAg阳性62份,HBeAg阴性80份.对各组进行HBV DNA的提取及HBV基因组S基因的PCR扩增和测序.将测序后得到的前S/S基因序列引入NCBI的在线病毒基因分型工具来确定HBV基因型.然后采用MEGA4软件构建系统进化树进行HBV基因亚型分析.结果 慢性乙型肝炎组C基因型19份,其中C1亚型9份,C2亚型10份,B基因型17份,均为B2亚型,B型C型混合型2份,D基因型6份,均为D2亚型;乙型肝炎肝硬化组C基因型26份,其中C1亚型9份,C2亚型17份,B基因型8份,均为B2亚型,D基因型2份,均为D2亚型;乙型肝炎相关性HCC组C基因型23份,C1亚型5份,C2亚型18份,B基因型6份,均为B2亚型,B型C型混合型1份,D基因型2份,均为D2亚型.HBV基因C2亚型在慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组、乙型肝炎相关性HCC组中的分布差异有统计学意义(x2=10.498,P均＜0.05).结论 兰州地区HBV感染者中基因型有B型、C型、D型及B型C型混合型.其中B基因型均为B2亚型,C基因型中检出C1、C2亚型,D基因型均为D2亚型.HCC患者和LC患者的C型检出率均显著高于CHB组,C基因型与较为严重的肝病(LC和HCC)有关.     

四川省两县区乙型肝炎病毒基因型、血清亚型分析

[目的]了解四川省两县区乙型肝炎病毒的基因型和血清型. [方法]从HBsAg、HBeAg均阳性的血清中提取病毒DNA,经多聚酶链反应和S基因核苷酸片段测序后,用进化树和推导氨基酸序列确定基因型和血清亚型.[结果]49份血清标本中,含w亚决定簇的均为B基因型,含r亚决定簇的均为C基因型;其中B基因型/adw2血清亚型31份,B基因型/aywl血清亚型1份,B基因型/adw3血清亚型1份,C基因型/adrq+血清亚型14份,C基因型/ayr血清亚型2份. [结论]两县区乙型肝炎病毒以B基因型/adw2血清亚型和C基因型/adrq+血清亚型为主,B基因型/adw2血清亚型占优势;同时存在少见的B基因型/adw3血清亚型.     

湖北咸宁地区正常人群与血吸虫疫区人群感染HBV基因型分析

目的了解咸宁市正常人群及血吸虫疫区人群乙肝病毒(HBV)基因型分布状态。方法取正常体检人员和血吸虫疫区例行体检人员中筛选出的HBsAg阳性携带者血清,用槽式PCR技术进行乙肝病毒基因分型检测。结果 86份HBsAg阳性血清标本(正常和血吸虫疫区人群分别43例)中检出B型69份(80.23%)、BC型10份(11.62%)、C型4份(4.65%)。结论咸宁地区正常人群感染HBV基因型均为B型,血吸虫疫区人群感染HBV基因型以B型为主,其次为C型、BC混合感染型。     

乙型肝炎病毒A～D基因型及B1、B2、C1和C2基因亚型巢式聚合酶链反应分型法的建立

目的 建立检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型和亚型特异性巢式聚合酶链反应(nPCR)分型法.方法 用DNAStar软件比较分析GenBank中登录的A～H 8种基因型HBV全基因组序列,用Primer Premier 5.0软件进行引物设计,建立nPCR分型法.该法在第一轮扩增基础上,第二轮分为3步扩增:第一步用Mix A扩增,检测B、D基因型和C1、C2亚型;第二步用Mix B扩增,检测A基因型;第三步用Mix C扩增,检测B1和B2亚型.应用该法检测68份慢性HBV感染者的血清样本,并从中随机选取15份样本的PCR产物直接测序,以验证该法的准确性.结果 该法检测68份慢性HBV感染者血清样本中,23.53%(16/68)为B2亚型,11.76%(8/68)为C1亚型,48.53%(33/68)为C2亚型,1.47%(1/68)为D型,11.76%(8/68)为B2C2混合型,1.47%(1/68)为C2D混合型,1.47%(1/68)为B2C1D混合型.随机选取15份样本测序分型,结果 与PCR法一致.结论 nPCR分型法简单快速,具有较高的灵敏度和特异度,可检测A～D基因型和B1、B2、C1、C2亚型.     

