四川省喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的发现与研究

目的 调查四川地区是否存在喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地.方法 应用现场调查和实验室检测相结合方法,调查宿主动物及媒介蚤携带鼠疫菌的状况.结果 四川省德格县境内调查发现宿主动物10目30种(亚种);常见宿主动物为喜马拉雅旱獭和高原鼠兔,发现蚤类3科7属7种,喜马拉雅旱獭为鼠疫菌主要储存宿主,斧形盖蚤和谢氏山蚤为主要媒介,分离鼠疫菌13株;鼠疫间接血凝试验(IHA)阳性血清8份,牧犬血清最高滴度1:10 240,鼠疫反向血凝试验(RIHA)阳性19份,旱獭最高滴度1:409 600.四川省德格县境内鼠疫疫源地面积约4545 km2.结论 四川省存在喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地.     

2009年德格鼠疫自然疫源地检测结果分析

目的研究德格县喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫流行状况。方法对喜马拉雅旱獭等材料进行细菌分离培养、鼠疫间接血凝试验（IHA）和反间接向血凝试验（R IHA）。结果细菌培养检测自毙喜马拉雅旱獭18份,分离鼠疫菌10株,细菌培养检测活体喜马拉雅57份,分离菌株2株;IHA检测旱獭血清56份、阳性1份,牧犬血清24份、阳性2份;RIHA检测组织悬液18份,阳性9份均为旱獭。结论从喜马拉雅旱獭分离出鼠疫菌,说明四川省德格县2009年正在发生动物鼠疫流行。     

2007-2010年德格县鼠疫相关标本检测结果分析

目的分析2007-2010年德格县鼠疫自然疫源地相关标本的检测结果,为四川省喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地防治提供科学依据。方法对鼠疫常规监测中的喜马拉雅旱獭等材料进行鼠疫菌分离培养、鼠疫间接血凝实验（IHA）和鼠疫反向血凝实验（RIHA）。结果 2007-2008年,细菌培养活体喜马拉雅旱獭223份,分离鼠疫菌2株,细菌培养自毙喜马拉雅旱獭汉89份,分离鼠疫菌27株;IHA检测喜马拉雅旱獭血清229份,阳性血清4份I,HA检测牧犬血清105份,阳性血清7份I,HA监测藏系绵羊血清117份,阳性血清0份;RIHA检测喜马拉雅旱獭脏器悬液89份,阳性32份,阳性率36.00%。结论 2007-2010年每年都分离出鼠疫菌,说明四川省德格县喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地处于活跃期,应加强人间鼠疫监测,防止人间鼠疫发生。     

2008年德格鼠疫自然疫源地实验检测结果分析

目的研究德格县喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地情况。方法对2008年在德格县捕获的喜马拉雅旱獭等材料进行细菌分离培养、胶体金免疫层析法(GICA)与鼠疫间接血凝(IHA)和反向血凝(RIHA)。结果细菌培养检测自毙喜马拉雅旱獭26份,分离鼠疫菌9株;IHA检测旱獭血清79份、阳性3份,牧犬血清29份、阳性3份;RIHA检测组织悬液30份、阳性9份均为旱獭;GICA检测旱獭血清79份、阳性2份,牧犬血清29份、阳性9份,藏系绵羊血清32份、阳性8份;GICA抗原检测组织悬液30份,阳性11份(旱獭10份、家猫1份)。结论从德格县喜马拉雅旱獭分离出鼠疫菌,说明四川省德格县2008年正在发生动物鼠疫流行。     

