光相干断层扫描连续监测大鼠慢性高眼压模型视盘神经纤维厚度变化

目的:用光相干断层扫描（OCT）连续观测大鼠慢性高眼压模型视 盘神经纤维层（RNFL）厚度的变化。 方法:选用Wistar大鼠48只，随机分为3组，每组16只鼠32只眼 ，右眼为激光光凝眼，左眼为对照眼。用波长为532 nm氩激光在全麻下光凝右眼小梁网，引 起眼压 慢性、中等程度升高并观测眼压变化。眼压升高后第3、6、9周时用OCT做视盘线性扫描， 计算机自动测量视盘RNFL厚度，然后处死大鼠，将每组8只大鼠右眼做光学切片行组织学 测量RNFL厚度，将另外8只大鼠右眼做全视网膜铺片甲苯胺蓝染色，记数视网膜神经元细胞 密度，将结果进行比较分析。 结果:激光光凝后大鼠眼压缓慢、中等程 度升高，在第3、6、9 周时光凝眼眼压分别比对照眼眼压为显著升高，差异有统计学意义(P＜0.001)。 OCT检查结果显示在3、6、9周时大鼠光凝眼视盘RNFL厚度分别小于对照眼，差 异有统计学意义（P＜0.05）。处死大鼠后组织学测量RNFL厚度，在3、6、9周时，光 凝眼为（64.38±6.54）、（51.47±6.4）、（42.10±6.10）μm，对照眼厚度为（76.23±6.78）、（78.64±6.15）、（77.64±6.63）μm。将两种方法测 得RNF L厚度值进行回归分析，两者变化趋势一致，相关系数(R=0.932，P＜0.001)。全视网 膜铺片甲胺蓝染色结果显示两组视网膜神经元细胞（RGC）密度值差异有统计学意义（P＜0.0 5）。 结论:激光光凝大鼠小梁可以成功建立大鼠慢性高眼压模型；OCT对大鼠慢性高眼压模型视盘RNFL厚度的测量与 在光学显微镜下的测量值变化趋势一致，相关性好；OCT可以连续活体监测大鼠慢性高眼压 模型视盘神经纤维厚度变化，从而了解大鼠青光眼视神经病变的进展。     

灯盏细辛对大鼠慢性高眼压模型视神经损伤保护的实验研究

目的:建立大鼠慢性高眼压模型,观察灯盏细辛(Erigeronbrevicapas hand mass,EBHM)对眼压升高诱导视神经损伤的保护作用。方法:选用健康成年Wistar大鼠90只,分为3组。用波长为532nm的氪离子黄绿激光光凝第1和第2组大鼠双眼小梁网,建立大鼠高眼压模型。在眼压升高后1wk开始用EBHM对第2组大鼠15mg/100g肌肉注射,行视神经保护性治疗。第1组作为光凝对照组,第3组大鼠作为正常对照组。在第9wk同时处死3组大鼠做全视网膜铺片,1%甲苯氨蓝染色,记数平均视网膜神经节细胞(retinalganglion cells,RGCs)密度。结果:所有光凝眼眼压均中等程度升高,光凝前眼压为14.70±3.2mmHg;光凝后第3,6,9wk眼压分别为27.25±4.75,28.75±6.24,25.47±5.60mmHg,与光凝前比较,差别有显著性(P<0.05)。经视网膜铺片甲苯胺蓝染色,视网膜RGCs密度值(个/mm2)为:第1组1654±136,第2组2135±125,第3组2516±196。第2组大鼠视网膜RGCs密度值与第1和第3组大鼠RGCs密度值比较,差别有显著性(P<0.05)。结论:光凝大鼠小梁网成功建立大鼠慢性高眼压模型,光凝眼眼压中等程度升高,RGC密度降低;EBHM能够部分保护大鼠慢性高眼压诱导的视神经损害。     

经角膜缘激光光凝小梁网建立慢性青光眼模型

目的建立一种慢性青光眼模型,为青光眼的基础和临床科研提供实验条件。方法使用波长532nm的氪离子黄光通过角膜缘光凝20只Wistar大鼠的右眼小梁网,左眼为对照眼。分别于光凝前,光凝后不同时间测量眼压,检测并比较视网膜神经节细胞(RGCs)的丢失程度。结果第1次激光光凝后3d,第2次光凝后3、7、14、28、35d,实验眼光凝后不同时间眼压较光凝前明显升高(P<0.01)。第2次光凝后35d光凝眼视网膜铺片RGCs平均密度为(1992±108)个/mm2,对照眼RGCs平均密度为(2516±196)个/mm2,光凝眼较对照眼明显减少(P<0.01)。结论激光光凝损伤小梁网引起眼压升高是建立慢性青光眼模型的一种简单有效的方法。     

睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压眼视网膜神经节细胞的保护作用

背景 青光眼可以引起视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡,据报道睫状神经营养因子(CNTF)对外伤性视神经损伤有修复作用,其是否对青光眼视神经病变有保护作用尚少见报道. 目的 观察CNTF对大鼠急性高眼压眼RGCs的保护作用.方法 24只Wistar大鼠双眼采用眼前房平衡盐液加压灌注法建立大鼠急性高眼压模型,造模前2d左眼玻璃体内注入0.5μg CNTF 5μl,右眼以同样的方法注射磷酸钠溶液5μl,另取3只正常大鼠作为正常对照.造模后1、3、7、14 d过量麻醉法处死动物并摘除眼球,制备视网膜组织学切片后采用苏木精-伊红染色法进行形态学观察,光学显微镜下计数RGCs数目;采用免疫组织化学染色法观察RGCs层谷氨酸的表达情况.结果 正常对照组大鼠视网膜各层排列整齐,细胞边界清晰;模型对照组大鼠RGCs细胞膜、细胞核均发现异常改变,有细胞空泡样变;CNTF治疗组大鼠造模后变性的RGCs数量少.与模型对照组比较,造模后3、7、14 d CNTF治疗组RGCs数目明显增加,差异均有统计学意义(均P=0.000).免疫组织化学染色表明,造模后3～7d,CNTF治疗组RGCs层谷氨酸阳性细胞数分别为(5.50±1.04)个／3个高倍视野和(6.00±1.41) 个/3个高倍视野,明显低于模型对照组的(9.00±2.91)个／3个高倍视野和(10.83±1.94)个／3个高倍视野,差异均有统计学意义(均P=0.000),而造模后1d和14 d两组间谷氨酸阳性细胞数的差异均无统计学意义(P=0.578、0.180).结论 CNTF能够下调急性高眼压眼谷氨酸在RGCs中的表达,从而对RGCs提供保护作用.     

藏红花提取液对慢性高眼压兔眼玻璃体谷氨酸浓度的影响

目的:探讨慢性高眼压后兔眼玻璃体谷氨酸浓度的变化情况及藏红花提取液对谷氨酸浓度的抑制作用。方法:将新西兰白兔20只随机分为对照组、高眼压组、治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组,每组均5兔5眼。高眼压组和治疗Ⅰ、Ⅱ组兔眼前房注入3g/L复方卡波姆溶液制作成慢性高眼压模型。治疗Ⅰ、Ⅱ组兔每日耳缘静脉推注50g/L藏红花提取液。4wk后利用高效液相色谱仪测定各组兔眼玻璃体中谷氨酸的浓度。结果:高眼压组与对照组、治疗组兔眼玻璃体谷氨酸浓度有显著性差异(P<0.01),且治疗Ⅰ组与治疗Ⅱ组有显著性差异(P<0.01)。结论:慢性高眼压可导致玻璃体谷氨酸浓度升高,对视网膜产生损伤;藏红花提取液可显著降低玻璃体中谷氨酸的浓度,对这种视网膜功能损害起到保护作用。     

