南方红豆杉水提物通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控HER2阳性胃癌移植瘤生长实验研究

目的：初步探讨南方红豆杉水提物抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide-3 kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称AKT） /雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路上相关靶点蛋白调控裸鼠人类表皮生长因子受体2（HER2）阳性胃癌移植瘤生长及其机制。方法：建立荷瘤裸鼠模型,将80只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87细胞株并随机分组给药及取瘤,采用Western blot法检测PI3K、pAKT、mTOR蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测PI3K、AKT1、mTOR mRNA表达水平。结果 ：Western blot法检测PI3K、pAKT、mTOR蛋白,红豆杉中、低剂量组下调PI3K蛋白表达更显著[（0.9123±0.0480、1.1440±0.1663）比1.4160±0.0730,P<0.01],红豆杉各剂量联合赫赛汀后明显下调pAKT蛋白表达（P<0.05）,红豆杉组均明显下调mTOR蛋白表达（P<0.01）,联合赫赛汀后下调更显著。2、实时荧光定量PCR法检测PI3K、AKT1、mTOR mRNA,红豆杉低剂量组PI3K mRNA表达降低[（0.6906±0.0710）比（0.9018±0.0696）,P<0.05],红豆杉各剂量组联合赫赛汀后明显下调AKT1 mRNA表达,红豆杉中、低剂量组mTOR mRNA表达显著降低[（0.8183±0.0664、0.7917±0.0699）比（1.0004±0.1182）,P<0.05）]。结论：南方红豆杉水提物可部分下调PI3K、pAKT、mTOR蛋白及PI3K、AKT1、mTOR mRNA表达水平,联合赫赛汀可增强其抑制作用。     

南方红豆杉水提物抑制 Ras/MAPK信号通路调控HER2阳性胃癌移植瘤生长实验研究

目的:初步探讨南方红豆杉水提物抑制Ras/MAPK信号通路上相关靶点蛋白调控裸鼠HER2阳性胃癌移植瘤生长及其机制。方法：建立荷瘤裸鼠模型,将80只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87细胞株并随机分组给药及取瘤,采用Western Blot检测HER2、KRAS蛋白表达情况,RT-PCR定量检测其mRNA表达水平。结果：Western blot检测HER2、KRAS蛋白,与空白组比,各给药组HER2、KRAS蛋白表达均显著下调,低剂量联合组HER2蛋白下调显著（0.554+0.110 vs 1.482+0.101;P＜0.01）,中剂量红豆杉组KRAS蛋白表达下调显著（1.015+0.033 vs 0.630+0.049;P＜0.01）。2、RT-PCR检测HER2、KRAS蛋白,中剂量红豆杉组HER2及KRAS mRNA表达下调（P＜0.01）,联合后下调明显。结论：南方红豆杉水提物可部分下调HER2、KRAS mRNA及蛋白表达水平,联合赫赛汀可增强其抑制作用。     

PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌中的研究进展

胃癌的形成是一个十分复杂的过程,不但涉及到基因的突变,还涉及到细胞内信号传导通路的改变.PI3K/AKT/mTOR通路是细胞内重要的信号传导通路之一,该通路活化可以抑制多种刺激诱发的胃癌细胞凋亡,促进细胞周期进展,促进血管形成,参与胃癌的侵袭和转移[1-2].现就PI3K/AKT/mTOR通路的结构特点及在胃癌发生、发展中作用的研究进展进行综述.     

