丹皮酚对人大肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制

目的:探讨丹皮酚(paeonol, Pae)对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用及可能的作用机制. 方法:应用MTT法、荧光显微镜及透射电镜技术、TUNEL法和流式细胞仪技术观察不同浓度的Pae对HT-29细胞增殖的抑制及凋亡的诱导作用; 应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2, Bax及P53表达的变化. 结果: HT-29细胞经Pae(浓度范围7.81-250 mg/L)作用后细胞生长明显受到抑制, 呈明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系; 荧光显微镜及透射电镜观察到Pae作用后HT-29细胞出现典型的细胞凋亡形态; Pae在15.63, 62.5, 250 mg/L 3种浓度下作用48 h均可诱导HT-29细胞凋亡, TUNEL法显示凋亡指数与Pae浓度呈正相依赖关系; 流式细胞仪技术检测其凋亡率分别为7.6%, 16.2%和34.5%, 也有明显的剂量效应关系, 同时Pae使细胞周期分布发生明显变化, 表现为S期细胞比例上升, G0/G1期和G2/M期细胞比例下降; 免疫细胞化学结果显示Pae作用后HT-29细胞Bcl-2及P53蛋白表达显著降低, Bax蛋白表达无显著改变. 结论:Pae能抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡, 呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系. 其作用可能与影响癌细胞的细胞周期、下调Bcl-2/Bax的比例及P53蛋白的表达有关.     

金雀异黄素诱导K562和K562/ADM细胞的凋亡作用

目的探讨金雀异黄素(GS)对人红白血病细胞系K562与其多药耐药细胞系K562/ADM的生长抑制、诱导凋亡作用及其可能的作用机制。方法不同浓度的GS处理K562与K562/ADM细胞后,用MTT比色法检测生长增殖作用,流式细胞术检测凋亡,免疫细胞化学ABC法分析Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 GS对K562及K562/ADM细胞均有很强的生长抑制作用。同一浓度下GS诱导K562/ADM细胞凋亡率明显低于K562细胞。不同浓度GS对K562细胞的Bax蛋白呈强阳性表达,Bcl-2蛋白实验组同对照组比较颜色无明显变化;而在K562/ADM细胞中,Bcl-2在实验组和对照组中均强表达,但Bax的表达均无明显变化。结论 K562细胞对GS的反应比K562/ADM细胞敏感;GS诱导K562细胞Bax蛋白高表达可能是GS诱导K562细胞凋亡的机制之一,而K562/ADM细胞的耐药性和凋亡抑制可能与Bcl-2蛋白高表达有关。     

XELOX方案化疗联合热疗对结肠癌HT29细胞体外增殖和凋亡的影响

目的观察卡培他滨＋奥沙利铂（XELOX）方案化疗联合热疗对结肠癌HT29细胞体外增殖和凋亡的影响。方法将对数生长期的HT29细胞分为正常对照组、单纯热疗组、单纯化疗组和化疗联合热疗组,做相应处理并分别进行培养,MTT比色法测定细胞光度密值、流式细胞仪分析细胞周期及凋亡情况。结果与正常对照组相比,单纯热疗组、单纯化疗组以及化疗联合热疗组HT29细胞均明显阻滞于G2～M期,G0～G1期和S期细胞明显减少,组间相比,P〈0.05;后三组两两比较,P均〈0.05。与正常对照组相比,单纯热疗组、单纯化疗组和化疗联合热疗组HT29细胞的抑制率和凋亡率依次升高,组间两两比较,P均〈0.05。结论 XELOX方案化疗联合热疗能显著抑制结肠癌HT29细胞的增殖并诱导其凋亡,且作用强于单纯热疗或单纯化疗。     

雷替曲塞对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡的影响及其机制

目的观察雷替曲塞对人结肠癌细胞(SW480)细胞增殖及细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将SW480随机分为A组、B组、C组与对照组,A组加入雷替曲塞0. 1μg/mL,B组加入雷替曲塞0. 5μg/mL,C组加入雷替曲塞2. 5μg/mL,对照组加入等量培养液。培养24、48、72 h后采用CCK-8试剂盒检测各组SW480增殖活性;培养10 d后,计算各组SW480克隆形成率;培养72 h后,采用实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA,采用Western Blotting法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3蛋白。结果随着雷替曲塞浓度的增加以及干预时间的延长,SW480的增殖速度减慢(P均<0. 05),且在浓度达到一定程度后,该现象不再明显;孵育10 d后,各组SW480克隆形成率组间两两比较,P均<0. 05;随着雷替曲塞浓度的增加,SW480 Bax及Caspase-3蛋白及mRNA表达升高,Bcl-2蛋白及RNA表达降低(P均<0. 05)。结论雷替曲塞可通过调节SW480 Bax、Caspase-3和Bcl-2蛋白及...     

