急性胆管炎时肝组织ICAM-1与循环PMN表面CD11b、CD18的表达变化

目的:观察急性胆管炎时大鼠肝组织ICAM-1与循环PMN表面CD11b、CD18的表达变化.方法:应用原位分子杂交和斑点杂交技术观察胆道感染时ICAM-1 mRNA在肝组织的定位及转录表达强度;用流式细胞仪测定PMN表达CD11b及CD18的阳性率.结果:ICAM-1 mRNA原位杂交显示胆道感染3 h后肝窦内皮细胞、枯否细胞和肝小叶中央静脉内皮细胞阳性反应增强,12 h阳性反应最强.斑点杂交显示胆道感染后3 h肝组织ICAM-1 mRNA含量开始增高,12 h达高峰.循环PMN表达CD11b和CD18的阳性率3 h以后明显增高.结论:胆道感染大鼠肝窦内皮细胞等表面ICAM-1与循环PMN表面CD11b、CD18的表达显著增强.     

乌司他丁对瓣膜置换术患者粘附分子的影响

目的　探讨尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁 (Ulinastatin)对风湿性心脏病二尖瓣置换术患者粘附分子的影响。方法　 2 0例择期行二尖瓣置换手术的风心病患者随机分为两组 (每组 10例 ) ,乌司他丁组应用 12 0 0 0U/kg于麻醉诱导后静脉推注 ,对照组不加乌司他丁。分别在麻醉诱导后、CPB30min、手术结束时、术后第一天和第二天抽取血标本 ,用流式细胞仪测定中性粒细胞CD11b、CD18和CD11b/CD18阳性细胞百分率 ,用ELISA法测定血清中的内皮细胞表达的细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)。结果　CPB30min直至术后第二天 ,对照组中性粒细胞CD11b、CD18和CD11b/CD18阳性细胞百分率均较乌司他丁组明显升高 (p <0 .0 5 ) ;术后第一天及术后第二天 ,对照组血清ICAM - 1含量较乌司他丁组明显增加 (p <0 .0 5 )。结论　乌司他丁能明显抑制风心病二尖瓣置换术患者中性粒细胞表面CD11b、CD18、CD11b/CD18以及血清ICAM - 1的表达 ,从而有效降低瓣膜置换术患者由CPB引发的炎症反应     

烧伤病人痂下水肿液对中性粒细胞膜表面 CD11/CD18表达的影响

目的 了解烧伤病人痂下水肿液（STF）对中性粒细胞（PMN）活化及CD11/CD18表达的影响。方法 应用流式细胞术动态检测严重烧伤病人STF 刺激健康人PMN后PMN膜表面CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达以及STF与PMN同孵育后培养液中髓过氧化物酶（MPO）变化。结果 健康人PMN在STF刺激1 h后，培养液中MPO活性即迅速升高并在24 h内保持此高水平，同时，PMN膜表面CD11a/CD18和CD11b/CD18也迅速升高达峰值并在24 h内保持此高水平。结论 STF可活化PMN并刺激PMN表达CD11a/CD18和CD11b/CD18，STF对烧伤后PMN致组织损害可能起重要作用。     

乌司他丁对心肺复苏后大鼠脑组织含水量及CD11b的影响

目的 探讨乌司他丁对心肺复苏早期大鼠脑组织含水量及脑组织CD11b水平的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为假手术对照组、心肺复苏(CPR)组、乌司他丁组,每组各10只大鼠.于自主呼吸循环恢复后2h,采用干湿法检测各组大鼠脑组织含水量,采用ELISE法检测大鼠脑组织CD11b水平.结果 ①脑组织含水量:CPR组为(80.4±2.0)%,较对照组(76.7±1.3)%显著增加(P<0.01);乌司他丁组(77.6±1.5)%,较CPR组显著减少(P<0.01).②脑组织CD11b含量:CPR组为(620.488±38.723)ng/mg,较对照组(453.189±121.403)ng/mag明显增高(P<0.01);乌司他丁组(476.875±114.686)ng/mg,较CPR组显著减少(P<0.05).结论 CPR早期即可发生脑水肿,脑组织CD11b水平显著增加;应用乌司他丁能有效降低脑组织含水量和脑组织CD11b水平.     

