阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路的干预作用

目的探讨阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路的干预作用。方法 36只SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和阿托伐他汀组,各组分别设7 d、14 d两个时间点。HE、Masson、PAS染色法观察肾脏病理改变;免疫组化观察Wnt4和β-catenin蛋白在肾组织的表达;Western印迹检测各组大鼠肾皮质Wnt4、β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、Ecadherin、α-SMA和CollagenⅠ蛋白的相对表达量。结果与假手术组相比,模型组肾皮质Wnt4和β-catenin、p-GSK-3β、α-SMA蛋白表达显著增多(P<0.05),CollagenⅠ沉积增多(P<0.01),E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.01),GSK-3β在各组大鼠肾组织表达无差异;与模型组相比,阿托伐他汀组肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β和α-SMA蛋白表达减少(P<0.05),CollagenⅠ蛋白沉积显著减少(P<0.05),并伴有E-cadherin蛋白表达显著增多(P<0.05),而GSK-3β蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论 Wnt4/β-catenin信号通路的活化促进了UUO大鼠肾脏纤维化的发生发展,阿托伐他汀能改善肾脏纤维化病变,减轻肾间质细胞外基质的沉积,可能与其抑制Wnt4/β-catenin信号通路的激活和传导有关。     

飞天蜈蚣七对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1蛋白表达的影响

目的探讨飞天蜈蚣七防治肝纤维化的作用机制.方法CCl4法复制肝纤维化模型,48只SD大鼠随机分为飞天蜈蚣七组(A组)、秋水仙碱组(B组)、模型组(C组)和正常对照组(D组),每组12只.各组分别在第22、43天时,检测血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)含量;行肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)免疫组化染色,检测其蛋白表达.结果第22天时,与D组、A组比较,C组血清HA、PC-Ⅲ升高,TGF-β1阳性表达较强(P＜0.05),LN升高(P＞0.05);第43天时,与D组比较,C组血清HA、LN、PC-Ⅲ明显降低,肝组织TGF-β1阳性表达明显减轻(P＜0.05).结论飞天蜈蚣七可以减轻肝纤维化程度、抑制肝组织TGF-β1蛋白的表达,飞天蜈蚣七可作为抗肝纤维化的一种有效药物.     

去卵巢对大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探索去卵巢对大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将20只3月龄SD雌性大鼠随机分为去势组和正常对照组,每组10只。去势组大鼠行双侧卵巢切除术,正常对照组大鼠不作任何处理。去除卵巢12 w后,取血检测血清雌二醇、骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平;取左股骨进行骨密度检测;取右股骨骨髓检测低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)和β-catenin mRNA和蛋白表达。结果去势组大鼠血清雌二醇水平较正常对照组显著下降(P<0.01),骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平较正常对照组显著增高(P<0.01);去势组大鼠骨密度比正常对照组显著降低(P<0.01);去势组的β-cantenin mRNA和蛋白表达比正常对照组显著增高(P<0.05),尽管去势组的LRP5 mRNA和蛋白表达比正常对照组增高,但差异没有统计学意义。结论大鼠去卵巢12 w后Wnt/β-catenin信号通路被激活。     

β连环蛋白在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制研究

目的探讨肝硬化大鼠心肌中的β连环蛋白(β-catenin)表达,以阐明β-catenin在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制。方法建立肝硬化大鼠模型,通过模型组和对照组比较,免疫组化法检测各组心肌组织中β-catenin表达水平; Western blot检测大鼠心肌中的β-catenin和Wnt诱导的分泌型蛋白1(WISP-1)表达差异。结果模型组体重增长较慢,且小于对照组。免疫组化及Western blot结果显示对照组β-catenin蛋白的表达水平低,肝硬化模型组β-catenin蛋白的表达水平高,二者比较差异有统计学意义(P 0. 01)。结论 Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白)信号通路参与肝硬化所致心肌肥厚的病理过程。     

