逆转MDR—l基因相关的消化系统肿瘤多药耐药

消化系统恶性肿瘤细胞多药耐药是导致化疗失败的重要原因。多药耐药基因(MDR—1)过度表达P—糖蛋白(p-gp)是产生耐药的主要机制。逆转MDR—l基因相关的消化系统肿瘤多药耐药，提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性的方式有两类：一是直接抑制p-gp的药泵功能；二是干扰MDR—l基因的表达。     

芹菜素通过下调MDR-1/P-gp表达逆转结肠癌耐药细胞HCT-8/5FU多药耐药性的作用及机制

目的探讨芹菜素逆转结肠癌耐药细胞HCT-8/5FU多药耐药性作用及其机制。方法运用免疫细胞化学技术和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)测定耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)及耐药基因MDR-1mRNA的表达情况。CCK-8法测定芹菜素对耐药细胞耐药逆转作用;荧光显微镜观察芹菜素、5-FU及二者联合作用时耐药细胞凋亡情况。结果芹菜素能够降低耐药蛋白P-gp糖蛋白及耐药基因MDR-1 mRNA的表达,同时能够逆转耐药细胞的多药耐药性,诱导更多细胞凋亡。结论菜素能够通过下调MDR-1/P-gp表达逆转HCT-8/5FU多药耐药性,从而有可能成为临床多药耐药逆转剂。     

白血病多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因的表达及临床研究

白血病是造血系统常见的恶性肿瘤 ,化疗是白血病治疗的主要手段 ,但白血病细胞产生的多药耐药是导致化疗失败的主要原因。多药耐药基因(ｍｄｒｌ)和多药耐药相关蛋白基因 (ＭＲＰ)的过度表达是引起白血病多药耐药发生的重要机制之一。本文应用半定量ＲＴ ＰＣＲ方法同时检测 40例急性白血病和慢性粒细胞白血病急变患者的ｍｄｒｌ和ＭＲＰ的表达水平 ,并探讨了它们与临床耐药的关系。1　对象与方法1 .1 　 研究对象40例患者均为我院 1 999年 7月～ 2 0 0 0年 5月住院患者 ,男 2 5例 ,女 1 5例 ,中位年龄 37岁 ( 4～ 68岁 )。初治组 2 7例 ,复…     

多药耐药基因的表观遗传调控与消化系肿瘤

消化系统恶性肿瘤细胞多药耐药基因过度表达p-糖蛋白，降低细胞内药物浓度，产生多药耐药是化疗失败的重要原因，MDR1的转录表达受多种因素的影响，其中表观遗传调控为肿瘤分子治疗提供新思路，MDR1基因甲基化和RNA干扰可通过转录抑制而逆转多药耐药性。     

大肠癌组织中PIK3CA、PIK3CB蛋白与多药耐药基因产物表达的相关性及其临床意义

目的:检测PIK3CA、PIK3CB和多药耐药基因1(muhidrug resistance 1,MDR-1)、肺耐药蛋白(lung cancer resistance protein,LRP)、谷胱甘肽转移酶π(glutathione-S-transferaseπ,GST-π)、D N A拓扑异构酶Ⅱ(DNA topoisomeraseⅡ,TopoⅡ)在大肠癌中的表达,探讨PIK3CA、PIK3CB对大肠癌多药耐药性的影响.方法:应用免疫组织化学EnVision法检测316例大肠癌组织中PIK3CA、PIK3CB、MDR-1、LRP、GST-π和TopoⅡ的表达情况,并结合临床病理因素进行分析.结果:316例大肠癌中,PIK3CA、PIK3CB的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移成正相关,其相关系数分别为0.136、0.168.MDR基因在大肠癌组织中的阳性率分别为:M D R-1为72.78%(230/316)、L R P为70.89%(224/316)、TOPⅡ为77.53%(245/316)及GST-π为76.58%(242/316).经Spearman相关性分析,PIK3CA、PIK3CB的表达与多药耐药蛋白MDR-1、LRP、GST-π的表达均成正相关,相关系数分别为0.288、0.128、0.1 9 7.3 1 6例大肠癌患者的中位生存期为60 mo,5年生存率为47.5%,Kaplan-Meier分析结果显示,PIK3CA与PIK3CB同时高表达、淋巴结转移、MDR-1(+)、GST-π(+)患者术后5年生存率明显降低.Cox比例风险模型显示,PIK3CA(+)PIK3CB(+)、淋巴结转移、MDR-1、GST-π是影响大肠癌患者预后的独立因素.结论:PIK3CA、PIK3CB与大肠癌的多药耐药密切相关,PIK3CA、PIK3CB、淋巴结转移、MDR-1、GST-π是影响大肠癌患者预后的独立因素,检测PIK3CA、PIK3CB为临床合理选择化疗药物、初步判断预后具有重要参考价值.     