乌司他丁对心肺复苏大鼠心功能及心肌组织CD11b、ICAM-1的影响

目的:观察心肺复苏后大鼠心功能和心肌组织黏附因子CD11b、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平及心肌细胞超微结构的变化,以及乌司他丁对其的影响。方法:利用窒息法制造心脏骤停大鼠模型,将Sprague Dawley大鼠随机分为对照组、复苏组及乌司他丁组,每组9只。于自主循环恢复(ROSC)2h,测定左室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力上升、下降最大速率(dp/dt max),采用透射电镜(TEM)观察心肌细胞超微结构变化,ELISA法测定心肌组织CD11b、ICAM-1水平。结果:与复苏组比较,乌司他丁组心功能有所改善,心肌组织病变减轻,CD11b、ICAM-1水平显著下降。结论:乌司他丁可抑制黏附因子CD11b和ICAM-1表达,改善心肺复苏后大鼠心功能,减轻心肌细胞损伤。     

小儿体外循环对中性粒细胞CD11/CD18表达水平的影响

目的:观察小儿体外循环(CPB)对中性粒细胞CD 11/CD 18的表达水平,探讨CD 11/CD 18在小儿体外循环诱发的全身炎症反应中的作用。方法:30例房室水平左向右分流型先天性心脏病在CPB下行心内直视手术患儿(CPB组)和20例非CPB胸科或腹部手术患儿(对照组)被纳入本研究对象,于麻醉诱导后、体外循环转流后10~15 m in、体外循环转流结束、术后2 h和术后第1、2、3天取外周静脉血,采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞CD 11/CD 18分子表达水平,酶联免疫法(EL ISA)定量测定血浆中IL-6、IL-8水平。结果:CPB组体外循环停机后血浆IL-6、IL-8水平开始升高并于术后2 h达峰值(P<0.05),随后开始下降,但仍高于诱导后水平(P<0.05);对照组血浆IL-6、IL-8水平于术后2 h达峰值(P<0.05),但其变化幅度小于CPB组相应时间点的值。CPB组外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平于转流后10~15 m in明显升高(P<0.05)并达峰值,术后第1、2天低于基础水平(P<0.05),第3天与基础水平比无显著性差异(P>0.05)。对照组外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平在各时间点间无显著性差异(P>0.05)。CPB组和对照组外周血中性粒细胞CD 11a/CD 18、CD 11c/CD 18表达水平于各时间点均无显著性差异(P>0.05)。结论:小儿体外循环可促发外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平增高,而对CD 11a/CD 18和CD 11c/CD 18的表达水平无明显影响,CD 11b/CD 18在小儿体外循环诱发的全身炎症反应中可能发挥重要作用。     

异丙酚对体外循环患者核因子κB活性及整合素CD11b表达的影响

目的:观察异丙酚对体外循环(CPB)患者中性粒细胞(PMN)核因子κB(NF-κB)活性及整合素CD11b表达的影响. 方法:将30例行CPB心瓣膜置换术病例随机分成观察组(异丙酚麻醉维持组)和对照组(咪唑安定麻醉维持组),每组30例.分别于麻醉前、CPB开始后30min、CPB停止后30min、4h、24h抽取挠动脉血3ml,运用电泳迁移率实验检测NF-κB活性,流式细胞仪检测CD11b表达水平.采用X2检验和t检验进行组间差异的统计学分析,比较两组间PMN NF-κB活性和CD11b的表达.结果:两组患者PMN NF-κB活性在CPB停止后30min达到峰值,观察组在CPB开始后30min、CPB停止后30min、4h、24h PMN NF-κB活性低于对照组;两组患者在CPB开始30min后 PMN CD11b表达水平呈递增的趋势,CPB停止后30min、4h、24h 3个时间点上观察组PMN CD11b表达水平明显低于对照组.结论:同咪唑安定相比,异丙酚可以减低CPB患者PMN NF-κB活性和CD11b表达,明显抑制体外循环患者炎症反应.     

丹参对兔烧伤早期中性粒细胞与内皮细胞粘附抑制作用的实验研究

目的 研究丹参对严重烧伤早期中性粒细胞（PNM）与内皮细胞粘附的作用及机制。方法 采用兔30%Ⅲ度烧伤模型，24只日本大耳兔随机分为丹参组和生理盐水组，分别烧伤后即刻、2、4、8、16、24、48h取血分离获得PMN，与体外培养的兔血管内皮细胞作用测定PMN-EC粘附率及其PMN表面粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18值。结果 烧伤后即刻两组粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18及PMN-EC粘附率均升高，生理盐水组伤后4h达高峰；丹参组伤后2、4、8、16、24h的CD11a/CD18、CD11b/CD18显著低于生理盐水组。结论 丹参能降低粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18表达，抑制PMN-EC粘附，改善微循环及减轻PMN-EC粘附所致的组织损伤。     