Wnt信号通路在结肠癌中的表达及其作用机制

目的探讨Wnt信号通路在结肠癌中的表达及其相关的分子机制。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测所有参与者(65例结肠癌和30例健康人)血清中半乳糖凝集素(galectin)-3的含量,观察galectin-3和人结肠癌发病的关系,荧光实时定量PCR检测人结肠癌组织和癌旁组织中相关基因的表达。Western印迹检测人结肠癌组织和癌旁组织中相关蛋白的表达水平,包括轴蛋白基因(AXIN)、β-catenin,c-myc和cyclin D1蛋白。结果血清中的galectin-3水平在结肠癌Ⅲ期患者血清中的含量较健康对照组明显升高(P0.01)。结肠癌组织中AXIN mRNA表达水平下降,β-catenin mRNA表达水平不变但其下游分子c-myc和cyclin D1基因的表达水平升高。β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白水平均升高,Wnt信号通路明显激活。结论在结肠癌患者血清中galectin-3水平明显升高,AXIN表达水平降低,其可以活化Wnt信号通路,激活后的Wnt信号通路通过β-catenin上调细胞增殖相关因子c-myc和cyclin D1水平的升高,促进结肠癌细胞的增殖。     

己酮可可碱对肝纤维化模型大鼠β-连环蛋白表达的影响

目的 研究己酮可可碱对肝纤维化模型大鼠β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响.方法 用CCl4诱导制备大鼠肝纤维化模型,试验组全程给予己酮可可碱治疗.测定大鼠血清ALT、Ⅳ型胶原含量及肝组织中β-catenin的表达和分布.结果 正常大鼠肝脏不表达β-catenin;肝纤维化大鼠肝组织中β-catenin的表达呈强阳性,多表达于胞质,且向细胞核内转移;经己酮可可碱治疗后,试验组大鼠肝纤维化程度地显著降低,胶原面积占肝组织的面积百分比下降(P＜0.05),β-catenin的表达显著减少(P＜0.05),两者呈正相关(r=0.842,P＜0.001).结论 β-catenin在纤维化程度高的肝组织的表达增强,是肝脏纤维化程度的反应指标;己酮可可碱能显著降低纤维化大鼠肝脏β-catenin的表达,延缓大鼠肝纤维化的发展.     

五灵胶囊调节TGF-β/Smad信号通路蛋白对胶原Ⅰ、Ⅲ型表达的影响

目的探讨五灵胶囊(WL)调节肝纤维化大鼠肝组织及星状细胞(HSC)TGF-β/Smads信号转导蛋白对胶原Ⅰ和Ⅲ型(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)表达的影响.方法SD大鼠以高脂低蛋白饲养、饮用10%乙醇,皮下注射40%CCl4,隔4天注射1次,连续6周制备肝纤维化模型,灌胃给予WL 3.86 g/kg和秋水仙碱0.1 mg/kg治疗1月;另体外分离HSC,以不同剂量的WL与HSC培养24 h, 最后3 h加入TGF-β1 10 ng/ml.实验结束后镜检肝细胞变性和肝组织纤维化程度,同时ELISA法测定血清COL-Ⅰ、COL-Ⅲ和培养液COL-Ⅰ含量,RT-PCR检测肝组织COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1 mRNA的表达. Western blot检测肝组织及HSC内COL-Ⅰ、ProCOL-Ⅰ、LN、α-SMA、ERK、p-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2/3、Smad7蛋白表达.结果WL组大鼠肝细胞变性和肝纤维化程度明显减轻,血清COL-Ⅰ、COL-Ⅲ含量增加, COL-Ⅰ、COL-Ⅲ mRNA表达降低.Western blot结果显示,WL能明显下调肝组织α-SMA、LN、p-ERK、TβRⅠ、COL-Ⅰ、ProCOL-Ⅰ蛋白表达,对ERK、TβRⅡ、Smad2/3、Smad7蛋白表达无影响;显著下调HSC α-SMA 、TβRⅡ、p-ERK、Smad7表达,呈浓度依赖性抑制HSC分泌COL-Ⅰ.结论WL抑制肝纤维化大鼠肝组织COL-Ⅰ、COL-Ⅲ合成并增加COL-Ⅰ降解,其作用位点是下调肝组织和HSC TGF-β/Smad、Ras/ERK信号通路蛋白p-ERK、TβRⅡ表达.     