丁酸钠对人结肠癌细胞株SW480增殖及凋亡的影响及其机制

将2.85 mmol/L丁酸钠(NaB)体外作用于人结肠癌SW480细胞12、24、48 h分别用半定量RT-PCR法与Western-blot法检测p21基因mRNA及蛋白表达变化;并用FCM检测细胞周期变化.结果 p21基因mRNA 及p21蛋白表达随时间延长逐渐增加;结肠癌SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,S期比例明显减少,细胞增殖指数下降.认为NaB可诱导结肠癌细胞凋亡,其机制可能为细胞周期阻滞及p21蛋白高表达.     

芒柄花黄素对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 观察芒柄花黄素对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法 将结直肠癌细胞HCT116随机分为两组,观察组分别以25、50、100μmol/L芒柄花黄素处理,对照组以等量二甲基亚砜处理;用MTT法检测细胞增殖情况(A490),Hoechst荧光染色法计数凋亡细胞,qRT-PCR法检测细胞中的HOC转录反义RNA(HOTAIR),Western blot法检测细胞中的Bax和Bcl-2。结果 与对照组比较,观察组随着芒柄花黄素浓度增加及处理时间延长HCT116细胞A490值降低(P均<0.05);观察组以25、50、100μmol/L芒柄花黄素处理48 h后HCT116细胞凋亡数分别为(3.20±0.84)、(20.20±1.92)、(31.00±2.92)个/HP,均高于对照组的(1.6±1.14)个/HP(P均<0.01);与对照组比较,观察组细胞HOTAIR、Bcl-2表达量降低,而Bax表达量增加,P均<0.05。结论芒柄花黄素可能通过抑制HOTAIR调节Bax和Bcl-2的表达,从而抑制结直肠癌细胞的生长并诱导细胞凋亡。     

马钱子碱对人结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响及相关机制

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响及其分子机制。方法以人结肠癌细胞HT-29为研究对象,将其按不同处理方式分为空白对照组,马钱子碱(1μmol/L)处理组、白细胞介素(IL)-6(100μg/L)处理组、马钱子碱联合IL-6处理组。CCK8法检测细胞增殖情况;Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡情况;细胞免疫荧光染色检测p-STAT3蛋白表达的位置和强度,Western印迹法检测凋亡相关蛋白表达量。结果马钱子碱处理组、马钱子碱联合IL-6处理组均可明显抑制细胞增殖且马钱子碱处理组细胞抑制率明显高于马钱子碱联合IL-6处理组(P<0.05)。马钱子碱处理组、马钱子碱联合IL-6处理组细胞凋亡率明显高于空白对照组且马钱子碱处理组细胞凋亡率明显高于马钱子碱联合IL-6处理组(P<0.05);IL-6处理组细胞凋亡率与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。马钱子碱处理组p-STAT3比值明显低于空白对照组(P<0.05);同时马钱子碱浓度越高p-STAT3蛋白表达量越低。马钱子碱处理组p-STAT3和抗凋亡BCL-2蛋白表达量明显低于空白对照组,促凋亡蛋白Bax、执行凋亡的DNA修复酶Parp表达量明显高于空白对照组(P<0.05);IL-6处理组的p-STAT3蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05);马钱子碱联合IL-6处理组BCL-2蛋白表达量明显高于马钱子碱处理组,而Bax和DNA修复酶Parp表达量明显减少(P<0.05)。结论马钱子碱可有效抑制结肠癌细胞HT-29增殖并促进凋亡,其主要通过调节IL-6/STAT3信号通路,抑制细胞中STAT3磷酸化来实现。     