慢性高眼压青光眼动物模型的构建和鉴定

目的:建立大鼠慢性高眼压模型,观察眼压、病理和视功能改变.方法:SD大鼠45只,麻醉后使用532二极管激光行右眼角膜缘360°光凝,角膜缘激光斑为80～100个,大鼠角膜缘颞侧、颞上及颞下巩膜浅层静脉3条,每条静脉光凝3～4个斑点,功率0.45W/0.7s.左眼为对照眼,3d后测量眼压,部分眼压升高不明显者,进行同样的二次光凝.Tono-penXL眼压计监测3,7,30,60,90,180d麻醉状态下的眼压.激光术后60,180d取大鼠各5只,40g/L多聚甲醛灌注固定,摘取双侧眼球和视神经,分别进行冰冻和石蜡切片,采用HE染色、尼氏染色、甲苯胺蓝染色,光镜下观察房角变化,不同时间视网膜节细胞计数,比较视神经髓鞘密度的变化.60,180d大鼠10只,使用TEC-350V视觉电生理仪行F-VEP检查;然后6mo大鼠5只,进行逆行荧光金标记RGCs,7d后40g/L多聚甲醛灌注固定,全视网膜铺片,荧光显微镜下比较视网膜节细胞数量变化.结果:大鼠高眼压模型成功38只,平均最高眼压在激光后30d,平均值为25.0±4.1mmHg,对照眼17.1±3.2mmHg,180d时眼压基本恢复正常.病理改变:实验眼前房角明显变窄,小梁网间隙压缩、变窄,甚至部分闭锁,消失,少量梭形成纤维细胞聚集,组织致密、硬化,而小梁细胞减少,虹膜部分卷曲,水肿、肥厚出现明显异常.逆行荧光金视网膜铺片和视网膜切片尼氏染色见实验眼视网膜节细胞数量有明显的减少;尼氏染色切片每400倍视野总平均数,60d组对照眼为41±10.6个,实验眼为35±11.2个,180d组对照眼为40±9.8个,实验眼为34±11.0个,周边视网膜平均值减少最为显著,均值相差可达8个神经节细胞;180d时模型眼视神经甲苯胺蓝染色显示的髓鞘密度明显降低;视功能检查:高眼压大鼠模型60,180d的实验眼和对照眼均可引出典型的和重复性好的NPN波形,60d时实验眼AP1(N1-P1振幅)均值降低,为13.03±3.11ms,对照眼为21.14±3.10ms,两者具有显著性差异(P＜0.05),波幅值降低持续至180d仍未恢复;LP1(P1峰潜伏期)60d时无明显变化,180d时则明显延迟,实验眼为74.47±8.05μV,对照眼为59.73±4.16μV,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:使用532-二极管激光角巩膜缘小梁网及巩膜浅层静脉光凝能成功升高眼内压,眼压升高近8mmHg;病理显示视网膜神经节细胞数显著减少,以周边视网膜为著;视神经髓鞘密度亦显著地减少;视觉电生理检测,F-VEP的AP1振幅降低,LP1波峰潜伏期延迟非常显著.     

经房角镜光凝小梁网法建立慢性高眼压大鼠模型及其与经角膜缘光凝法的比较

背景 慢性高眼压动物模型的建立是青光眼发病机制研究的基础,以往激光光凝建立慢性高眼压动物模型的方法存在模型眼压波动大,需要重复光凝和并发症多的问题,造模方法的改良对于顺利开展相关的实验研究具有重要意义. 目的 用经房角镜光凝小梁网法建立大鼠慢性高眼模型,并与以往的经角膜缘光凝法进行比较. 方法 选取8 ～12周龄清洁级Fischer344大鼠36只,将动物分为正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组,每组12只,经角膜缘光凝组采用532 nm YAG激光经角膜缘光凝大鼠右眼小梁网建立慢性高眼压模型,激光能量为440 ～ 500 mW,激射光斑40 ～ 60个;经房角镜光凝组激光能量为800 ～850 mW,激射光斑100～120个.光凝后用Tonolab眼压计测量并观察各组大鼠眼压变化;于光凝后第3周每组处死5只大鼠,分离视网膜,采用免疫荧光技术检测并比较各组大鼠视网膜中Tuj-1阳性的视网膜神经节细胞(RGCs)数目.实验动物的使用及喂养遵循ARVO声明.结果 造模后3周各组大鼠一般情况可,眼表无明显损伤.经角膜缘光凝组和房角镜光凝组慢性高眼压模型的成模率分别为75％和100％.正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼造模后3周的平均眼压分别为(11.0±1.3)、(23.4±12.6)和(25.3±4.9)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),峰眼压分别为(12.3±1.0)、(50.5±7.3)和(44.3±12.3)mmHg,组间总体比较差异均有统计学意义(F=25.496、80.762,均P＜0.001),其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼平均眼压均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.001),而2个组间平均眼压和峰眼压差异均无统计学意义(P=1.000、0.195).正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目分别为(2 048.2±148.5)、(645.2±177.1)及(1 223.7±148.6)/mm2,总体比较差异有统计学意义(F=98.767,P＜0.001),其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目均明显少于正常对照组,且经角膜缘光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目明显少于经房角镜光凝组,差异均有统计学意义(均P＜0.01). 结论 经房角镜光凝小梁网能够诱导大鼠慢性高眼压并导致RGCs损害,但眼压升高模式及RGCs损害程度与经角膜缘光凝法有所不同,经房角镜光凝法建立慢性高眼压模型成模率更高.     