南方红豆杉水提物对NCI-N87胃癌裸鼠移植瘤凋亡作用及机制研究

目的探讨南方红豆杉水提物对HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的诱导凋亡作用,并初步探索其作用机制。方法建立荷瘤裸鼠模型,将60只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87细胞株并随机分组给药及取瘤,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测PI3K、AKT1、mTOR mRNA表达水平。结果①中药低、中、高剂量组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);中剂量联合组差异性最为显著(P0.01);②红豆杉各剂量组PI3K mRNA表达均降低(P0.05),红豆杉联合赫赛汀后明显下调AKT1 m RNA表达,红豆杉中、低剂量组m TOR mRNA表达显著降低(P0.05)。结论①南方红豆杉水提物可以诱导胃癌细胞的凋亡,联合西药曲妥珠单抗后并未增强其诱导作用;②南方红豆杉水提物可部分下调PI3K、AKT1、m TOR mRNA表达水平。     

南方红豆杉水提物逆转胃癌细胞NCI-N87荷瘤裸鼠曲妥珠单抗耐药实验研究

目的:观察南方红豆杉水提物联合曲妥珠单抗抑制人胃癌细胞NCI-N87裸鼠移植瘤的作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探索南方红豆杉水提物克服曲妥珠单抗耐药的机制。方法:建立荷瘤裸鼠模型,将40只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87耐药细胞株并随机分组给药及取瘤,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,Western-blot检测移植瘤中PI3K、AKT1、mTOR蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR法检测mRNA表达水平。结果:各治疗组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较显著升高(P<0.05),联合组最为显著(P<0.01)。南方红豆杉联合组较曲妥珠单抗单药能显著降低移植瘤PI3K、AKT1、mTOR蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论:南方红豆杉水提物可以诱导胃癌细胞的凋亡,联合西药曲妥珠单抗后增强其诱导作用。南方红豆杉水提物可能通过抑制HER2及下游PI3K/AKT信号通路的激活,从而克服曲妥珠单抗耐药。     

南方红豆杉水提物逆转胃癌细胞NCI-N87荷瘤裸鼠曲妥珠单抗耐药实验研究

目的:观察南方红豆杉水提物联合曲妥珠单抗抑制人胃癌细胞NCI-N87裸鼠移植瘤的作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探索南方红豆杉水提物克服曲妥珠单抗耐药的机制。方法:建立荷瘤裸鼠模型,将40只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87耐药细胞株并随机分组给药及取瘤,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,Western-blot检测移植瘤中PI3K、AKT1、mTOR蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR法检测mRNA表达水平。结果:各治疗组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较显著升高(P0.05),联合组最为显著(P0.01)。南方红豆杉联合组较曲妥珠单抗单药能显著降低移植瘤PI3K、AKT1、mTOR蛋白及mRNA的表达(P0.05)。结论:南方红豆杉水提物可以诱导胃癌细胞的凋亡,联合西药曲妥珠单抗后增强其诱导作用。南方红豆杉水提物可能通过抑制HER2及下游PI3K/AKT信号通路的激活,从而克服曲妥珠单抗耐药。     

丙泊酚通过靶向调控PI3K/AKT/mTOR信号通路体外抑制乳腺癌细胞生长

探讨丙泊酚通过PI3K/AKT/mTOR信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法 在体外,丙泊酚10 mg/mL分别与乳腺癌MCF-7和BT474细胞系共孵育分为对照组和丙泊酚组。PI3K过表达质粒经丙泊酚处理后转染MCF-7细胞分为对照组、丙泊酚+PI3K组、PI3K组,分别检测细胞的生存、侵袭及凋亡情况。Western blot检测PI3K/AKT/ mTOR信号通路相关蛋白表达水平。在体内构建MCF-7小鼠模型,免疫组化和TUNEL实验用于检测乳腺癌细胞的生长和凋亡情况。结果 丙泊酚显著抑制乳腺癌细胞的生长和侵袭能力（P＜0.05）。Western blot和细胞凋亡实验结果显示,丙泊酚通过降低Bcl-2和Bcl-w在乳腺癌细胞中的表达水平来诱导细胞凋亡（P＜0.05）。丙泊酚降低了乳腺癌细胞中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT)和mTOR蛋白表达水平（P＜0.05）。对P13K进行过表达处理后显示,PI3K过表达逆转了丙泊酚对MCF-7细胞的生长和侵袭的抑制作用（P＜0.05）。体内实验表明,丙泊酚治疗明显抑制MCF-7小鼠模型中的肿瘤生长,促进了细胞凋亡（P＜0.05）。结论 丙泊酚通过PI3K/AKT/mTOR信号通路体外抑制乳腺癌细胞的生长和侵袭,促进细胞凋亡     