吲哚美辛对前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响及机制探讨

目的观察吲哚美辛对人激素非依赖性前腺癌细胞系DU145增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用不同浓度的吲哚美辛处理DU145细胞。应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测并计算细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞周期分布,并计算细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定细胞培养上清PGE2;应用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA。结果吲哚美辛可明显抑制DU145细胞增殖（P〈0．05）,并具有时间一剂量依赖性;经吲哚美辛作用后,S期细胞明显增多,G2/M期细胞减少,细胞出现凋亡峰;细胞上清中PGB量明显减少（P〈0．001）;Bcl-2 mRNA表达降低,BaxmRNA表达下降,Bcl-2／Bax下降（P〈0．05）。结论吲哚美辛对前列腺癌细胞DU145生长具有抑制作用,阻滞细胞向c2／M期转化,并促进其凋亡。其作用可能与抑制细胞PGE2释放、下调Bel-2／Bax有关。     

神经酰胺对结肠癌HT-29细胞凋亡和增殖细胞核抗原表达的影响

目的 探索神经酰胺(C_2-cer)影响人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和增殖细胞核抗原(PCNA)表达.方法 12.5、25 μmol/L的C_2-cer处理HT-29细胞,用MTT法、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、Western印迹等方法检测HT-29细胞增殖、凋亡和PCNA表达.结果 以12.5、25 μmol/L的C_2-cer处理HT-29细胞,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡明显增加,PCNA表达明显降低,并呈剂量-效应关系.结论 C_2-cer可诱导细胞凋亡,该效应可能与下调PCNA表达有关.     

金雀异黄素诱导人白血病Jurkat E6-1细胞凋亡的机制

目的 探讨金雀异黄素(Gen)对Jurkat E6-1人白血病细胞的凋亡诱导作用.方法 用激光共聚焦技术观察金雀异黄素对JurkatE6-1白血病细胞形态的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹方法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase3的表达.结果 Gen各浓度组瘤细胞皱缩、变形,染色质浓缩,部分核染色体碎裂,呈高蓝低红色;与1640组相比,Gen各浓度组凋亡率均呈显著增高,且随着Gen浓度的升高,凋亡率也增高;Gen 0.1、1.0、10.0 μmol/L组的Bax和Caspase-3蛋白条带强度递增,并明显高于1640组,而Bcl-2蛋白条带强度则递减,并明显低于1640组.结论 Gen对Jurkat E6-1白血病细胞可能通过上调Bax和Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达来诱导其凋亡.     

依那普利对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、Bax的影响

目的:探讨血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)———依那普利对慢性压力负荷性心力衰竭大鼠心肌重构、心肌细胞凋亡、凋亡基因Bcl 2、Bax在心肌细胞中表达的影响,为心力衰竭的发病机制及治疗提供实验依据。方法:结扎大鼠的腹主动脉,复制慢性压力负荷性心力衰竭模型,32只大鼠随机分为心力衰竭组 12 只、依那普利治疗组(治疗组)12只、对照组8只。手术后6周,充血性心力衰竭模型形成。治疗组给予依那普利10 mg·kg-1·d-1灌胃,心力衰竭组和对照组给予同量0.85%氯化钠溶液灌胃。在 3 个月末测量血流动力学指标后,将大鼠处死,取出心脏。用原位脱氧核糖核酸酶末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;免疫组化法和免疫印迹法测 bcl 2、Bax表达。结果:心力衰竭组与对照组相比,心功能明显减退(P < 0.01);心肌细胞凋亡明显增加(P <0.01);在心肌细胞中bcl 2 表达减低,Bax表达增加。依那普利治疗后能改善心室重构(P<0.05),减少心肌细胞凋亡(P< 0.01),增加bcl 2、减少Bax在心肌细胞中的表达(P<0.05)。结论:在心力衰竭时血管紧张素Ⅱ生成增多,减低bcl 2的表达,增加Bax的表达,从而降低 bcl 2/Bax比率;依那普利可能通过血管紧张素Ⅱ的介导作用,增加bcl 2、减低Bax在心肌细胞中的表达,减轻心肌细胞凋亡。     

肠复康对人结肠癌细胞HT-29增殖及浸润转移的影响

[目的] 探讨肠复康中药对人结肠癌细胞HT-29增殖及浸润转移影响的分子机制。[方法] 采用体外培养，应用免疫组化方法，检测其对核增殖抗原Ki-67、金属基质蛋白酶(MMP2)及其相应组织抑制物(TIMP2)表达的影响。[结果] 经中药血清处理过的HT-29细胞表现出增殖受抑，MMP2表达减少及TIMP2分泌增加，且其表达与中药血清浓度有量效关系，以30％血清组效果最明显。[结论] 中药肠复康通过抑制Ki-67的表达及影响MMP2、TIMP2的相互平衡来影响结肠癌细胞的增殖及浸润转移。     