肺癌多药耐药的监测与评价

国内外研究表明多药耐药(MDR)的产生是导致肺癌化疗乏效的主要原因,试验研究证实,参与体内外肺癌细胞耐药机制主要有多药耐药基因(MDR1)及其编码的细胞膜蛋白P-糖蛋白(P-gp)过表达,多药耐药相关蛋白(MRP)表达增加,谷胱甘肽解毒酶系统活性增强,拓扑异构酶活性降低及结构异常,DNA损伤的修复能力增强等.因此充分了解耐药机制可为临床肺癌治疗提供决策.     

多药耐药基因的表观遗传调控与消化系肿瘤

消化系统恶性肿瘤细胞多药耐药基因过度表达p-糖蛋白,降低细胞内药物浓度,产生多药耐药是化疗失败的重要原因,MDR1的转录表达受多种因素的影响,其中表观遗传调控为肿瘤分子治疗提供新思路,MDR1基因甲基化和RNA干扰可通过转录抑制而逆转多药耐药性。     

急性白血病乳腺癌耐药蛋白基因表达及其与临床的关系

化疗是急性白血病 (AL)的主要治疗手段。耐药是影响化疗疗效的重要因素 ,目前认为AL耐药即多药耐药 (MDR)的发生是多因素、多种机制作用的结果[1,2 ] 。乳腺癌耐药蛋白基因 (BCRP)是 1998年才被发现的又一与耐药有关的糖蛋白 ,它主要参与膜内、外药物转运而改变药物在胞内的分布 ,以药物排出泵的作用参与MDR[3 ] 。有关BCRP与AL临床的关系报道极少 ,为探讨BCRP在成人AL中的表达及其与临床关系 ,本研究应用半定量逆转录 PCR(RT PCR)检测AL患者的BCRP表达 ,并结合mdr 1、耐药相关蛋白基因 1(MRP 1)及肺耐药蛋白基因(LRP)…     

缺氧诱导胃癌多药耐药的机制研究

目的研究缺氧对化疗药物敏感性的影响及药物转运蛋白和凋亡相关蛋白的变化,探讨缺氧条件下胃癌细胞发生多药耐药的机制。方法通过MTT比色法检测胃癌细胞SGC7901在缺氧和常氧状态下对化疗药物敏感性的差异;利用Annexin V/PI染色法检测缺氧对化疗药物诱导的凋亡的影响;利用阿霉素的蓄积和潴留实验检测缺氧与常氧条件下胃癌细胞SGC7901阿霉素的潴留和蓄积的差异;利用Western blot和RT-PCR方法检测不同时间缺氧处理胃癌细胞SGC7901中药物转运蛋白p-gp和MRP的变化以及凋亡相关分子Bcl-2和Bax的变化。结果缺氧能够显著降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性,并能够降低化疗药物诱导的凋亡和药物在细胞内的潴留和蓄积;缺氧能够显著上调MDR1和MRP1基因的表达以及增加其产物p-gp和MRP的蛋白水平;缺氧能够显著增加抗凋亡分子Bcl-2 mRNA和蛋白水平以及降低促凋亡分子Bax的表达。结论缺氧加剧胃癌细胞的多药耐药表型,其主要是通过上调药物转运蛋白的表达及增加抗凋亡分子Bcl-2/Bax的比例实现的。     

MRP1与肺癌耐药

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,约80％的患者就诊时已属中、晚期,化疗成为其主要治疗手段,而多药耐药现象的产生是目前影响化疗效果的主要原因。多药耐药(multidrug resistance,MDR)是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药的同时,对结构和作用机制迥然不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药的现象。典型的MDR机制是指MDR1基因编码的P—gP致药物外流而产生的多药耐药,但多数学者发现它们在肺癌中的表达水平并不高,     

乳腺癌耐药相关蛋白在肝硬化及肝癌组织中的表达

肝癌对化疗药物的敏感性低,其多药耐药是肝癌治疗失败的主要原因.P-糖蛋白(P gP)在肝癌组织中高表达,可能是参与肝癌多药耐药的关键分子[1],然而抑制P-gp的活性,并不能有效逆转肝癌的多药耐药[2].因此,除了P-gp,可能有其他的多药耐药分子共同参与了肝癌的多药耐药.乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)是近年来发现的一个新的多药耐药分子,可排泄多种化疗药物[3-4].已有研究结果显示,BCRP在肝癌中有表达,并可能是肝癌干细胞的一种标志物[5-6].然     