DIS3通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进人骨髓瘤细胞凋亡

目的 探究DIS3对人骨髓瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 选取人骨髓瘤细胞株NCI-H929、RPMI 8226和U266为研究对象,分别设计并构建DIS3基因过表达载体和DIS3-siRNA,3种细胞均随机分成5组:对照组、DIS3-siRNA阴性对照(negative control,NC)组、DIS3空载组、...     

PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展

CD4⁺ T细胞是一类在免疫反应中发挥重要作用的免疫细胞,它在激活后可分化为Th1、Th2、Th17和Treg等细胞亚群。其中Th17细胞是一类新型CD4⁺ 效应T细胞,在宿主防御各种病原体和炎症发病机制中发挥重要作用。PI3K/AKT/mTOR信号通路可以调控细胞的新陈代谢、增殖、分化和生存等生命过程,并参与肿瘤、自身免疫性疾病等的发生。本文针对PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展进行综述。     

中药基于PI3K/AKT/mTOR信号通路治疗膝骨关节炎

磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositiol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路在膝骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)的形成、发展和治疗中起着关键作用,其在软骨增殖与凋亡、软骨下骨重塑和滑膜炎症中扮演重要角色。抑制PI3K/AKT/mTOR信号传导,能够促进自噬,减轻关节炎症反应,恢复关节稳态;激活PI3K/AKT/mTOR信号传导,可以促进软骨细胞增殖分化,减少凋亡。以中药单体和中药复方为研究对象,依据中药基于PI3K/AKT/mTOR信号通路分析其促进软骨细胞增殖、减少凋亡、抑制炎症反应、增强软骨细胞自噬、恢复关节稳态、减轻关节损伤等方面的机制,以期为KOA的临床治疗及基础研究提供思路。     

VCAN通过PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖

目的 探讨多能蛋白聚糖（VCAN）通过PI3K/AKT 信号通路对乳腺癌细胞MDA-MB-231 增殖的影响。方法 利用Western Blot 和qRT-PCR 检测VCAN 在正常人乳腺细胞MCF-10A 和三株乳腺癌细胞中的表达水平。选取VCAN 高表达细胞株MDA-MB-231 为实验对象,实验分组为NC 组、siRNA1-VCAN 组和siRNA2-VCAN 组。采用MTT 法及克隆形成法检测转染后的乳腺癌细胞增殖变化。Western Blot 检测p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K 的蛋白相对表达水平。结果 与正常人乳腺细胞相比,VCAN 在乳腺癌细胞中的表达量显著上升（P＜0.05）。下调VCAN 表达量,MDA-MB-231 细胞的增殖显著被抑制（P＜0.05）。同时,下调VCAN 表达量,p-AKT、p-PI3K 蛋白水平显著下降（P＜0.05）。结论VCAN 在乳腺癌MDA-MB-231 细胞中,可能通过PI3K/AKT 信号通路调控细胞增殖能力。     

黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导膀胱癌细胞凋亡

目的 研究黄芩素对膀胱癌细胞的作用及机制。 方法 膀胱癌细胞T24和5637经黄芩素(处理组)或二甲基亚砜(对照组)处理后,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)以及胸腺嘧啶核苷类似物(EdU)插入实验检测细胞增殖和DNA复制速率;划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡水平;Western blotting检测PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)等蛋白的表达水平;裸鼠成瘤实验检测黄芩素对于体内膀胱癌细胞增殖能力的影响。 结果 黄芩素可以在体内和体外抑制膀胱癌细胞的增殖速率,高浓度黄芩素体外抑制率可达80%以上,体内抑制率约50%。黄芩素可以减缓DNA复制并降低肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,诱导细胞停滞在G₀/G₁期,发生细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义。黄芩素处理后,PI3K的表达以及AKT和mTOR的磷酸化水平降低,Bax/Bcl-2的比值升高。 结论 黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制膀胱癌细胞增殖,发生周期阻滞,诱导细胞凋亡。     