亚砷酸对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及其Bcl-2表达的影响

目的探讨亚砷酸（AA）对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及其Bcl-2表达的影响。方法采用MTT比色法检测从作用后的BEL-7402细胞增殖抑制率,流式细胞术检测BEL-7402细胞周期及凋亡细胞,HE染色法观察凋亡细胞的形态,RT-PCR检测BEL．7402细胞的Bcl-2 mRNA,免疫组化法检测细胞的Bcl-2蛋白。结果1．0—8．0μmol／L的AA可使BEL-7402细胞增殖抑制率上升,能诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞细胞周期于S、G2／M期,呈剂量依赖性;8．0μmol／L的AA作用BEL-7402细胞48h后,细胞呈现明显的凋亡形态改变,其Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显减弱。结论AA体外有抑制BEL-7402细胞增殖及诱导凋亡的作用,且呈时间、剂量依赖性,其作用机制可能与降低其Bcl-2表达有关。     

丙咪嗪对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的:探讨丙咪嗪对结肠癌HT-29细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制.方法:按ACTT方法常规培养HT-29细胞,并以不同浓度(0、1、5、10、25、50和100μmol/L)丙咪嗪干预,MTT法检测各浓度干预24、48和72h后的细胞增殖能力:丙咪嗪以各浓度(0、1、10、50和100μmol/L)干预HT-29细胞24h,PI染色后流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V/PI双染后流式细胞仪和DNA片段梯试验检测细胞凋亡,Western blot检测Eagl蛋白的变化,逆转录PCR检测p21、p27、CyclinE1和cDK2mRNA表达水平的变化.结果:各浓度丙咪嗪干预HT-29细胞24、48和72h后,IC50分别为43、32、22μmol/L;丙咪嗪以剂量依赖方式诱导HT-29细胞在细胞周期Gn/G1期停滞,随丙咪嗪干预的浓度增加,HT-29细胞的凋亡指数逐渐升高(P<0.01),HT-29细胞中Eag1蛋白的表达水平逐渐下降(P<0.05),p27和p21mRNA表达水平逐渐增强(P<0.05),cyclinE1和CDK2mRNA的表达水平逐渐减弱(P＜0.05).结论:丙咪嗪可抑制HT-29细胞增殖,阻滞HT-29细胞周期进展,诱导细胞凋亡.其作用机制可能与抑制Eag1钾通道的活性,上调p27和p21表达、下调CyclinE1和CDK2表达有关.     

白藜芦醇对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨白藜芦醇对白血病K562细胞生长的影响及相关作用机制.方法 用不同浓度白藜芦醇作用于K562细胞,CCK-8法观察白藜芦醇对K562细胞生长增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法观察白藜芦醇对K562细胞凋亡的影响,PI染色法观察白藜芦醇对K562细胞周期的影响,Western blot法检测K562细胞中的Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Cyclin D1蛋白.结果 白藜芦醇作用后的K562细胞的增殖被抑制并且凋亡增加,呈时间-剂量依赖性;同时,凋亡相关分子Bcl-2、Bcl-xl表达下调,Bax表达上调;白藜芦醇作用K562细胞后,G1期细胞增多,S期细胞减少,细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达下降.结论 白藜芦醇可抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与下调细胞内Bcl-2、Bcl-xl、Cyclin D1表达并上调Bax的表达有关.     

抑制JNK信号通路对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抑制JNK 信号通路对结肠癌HT-29 细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分为正常对照组和JNK 抑制剂组(用SP600125 预处理细胞24 h),用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT 法)检测细胞增殖水平,用脱氧核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL 法)观察细胞凋亡情况.结果:...     