2021年重庆口岸出入境人员乙肝病毒感染情况及HBV分型检测分析

目的 了解2021年重庆口岸出入境人员乙型肝炎病毒感染情况和基因分型情况。方法采集2021年在重庆国际旅行卫生保健中心进行健康监测的出入境人员血清样本，使用电化学发光法进行HBsAg检测，采用荧光PCR的方法对100份HBsAg阳性血清标本进行HBV基因检测和分型检测。结果 2021年在重庆国际旅行卫生保健中心进行健康监测的出入境人员11431名，其中HBsAg阳性485例；100例HBsAg阳性血清标本中，B型47例，C型19例，D型2例，BCD以外的其他基因型3例，样本HBV DNA含量低于最低检测限29例。结论 2021年重庆口岸出入境人员中HBV感染者以青壮年居多，职业以劳务为主；出境人员HBV基因型以B型为主，应加强对劳务人员健康宣传。     

石家庄地区乙肝病毒基因型分布及其与疾病进展关联研究

目的明确石家庄地区乙肝基因型/亚型分布特征,探索其与乙肝感染后疾病进展的相关性。方法采用型特异性引物多重聚合酶链反应(PCR)方法对270例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性慢性乙肝、肝硬化和原发性肝癌患者血清标本进行HBV基因型/亚型检测,应用SPSS16.0进行统计描述和检验。结果基因型检测成功样本共233例,其中,C型占81.11%(189/233),B型占18.03%(42/233),D型占0.86%(2/233),基因亚型检测结果为:C2亚型占75.10%(175/233),B2亚型占16.74%(39/233),C1亚型占6.01%(14/233),B1亚型占1.29%(3/233);原发性肝癌、慢性乙肝患者中C基因型比例显著高于肝硬化(P=0.013,P=0.026);C基因型HBV感染者相对B型具有更高的HBe Ag阳性率和HBV DNA滴度(P=0.012,P=0.002);相对B型,C型HBV患者更易进展为肝硬化失代偿期(P=0.006),且具有显著更高的患癌风险(P=0.029)。结论石家庄地区流行HBV以C型和B型为主,其中C2、B2为主要亚型,HBV C型感染者更容易进展为失代偿肝硬化,发生肝癌的风险更高,但是需要更大样本量研究进行验证。     

HBV血清型和基因型与母婴传播关系的研究

【目的】探讨乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)血清型、基因型与HBV母婴传播的关系。【方法】100份HBsAg阳性孕产妇及其新生儿的外周血,发生母婴传播血清为病例组,其他为对照组。ELISA法检测乙肝系列,根据S基因判断HBV血清型和基因型。【结果】99份HBV血清型全为adw型;39例发生母婴传播HBV基因C型25例;B型13例;E型1例。60例未发生母婴传播,HBV基因B型50例;C型10例。两组HBV基因分型结果差异有显著性(P<0.05)。【结论】HBV母亲C基因型可能更易发生母婴传播。     

天津口岸出入境人员乙型肝炎病毒基因分型研究

[目的]探讨天津口岸出人境人员乙型肝炎病毒（HBV）的基因类型分布特征。[方法]调查天津口岸出入境人员HBV血清学指标，采用实时荧光定量PCR结合Taqman探针技术对180份乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性血清标本中的HBVDNA进行定量检测和基因分型；对非B非C型HBsAg阳性血清标本采用通用引物PCR方法结合序列分析进行基因分型。[结果]180份HBsAg阳性血清标本中，B型23份（40．35％）；C型30份（52．63％）；D型4份（7．02％），其余123份血清HBVDNA浓度均低于定量检测试剂盒的下限（500IU／ml）。[结论]天津口岸出入境人员中HBV基因型以C型为主，B型次之，D型极少。     

广西那坡县发现乙肝病毒新基因亚型D11

目的 2011年,在广西那坡县发现一例HBsAg阳性携带者,其所携带的HBV利用S基因序列分型法无法分型,本研究意在用全基因组分型法对其进行分型。方法为便于前后对比,除2011年血清标本外,还收集该携带者2018年的血清标本。检测前后2份标本HBV血清标志物和病毒载量,使用酚氯仿法提取HBV DNA,巢式PCR扩增HBV全基因组,将扩增产物进行克隆并测序。利用软件Mega 6.0、 Bioedit 7.0对测序结果进行分析。结果 2011年和2018年的2份标本HBsAg均为阳性, 2份标本的PCR产物分别获得15个克隆株。对获得的克隆株进行生物信息学分析发现, 2011年该携带者体内乙肝病毒基因型为B型、 D型以及未知基因型; 2018年该携带者体内乙肝病毒基因型仅为D型。30个克隆株中有23个单独聚集成簇, bootstrap值为100%,与D1-D10亚型间核苷酸的差异4%。结论该携带者体内的HBV基因型为新基因亚型D11。     