丹参对兔内毒素血症中性粒细胞与内皮细胞粘附抑制作用的实验研究

目的 研究丹参对内毒素血症中性粒细胞(PMN)与内皮细胞(EC)粘附的作用及机制。方法 采用兔内毒素血症模型，将24只日本大耳兔随机分为内毒素血症组和丹参治疗组，分别于造模后即刻、2、4、8、16、24、48h取血分离获得中性粒细胞，与体外培养的兔血管内皮细胞作用，测定PMN—EC粘附率及其PMN表面粘附分子CD11a／CD18、CD11b／CD18值。结果 造模后即刻两组粘附分子CD11a／CD18、CD11b／CD18及PMN—EC粘附率均升高，内毒素血症组造模后4h达高峰，丹参治疗组造模后2、4、8、16、24h的CD11a／CD18、CD11b／CD18显著低于内毒素血症组。结论 丹参能降低粘附分子CD11a／CD18、CD11b／CD18表达，抑制PMN—EC粘附，改善微循环及减轻PMN—EC粘附所致的组织损伤。     

整合数CD11c/CD18在急性缺血性卒中患者外周血白细胞表达及意义

目的:探讨急性缺血性卒中(AIS)患者外周血中性粒细胞(PMN)和单核细胞(MNL)表面黏附分子整合素CD11c/CD18表达的变化及意义。方法:采用流式细胞术,单克隆抗体标记测定28例AIS患者发病72h内及7天时外周血表面PMN、MNL表面黏附分子CD11c/CD18的表达量。同时测试28例健康者作对照。结果:发病72h内患者组PMN、MNL表面黏附分子CD11c/CD18的表达显著高于对照组(P<0.01);发病7天后患者组CD11c/CD18的表达有所下降,与72h内检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05);但仍显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:AIS时激活的PMN、MNL上整合素CD11c/CD18表达上调,可能参与了AIS的炎症反应机制。     

CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响

目的 研究CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响.方法 构建CD59配体肽基因的真核表达重组体(CD59配体-pIRES),转染人卵巢癌细胞A2780,G418筛选稳定表达细胞克隆;RT-PCR及Western blot方法检测细胞表面CD59 mRNA及蛋白的表达;MTT法测定细胞增殖抑制率.结果 成功构建了CD59配体肽基因真核表达重组体,转染后的A2780 CD59 mRNA及蛋白的表达水平与WT-A2780比较均明显下降(t=9.21、7.20,P<0.05);细胞增殖抑制率明显增高(F=5.417,q=3.93,P<0.05).结论 CD59配体肽基因可影响人卵巢癌细胞A2780表面CD59的表达,有望用于肿瘤治疗.     

CD59与CD55锚固蛋白对T细胞活化信号转导的作用

目的研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固蛋白CD59、CD55在脂筏介导T细胞信号转导通路中的作用。方法应用siRNA技术,构建针对CD55与CD59基因的重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59。实验分为未转染的Jurkat细胞组(Ⅰ组)、转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅱ组)及转染pSUPER-siCD55重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅲ组)。RT-PCR方法检测转染细胞中CD55和CD59基因mRNA的表达。噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦扫描显微镜分别检测CD55与CD59联合作用对3组Jurkat细胞的增殖效应以及细胞内钙离子的变化。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞CD59和Ⅲ组细胞CD55 mRNA的表达均明显减少(F=595.14、699.06,q=45.70~47.25,P<0.05)。Ⅰ组细胞CD55与CD59联合作用后增殖能力和钙离子浓度均明显高于Ⅱ组、Ⅲ组(F=97.02、189.47,q=13.69~26.39,P<0.01),Ⅱ组低于Ⅲ组(q=5.43、6.42,P<0.05)。结论 CD59和CD55在T细胞活化信号转导通路中存在协同效应,其中CD59起到重要作用。     

从RPMI8866细胞制备CD23分子最佳条件及提取方法的研究

建立从高表达CD23分子的RPMI8866细胞株分离制备CD23分子的两种方法:自然裂解法和木瓜蛋白酶水解法。比较了此两法的优劣,探讨了CD23回收量的影响因素,经Western blot-ting技术鉴定出制备品中18、37、42、45和86KDa的CD23片段。结果表明,上述方法简便、可靠、易行,且回收量较高。可供研究及分离其它膜分子参考。     

铯137辐照对库存红细胞表面分子CD35、CD47的影响

目的：探讨铯137（137 Cs）辐照对库存红细胞表面分子红细胞1型补体受体（complement receptor type 1,CR1 or CD35）及 CD47分子的影响。方法采集60例健康献血者静脉血,制备去白细胞的悬浮红细胞,并将其分为2组各30例,未辐照组常规4℃保存,辐照组采用25Gy 137 Cs辐照后4℃保存。分别于第0、7、14、28、35天收集2mL 样本。采用直标法流式细胞术检测红细胞表面分子 CD35、CD47。结果辐照组和未辐照组红细胞 CD35、CD47的表达均随着4℃保存时间的延长而减少,2组的时点间以及组间·时点间交互作用比较差异均有统计学意义（P ＜0．01）,但组间差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论25Gy 137 Csγ射线辐照对保存期内红细胞 CD35、CD47表面分子表达无明显影响。     