内蒙古阿鲁科尔沁旗鼠疫疫区小肠结肠炎耶尔森菌调查研究

目的了解赤峰市阿鲁科尔沁旗达乌尔黄鼠鼠疫疫源地内鼠类、家畜家禽携带小肠结肠炎耶尔森菌情况,为疾病防治工作和研究鼠疫疫源地提供科学依据。方法在达乌尔黄鼠鼠疫疫源地内,选择以村庄为中心,向外依次为农田、草原的同心圆样地,分别采集鼠类、家畜家禽粪便、舌根、咽拭子及肠道内容物等样品,进行小肠结肠炎耶尔森菌分离、培养、鉴定、生物血清分型,并用PCR方法进行毒力因子测定。统计学分析采用χ2检验。结果 2009-2012年共检验各类样品3837份,检出小肠结肠炎耶尔森菌17株,总检出率为0.44%。2011年检出的16株小肠结肠炎耶尔森菌中13株源自猪粪,3株来自鼠肠;1株O∶3血清型,生物3型,携带ail、yst A、rfb C毒力基因的致病性菌株检自猪粪。结论阿鲁科尔沁旗绍根地区的猪、鼠体内携带小肠结肠炎耶尔森菌,猪是致病性小肠结肠炎耶尔森菌的重要携带者。进一步调查分析小肠结肠炎耶尔森菌在该地区人和宿主动物间的分布规律十分必要。     

2007-2009年四川省旱獭鼠疫流行病学监测

目的分析四川省2007-2009年喜马拉雅旱獭鼠疫流行态势,为四川鼠疫防治提供科学依据。方法按照＂全国鼠疫总体规划＂和＂四川省鼠疫监测方案＂及实施细则进行调查。结果2007-2009年调查发现：每个年度均发生喜马拉雅旱獭动物鼠疫流行;发现染疫动物3种,包括喜马拉雅旱獭、牧犬和藏系绵羊;分离鼠疫菌25株,鼠疫间接血凝试验（IHA）阳性血清9份、旱獭血清最高滴度1∶10240,鼠疫反向血凝试验（RIHA）阳性28份、旱獭最高滴度1∶409600;发现蚤类4科10属11种,主要传播媒介为斧形盖蚤和谢氏山蚤。结论喜马拉雅旱獭动物鼠疫呈连续流行态势。     

丽江市古城区家犬致病性耶尔森菌携带状况调查

目的 初步了解丽江市古城区 3 种致病性耶尔森菌在家犬中的携带情况,补充该疫源地家犬致病性耶尔森菌带菌状况的相关数据。 方法 采集丽江市古城区鼠疫疫源地家犬肛拭子样本并进行冷增菌培养,通过聚合酶链反应和细菌分离纯化对致病性耶尔森菌进行检测与分析。结果 在丽江市古城区七河镇、大东乡、金安镇、束河街道、文华街道、开南街道等地共采集了 164 份家犬肛拭子,从 1 份样本中检出鼠疫耶尔森菌、4 份样本中检出小肠结肠炎耶尔森菌,未检测到假结核耶尔森菌。 结论 丽江市古城区家犬携带鼠疫耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌,增加了当地居民感染鼠疫及相关疾病的风险,须加强对该地家犬致病性耶尔森菌携带情况的监测。     

四川省鼠疫防治30年回顾

目的分析四川省1981-2010年鼠疫防治的研究结果,为四川鼠疫防控工作提供对策与依据。方法统计、整理、分析四川省1981-2010年鼠疫相关工作资料,实验方法按照"鼠疫诊断标准"进行。结果通过调查,细菌学检测材料42 429份、分离鼠疫菌183株,鼠疫间接血疑试验血清29 980份、阳性251份,鼠疫放射免疫沉淀试验标本7 611份、阳性79份,鼠疫反向血疑试验检测标本833份、阳性31份,发现染疫动物7种,染疫媒介3种,发现青海田鼠型鼠疫菌和喜马拉雅旱獭型鼠疫菌,鼠疫发生在2县5个乡镇。结论证实了四川鼠疫自然疫源地的存在,发现了青海田鼠疫源地和喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地。     

丽水市莲都区鼠疫疫源地耶尔森菌的分离及鉴定

目的了解丽水市莲都区鼠疫疫源地鼠类携带耶尔森菌的类型、毒力基因、生物型以及抗生素敏感等情况。方法利用常规耶尔森菌分离方法从635份鼠类肠道内容物中分离耶尔森菌,对检获的小肠结肠炎耶尔森菌、假结核耶尔森菌进行生物分型试验、抗生素敏感试验和毒力基因检测。结果共检获26株耶尔森菌,其中小肠结肠炎耶尔森菌检出率为2.83%(18/635),均为生物1A型非致病性菌株;假结核耶尔森菌检出率为0.31%(2/635),中间型耶尔森菌检出率为0.31%(2/635),弗氏耶尔森菌检出率为0.47%(3/635),克氏耶尔森检出率为0.16%(1/635)。18株小肠结肠炎耶尔森菌中,2株对庆大霉素耐药,4株对复方新诺明耐药。2株假结核耶尔森菌均对庆大霉素耐药,1株同时对头孢曲松和复方新诺明耐药。结论莲都鼠疫监测点鼠类携带耶尔森菌种类多,以小肠结肠炎耶尔森菌为主,对耶尔森菌的监测要进一步加强,以评估鼠疫暴发的危险度。同时,应警惕耶尔森菌引起的肠道传染病。     