激光光凝法建立小鼠慢性高眼压模型

目的：激光光凝法建立小鼠的慢性高眼压模型,为以后的研究做准备。

方法：C57BL/6小鼠44只一侧眼用来诱导慢性高眼压。另一只眼作为对照眼。TONO-PEN AVIA眼压笔分别在激光光凝后1,2,4,8wk测量小鼠眼内压。裂隙灯显微镜观察小鼠眼球结构变化情况,分别于术后1,2,4,8wk摘除小鼠双侧眼球,进行冰冻切片,采用HE染色,光镜下观察视网膜情况。TUNEL计数视网膜切片的细胞凋亡。

结果：在1～8wk,实验眼的眼内压明显高于对照眼(P<0.05),最高眼内压是31mmHg,只有1眼。眼压平均在20mmHg左右。在第2wk,内核层和视网膜神经节细胞层细胞数较对照眼轻度减少,在第4,8wk细胞数明显减少。

结论：角膜缘激光光凝能造成小鼠慢性眼内压升高,通过该方法可以建立研究青光眼视网膜神经节细胞损害的模型。     

恒河猴慢性高眼压模型视乳头和视神经纤维损伤模式

目的观察恒河猴慢性高眼压模型与开角型青光眼患者的视乳头和视神经纤维损伤模式是否一致。方法实验研究。采用眼科多波长激光仪光凝恒河猴（12眼）的小梁网以破坏小梁网功能使眼压升高，建立恒河猴慢性高眼压模型。术前和术后每周行眼压、眼底照相、视乳头参数和视神经纤维层厚度检测。结果建模的12眼术前眼压为（16．08±2．02）mmHg，中央角膜厚度为（489．17±17．82）μm，眼轴为（20．32±0．84）mm。12只用于诱导建模的恒河猴眼，经3～4次激光光凝，11眼被成功诱导。27周平均眼压为（30．32±14．59）mmHg，眼压波动幅度为（8．19±7．45）mmHg。光学相关断层扫描成像显示整个盘沿面积从（1．67±0．44）mm2减小到（0．43±0．34）mm2。平均视神经纤维从（97．92±6．79）μm减少到（64．46±17．44）μm。结论恒河猴慢性高眼压性模型模拟了人类高眼压／开角型青光眼发病机制和过程，在视杯对高眼压的反应、视杯可逆性缩小、视神经纤维损伤现象等方面一致，是开展高眼压性视乳头和视神经纤维层损伤研究理想的动物模型。     

急性眼压升高所致视网膜、视神经及视交叉胶质细胞的早期反应

背景 中枢神经系统以及视网膜中的胶质细胞与神经元关系十分紧密,胶质细胞在神经元损伤和修复过程中发挥着重要作用.急性眼压升高引起的视网膜、视神经及视交叉各部位胶质细胞的早期反应特点以及其与视神经损伤的关系目前尚不清楚. 目的 探讨大鼠视网膜、视神经及视交叉的胶质细胞对急性高眼压的早期反应,同时观察神经前体细胞标志物巢蛋白( nestin)在反应性胶质细胞中的表达. 方法 成年雌性Wistar大鼠9只,分为正常对照组3只和急性高眼压组6只,急性高眼压组大鼠采用右眼前房灌注生理盐水的方法升高大鼠眼压至110 mmHg,持续60 min.于术后第3天和第7天用过量麻醉法处死各组动物各3只,摘出眼球分离视神经和大脑标本,并制作冰冻切片.利用Nissl染色的方法测量高眼压眼视网膜内层厚度,观察视网膜和视交叉的大体形态.用βⅢ-tubulin免疫荧光染色法标记视神经内的视网膜神经节细胞(RGCs)轴突,用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和nestin双重标记显示视网膜、视神经及视交叉的胶质细胞反应,并对两组结果进行比较.结果 正常大鼠的视网膜、视神经以及视交叉内均可见到一定量的GFAP阳性胶质细胞,但nestin的表达量很低.急性眼压升高后的第3天,视网膜内丛状层厚度明显变薄,RGCs数目较损伤前减少约46％.视网膜内胶质细胞GFAP的表达显著增加,细胞突起由神经纤维层伸展至整个视网膜,增生的胶质细胞内可见nestin的明显表达.视神经内RGCs轴突发生变性样改变,GFAP阳性胶质细胞内nestin的表达较眼压升高前明显增加.同损伤眼相对应的一侧视交叉的横断面积减小,出现大量星状GFAP和nestin共表达的胶质细胞.以上改变在眼压升高后第7天更趋明显.结论 急性眼压升高早期即可引起RGCs的丢失及轴突的变性,视觉神经元改变的同时伴随胶质细胞的反应,增生的胶质细胞表达神经前体细胞的标志物.视网膜与视神经和视交叉的改变在时间上具有一定的同步性.     