吲哚美辛对结肠癌细胞CDK2、CDK4、P21WAF1/CIP1、Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

目的：非甾体类抗类药通过环氧合酶途径是抑制肿瘤的机制之一，是否还有其他途径抑制细胞增殖及诱导凋亡。探讨吲哚美辛抗肿瘤的作用机制。为其临床应用实验依据。方法：不同浓度的吲哚美辛作用于结肠癌细胞株HCT116细胞24h，通过Western蛋白印迹技术检测CDK2、CDK4、p21s^WAF1/CIP1、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果：吲哚美辛降低细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2、CDK4及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达上，上调细胞周期依赖蛋白激酶抑制剂p21s^WAF1/CIP1蛋白，而对促凋亡蛋白Bax的表达无影响。结论：吲哚美辛通过降低CDK2、CDK4、Bcl-2蛋白，上调p21s^WAF1/CIP1的表达来抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax的影响

目的：观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及其调控基因Bcl-2、Bax的影响。方法：随机选择15只SD雄性大鼠,以高糖高脂饲料喂养6周后,腹腔注射STZ30mg／kg;2周后血糖升高≥16mmol／L者12只,随机又分为2型糖尿病组（n=6）和2型糖尿病缬沙坦治疗组（简称治疗组,n=6）,治疗8周,另选6只健康SD雄性大鼠为空白对照组,查内生肌酐清除率（Ccr）,24h尿白蛋白的排泄率（Uaer）。流式细胞术检测大鼠肾脏细胞凋亡率。免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达。结果：8周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻。细胞凋亡率糖尿病组较治疗组高（26．54±2．67VS20．05±2．03,P〈0．05）;Ccr糖尿病组较治疗组低（O．021±0．001VS0．065±0．004ml／min,P〈0．05）,Uaer糖尿病组高于对照组和治疗组（O．150±0．004VS0．081±0．001,0．086±0．002mg,P〈0．05）。治疗组和糖尿病组肾小管均较对照组的Bcl-2和Bax阳性表达高（P-40．05）,治疗组肾小管Bcl-2较糖尿病组的阳性表达高,而Bax阳性表达低（P〈O．05）。结论：缬沙坦通过增加Bcl-2／Bax在肾小管的比例,使糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡率减低,保护肾功能。     

依那普利对心力衰竭大鼠肾细胞凋亡及凋亡基因Bcl-2、Bax的影响

心力衰竭常并发肾功能不全，为心力衰竭的治疗带来困难。但有关心力衰竭易引起肾脏损害的分子机制不清。有报道慢性心脏后负荷增加引起心功能不全时存在肾细胞凋亡，但有关血管紧张素转化酶抑制剂能否减轻心力衰竭并发的肾脏损害未见报道。我们用依那普利对压力负荷性心力衰竭大鼠肾     

四氧嘧啶对人神经瘤SK-N-SH细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 观察四氧嘧啶对人神经瘤SK-N-SH细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将人神经瘤SK-N-SH细胞分为两组,对照组常规培养12h,观察组分别加不同浓度的四氧嘧啶培养12 h.用MTT法测细胞吸光度值观察细胞增殖情况,用PI/Hoechst染色法观察细胞凋亡,用蛋白免疫印迹法检测细胞中糖基化和磷酸化的神经丝蛋白.结果 对照组细胞吸光度值为0.43 ±0.01,观察组加入2、4、6、8、10 mM四氧嘧啶作用12 h,细胞吸光度值分别为0.39 ±0.01、0.35 ±0.02、0.30±0.01、0.26±0.03、0.21 ±0.02;观察组与对照组比较,P均＜0.05;观察组不同浓度间比较,P均＜0.05.对照组细胞凋亡率为5％±1％,观察组加入2、4、6 mM四氧嘧啶作用12 h,细胞凋亡率分别为10％±1％、18％±2％、29％±1％;观察组与对照组比较,P均＜0.05;观察组不同浓度间比较,P均＜0.05.对照组细胞中磷酸化、糖基化神经丝蛋白OD值为1.00 ±0.20、1.00±0.20,观察组加入2、4、6 mM四氧嘧啶作用12 h,细胞中磷酸化、糖基化神经丝蛋白OD值分别为1.21±0.42和0.95±0.21、1.32±0.51和0.78±0.32、1.51±0.30和0.75±0.24;观察组与对照组比较,P均＜0.05;观察组不同浓度间比较,P均＜0.05.结论 四氧嘧啶可抑制SK-N-SH细胞增殖,并诱导其凋亡;可能与神经丝蛋白的糖基化降低、磷酸化增加有关.