一起氟乙酰胺蓄积性中毒分析

氟乙酰胺急性中毒时有发生 ,其中毒者临床表现与实验室诊断技术已为预防医学工作者所掌握 ,但氟乙酰胺蓄积性中毒十分罕见 ,经检索国内尚无个案报道。现就集宁市发生的一起氟乙酰胺蓄积性中毒分析报告如下。患者男性 6 3岁 ,2 0 0 1年 6月 2 0日由家属陪送入院 ,主诉神志有时不清 ,妄语 ,肢体阵发性抽搐 ,大小便失禁 ,视力模糊 ,病史已有 4个多月 ,院方即按颠痫收住入院 ,经过 1周对症治疗但疗效甚微 ,遂建议其转入精神病院 ,经精神病专家会诊 ,发现患者有接触鼠药史 ,于是要求卫生防疫部门协助检验。该病例系鼠药商贩 ,同时经销数种鼠药 ,…     

重庆地区乙型肝炎病毒B/adw2和C/adrq+亚型PreS/S基因参照序列的初步建立

目的 建立重庆地区不同亚型乙型肝炎病毒(HBV)流行株PreS/S基因参照序列。方法 扩增18例HBV慢性无症状携带者的PreS/S基因，应用同源性分析和对齐比较等方法确定基因型／血清型，并选同HBV亚型的PreS/S拟定参照序列。结果 9株基因型B/血清型adw2、6株基因型C／血清型adrq 、3株基因型B/血清型aywl；建立的重庆地区基因型B/血清型adw2、基因型C／血清型adrq HBV流行株PreS/S参照序列，与华东华南、东北华南地区同亚型的参照序列比较分别有6个、13个核苷酸差异，均可引起4个氨基酸差异。结论 初步建立了重庆地区HBV基因型吲血清型adw2、基因型C/血清型adrq HBV流行株PreS/S基因参照序列。     

单纯乙型肝炎疫苗免疫后表面抗原携带者“a”决定簇基因变异的分子流行病学特征

目的　了解单纯乙型肝炎疫苗免疫失败后表面抗原 ( HBs Ag)携带者和未免疫携带者 HBs Ag基因变异的流行特点及乙型肝炎病毒 ( HBV)基因型和血清亚型的分布特点。　方法　应用直接测序和基因序列特异固相聚合酶链反应( SS- SPPCR)方法 ,分别检测 69例单纯乙型肝炎疫苗免疫后携带者和 83例未免疫携带者 ,乙型肝炎病毒 HBs Ag“a”决定簇氨基酸的变异及 HBV基因型和血清亚型的分布。　结果　 HBV基因型 B、C和 D均存在 ,其中 B和 C为优势基因型 ;血清亚型 adr、adw2、avr、ayw1、ayw2和 ayw3均存在 ,其中 adr和 adw2为优势血清亚型。直接测序检测的乙型肝炎疫苗免疫后携带者 HBs Ag“a”决定簇氨基酸变异率明显高于未免疫携带者对照 ,变异率分别为 3 1.9% ( 2 2 / 69)和 8.4 % ( 7/ 83 )。14 5、12 6和 13 3位是最常见的氨基酸变异点。应用更为敏感的 SS- SPPCR法分别检测 14 5和 12 6位氨基酸点突变的变异率 ,各组间差别不明显。经直接测序法检测 ,免疫后携带者基因变异危险度 ( OR)是未免疫携带者的 5 .1倍。按基因型和血清亚型分层分析 ,基因型 B和 adw2血清亚型携带者受免疫后出现基因变异的危险度明显高于未免疫携带者 ,分别为3 1.7和 2 8.9。　结论　接种乙型肝炎疫苗者可引起表面抗原基因的免疫逃避     

福州市健康人群中乙肝病毒感染的检测分析

目的了解福州市健康人群中乙肝病毒感染情况及HBV流行株的基因分布特性,为福州市乙型肝炎防制工作提供科学依据。方法采用ELISA方法检测乙肝病毒免疫学标志物,应用荧光定量PCR检测HBV-DNA含量,用型特异性引物套式PCR进行乙型病毒基因分型。结果1710份样品中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别为12.51%、50.23%、2.40%、16.73%、60.18%;201份HBsAg阳性样品中HBV-DNA阳性率为76.12%;HBV-DNA阳性标本中,B型62份(41.89%)、C型57份(38.51%)、B、C混合型7份(4.73%)、未能分型22份(14.86%)。结论福州市健康人群中HBsAg携带率为12.51%,高于全国平均水平,HBV基因型以B、C型为主,应该加强乙肝的预防控制工作。     