浙江省义乌市鼠类中耶尔森菌调查与分析

目的 调查浙江省义乌市鼠疫疫源地啮齿动物中致病性耶尔森菌的分布情况,并分析菌株的生物学特征.方法 采集鼠粪便进行耶尔森菌分离,对分离获得的菌株进行生物分型、血清分型和毒力基因鉴定.结果 2005-2013年共检测3623份标本,分离到小肠结肠炎耶尔森菌74株,假结核耶尔森菌11株;耶尔森菌的检出率以春季最高(5.72％).68株小肠结肠炎耶尔森菌有生物1A型(55株)、生物3型(1株)2个型别;血清分型O∶5血清型有8株、O∶8血清型有2株;毒力基因检测有29株菌检出stB基因.结论 义乌市鼠疫疫源地内未检出鼠疫菌,但分离出假结核菌和小肠结肠炎菌;在鼠疫监测同时也对其他两种致病性耶尔森菌开展监测和相关研究,对鼠疫的监测有指导意义.     

青海高原藏系绵羊鼠疫菌系统发育关系和流行特征的研究

  目的  对青海高原藏系绵羊引发的人间鼠疫疫情流行病学和相关鼠疫菌遗传特征进行研究,为制定出适合青海省藏系绵羊鼠疫防控提供科学依据。  方法  汇总分析青海省1958―2020年藏系绵羊引发的人间鼠疫疫情资料,描述其时间、地区和人群分布及其他流行病学特征;对38株分离自人、藏系绵羊和喜马拉雅旱獭的鼠疫杆菌进行测序,再结合其他参考菌株的基因序列分析菌株的全基因组单核苷酸多态性特征,构建菌株之间的系统发育关系。  结果  1958―2020年共发生藏羊为疫情传染源的人间鼠疫疫情16起,发病69人,死亡42人,病死率60.86%。与藏系绵羊相关的鼠疫杆菌都位于系统发育树的同一进化分支1.IN2中,并具有明显的地域性特征。同一鼠疫事件中人、藏系绵羊和周边喜马拉雅旱獭分离菌株位于同一簇群,与流行病学调查资料相符。  结论  流行病学结合系统发育关系分析,证实了青海省人间鼠疫来自藏系绵羊,而藏系绵羊鼠疫则起源于旱獭。藏系绵羊是青海高原上重要的家畜,因此不应低估藏系绵羊鼠疫的危害。     

我国5岁以下儿童小肠结肠炎耶尔森菌感染临床特征及病原学分析

目的 了解我国5岁以下儿童小肠结肠炎耶尔森菌腹泻病例临床与病原学特征,分析其可能的感染来源,为小肠结肠炎耶尔森菌病的防控与诊断提供科学依据。 方法 收集2010—2020年间来自全国10个省市自治区哨点医院儿童腹泻标本、调查及回访问卷;对标本进行小肠结肠炎耶尔森菌的分离鉴定;菌株进行生物分型、血清型鉴定;毒力基因检测以及脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型。 结果 2010—2020年共监测11 377例,分离到致病性小肠结肠炎耶尔森菌63株,包括61株O:3血清型、2株O:9血清型菌株,5岁以下腹泻儿童感染率0.55%(63/11 377)。不同性别儿童对致病性小肠结肠炎耶尔森菌的感染率差异无统计学意义,1～5岁感染率高于≤1岁病例(χ²=44.836,P＜0.05),感染患儿中1～5岁发热比例高于≤1岁(χ²=11.508 ,P<0.05),随访病例未发现后遗症。我国儿童感染O:3血清型致病性小肠结肠炎耶尔森菌的PFGE带型存在多样性,优势带型为K6GN11C30021、K6GN11C30012。 结论 我国5岁以下儿童感染致病性小肠结肠炎耶尔森菌的生物血清型以3/O:3为主,偶有4/O:3与2/O:9。根据患儿感染特点与高发季节推测食源为主要感染来源,需进一步调查研究。     