肝豆扶木汤对TX小鼠肝纤维化TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的观察肝豆扶木汤(GDFMT)对TX小鼠肝纤维化转化生长因子-β1(TGF-β_1)/Smad信号通路的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法将24只雄性TX小鼠随机分为模型组、青霉胺组、GDFMT组,另设正常对照组。采用竞争性放免分析法检测血清肝纤维化透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)含量,免疫组化法观察肝组织TGF-β_1、Smad2和Smad7蛋白的表达。结果血清肝纤维化指标结果:与正常对照组比较,模型组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均明显升高(P0.01);与模型组比较,青霉胺组和GDFMT组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均降低(P0.05或P0.01);与青霉胺组比较,GDFMT组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均降低(P0.05)。免疫组化法观察结果:与正常对照组比较,模型组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显升高,Smad7蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,青霉胺组和GDFMT组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显降低(P0.05),Smad7蛋白表达明显升高(P0.01);与青霉胺组比较,GDFMT组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显降低(P0.05),Smad7蛋白表达明显升高(P0.05)。结论 GDFMT可以能降低TX小鼠肝纤维化血清学指标,具有良好的抗肝纤维化的作用,其作用机制可能是抑制TGF-β_1和Smad2蛋白的表达,上调Smad7蛋白的表达。     

飞天娱蚣七对肝纤维化大鼠肝组织转化牛长因子β1蛋白表汰的影响

目的：探讨飞天娱蚣七防治肝纤维化的作用机制。方法：CCl4法复制肝纤维化模型，48只SD大鼠随机分为飞天娱蚣七组(A组)、秋水仙碱组(B组)、模型组(C组)和正常对照组(D组)，每组12只。各组分别在第22、43天时，检测血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)含量；行肝组织转化生长因子—β1(TGF-β1)免疫组化染色，检测其蛋白表达。结果：第22天时，与D组、A组比较，C组血清HA、PC—Ⅲ升高，TGF-β1阳性表达较强(P＜0．05)，LN升高(P＞0．05)；第43天时，与D组比较，C组血清HA、LN、PC-Ⅲ明显降低，肝组织TGF—β1阳性表达明显减轻(P＜0．05)。结论：飞天娱蚣七可以减轻肝纤维化程度、抑制肝组织TGF-β1蛋白的表达，飞天娱蚣七可作为抗肝纤维化的一种有效药物。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体表达的影响

[目的]研究荔枝核总黄酮(TFL)与胆管阻塞性肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的关系以及TFL抗肝纤维的作用。[方法]雄性SD大鼠60只,随机分为3组:假手术组、模型组及TFL给药组,除假手术组外其他大鼠采用胆总管结扎制备肝纤维化大鼠模型。TFL给药组给予TFL200 mg/(kg.d)灌胃,4周后处死所有大鼠,取血清和肝组织进行检测,酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TRAIL水平;放射免疫法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;采用苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察大鼠肝纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肝组织TRAIL表达情况。[结果]同模型组相比,TFL给药组肝组织纤维化程度明显改善;TFL给药组和假手术对照组血清TRAIL HA、LN、PCⅢ均显著低于模型组(P0.05),且TFL给药组和假手术对照组之间血清TRAIL水平差异无统计学意义(P0.05);血清TRAIL水平与肝组织中TRAIL表达一致;血清TRAIL水平与血清HA、LN、PCⅢ呈正相关(r=0.97,0.95,0.94,P0.01)。[结论]TRAIL可促进胆管阻塞性大鼠肝纤维化发生发展,TFL可以改善肝纤维化程度,其机制可能与抑制肝内TRAIL的表达有关。     

衰老对大鼠结肠干细胞增殖分化功能及微环境的影响

目的探讨衰老对大鼠结肠干细胞增殖分化功能及微环境的影响。方法雄性SD大鼠按不同月龄分成:成年组(6月龄)、老年组(24月龄),每组10只。采用高碘酸-雪夫试剂(PAS)染色和阿利新蓝染色检测大鼠结肠杯状细胞数量的变化,免疫组化检测各组大鼠结肠干细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、β-catenin、糖原合成酶激酶(GSK)-3β蛋白的表达,RT-PCR检测各组大鼠结肠干细胞MUC1、MUC2、Lgr5、Bmi-1的变化。结果与成年组比较,老年组大鼠结肠组织干细胞标记物Lgr5、Bmi-1 mRNA表达量显著降低(P0. 01),细胞增殖相关蛋白PCNA表达显著增加(P0. 01),杯状细胞数量和MUC1、MUC2 mRNA表达显著降低(P0. 01),其微环境Wnt/β-catenin信号通路中的β-catenin蛋白显著增加(P0. 05)、GSK-3β表达显著降低(P0. 01)。结论衰老过程中,大鼠结肠干细胞增殖功能增加,向杯状细胞分化的功能减弱,干细胞微环境Wnt/β-catenin信号通路上调。     