RNA干扰对胃癌耐药细胞MDR1及P-gP表达的影响

目的 寻找逆转胃癌细胞多药耐药的有效方法.方法 根据多药耐药基因1(MDR1)的基因序列,设计并体外转录合成2条siRNA,用脂质体转染将其导入人胃癌多药耐药BGC-823细胞内.应用MTT法检测转染后癌细胞生长增殖情况及对阿霉素(ADM)的敏感性,流式细胞仪检测细胞膜表面P-糖蛋白(P-gp)表达和细胞内Rh123的潴留情况.结果 转染sh-MDR1-1和sh-MDR1-2后,BGC-823细胞对ADM的IC50均降低,敏感性提高;BGC-823细胞MDR1 mRNA和P-gP表达均显著降低,细胞内Rh123稳态积累量均明显增高;上述效果均以转染sh-MDR1-1序列为著.结论 sh-MDR1-1特异性siRNA可抑制BGC-823细胞MDR1表达,此为寻找逆转胃癌细胞多药耐药有效方法奠定了基础.     

奥曲肽逆转肝细胞肝癌多药耐药的机制

目的 探讨生长抑素（SST）类似物奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药可能的机制。方法 应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性；RT—PCR、流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因多药耐药糖蛋白1（MDR1）、多药耐药相关蛋白2（MRP2）mRNA及其蛋白质的表达。结果 奥曲肽联合化疗药物可以显著降低化疗药物的IC50肝癌细胞有生长抑索受体2（SSTR2）、生长抑素受体3（SSTR3）、MDR1、MRP2的表达，奥曲肽可显著降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达。结论 SST可与肝癌细胞表面的SSTR结合，降低其表面MDR2、MRP2的表达，使细胞内细胞毒药物浓度增加，从而逆转肝癌细胞多药耐药。     

卵巢癌组织中MDR-1、Wnt-1、FZD-1基因的表达变化及其与化疗耐药的关系

目的观察化疗及非化疗卵巢癌组织中多药耐药基因-1（MDR-1）及Wnt-1、FZD-1基因的表达变化,探讨其与卵巢癌化疗耐药的关系。方法卵巢癌患者60例,包括紫杉醇化疗组（Ⅰ组）和未化疗组（Ⅱ组）各30例,Ⅰ组分为先期化疗有效组（ⅠA组）22例和化疗后复发组（ⅠB组）8例。采用实时荧光定量RT-PCR技术检测各组卵巢癌组织中的MDR-1、Wnt-1、FZD-1基因。结果Ⅰ组MDR-1基因阳性表达率为70%（21/30）,Ⅱ组为86%（26/30）,两组相比,P〉0.05;ⅠB组MDR-1阳性6例（6/8）,较ⅠA组的15例（15/22）略高,但两组相比,P〉0.05。Wnt-1基因在MDR-1表达阳性的卵巢癌组织中的Ct值为4.742 9±0.756 9,与MDR-1阴性者的3.298 1±1.489 7相比,P〈0.01。FZD-1基因在MDR-1表达阳性的卵巢癌组织中的Ct值为3.677 3±1.220 8,与MDR-1阴性者的4.898 0±0.633 9相比,P〈0.01。在Ⅰ组中,MDR-1和Wnt-1、FZD-1基因的表达呈正相关（r分别为0.525、0.678,P均〈0.05）;但在Ⅱ组中,MDR-1和Wnt-1、FZD-1基因的表达无相关性（r分别为-0.091、0.031,P均〉0.05）。结论卵巢癌组织中MDR-1基因有较高的阳性表达率,与卵巢癌的化疗耐药有关,MDR-1基因可能通过抑制Wnt-1、FZD-1基因的表达而发挥作用。     

环孢素A逆转肿瘤多药耐药的临床观察

多药耐药（MDR）是恶性肿瘤化疗失败的原因之一,临床许多病人在经历了最初有效的化疗之后,最终仍难免于复发,此时再使用曾有效的药物或从未用过的药物,均不见疗效.其主要原因是肿瘤细胞对化疗产生了耐药性,多药耐药基因（MDR1）呈高表达.因此,逆转肿瘤细胞的耐受性是提高肿瘤化疗疗效的关键.国内外许多基础研究表明,很多药物可用来逆转肿瘤细胞的MDR.我们自2002年起用RT-PCR法检测MDR1表达,用免疫调节剂环孢素A口服逆转肿瘤MDR取得良好效果.     