小肠结肠炎耶尔森菌108株的分离及耐药性分析

目的了解小肠结肠炎耶尔森菌的感染状况及耐药性,为临床合理应用抗生素提供依据。方法严格按《全国临床检验操作规程》[1]及《食品卫生微生物检验》[2]的要求对送检标本进行分离培养,采用API 20 E生化鉴定试剂盒进行菌株鉴定,根据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)标准,采用K-B法,测定细菌对抗菌药物的敏感性,对2007—2010年江都市人民医院分离的小肠结肠炎耶尔森菌的感染状况以及耐药性进行分析。结果从各类标本中分离到108株小肠结肠炎耶尔森菌,其中腹泻便分离率最高,共检出71株(65.7%);血液标本3株(2.8%);痰标本5株(4.6%);呕吐物标本11株(10.2%);可疑食物样品18株(16.7%)。对15种临床常见药物耐药率最低的是氧氟沙星、左氧氟沙星、美洛西林,耐药率10%;对临床经验抗菌药物氨苄西林、氯霉素、复方新诺明耐药率高达80%以上。结论监测结果显示,小肠结肠炎耶尔森菌除了主要引起食物中毒外,还可引起胃肠外感染;小肠结肠炎耶尔森菌对氧氟沙星、左氧氟沙星、美洛西林保持较好的敏感性,可考虑为治疗小肠结肠炎耶尔森菌用药的首选药物;为提高小肠结肠炎耶尔森菌的检出率,应重视冷增菌培养这一环节。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌不同温度下生长预测模型的初步研究

目的研究小肠结肠炎耶尔森氏菌(以下简称耶氏菌)O:3和O:9血清型在增菌液MTSB中关于温度的生长模型。方法用液体稀释法计细菌总量,并应用此模型来预测耶氏菌O:3和O:9血清型在有效的生长温度下的生长速率,世代时间,迟缓期及不同时间的生长菌数.并比较相同条件下耶氏菌O:3与O:9血清型之间生长速率的差异。结果耶氏菌O:3血清型的最低生长温度为-17·8℃,耶氏菌O:9血清型的最低生长温度为-10·3℃,在增菌液MTSB中的生长模型:耶氏菌O:3血清型为M=0·0134(T-255·1866),耶氏菌O:9血清型为M=0·0173(T-262·7457)。结论在4~30℃的温度范围内,它们的生长速率都随着温度的升高而增加,而在4℃到15·7℃之间时,耶氏菌O:3血清型的生长速率大于耶氏菌O:9血清型,在15·7~30℃之间时,则耶氏菌O:9血清型的生长速率大于耶氏菌O:3血清型。     

中国六省致病小肠结肠炎耶尔森菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的 对中国致病小肠结肠炎耶尔森菌分离株进行脉冲场凝胶电泳分析。方法 参照美国疾病预防控制中心PulseNet实验方法对中国6省165株致病小肠结肠炎耶尔森菌进行脉冲场凝胶电泳分析，使用BioNumerics软件进行聚类分析，并按照PulseNet命名原则对带型进行命名。结果 将114株O：3血清型小肠结肠炎耶尔森菌分成25个带型；K6GNllC30012（50株）、K6GNllC30015（19株）及K6GNllC30016（10株）是其主要带型，三个主要带型之间聚类相似性很高。将51株O：9血清型小肠结肠炎耶尔森菌分为14个带型；其中K6GNllC90004（22株）与K6GNllC90010（13株）是其主要带型，K6GNllC90004与K6GNllC90010带型之间有一定的差异。O：3与O：9血清型的主要带型之间有明显的差异。结论 O：3血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于一个克隆系，且在不同地区和年代变异很小；O：9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于两个不同的克隆系，且各自有一定的变异。O：3与O：9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系较远。     

Occurrence of bacteria of the Yersinia genus in surface water]