福州市人群乙型肝炎分子流行病学研究

[目的]研究福州市人群乙肝流行规律,探讨沿海地区HBV高发的原因,为制定防控策略提供科学依据。[方法]按整群抽样法,以家庭为单位随机抽样,用ELISA方法检测乙肝血清标志物,用荧光定量PCR检测HBV-DNA含量,用型特异性PCR进行乙肝病毒基因分型。[结果]福州市检测结果,人群HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别是13.3%、53.3%、2.3%、17.0%、56.8%;沿海2558份标本阳性率分别是16.8%、45.6%、4.9%、15.8%、53.9%;内陆1635份标本阳性率分别是9.7%、47.2%、2.2%、15.0%、51.5%;沿海HBsAg、HBeAg阳性率高于内陆(P<0.05)。随机抽取323份DNA阳性的样品进行基因分型,B型占49.2%、C型占43.4%、B C型占7.4%,沿海B、C型比重相近,内陆以B型为主。[结论]福州市人群中HBsAg携带率为13.3%,高于全国平均水平。沿海HBsAg携带率高达16.8%,为福州市乙型肝炎高发人群,应加强乙肝的预防与控制。     

酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原结果的比较

目的 比较ELISA和电化学发光免疫法（ECLIA）检测HBsAg的一致性,探讨其相关的因素和基因进化特征。方法 2014年1月1日至2015年1月31日连续招募安庆市市立医院产科初次住院活产孕妇2 296例,收集其人口学特征,并对采集的血清应用ELISA和ECLIA检测HBsAg,采用Kappa检验评价两种方法检测结果的一致性;对HBV S基因片段进行巢式PCR扩增、测序及进化分析。结果 两种方法具有一致性,Kappa=0.71。共获得123株HBV S基因片段序列,其中113株为B基因型（adw2血清型112株,adw3血清型1株）,10株为C基因型（全为adr血清型）。两种方法检测不同基因型或血清型病毒株的结果显示,ECLIA对B基因型和adw2血清的检测明显优于ELISA,差异有统计学意义。113株B基因型序列进化分析显示,两种检测方法或不同阳性组别在各位点替换率的差异均无统计学意义。发生于HBsAg主要亲水区域（MHR）的氨基酸变异显示,ELISA/ECLIA单纯阳性组出现完全不相同的替换位点。结论 两种方法检测HBsAg具有高度的一致性,但在ELISA/ECLIA单纯阳性组中仍获得34株（32.4%）HBV S基因片段,且存在MHR的氨基酸替换位点互补。因此在控制HBV传播中应考虑ELISA/ECLIA单纯阳性的感染者在人群中可能的静默传播作用,还需优化临床检测程序。     

100例乙型肝炎病毒基因分型的探讨

目的:为了解宁波及毗邻地区乙型肝炎患者HBV基因型分布、优势型与临床的相关性。方法:选择宁波及毗邻地区HBV DNA阳性的HBV感染者100例,应用基因芯片对其进行基因分型,其中7例优势基因型进行S基因序列同源性测序复核。结果:100例HBV阳性的血清标本分型率为96.0%,其中B基因型36例(37.5%),C基因型47例(48.9%),BC混合基因型11例(11.5%)及BCD混合基因型2例(2.1%),未分出型的4例。乙型肝炎感染者检出的基因型以B、C型为主;重型肝炎与肝癌组中C型检出率分别为60%和55%,明显高于其他基因型(P<0.05),B、C基因型与HBV DNA拷贝数、丙氨酸氨基转移酶水平及总胆红素在统计学上无显著差异(P>0.05)。结论:基因芯片分型方法可应用于HBV基因的分型。宁波及毗邻地区的HBV基因型以B、C为优势基因型,重型肝炎和肝癌患者检出的基因型多为C型,提示C基因型患者预后较差。     

浙东地区乙型肝炎病毒基因型分布及临床意义

目的：了解浙江东部地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布、优势型及其与临床的相关性。方法：选择浙江东部地区HBVDNA阳性的HBV感染者100例，应用基因芯片对其进行基因分型，其中对7例优势基因型进行S基因序列同源性测序复核。结果：100例HBV阳性的血清标本分型率为96．0％，其中B基因型36例（36．0％），C基因型47例（47．0％），BC混合基因型11例（11．0％）及BCD混合基因型2例（2．0％），未分出型的4例（4．0％）。基因芯片分型与S基因序列同源性测序分型结果一致，乙型肝炎感染者检出的基因型以C、B型为主；重型肝炎与肝癌组中c型检出率分别为60％和55％，明显高于其他基因型（P〈0．05），C、B基因型与HBVDNA拷贝数、丙氨酸氨基转移酶水平及总胆红素在统计学上无显著差异（P〉0．05）。结论：HBV的基因型存在地区性差异，浙江东部地区的优势基因型为c、B型，与以往报道的结论不太一致。不同临床肝炎型与基因型存在一定的相关性，主要表现为重型肝炎和肝癌患者检出的基因型多为C型，提示C基因型患者预后较差。基因芯片分型方法可应用于HBV基因的分型，方便、快速。