P4HA2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肝癌的发生和发展

目的 探讨脯氨酸4-羟化酶II（P4HA2）在肝癌细胞发生发展中的作用及相关机制。方法 利用GEPIA、Human Protein Atlas数据库预测P4HA2在肝癌中的表达情况,利用K-M plotter在线数据库分析P4HA2的表达情况与肝癌预后的关系,采用qRT-PCR和Western blot检测肝癌细胞和正常肝细胞中P4HA2的表达。构建慢病毒载体,用携带P4HA2 shRNA和Con shRNA的慢病毒载体分别转染肝癌SNU-449和Hep-3B细胞系,建立沉默表达P4HA2的细胞株（shP4HA2组）和对照组细胞株（NC组）。采用CCK-8、集落形成试验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果 在线数据库分析结果显示,肝癌组织中P4HA2表达高于正常肝组织（P<0.05）。同时,肝癌细胞系中P4HA2 mRNA和蛋白表达水平也高于正常肝细胞（P<0.01）。慢病毒干扰后,与NC组相比,shP4HA2组中mRNA和蛋白表达水平下降（P<0.05）。P4HA2基因表达沉默后,细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。Western blot显示,相对于NC组,shP4HA2组的E-cadherin蛋白表达上升,N-cadherin、Snail蛋白表达下降（P<0.05）,在PI3K/AKT/mTOR通路中,磷酸化的PI3K（P-PI3K）、AKT（P-AKT）和mTOR（P-mTOR）显示出较低的水平（P<0.05）。结论 P4HA2通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进肝癌的发生发展。     

缺氧条件下Netrin-1通过激活PI3K/AKT通路诱导宫颈癌细胞上皮-间质转化

目的 探讨缺氧条件下Netrin-1通过激活PI3K/AKT通路诱导宫颈癌细胞上皮-间质转化(EMT).方法 qPCR检测正常上皮细胞HaCaT及宫颈癌细胞系SiHa、Caski、Hela中Netrin-1的表达.二氧化钴处理模拟低氧微环境,通过Trans wall和细胞划痕实验观察SiHa、Caski、Hela细胞侵...     

蛇床子素通过c-met/PI3K/AKT途径提高顺铂对肺癌细胞的杀伤活性

目的探讨蛇床子素是否能提高顺铂对肺癌细胞的杀伤活性并研究其机制。方法 A549非小细胞肺癌细胞按对照组、蛇床子素组、顺铂组、蛇床子素+顺铂组及蛇床子素+顺铂+c-met质粒组进行分组后,MTT法检测A549细胞活力,Western blot实验检测A549细胞蛋白酪氨酸激酶(cmet)表达水平,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)磷酸化水平及半胱天冬酶(caspases)活化水平的影响,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。结果顺铂+蛇床子素组A549的细胞活力抑制率[(59.8±3.5)%]显著高于顺铂单治疗组[(16.9±1.2)%,P0.05]和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组[(21.6±1.5)%,P0.05]。蛇床子素处理可诱导A549细胞c-met蛋白的下调并抑制A549细胞PI3K和AKT的磷酸化。顺铂+蛇床子素组对A549细胞的凋亡诱导率[(29.7±2.1)%]显著高于顺铂组[(7.8±0.9)%,P0.05]和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组[(10.1±1.5)%,P0.05]。顺铂+蛇床子素组A549细胞的Caspase-9、Caspase-3活化水平显著高于顺铂组和蛇床子素+顺铂+c-met质粒组。结论蛇床子素通过下调c-met表达提高肺癌细胞对顺铂的敏感性。     

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤转移及其机制的研究进展

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤的发生发展关系密切,本文概述PI3K、AKT的结构特征、PI3K/AKT信号转导通路的活化及其与恶性肿瘤转移的关系及机制。