The aim of the study was determination of the frequency of occurrence of Yersinia genus bacteria in surface waters polluted to various degrees with bacteria of the coliform and of fecal coli. For detection of Yersinia rods the previously elaborated medium Endo MLCe and the membrane filter method were applied. Samples of 42 surface waters were examined, including 26 from rivers and 16 from lakes, ponds and clay-pits. On the basis of sanitary bacteriological analysis 16 surface waters were classified to class I purity, 10 to class II, the remaining ones to class III or beyond classification. Yersinia rods were detected in 15 water bodies that is 35.7% of the examined waters. A total of 27 Yersinia strains were identified with dominance of Y. intermedia (14 strains) and Y. enterocolitica (10 strains). Three strains represented by the species Yersinia frederiksenii. Most of the Y. enterocolitica strains belonged to biotype 1, the particular strains being represented by various serotypes. Hence their different origin may be concluded. The pathogenic serotypes 0:3 and 0:9 of Yersinia enterocolitica were not detected.     

Faecal carriage rate of Yersinia species.

A total of 1,203 unselected routine faecal samples from 1,006 patients were cultured for Yersinia species by a cold enrichment technique. Seventy-five specimens (6.1%) from 63 patients were culture-positive for Yersinia spp. Fifty-two were Yersinia enterocolitica, 22 Yersinia frederiksenii and 1 Yersinia intermedia. The predominant Y. enterocolitica isolates belonged to biotype 1 - serotype 0:6, 30 or serotype 0:5, 27. Y. frederiksenii strains were non-typable. Forty isolates were recovered from 33 patients with gastroenteritis. During the study period 83 Salmonella spp. from 33 patients, 17 Shigella sonnei from 13 patients and 13 Campylobacter jejuni from 12 patients were cultured. Yersinia spp. was isolated in association with salmonella on three occasions, twice with rotavirus and once each with Shigella sonnei, Campylobacter jejuni and Trichuris trichiura.     

Faecal carriage rate of Yersinia species

A total of 1,203 unselected routine faecal samples from 1,006 patients were cultured for Yersinia species by a cold enrichment technique. Seventy-five specimens (6.1%) from 63 patients were culture-positive for Yersinia spp. Fifty-two were Yersinia enterocolitica, 22 Yersinia frederiksenii and 1 Yersinia intermedia. The predominant Y. enterocolitica isolates belonged to biotype 1 - serotype 0:6, 30 or serotype 0:5, 27. Y. frederiksenii strains were non-typable. Forty isolates were recovered from 33 patients with gastroenteritis. During the study period 83 Salmonella spp. from 33 patients, 17 Shigella sonnei from 13 patients and 13 Campylobacter jejuni from 12 patients were cultured. Yersinia spp. was isolated in association with salmonella on three occasions, twice with rotavirus and once each with Shigella sonnei, Campylobacter jejuni and Trichuris trichiura.     

云南战区部队首次检出携带耶尔森菌HPI毒力岛基因irp-2的大肠杆菌

目的：了解携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp^-2的大肠杆菌在云南战区部队腹泻患者粪便标本中的存在情况，并对其菌株做毒力试验。方法：用PCR扩增法检测毒力岛基因irp^-2，小白鼠腹腔注射检测毒力。结果：从268份腹泻病人粪便中分离的大肠杆菌菌株中，检测出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因卸12的18株，检出率为6．72％（18／268）。毒力试验使小白鼠发病并死亡。结论：云南战区存在携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因卸12的大肠杆菌，该菌对部队指战员的健康具有潜在性的威胁。     

小肠结肠炎耶尔森菌环介导管温扩增技术检测方法的建立

目的将一种新颖的核酸扩增技术——环介导等温扩增技术(LAMP)应用于小肠结肠炎耶尔森菌的快速检测。方法针对小肠结肠炎耶尔森氏菌毒素基因yruI/yru R设计5条特异性引物,进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化。并考核方法的敏感性和特异性。结果最佳反应时间为60min,反应温度为60℃。对8种相关肠道细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性。小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为74fg和43cfu/ml。对模拟食品样品进行直接检测,检测限为76cfu/g。结论本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1.5h即可完成,有望发展成为快速检测小肠结肠炎耶尔森菌的有效手段。