乳腺癌多药耐药基因的表达及意义

用组织芯片技术和免疫组化法检测28例乳腺癌标本中多药耐药基因GST-π、P-gP、Top-Ⅰ的表达情况。结果显示，乳腺癌GST-π基因表达阳性率64．2％，P-gP25％，Top-Ⅰ57．1％，多药耐药基因阳性表达与患者年龄、淋巴结转移、雌激素受体及孕激素受体无关。提示GST-Ⅱ、P-gP、Top-Ⅰ表达可作为乳腺癌患者化疗耐药的评价指标。     

姜黄素对人肝癌耐药细胞株Bel7402/5-FU多药耐药性的逆转作用

目的:探讨姜黄素对人肝癌耐药细胞株Bel7402/5-FU多药耐药性的逆转作用及可能的作用机制.方法:采用氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)药物浓度梯度递增法诱导建立肝癌耐药细胞亚系Bel7402/5-FU;MTT法检测人肝癌细胞株Bel7402及其耐药细胞株Bel7402/5-FU对6种化疗药物以及姜黄素的敏感性;Western blot法检测Bel7402细胞、Bel7402/5-FU细胞及经过0、5、10、20mg/L姜黄素作用后的Bel7402/5FU细胞中多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)、程序化死亡因子5(PDCD5)蛋白的表达水平.结果:Bel7402/5-FU细胞对6种化疗药物表现出交叉耐药性,其中对5-FU耐药指数最高;与Bel7402细胞相比,Bel7402/5-FU细胞中的MRP1、LRP、P-gp蛋白表达升高,PDCD5蛋白表达降低;随姜黄素浓度的升高,Bel7402/5FU细胞中MRP1、LRP、P-gp蛋白表达逐渐降低,PDCD5蛋白表达逐渐增高.结论:姜黄素具有逆转肝癌细胞多药耐药性的作用,可能与下调多药耐药相关蛋白MRP1、LRP、P-gp,上调凋亡相关蛋白PDCD5表达有关.     

硒化壳聚糖对K562/ADM细胞生物学行为的影响

目的观察硒化壳聚糖对体外培养慢性粒细胞多药耐药白血病细胞株K562/阿霉素(ADM)细胞生物学行为的影响。方法硒化壳聚糖作用于体外培养的K562/ADM细胞12、24 h,应用流式细胞法检测细胞凋亡,软件拟合计算细胞周期;应用免疫印迹法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;应用RT-PCR法检测MDR-1 mRNA水平。结果硒化壳聚糖能够明显增强ADM对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,阻滞细胞周期于G1期(P<0.05,P<0.01),下调P-gp表达和MDR-1 mRNA水平(P<0.05,P<0.01),硒化壳聚糖浓度越高,作用效果越显著。结论硒化壳聚糖能够通过下调MDR-1基因和P-gp表达,阻滞细胞周期于G1期来诱导细胞凋亡,进而对体外培养的K562/ADM细胞耐药生物学行为产生逆转。     

乳腺癌耐药蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的:探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达及临床意义。方法:采用RT-PCR法检测66例NHL患者新鲜淋巴组织标本BCRP及多药耐药基因(MDR1)的表达,并对所有患者进行随访。结果:66例NHL患者BCRP阳性率45.5%,MDR1阳性率59.1%;不同类型、不同临床分期BCRP阳性率不同;BCRP基因有无表达其缓解率、复发率、5年生存率不同;BCRP+MDR1+、BCRP+MDR1-、BCRP-MDR1+、BCRP-MDR1-4组化疗疗效不同(P<0.05)。结论:本组NHL患者BCRP及MDR1表达率高,是化疗敏感性差的重要原因。     

多药耐药基因与胰腺癌化疗

胰腺癌是一种临床表现隐匿,发展迅速和预后极差的消化道恶性肿瘤。在西方国家,胰腺癌的死亡率位居第五位,它也是我国消化道恶性肿瘤的三大死亡原因之一。85％的患者就诊时已属晚期,术后5年生存率为1％～5％左右,确诊后平均生存时间不超过六个月。目前化疗仍然是胰腺癌辅助治疗的重要手段之一,但多药耐药现象的存在严重阻碍了化疗药物在胰腺癌治疗中的应用。肿瘤的多药耐药是指肿瘤细胞接触某一种抗癌药物产生耐药的同时,也对其它结构和功能不同的药物产生交叉耐药。其中多药耐药基因(mulitidrug-resistance genel,MDR1)及表达产物(P-gp)研究得最早,最广泛,故本文就MDR1与胰腺癌化疗的关系进行回顾和总结。