吡格列酮调控β-连环蛋白表达延缓糖尿病大鼠肾脏纤维化的组织和细胞实验研究

目的在组织和细胞水平研究吡格列酮通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路延缓糖尿病大鼠肾脏纤维化的发生发展。方法 18只SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、DKD组和吡格列酮治疗组(PIO),每组各6只。HE、Masson染色观察肾组织形态学变化。大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常糖组(Con)、高糖组(HG)、吡格列酮处理组(HG+PIO)、HG+空载组(HG+E)和HG+PPARγ过表达组(HG+PPARγ)。免疫细胞荧光观察细胞中β-catenin表达;Western blot法检测大鼠肾组织和NRK-52E细胞相关蛋白表达变化。结果与NC组比较,DKD组PPARγ表达降低(P0.05),磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、β-catenin、细胞核β-catenin、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)和Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)蛋白表达升高(P0.05),与DKD组比较,PIO组PPARγ表达升高(P0.05),p-GSK3β、β-catenin、细胞核β-catenin、Collagen Ⅳ、Collagen Ⅲ和Collagen Ⅰ表达降低(P0.05)。与Con组比较,HG组PPARγ降低(P0.05),p-GSK3β、β-catenin、细胞核β-catenin、Collagen Ⅳ、Collagen Ⅲ和Collagen Ⅰ蛋白表达升高(P0.05),与HG组比较,HG+PIO组PPARγ表达升高,p-GSK3β、β-catenin、细胞核β-catenin、Collagen Ⅳ、Collagen Ⅲ和Collagen Ⅰ表达降低(P0.05)。与HG组比较,HG+PPARγ组PPARγ表达升高(P0.05),p-GSK3β、β-catenin、Collagen Ⅳ和Collagen Ⅲ表达降低(P0.05)。结论吡格列酮可上调PPARγ表达,下调β-catenin表达,抑制Wnt/β-catenin通路活化,减少ECM沉积,延缓糖尿病肾脏纤维化的发生发展。     

miR-183调控Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌SGC-7901细胞生物学特性的研究

背景 miR-183在胃癌、乳腺癌、膀胱癌等多种肿瘤组织中低表达,发挥抑癌基因的作用,但其在胃癌中作用机制目前尚不十分清楚.研究表明, miR-183可以通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制骨肉瘤细胞的生长、迁移和侵袭,而Wnt/β-catenin信号通路在胃癌中高度激活与胃癌的发生和转移密切相关.但miR-183是否调节Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞生物学特性尚不清楚.目的探讨miR-183调控Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞生物学特性的影响.方法采用q RT-PCR检测miR-183在不同胃癌细胞株中的表达情况,在胃癌细胞SGC-7901中转染miR-183mimics或mimics对照,分别设为miR-183组和miR-NC组, qRT-PCR检测转染效率,噻唑蓝增殖实验检测SGC-7901细胞增殖变化,流式细胞仪检测SGC-7901细胞凋亡情况, Transwell实验检测SGC-7901细胞侵袭和迁移能力, Western blot法检测凋亡相关及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平.使用Wnt/β-catenin信号通路激动剂氯化锂处理过表达miR-183的SGC-7901细胞,观察SGC-7901细胞生物学特性的变化.结果与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比, 4株胃癌细胞中miR-183的表达水平明显降低(P 0.05).转染miR-183mimics后SGC-7901细胞中miR-183的表达水平显著升高(P0.05).过表达miR-183后SGC-7901细胞OD值降低(P0.05),凋亡率、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(P 0.05),侵袭和迁移细胞数减少(P0.05),β-catenin、p-GSK-3β和Cyclin D1蛋白表达水平下调(P0.05), GSK-3β蛋白表达水平上调(P 0.05).激活Wnt/β-catenin信号通路部分逆转了过表达miR-183对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用及凋亡促进作用(P0.05).结论miR-183可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路阻碍人胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移能力,促进细胞凋亡.     

肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-HODA致帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探讨肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-羟多巴胺(6-HODA)所致帕金森病大鼠受损神经的保护作用。方法将45只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和肉苁蓉多糖治疗组,采用6-HODA立体定向微量注射制备帕金森病大鼠模型。第32天观察实验动物行为学改变,之后将大鼠处死,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)检测大鼠脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组游泳静止时间缩短,自主活动站立次数下降,肉苁蓉多糖治疗后上述两种行为得到恢复;模型组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平低于假手术组;肉苁蓉多糖治疗组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平高于模型组(P0.05);模型组脑黑质内GSK-3βmRNA高于假手术组;肉苁蓉多糖治疗后,帕金森病大鼠脑黑质内GSK-3βmRNA水平下降(P0.05)。结论肉苁蓉多糖能改善6-HODA所致帕金森病SD大鼠模型临床症状,这种作用可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制GSK-3β活性,进而发挥多巴胺神经保护作用。     

五灵胶囊对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β／Smad及Ras／ERK信号通路蛋白的影响

目的探讨五灵胶囊对肝纤维化大鼠肝组织TGF-βSmad及Ras／ERK信号通路蛋白的影响,阐述五灵胶囊治疗肝纤维化的作用机制。方法SD大鼠以高脂低蛋白饲料饲养,饮用10％乙醇,并腹腔注射4．1mol／LCCl4制备肝纤维化模型,给予五灵胶囊进行治疗1个月。Westernblot检测肝组织中α-SMA、Ras、ERK、p-ERK、Smad2／3、p-Smad2／3、Smad7、TJ3RI、T13R1I;RT-PCR法检测肝组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1mRNA;酶法测定血清ALT、AST;ELISA测定血清COL-Ⅰ、COL-Ⅲ含量;肝组织masson和HE染色进行肝细胞变性程度与胶原纤维增生程度评分。结果五灵胶囊可显著降低血清AST、ALT水平,下调肝组织中Rasp21、α-SMA、p-ERK、T13RI蛋白与TGF-β1、COL-I、COL-Ⅲ mRNA表达（P〈0．01或0．05）,增加p-Smad2／3蛋白表达（P〈0．01）,使肝细胞变性程度与胶原纤维增生程度显著降低。结论五灵胶囊治疗肝纤维化的作用机制是显著降低肝纤维化大鼠组织肝细胞变性和胶原纤维增生的程度、抑制TGF-β／Smad及Ras／ERK信号通路TJ3RI、Rasp21、p-ERK蛋白表达及TGF-β1过量分泌。     

五灵胶囊调节TGF-β／Smad信号通路蛋白对胶原I、Ⅲ型表达的影响

目的探讨五灵胶囊（WL）调节肝纤维化大鼠肝组织及星状细胞（HSC）TGF-β／Smads信号转导蛋白对胶原I和Ⅲ型（COL～I、COL-Ⅲ）表达的影响。方法SD大鼠以高脂低蛋白饲养、饮用10％乙醇,皮下注射40％CCl4,隔4天注射1次,连续6周制备肝纤维化模型,灌胃给予WL3．86g／kg和秋水仙碱0．1mg／kg治疗1月;另体外分离HSC,以不同剂量的WL与HSC培养24h,最后3h加入TGF-β1 10ng／ml。实验结束后镜检肝细胞变性和肝组织纤维化程度,同时ELISA法测定血清COL-I、COL-Ⅲ和培养液COL—I含量,RT-PCR检测肝组织COL-I、COL-Ⅲ、TGF-β1 mRNA的表达。Western blot检测肝组织及HSC内COL—I、ProCOL—I、LN、α—SMA、ERK、p-ERK、TβRI、TβRⅡ、Smad2／3、Smad7蛋白表达。结果WL组大鼠肝细胞变性和肝纤维化程度明显减轻,血清COL-I、CoL-Ⅲ含量增加,COL-I、COL-ⅢmRNA表达降低。Western blot结果显示,WL能明显下调肝组织α—SMA、LN、p-ERK、TβRI、COL—I、ProCOL-I蛋白表达,对ERK、TβRⅡ、Smad2／3、Smad7蛋白表达无影响;显著下调HSCα—SMA、TβRII、p-ERK、Smad7表达,呈浓度依赖性抑制HSC分泌COL-I。结论WL抑制肝纤维化大鼠肝组织COL-I、COL-Ⅲ合成并增加COL—I降解,其作用位点是下调肝组织和HSCTGF-β／Smad、Ras／ERK信号通路蛋白p—ERK、TβRⅡ表达。     