创伤性骨关节炎软骨组织CD11、CD54和TNF-α表达及意义

目的 观察创伤性骨关节炎病人软骨组织中淋巴细胞功能相关抗原-1(CD11)、细胞间黏附分子-1(CD54)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,探讨创伤性骨关节炎的发病机制.方法 随机取20例创伤性骨关节炎手术病人的病变软骨组织(实验组)与非正常死亡人体标本正常软骨组织5例(对照组),应用免疫组织化学方法检测软骨组织中CD11、CD54、TNF-α的表达,经图像分析比较两组的差异.结果 实验组CD11、CD54、TNF-α的表达均较对照组明显增高,差异有显著性(t=2.34～6.46,P<0.05).结论 创伤性骨关节炎的发生与CD11、CD54、TNF-α介导的炎性反应有关.     

CD23单克隆抗体的研制及其鉴定

目的：制备高度特异性和高纯度的抗ＣＤ２３单克隆抗体（ＣＤ２３ＭｃＡｂ）。方法：用ＥＢＶ感染的人Ｂ淋巴细胞（ＲＰＭＩ－８８６６）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,采用杂交瘤技术,细胞ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ等方法制备、纯化和鉴定了ＣＤ２３ＭｃＡｂ。结果：筛选出了强分泌抗Ｂ细胞膜ＣＤ２３分子的单克隆抗体的杂交瘤细胞株（２Ｂ６）。结论：该单抗对Ｍｒ４５×１０３的ＣＤ２３分子反应具有高度特异性。     

支气管肺泡灌洗液CD4／CD8比率在三种肺门淋巴结肿大疾病中的差异

为探讨支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＣＤ４／ＣＤ８比率在非何杰金氏病、结节病、结核病三种疾病之间是否有差异，对经病理活检证实的７例非何杰金氏病和６例结节病；经痰菌检查证实的７例结核病和９例健康者进行了运气了管肺泡灌洗，并对ＢＡＬＦ中的ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋细胞进行了分析测定。结果显示：ＢＡＬＦ中ＣＤ４／ＣＤ８比率在非何杰金氏病组中不但显著低于正常对照组，而且显著低于结节病组和结核病组（Ｐ均〈０．０     

红斑狼疮皮损中CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达

目的检测红斑狼疮皮损区T淋巴细胞亚群CD4 和CD8 T细胞的表达情况。方法采用免疫组织化学法对红斑狼疮皮损区淋巴细胞进行检测,并与正常皮肤作对照。结果红斑狼疮患者皮损CD4 T细胞百分数明显高于正常对照组。CD8 T细胞百分数明显低于正常对照组。结论红斑狼疮患者可能存在CD4 T细胞活性增强,CD8 T细胞功能抑制,从而导致免疫紊乱而发病。     

COPD病人外周血CD4+CD25+调节性T细胞检测及意义

目的 检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞( Treg)的频率及血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)浓度,探讨Treg在COPD发病中的免疫调节作用.方法 采用流式细胞仪检测45例COPD急性发作期病人、33例COPD临床缓解期病人以及25例健康人外周血中Treg亚群的频率,ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-4浓度.结果 COPD病人急性发作期组IL-4浓度较临床缓解期组和健康对照组显著增高,临床缓解期组低于健康对照组,差异有统计学意义(F= 192.86,q=11.63～27.66,P＜0.01); COPD病人急性发作期组IFN-γ浓度高于临床缓解期组和健康对照组,差异有统计学意义(F=35.53,q=9.72、10.13,P＜0.01),而临床缓解期组与健康对照组差异无统计学意义(q=1.13,P＞0.05);临床缓解期组IFN-γ/IL-4比值最高,急性发作期组次之,健康对照组最低,差异有统计学意义(F=230.95,q=7.79～30.10,P＜0.01);CD4+ CD25+Treg频率在COPD急性发作期组高于临床缓解期组和健康对照组,而临床缓解期组低于健康对照组,差异有显著性(F= 146.08,q=8.68～12.72,P＜0.01).结论 COPD病人存在Th1/Th2动态变化,急性发作期以Th2免疫为主,临床缓解期则以Th1免疫为主;Treg在COPD的发生发展中担负着重要的免疫调节作用.     

CD34在大肠癌中的表达及其意义

目的:检测大肠癌中CD34的表达,探讨其在大肠癌发生、发展及转移中的作用.方法:应用流式细胞术检测80例大肠癌标本中CD34的表达.结果:CD34在大肠癌组织中的表达量明显高于正常大肠粘膜(P＜0.01);不同Dukes分期之间、不同分化程度大肠癌组织之间CD34的表达差异有统计学意义(P＜0.05-0.01).结论:大肠癌中有血管形成,CD34可能是判断病人预后的指标.