Treatment of retinal detachment of the course of retinopathy of prematurity

Cryo- and laser therapy of stage 3 have reduced, but not eliminated the occurrence of retinal detachment in stages 4a, 4b and 5 of ROP. In this disease the treatment of these stages is still the greatest challenge to the ophthalmologist. Therefore, the aim of this paper is to present our up-to-date possibilities of treatment of different kinds of retinal detachments in ROP, including segmental scleral buckling, encircling scleral buckling, scleral resection, vitrectomy and its modifications in ROP. Guidelines of surgery of retinal detachment in active stage 4 and 5 of retinopathy of prematurity have been described.     

Analysis of some of the possible neonatal risk factors of development of retinopathy of prematurity

PURPOSE: The aim of the study was to evaluate some of the possible risk factors for retinopathy of prematurity (ROP) treated with laser photocoagulation or cryocoagulation. MATERIAL AND METHODS: The study comprised 71 preterm infants with ROP needing treatment and 118 prematures without ROP or with ROP requiring no treatment, as a control group. All infants were born with gestational age < or = 32 weeks and birth weight < or = 1500g. The perinatal variables, including some of clinical data, the length of mechanical ventilation as well as continous positive airway pressure (CPAP), duration of total parenteral nutrition and some of laboratory data were analyzed, to evaluate their correlation with the development of ROP. RESULTS: Gestational age before 28 weeks (OR = 5.11), episodes of convulsiones (OR = 2.15), mechanical ventilation for more than 20 days (OR = 5.86) and > 30 days (OR = 7.47), CPAP for more than 5 days (OR = 4.15) and > 10 days (OR = 2.84), total parenteral nutrition for more than 10 days (OR = 7.84) and > 20 days (OR = 9.02) and elevated peak of alanine aminotransferase (AIAT) levels (OR = 3.17) were significant risk factors for ROP requiring treatment. CONCLUSIONS: The opthalmic examination for retinopathy of prematurity requiring laser photocoagulation or cryocoagulation should be obligatory for prematures born < or = 32 weeks of gestational age, with birth weight < or = 1500 g.The frequency of the consecutive ophthalmic examinations depends on the severity of prematurity and on the presence and intensification of the risk factors for ROP.     

角膜曲率的分析

目的：探讨我国人角膜曲率半径的正常值及不同性别、不同年龄的角膜曲率半径差异。方法：对10998只眼的角膜曲率进行检测，并按男、女10岁一组进行统计分析。结果：（1）K1为7.65mm,K2为7.71mm，平均K值为7.67mm。较眼科学正常值K:7.77mm短0.1mm。（2）K的平均值男性较女性的长0.1155mm。且女性各年龄段角膜曲率半径均男性的有不同程度的减短。（3）男女均随年龄的增长，角膜曲率半径大致呈递减趋势，即：角膜曲率半径与年龄成反比关系。（４）男女K1,K2之比，均随年龄增长而增长，即K1逐渐增长而增长，即　K1值逐渐增长，K2逐渐减短。结论：本文测定的角膜曲率较眼科文献中的提供的正常值短0.1mm，并且存在着年龄、性别上的差异。     

艾滋病眼部并发症的资料分析

目的:通过调查分析,了解艾滋病眼部并发症的临床表现、治疗及预后。方法:收集赞比亚卡布韦总医院眼科2008-08/2009-08就诊患者。结果:艾滋病眼部并发症症状重,病程长,致盲率高。结论:充分认识、掌握艾滋病眼部并发症的临床表现,提高艾滋病的检出率,早发现、早治疗,提高艾滋病患者的生活质量。同时应强调预防是降低艾滋病发生率的关键。