肝复康对HSC-T6细胞Wnt信号转导通路调节作用的观察

目的观察中药肝复康含药血清对肝星状细胞T6（HSC-T6）细胞株经典Wnt信号转导通路中的关键调节因子Wnt1、糖原合成激酶3β（GSK-3β）、β-链蛋白（β-catenin）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）以及α-平滑肌动蛋白（α-SMA）基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法制备肝复康含药血清,用乙醛及肝复康含药血清干预HSC-T6细胞株,采用RT-PCR和Western-Blot法分析Wnt1、Gsk-3β、β-catenin、cyclinD1和α-SMA表达的变化。结果肝复康含药血清处理可上调HSC-T6细胞株Gsk-3βmRNA的表达,下调Wnt1、β-cateninc、yclinD1和α-SMA的表达。结论肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过调节经典的Wnt信号通路中的关键因子的表达,从而抑制α-SMA mRNA的转录,以减少细胞外基质的形成。     

转化生长因子β1在人肝纤维化组织中的表达及作用的探讨

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在人肝纤维化组织中的分布和作用.方法:采用放射免疫方法检测36例慢性乙型肝炎患者血清中PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN水平,同时采用原位杂交和免疫组化的方法检测其肝组织中TGF-51mRNA及蛋白表达情况,并对蛋白表达结果进行半定量分析.结果:TGF-β1mRNA和蛋白表达于肝纤维化活跃的汇管区、纤维间隔、Disse间隙及肝细胞变性坏死处,随肝纤维化程度的加重,TGF-β1蛋白表达着色积分增加(S0期1.4±0.8,S1期1.7±0.9,S2期2.9±1.0,S3期4.8±1.5,S4期6.8±1.5);并且与血清PCⅢ,Ⅳ-C,HA及LN水平呈明显的正相关(r=0.39,P＜0.05;r=0.436,P＜0.05;r=0.63,P＜0.01;r=0.40,P＜0.05).结论:TGF-β1与胶原蛋白沉积密切相关,在人肝纤维化的形成和发展中起关键性的作用.     

Wnt信号通路对脑胶质瘤凋亡的影响及其机制

目的初探Wnt信号通路对脑胶质瘤U87细胞凋亡的影响及其机制。方法采用Annexin V-FITC/PI流式细胞仪和Western Blot法检测加入抑制剂LXAV939和不加抑制剂的两组实验的细胞凋亡率及其参与Wnt信号通路的Wnt1和β-catenin蛋白的表达情况。结果经抑制剂LXAV939处理的U87细胞的凋亡率明显大于对照组(P0.05);Wnt1和β-catenin蛋白的表达明显低于对照组(P0.05)。结论 Wnt信号抑制剂LXAV939能诱导脑胶质瘤U87细胞凋亡,其机制可能与下调Wnt1和β-catenin蛋白有关。     

Wnt/β-catenin通路相关蛋白在乙型肝炎肝纤维化进程中的临床意义

目的:探讨Wnt/β-catenin通路相关蛋白在乙型肝炎肝纤维化进程中的变化。方法:选取275例患者,包含HBV携带者或非活动性乙肝表面抗原(HBsAg)携带者(HBV组,n=130例)和慢性乙型肝炎患者(n=145例)。根据肝活检病理学评估,慢性乙型肝炎患者中29例患者未发生肝纤维化(CHB组),另116例患者发生肝纤维化(肝纤维化组)。比较肝纤维化组不同肝纤维化分期(S0～S4)和炎症分级(G0～G4)患者血清Wnt/β-catenin通路相关蛋白水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清标志物诊断不同肝纤维化分期的最佳切割点。多元Logistic线性回归模型分析血清标志物与肝纤维化进展的关系。结果:与HBV组和CHB组比较,肝纤维化组患者血清Wnt-3a、Wnt-5a、β-catenin、Wnt诱导分泌蛋白-1(WISP-1)水平升高,同时Wnt信号通路抑制分子Dickkopf-1(DKK-1)水平降低(均P<0.05)。与S1～S2期患者比较,S3～S4期患者血清Wnt-5a、WISP-1水平升高,且血清DKK-1水平降低(均P<0.05)。此外炎症分级G4级患者...